自体富血小板血浆促进兔上颌缝的牵张成骨

背景：富血小板血浆内含多种高浓度的生长因子，具有促进新骨生成，加速愈合的作用，对牵张成骨的作用尚无公识性结论。目的：观察自体富血小板血浆对免上颌骨牵张成骨的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于200707／08在中山大学北校区何母实验楼生理实验室完成。材料：3～5月龄健康家兔16只，雌雄各半，体质量1．4～1．7kg，随机分为实验组和对照组，每组8只。自制上切牙带环、外置式前牵引面具、牵引橡皮圈。凝结剂由1000U牛凝血酶溶于1mL100肌氯化钙制成。方法：分别在家兔左侧前颌缝的两侧置入钛钉（直径1．5ram），戴自制前牵引装置，试验组在牵张开始时，注射V（富血小板血浆）：V（凝结剂）=9：1混合的凝胶样物质至左侧前颌缝内。两组分别持续牵引1周和3周，每个时间点4只家兔。主要观察指标：牵引结束后测量骨缝两侧钛钉间距离的增加值以及组织学观察结果。结果：对照组和试验组家兔上颌均向前移位。同对照组相比，实验组骨缝标志钉间距离增加值较大，新骨生成与矿化较快，血管分布较多，牵张间隙中骨小粱较为粗壮和成熟。结论：富血小板血浆有助于骨组织再生，对兔上颌牵张成骨具有促进作用。     

犬颧骨牵张成骨后新生骨成熟状况与厚度和密度特征

目的：通过新生骨骨质结构和骨密度分析观察犬颧骨牵张成骨效果。 方法：实验于2004—10／2005—4在解放军第四军医大学实验外科实验室完成。①以6只犬为实验动物，实验侧，全麻下截除部分上颌骨颧突制作宽约10mm节段性缺损，模拟上颌骨大型缺损，施行颧骨牵张成骨，0．5mm／次．2次／d，连续10d，共牵引10mm。保留对侧骨质完好为对照侧。②固定期X射线观察，分别于8，12，16周取材，行骨密度分析、大体标本、扫描电镜观察。 结果：①6只犬实验内容按计划完成，牵张区新骨生成顺利，快速。②于固定期8周时，新骨形成良好，但骨质结构、密度和成熟状况与正常骨相比尚存在一定差距，实验侧骨密度为对照侧骨密度的56．9％，此后，各项指标进行性加强，至16周时，新生骨骨质结构已接近于正常骨，并具备相当的密度，实验侧骨密度为对照侧骨密度的86．1％。 结论：颧骨牵张成骨效果确切，在固定期8周时，新生骨生成良好，骨缺损修复基本完成，此后，骨质不断改建和成熟，骨密度进行性加强，固定期16周时，新生骨在成熟状况，厚度、密度等方面接近于正常骨。固定期8～12周时可考虑卸下牵张器，确定进一步治疗方案。     

犬颧骨牵张成骨后新生骨成熟状况与厚度和密度特征

目的:通过新生骨骨质结构和骨密度分析观察犬颧骨牵张成骨效果。方法:实验于2004-10/2005-4在解放军第四军医大学实验外科实验室完成。①以6只犬为实验动物,实验侧,全麻下截除部分上颌骨颧突制作宽约10mm节段性缺损,模拟上颌骨大型缺损,施行颧骨牵张成骨,0.5mm/次,2次/d,连续10d,共牵引10mm。保留对侧骨质完好为对照侧。②固定期X射线观察,分别于8,12,16周取材,行骨密度分析、大体标本、扫描电镜观察。结果:①6只犬实验内容按计划完成,牵张区新骨生成顺利,快速。②于固定期8周时,新骨形成良好,但骨质结构、密度和成熟状况与正常骨相比尚存在一定差距,实验侧骨密度为对照侧骨密度的56.9%,此后,各项指标进行性加强,至16周时,新生骨骨质结构已接近于正常骨,并具备相当的密度,实验侧骨密度为对照侧骨密度的86.1%。结论:颧骨牵张成骨效果确切,在固定期8周时,新生骨生成良好,骨缺损修复基本完成,此后,骨质不断改建和成熟,骨密度进行性加强,固定期16周时,新生骨在成熟状况,厚度、密度等方面接近于正常骨。固定期8～12周时可考虑卸下牵张器,确定进一步治疗方案。     

