锰对小鼠淋巴细胞DNA损伤的研究

目的:研究不同剂量染锰小鼠淋巴细胞 DNA损伤的情况。 方法:随机分为正常对照组和 3个剂量组(低、中、高剂量组 ) ,给小鼠腹腔注射氯化锰 ,6周后采用单细胞凝胶电泳实验检测染锰小鼠外周血淋巴细胞 DNA链断裂情况 ,并进行对比分析。 结果:低、中、高剂量组小鼠淋巴细胞 DNA损伤率明显高于正常对照组 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论:氯化锰可引起小鼠淋巴细胞 DNA的损伤     

MTX致小鼠组织DNA损伤的研究

目的为进一步了解甲氨蝶呤(methotlexate,MTX)的作用机制,探测一次给药后不同时间点小鼠组织DNA损伤的修复情况。方法用单细胞凝胶电泳技术检测MTX腹腔注射染毒1、3、6、12、24h后对小鼠肝、脾、骨髓、胸腺、肾、睾丸、胃和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用。结果腹腔注射5mg／kg MTX可诱发小鼠脾细胞、骨髓细胞、胸腺细胞和外周血淋巴细胞的DNA单链断裂。结论MTX可致小鼠体内多脏器细胞的DNA单链断裂,不同细胞对MTX的易感性不同。     

单细胞凝胶电泳技术检测小鼠骨髓细胞DNA损伤

目的:探索并优化单细胞凝胶电泳技术并评价其在环境有害物致骨髓细胞DNA损伤检测中的应用价值.方法:离体小鼠骨髓细胞分别用0.1 mmol/L、1.0mmol/L、10.0mmol/L氯化镉37℃处理1 h后,制成凝胶,用pH10.0的冷裂解液裂解1 h,稳压25V、电流80 mA电泳1 h,中性化后用荧光染料染色,在波长为450～490nm的荧光显微镜下观察并统计100个细胞,计算彗星细胞的百分率.结果:氯化镉处理的离体小鼠骨髓细胞的彗星细胞率明显高于对照组(P＜0.001).结论:本方法在原有单细胞电泳技术的基础上加以优化,可以灵敏地检测出骨髓细胞的DNA损伤,可广泛用于环境等对骨髓细胞DNA损伤的研究.     

预防非典型肺炎方剂对小鼠外周血液淋巴细胞DNA损伤的影响

目的　研究预防非典型肺炎方剂对小鼠外周血液淋巴细胞 DNA的损伤作用。方法　应用单细胞凝胶电泳方法测定 6个预防非典型肺炎方剂体内给药对小鼠外周血液淋巴细胞 DNA损伤的作用。结果　ig给予预防非典型肺炎方剂 、 、 (1/ 3临床等效剂量、临床等效剂量、3倍临床等效剂量× 3 d)对小鼠外周血液淋巴细胞 DNA有明显的损伤作用 ,并呈剂量依赖关系。预防非典型肺炎方剂 、 、 (1/ 3临床等效剂量、临床等效剂量、3倍临床等效剂量× 3 d)对小鼠外周血液淋巴细胞 DNA没有明显的损伤作用。结论　预防非典型肺炎方剂 、 、 具有潜在的遗传毒性     

四乙基铅对小鼠脑细胞DNA的损伤作用

目的:了解四乙基铅对小鼠脑细胞DNA的损伤作用。方法:用单细胞凝胶电泳技术研究脑细胞DNA的损伤。结果:在染毒条件下,7~28mg/m3浓度的四乙基铅均可引起小鼠脑细胞DNA的损伤,且随四乙基铅浓度的增高,DNA损伤加重,具有明确的剂量效应关系。结论:四乙基铅能引起小鼠脑细胞DNA突变,呈剂量效应关系。     

Q3衰老小鼠模型的DNA损伤研究

目的 探讨自由基致衰老的小鼠模型DNA氧化损伤的情况。方法 通过给2月龄小鼠吸入一定量的O3,建立O3衰老小鼠模型;然后以单细胞凝胶电泳检测O3衰老小鼠模型、自然衰老小鼠和正常青年小鼠（阴性对照 组）的脾淋巴细胞DNA氧化损伤情况。结果 与阴性对照组相比,O3衰老小鼠模型的脾淋巴细胞DNA受到较显著的氧化损伤（P＜0．05）;其损伤程度与自然衰老小鼠相近（P＞0．05）。结论 O3衰老动物模型与自然衰老近似,在衰老的研究和抗衰老药物的药理实验中具有一定应用价值。     

柴油机废气颗粒物对小鼠淋巴细胞DNA损伤的SCGE检测

柴油机排出颗粒物的数量是汽油机的 2 0～ 10 0倍 ,且颗粒物粒径多小于 2μm,对人类健康危害很大 [1 ] 。国外研究认为 [2 ] ,柴油机废气是一种潜在致癌物 ,且随着累积接触量的增多 ,职业性接触柴油机废气的人群患肺癌的危险度明显增高。但研究方法目前多采用姐妹染色单体交换微核实验 ,DNA加合物实验 ,这些方法均比较繁琐 ,耗时较长 ,近几年发展起来的单细胞凝胶电泳试验 ( SCGE) ,又称慧星试验 ,对 DNA损伤十分敏感 ,可测出每 10 9道尔顿 DNA中 0 .1个 DNA分子的断裂 [3 ] 。该技术可将细胞内断裂的 DNA单键 (在碱性条件下 )在凝…     