富血小板血浆对人骨髓间充质干细胞成骨诱导的影响

背景:富血小板血浆足经过特殊方法提取的血小板含量丰富的血浆,相较普通血清含有更丰富的细胞因子,如血小板衍生因子、转化生长因子β、血管内皮生长因子等.目的:观察富血小板血浆对成骨诱导人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响,拟探讨促进人骨髓间充质干细胞的增殖与诱导成骨细胞的培养方法.设计、时间及地点:配对样本对比观察,于2007-03/2008-03在中山大学组织工程实验室完成.对象:18名健康志愿者,男12名,女6名,平均年龄27.5岁.随机分为3组:富血小板血浆组、胎生血清组、无血清对照组,每组6人.方法:抽取18名健康志愿者自体外周静脉血获取富血小板血浆.采用密度梯度离心法获取健康志愿者骨髓间充质干细胞,常规原代培养,传代诱导培养时根据分组情况,分别采用10%AB型血清、10%自体富血小板血浆与无血清,配比高糖DMEM培养基、50mg/L抗坏血酸、1008mol/L地塞米松、103mol/L-β甘油磷酸钠.主要观察指标:倒置相差显微镜、扫描电镜观察各组细胞彤态,MTT法检测细胞增殖情况,细胞碱性磷酸酶活性、骨钙素水平.结果:3组细胞均存接种后12～24 h开始贴壁,并由圆形逐步变化为梭型、多角形、有多个突起的不规则形状等.细胞传代诱导培养后,富血小板血浆组与胎生血清组细胞生长迅速,明显快于无血清对照组(P<0.05).从传代培养第2、4、6代的细胞生长看,随着培养时间的延长富血小板血浆组细胞增殖明显快于胎生血清组.3组细胞碱性磷酸酶活性与骨钙素随诱导时间的延长而增高,培养第3,6,9,12天胎生血清组碱性磷酸酶活性较富血小板血浆组低,培养第15天两组无明显差异.培养第3,6,9天富血小板血浆组细胞内骨钙素含量与胎生血清组无明显差别,12 d后明显高于胎生血清组.无血清对照组碱性磷酸酶活性及骨钙索含量较富血小板血浆组变化程度明显减小.并且各时间点碱性磷酸酶活性与骨钙素含量均低于富血小板血浆组(P<0.01).结论:自体富血小板血浆能够有效加快人骨髓间充质干细胞的增殖,并能有效促进诱导培养的人骨髓间充质干细胞成骨特性表达.     

小型猪富血小板血浆对牙周膜干细胞的成骨诱导

背景:组织工程技术为牙周炎致骨组织缺损的修复提供了新的思路。目的:探寻富血小板血浆在小型猪牙周膜干细胞成骨诱导中的作用。方法:采集贵州小型猪静脉血,三次离心制备富血小板血浆。采用组织块法分离培养小型猪牙周膜干细胞,分别将含体积分数0.8%,1.0%,1.2%的富血小板血浆与牙周膜干细胞共同培养3,7,14,21d,以未添加富血小板血浆的牙周膜干细胞作为对照。结果与结论:体积分数0.8%,1.0%,1.2%的富血小板血浆成骨诱导第14天,碱性磷酸酶活性达到峰值,其中体积分数1.0%的富血小板血浆诱导的细胞碱性磷酸酶活性最高,第21天时碱性磷酸酶活性降低。茜素红染色显示富血小板血浆成骨诱导第21天细胞染色呈阳性。单克隆纯化后细胞的生长曲线从第3天起进入对数生长期,第8天细胞数量达到顶峰。说明富血小板血浆具有诱导牙周膜干细胞成骨的能力,以体积分数1.0%时诱导成骨效率最优。     

小型猪富血小板血浆对牙周膜干细胞的成骨诱导

背景：组织工程技术为牙周炎致骨组织缺损的修复提供了新的思路。目的：探寻富血小板血浆在小型猪牙周膜干细胞成骨诱导中的作用。方法：采集贵州小型猪静脉血,三次离心制备富血小板血浆。采用组织块法分离培养小型猪牙周膜干细胞,分别将含体积分数0.8%,1.0%,1.2%的富血小板血浆与牙周膜干细胞共同培养3,7,14,21d,以未添加富血小板血浆的牙周膜干细胞作为对照。结果与结论：体积分数0.8%,1.0%,1.2%的富血小板血浆成骨诱导第14天,碱性磷酸酶活性达到峰值,其中体积分数1.0%的富血小板血浆诱导的细胞碱性磷酸酶活性最高,第21天时碱性磷酸酶活性降低。茜素红染色显示富血小板血浆成骨诱导第21天细胞染色呈阳性。单克隆纯化后细胞的生长曲线从第3天起进入对数生长期,第8天细胞数量达到顶峰。说明富血小板血浆具有诱导牙周膜干细胞成骨的能力,以体积分数1.0%时诱导成骨效率最优。     

富血小板血浆对促进鼻骨缺损模型兔骨愈合的影响

目的 探讨富血小板血浆(PRP)对鼻骨缺损模型兔骨愈合的治疗效果,为临床应用提供实验学参考.方法 取24只成年新西兰大白兔,体重2.5～3.0 kg,均为雄性,均制备直径为5 mm、深度2.5 mm的鼻骨圆柱形缺损,随机分为PRP组(A组)和空白组(B组),每组12只.B组不用药物处理骨缺损区;A组用制备的兔自体PRP...     

富血小板血浆诱导人骨髓基质干细胞的体内异位成骨

背景:近年来的研究发现,结合组织工程技术利用经诱导转化的骨髓基质干细胞能成功地在动物体内再生出骨组织,并在大型哺乳动物负重骨缺损的修复实验中取得了较好的修复效果.目的:观察富血小板血浆诱导培养人骨髓基质干细胞在体内的成骨特性,探讨采用富血小板血浆诱导培养的人骨髓基质干细胞与珊瑚羟基磷灰石材料体内异位成骨的可行性.设计、时间及地点:配对样本观察,于2007-10/2008-04在中山大学组织工程实验室完成.材料:4周龄BALB/C裸鼠14只,体质量22～24 g,麻醉后将裸鼠两侧股部切开,于股部肌间隙内制成肌袋模型.方法:14只裸鼠左侧肌袋内植入珊瑚羟基磷灰石复合富血小板血诱导培养的人骨髓基质干细胞,作为实验组;右侧背部肌袋内植入单纯珊瑚羟基磷灰石材料为对照组.主要观察指标:分别于植入后4,8,12周对比观察两组裸鼠活动及进食情况;X射线平片观察阻射率;苏木精-伊红染色观察骨形成情况.结果:14只裸鼠均进入结果分析.①植入材料后裸鼠活动及进食均正常,伤口愈合良好.材料随植入时间的延长无明显吸收,而材料周围的肌肉组织等软组织由外向内逐渐长入材料孔隙内有所增多.②随时间延长两组X射线平片阻射影像密度逐步增加.植入材料后4,8,12周实验组与对照组相比,差异有非常显著性意义(P<0.01).③植入材料后4周,实验组可见珊瑚羟基磷灰石表面有细胞生长,孔隙内有结缔组织长入;对照组仪见珊瑚羟基磷灰石表面有细胞生长.8周时珊瑚羟基磷灰石表面有新生骨形成,孔隙内和孔隙边缘可见骨样组织沉积和少量软骨样组织形成;对照组仅见少量纤维结缔组织长入.12周时珊瑚羟基磷灰石材料表面有较多成熟编织骨形成,部分区域可见髓腔样结构形成,并有血管长入;对照组仍未见新骨及骨样组织形成.结论:富血小板血浆诱导培养人骨髓基质干细胞与珊瑚羟基磷灰石材料在裸鼠体内能够良好的成骨,随时间的延长,成骨特性越明显;体内采用肌袋包裹的方法能有效增加血运及促进组织工程骨血管化生成,促进成骨.     