久效磷对小鼠DNA损伤的研究

目的探讨久效磷对小鼠的遗传毒性。方法50只小鼠,随机分成5组,设4个久效磷染毒组(0.25 mg.kg-1、0.50 mg.kg-1、1.00 mg.kg-1和2.00 mg.kg-1)和对照组。4个染毒组分别给予0.25 mg.kg-1、0.50 mg.kg-1、1.00 mg.kg-1和2.00 mg.kg-1的久效磷灌胃,对照组给予生理盐水灌胃,每日1次,连续14 d。采用微核试验和单细胞凝胶电泳实验检测久效磷的遗传毒性。结果久效磷染毒小鼠14 d后,与对照组相比,随着染毒浓度的升高,小鼠骨髓细胞微核率显著升高(P<0.05,P<0.01)),小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤程度显著增加(P<0.05,P<0.01),并具有良好的剂量-效应关系。结论久效磷对小鼠具有遗传毒性。     

应用单细胞凝胶电泳技术检测K562细胞 DNA损伤的研究

目的用单细胞凝胶电泳技术来探讨一种能方便检测细胞DNA损伤的方法。方法在Singh等人的方法的基础上，加入过氧化氢作为DNA致突变剂来观察K562细胞的DNA损伤。结果在培养K562细胞的过程中，加入了下同浓度的过氧化氢，我们发现了DNA损伤与过氧化氢剂量之间存在着线性相关关系。结论这种在本实验室建立起来的用于检测细胞DNA损伤的方法易于操作，结果令人满意，并更具实用性。     

单细胞凝胶电泳检测烹调油烟对淋巴细胞DNA的损伤作用

目的 研究烹调油烟对体外和体内小鼠淋巴细胞DNA损伤作用。方法 采用单细胞凝胶电泳,检测细胞DNA单链断裂,观察在不同剂量及浓度下的DNA损伤情况。结果 以10、50、100及200μg/L的油烟颗粒有机提取物染毒小鼠淋巴细胞,各剂量组均可引起小鼠淋巴细胞DNA损伤。以10、20、40mg/m^3的烹调油烟染毒小鼠,也可引起小鼠体内淋巴细胞DNA损伤。烹调油烟引起的小鼠体外和体内淋巴细胞DNA损伤均存在剂量－效应关系,且整体染毒显示存在时间－效应关系。结论 一定剂量的烹调油烟能引起小鼠淋巴细胞DNA损伤。     

单细胞凝胶电泳法检测双酚A对小鼠睾丸细胞DNA损伤

目的 采用单细胞凝胶电泳法研究双酚A对小鼠睾丸细胞DNA的影响.方法 制备小鼠生殖细胞悬液,用不同浓度的双酚A染毒1 h后,应用单细胞凝胶电泳法检测睾丸细胞DNA损伤情况.结果 与对照组比较,除10-10 mol/L组外,其他各染毒组拖尾率均明显高于对照组(P＜0.05).随着双酚A染毒浓度的增加,小鼠睾丸细胞DNA损伤程度也逐渐增加(P＜0.05),在10-5 mol/L和10-6 mol/L组均出现了Ⅳ级损伤.结论 双酚A体外染毒可造成小鼠睾丸细胞DNA损伤,且随着剂量的增加有加重的趋势.     

煤焦沥青烟提取物致大鼠肺泡巨噬细胞DNA损伤作用

目的　研究煤焦沥青烟提取物致大鼠肺泡巨噬细胞 (AM )DNA损伤作用。方法　将大鼠肺泡巨噬细胞分 4组与不同浓度的煤焦沥青烟提取物共育 1h后 ,采用单细胞凝胶电泳技术检测大鼠肺泡巨噬细胞DNA断裂情况。结果　单细胞凝胶电泳后 ,对照组肺泡巨噬细胞无明显细胞拖尾现象 ,而经不同浓度的煤焦沥青烟提取物处理后 ,AM细胞有明显的拖尾现象 ,且随煤焦沥青烟提取物浓度增加 ,AM细胞彗星率上升 ,各组间差异有高度显著性 (P <0 .0 0 1) ,而且损伤的严重程度与作用物浓度呈相关关系 (Spearman相关系数为 0 .6 73,P <0 .0 0 1)。结论　煤焦沥青烟提取物作用于大鼠肺泡巨噬细胞可引起DNA链的断裂 ,单细胞凝胶电泳适于检测肺泡巨噬细胞的DNA链断裂     

单细胞电泳检测放射诱导人淋巴细胞DNA损伤

单细胞电泳(SCG)具有快速、灵敏和简便等优点,并可检测出单个细胞DNA的损伤程度,这对研究具有高度组织和细胞特异性的肿瘤方面有特殊意义。通过延长SCG技术的标准碱化时间,可以检测出更低剂量放射诱导的人淋巴细胞DNA单链断裂和碱基损伤,使这一技术更加敏感,在低剂量放射作用研究方面有应用价值。     