富血小板血浆对体外培养骨骼肌干细胞增殖及成骨活性的作用

背景:已有研究发现富血小板血浆可以影响骨髓间充质干细胞和脂肪干细胞的生长和分化.目的:观察富血小板血浆对体外培养的骨骼肌干细胞增殖与诱导成骨的影响,探讨富血小板血浆影响骨骼肌干细胞的机制.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于 2008-06/10在上海交通大学附属第六人民医院中心实验室完成.材料:普通级新西兰大白兔9只,体质量2.5～3 kg.年龄1岁左右,雌雄不限.方法:取兔右后肢比目龟肌体外培养新西兰大白兔骨骼肌干细胞.取兔耳中央动脉血,经离心处理后制备富血小板血浆.将细胞分为实验组与对照组,实验组以含12.5%自体富血小板血浆的条件培养液干预,对照组不进行富血小板血浆干预.主要观察指标:①细胞形态学观察.②以四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖活性.③以碱性磷酸酶钙钴法染色、碱性磷酸酶活性测定、茜索红染色和骨钙素免疫荧光染色检测细胞成骨活件.结果:四甲基偶氮唑盐法显示富血小板血浆诱导实验组较对照组增殖明显(P<0.01);碱性磷酸酶活性较对照组增高明显(P<0.01).富血小板血浆诱导实验组碱性磷酸酶染色阳性,骨钙素免疫荧光染色阳性,茜素红染色可见钙结节形成.结论:富血小板血浆对体外培养的骨骼肌干细胞增殖与成骨分化活性具有显著的促进作用.     

富血小板血浆诱导犬骨髓间充质干细胞的体外成骨

背景:富血小板血浆中含有大量骨再生所需的生长因子,且各生长因子的比例是机体自身形成的,具有良好的协同作用.目的:探讨富血小板血浆体外诱导犬骨髓间充质干细胞成骨的效果.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-06/2008-02在中南大学湘雅医院中心实验室完成.材料:健康12月龄雄性比格犬,由中南大学湘雅医学院实验动物部提供.方法:收集第3代犬骨髓间充质干细胞,分为4组:对照组加入标准培养基;成骨诱导培养基组向培养板孔内加入含胎牛血清、地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C的高糖DMEM培养基;富血小板血浆组根据预实验结果,向培养板内加入含体积分数为6.25%富血小板血浆的低糖DMEM培养基;联合组向培养板内加入含地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C、体积分数为6.25%富血小板血浆的高糖DMEM培养基.主要观察指标:细胞内碱性磷酸酶活性,免疫细胞化学染色检测I型胶原的表达,改进Yon Kossa染色标记钙结节形成情况,RT-PCR检测诱导后骨钙素mRNA的表达.结果:各组碱性磷酸酶活性均随诱导时间的延长而逐渐增高,联合组升高幅度最为明显(P<0.05).诱导7,14 d后,成骨诱导培养基组、联合组I型胶原均呈阳性表达,富血小板血浆组、对照组I型胶原始终呈阴性表达.诱导14 d后,成骨诱导培养基组、联合组可见卵圆形钙结节.诱导7,14 d后,对照组与富血小板血浆组之间骨钙素mRNA表达水平无明显差异(P>0.05),此2组骨钙素mRNA表达水平均明显低于成骨诱导培养基组、联合组(P<0.05);成骨诱导培养基组骨钙素mRNA表达水平明显低于联合组(P<0.05).结论:经成骨条件培养基诱导培养的骨髓基质干细胞,富血小板血浆能在体外显著诱导其成骨指标的表达.     

犬牙槽骨牵张成骨的生物力学和组织学分析

背景：牙槽骨牵张成骨是解决严重牙槽骨萎缩的重要方法,其成骨过程和生物力学对于以后的种植和修复极为重要,目前一直缺少相关的实验研究。目的：分析犬牙槽骨牵张成骨的生物力学和组织学特点。方法：先拔除12只杂种犬双侧下颌前磨牙,牙槽骨修整后,制作萎缩牙槽骨模型。3个月后,植入骨内型牙槽骨牵张器。经过7 d的间歇期,以1 mm/d,1次/d的频率进行牙槽骨垂直向增高。在固定期的1,2和3个月,对牵张后的牙槽骨进行临床、生物力学、放射学和组织学检测。结果与结论：所有牵张器与周围组织愈合良好。牵张结束时,临床和放射学检查显示：萎缩牙槽骨分别增高（4.80±0.50） mm和（5.12±0.67） mm。组织学检测发现牵张区骨小梁在固定期的1-3个月成熟,其剪切力逐步提高,固定期3个月时和自体骨的剪切力相当。结果显示牙槽骨牵张成骨的组织学和生物力学性能在固定期3个月时与自体骨相当。     

The effect of cognitive distraction on the processing of alcohol cues

ABSTRACT

A range of studies have demonstrated that regular drinkers respond to alcohol-related stimuli with increased self-reported craving for alcohol (cue-reactivity). Considerable individual differences have been found in terms of the magnitude of the craving response. However, less work has been conducted to assess the role of cognitive factors in influencing alcohol cue-elicited craving. This study assessed the effect of a cognitive distraction task and individual variability in trait-mindfulness on responses to alcohol cues using a standard cue reactivity paradigm. Sixty-nine regular social drinkers were randomly allocated to one of the two experimental conditions – no instructions vs cognitive distraction (asked to focus on milk) – and were presented with alcohol. Results indicated that positive craving (i.e., desire to drink for positive reinforcement) increased from neutral to alcohol-cue exposure, and that those in the cognitive distraction condition reported significantly lower positive urge to drink after alcohol-cue exposure. No relationship between alcohol craving and mindfulness was found. Implications of the findings are discussed with a particular focus on the role of cognitive distraction in cue-reactivity and the potential utility of using a cognitive distraction technique to reduce alcohol craving.     

兔短暂性局灶脑缺血MRI动态演变和病理组织学改变

目的：研究兔短暂局灶脑缺血后MRI缺血改变的时程,并且评价其组织病理学改变。为短暂性脑缺血发作患者的临床诊断和治疗提供依据。方法：30只新西兰白兔分为7min和30min短暂大脑中动脉阻塞模型和假手术组,各组10只。在阻塞前、阻塞中和再灌注后0.5h、2h、6h、12h、24h、48h、72h对实验动物MRI检查,在MRI检查后于72h时间点进行组织病理学评价。结果：在假手术组无MRI异常。在7min和30min组,在阻塞时的DWI高信号于再灌注后消失。此后,在7min组,DWI和T2WI保持正常,而在30min组,于6～12h观察点出现继发的DWI高信号和T2WI异常。组织学检查显示在2组均有神经元坏死,但是坏死神经元数目在30min组显著高于7min组（P<0.001）。结论：于再灌注后DWI信号异常的短暂或持久消失依赖于缺血持续时间。DWI信号异常的短暂消失动物有广泛的神经元坏死;然而,DWI信号异常持久消失并不表明缺血损伤的脑组织完全恢复。这些结果有助于解释在有些脑缺血后DWI正常的患者神经功能缺失的表现,以及有些经历过短暂性脑缺血发作的患者表现认知功能改变。     

99Tc-MDP对绝经后骨质疏松骨吸收、骨生成的影响

目的　观察99Tc- MDP[99锝 亚甲基二膦酸盐]治疗10 2例绝经后骨质疏松患者骨代谢指标变化。方法　监测绝经后骨质疏松患者治疗前后BGP(骨钙素)、IL -1(白细胞介素- 1)、IL 6 (白细胞介素- 6 )、IGF -I(类胰岛素样生长因子I)、IGF -II(类胰岛素样生长因子II)、E2 (雌二醇)及骨密度测定。结果　治疗后6个月患者骨密度增加,BGP水平升高,IL -1、IL- 6水平降低,IGF I、IGF II水平升高。结论　99Tc -MDP抑制骨丢失,提高成骨细胞活性,增加骨密度作用确切。     