改良单细胞凝胶电泳技术在DNA损伤与修复检测中的应用

目的单细胞凝胶电泳技术是检测细胞DNA损伤与修复的一种快速、简便、灵敏方法，但影响因素很多，为此对该技术进行了改进，并对操作中易出现的问题进行了总结。方法在singh等人的方法基础上，根据本实验室条件进行改进，以获得更好、更稳定的结果。结果改进后技术检测H2O2对K562细胞损伤具有良好的剂量效应关系。结论改进方法不影响结果的正确性，更易于掌握和操作，减少了影响因素，试验更具实用性，可以广泛应用于离子射线损伤、自由基损伤、癌症放化疗、生物监测等领域。     

单细胞电泳观察双氢青蒿素对K562细胞DNA的损伤作用

【目的】研究双氢青蒿素对人红白血病K562细胞DNA的损伤作用。【方法】体外培养人红白血病K562细胞,加不同浓度双氢青蒿素处理24 h后,MTT法测定IC50;用单细胞凝胶电泳技术观察双氢青蒿素对K562细胞DNA的损伤情况。【结果】双氢青蒿素处理细胞后,MTT检测IC50为8×10^-5mol/L;单细胞凝胶电泳显示双氢青蒿素作用24 h后可见明显的彗星状拖尾,而对照组细胞呈现明亮圆点。【结论】双氢青蒿素可抑制K562细胞的生长,对其DNA有致损效应。     

孕期低剂量BDE-209暴露联合窒息对新生仔鼠海马MDA含量及SOD活性的影响

目的探讨孕鼠孕期低剂量十溴联苯醚（BDE．209）暴露联合窒息对新生仔鼠海马组织丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响。方法12周龄sD雌性大鼠自妊娠0d起随机分成A组：空白对照,B、C组：0．6、6mg／kgBDE-209暴露组。D组：孕期窒息15min,E、F组：0．6、6mg／kgBDE．209暴露＋孕期窒息15min。B、C、E、F组雌鼠从孕0天开始胃灌BDE．209,A、D组胃灌等量的花生油直至孕第21天（即孕22d）,A、B、C组孕鼠行剖宫产术直接取出仔鼠,D、E、F组孕鼠行剖宫产建立孕期窒息模型后再取出仔鼠。各组随机选取10只雄性仔鼠,在出生24h内检测海马MDA含量及SOD活性。结果各实验组仔鼠MDA含量随BDE-209暴露剂量增加而增高,SOD活性随BDE．209暴露剂量增加而降低,在BDE．209暴露剂量相同的情况下,孕期窒息能够增加MDA含量,降低SOD活性,组间两两比较,差异有统计学意义（P=0．000）。孕期低剂量BDE-209暴露联合窒息对SOD活性的影响存在交互作用（P=-0．002）。结论孕期低剂量的BDE-209暴露联合窒息可以使仔鼠海马SOD活性下降,MDA含量升高,出现氧化应激状态,导致神经系统的氧化损伤。孕期低剂量BDE-209暴露与孕期窒息之间存在-定的交互作用。     

西维因致男性工人精子DNA损伤的机制初探

目的:探讨西维因农药暴露与男性工人精子DNA损伤的关系,并探讨其可能的机制?方法:选择某农药厂西维因生产男工31名为暴露组;该厂行政区男性员工36名为内对照组;同地区男性行政人员22名为外对照组?检测3组人群精子DNA损伤?精浆超氧化物歧化酶(SOD)活性及精子活性氧(ROS)含量?选用培养的小鼠精母细胞(GC2-spd细胞)进行体外功能学验证,在不同浓度西维因染毒条件下,分析细胞存活率?凋亡及SOD活性,ROS含量的变化?结果:与内?外对照组相比,暴露组男性精子DNA断裂损伤显著增加(P < 0.05)?精浆SOD活性降低及精子ROS增加(P < 0.05)?相关性分析的结果显示,精子DNA损伤与精浆SOD的活性负相关(r=-0.53,P < 0.001),与精子ROS水平呈正相关(r=0.32,P=0.002)?小鼠精母细胞随西维因染毒剂量增加细胞存活率显著下降,凋亡增多并且细胞SOD减少及ROS增加(P < 0.05)?结论:西维因可影响男性精液质量,其可能的机制是通过氧化应激导致精子DNA的损伤?     

晶状体上皮细胞DNA损伤的SCGE测定法

目的 研究晶状体上皮细胞DNA的损伤.方法 应用单细胞凝胶电泳(SCGE)法测定氧化、辐射及细胞外高糖、高钙环境对晶状体上皮细胞DNA的损伤.结果 对照组中晶状体上皮细胞呈圆形无拖尾,表明其DNA未受损伤.各处理组细胞呈不同程度的典型彗星图像,头尾分明,与对照组相比差异具有显著性(P＜0.001).结论 以SCGE法测定出多种因素均可导致体外培养的晶状体上皮细胞DNA损伤,考虑其可能与白内障的形成有关.