单肺通气时降低吸入氧浓度对兔肺损伤的影响

目的观察单肺通气(OLV)时降低吸入氧浓度(FiO2)对兔肺损伤的影响。方法新西兰白兔30只,随机均分为三组:60%FiO2组(L组)、100%FiO2组(H组)和对照组即双肺通气(TLV)组(C组,60%FiO2)。L组和H组TLV30min后行右OLV3h,C组TLV30min后继续TLV3h。三组于TLV30min(T0)和OLV10min(T1)、30min(T2)、60min(T3)、120min(T4)、180min(T5)时抽取动脉血行血气分析并计算氧合指数(OI)。股动脉置管监测血压(ABP)、心率(HR),记录气道峰压(Ppeak)。各组实验结束后处死动物,取双侧肺组织行肺病理组织学损伤评分,并测量双侧肺组织匀浆液中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果与H组比较,L组动脉氧分压(PaO2)在T4、T5时明显降低,动脉氧饱和度(SaO2)在T5时明显降低,T5时SOD含量明显增高,MDA含量明显降低,肺损伤评分降低(P<0.05);H组镜下肺泡腔内可见大量红细胞渗出,L组镜下可见较少的炎性细胞浸润、肺泡渗出液、肺泡间质破坏。结论OLV时降低FiO2到60%虽然增加低氧血症的发生率,但能显著减轻兔肺损伤,这可能与减轻了肺组织氧化应激水平有关。     

高职高专护理专业学生不同实习阶段压力源的调查研究

目的 调查高职高专护理专业学生不同实习阶段的压力源.方法 采用临床实习压力源问卷,对227名高职高专护理专业实习生在实习前期、中期及末期进行调查.结果 学生各阶段的压力源总分及各维度得分均＞1分.在实习中,除考试及就业维度的压力水平升高外,压力源总分及其余5个维度得分均下降.各阶段持续存在的压力源包括知识水平与临床实习的差距、处理紧急情况的能力、实习中出现差错、带教教师的评价、患者与家属的评价.阶段性压力源在实习早期主要是环境与工作流程不熟悉,实习中期主要是动手操作机会与患者家属不配合,实习后期主要是考试与就业压力.结论 高职高专护理专业学生在实习各阶段均处于中度及以上压力,应根据不同阶段的压力源采取相应措施,缓解其压力.     

血浆与红细胞不同比例输注对大量输血患者凝血功能的影响

目的探讨大量输血时,输注不同比例的血浆和红细胞对大量输‘血患者凝血功能的影响。方法回顾性分析97例大量输血患者临床资料,按入院24h内输注新鲜冰冻血浆（FFP）与浓缩红细胞（CRBC）的比例,以100mI。：1U为比例单位,将患者分为低比例组（FFP：CRBC：1：3,n=20）、中比例组（FFP：CRBC=1：2,n=33）和高比例组（FFP：CRBC=1：1,n=44）;比较3组凝血指标、住院时间、病死率以及24h内输注红细胞量、血小板量、冷沉淀量的差异。结果大量输血后,中比例组和高比例组凝血酶原时间（PT）、部分促凝血酶原时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）,3项凝血指标与低比例组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;但大量输血后,3组住院时间、病死率及24h内输注红细胞量、血小板量、冷沉淀量的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论大量输血时,适度提高血浆输注的比例,有利于预防患者发生凝血功能障碍。     

术中输血与输明胶类代血浆对恶生肿瘤病人T细胞亚群的影响

目的 对比研究中输血及输注明胶类血将代用品海脉素对恶生肿瘤病人T细胞亚群的影响。方法 将印例恶生肿瘤切除术患者，随机分为两组，对照组术中输血组（Ⅰ组）30例；试验组术中输注海脉素组（Ⅱ组）30例。分别于麻醉前，术中及术后24h，48h，72h，抽取静脉血测定T细胞亚群CD2，CD4，CO3，CD4／CD8。结果 输血组在术后24hT细胞变化明显，CD2，CD4，CD4／CD8降低，CD8升高，72h未见恢复到术前水平。输海脉素组在术后24hT细胞变化不明显。结论 围术期输注明胶类血浆代用品海脉素对T细胞亚群的影响不大而输异体血对T细胞亚群有明显的抑制作用。     

The effect of fibrinogen concentrate and fresh frozen plasma on the outcome of patients with acute traumatic coagulopathy: A quasi-experimental study

Introduction

The debate on replacing coagulation factors and its effect on the final outcome of the patients with acute traumatic coagulopathy (ATC) in need of transfusion is still ongoing. Therefore, the present study is designed with the aim of comparing the outcome of patients with acute traumatic coagulopathies receiving fibrinogen and fresh frozen plasma (FFP).