流式细胞术快速检测念珠菌的药物敏感性

目的建立流式细胞术（FCM）快速检测念珠菌药物敏感性的方法。方法选定了3种代表性染料：碘化丙啶（PI）、FUN-1和DiOC5（3）,采用FCM测定60株临床分离的念珠菌对氟康唑（FLC）和两性霉素B（AMB）的敏感性,并与美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的M27-A法的结果进行比较。结果PI、FUN—1和DiOC5（3）3种荧光染料均可用于FCM检测念珠菌的药物敏感性,其中PI、FUN-1均可用于FLC和AMB2种药物的敏感性试验;与另外2种染料相比,利用PI染料进行检测的结果与M27-A法有更好的-致性,并且价廉易得,但其要求药物与细菌的孵育时间较另外2种染料长;DiOC5（3）仅可用于对AMB的最低抑菌浓度（MIC）测定,但其要求药物与细菌的孵育时间最短,只需0．5h。结论利用FCM进行抗真菌药物敏感性试验,可大大缩短检测时间,但为获得与M27-A法较为-致的结果,应针对不同的药物选用不同的染料,设定各自的最佳检测条件。     

流式细胞术快速检测念珠菌的药物敏感性

目的建立流式细胞术(FCM)快速检测念珠菌药物敏感性的方法。方法选定了3种代表性染料:碘化丙啶(PI)、FUN-1和DiOC5(3),采用FCM测定60株临床分离的念珠菌对氟康唑(FLC)和两性霉素B(AMB)的敏感性,并与美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的M27-A法的结果进行比较。结果PI、FUN-1和DiOC5(3)3种荧光染料均可用于FCM检测念珠菌的药物敏感性,其中PI、FUN-1均可用于FLC和AMB 2种药物的敏感性试验;与另外2种染料相比,利用PI染料进行检测的结果与M27-A法有更好的一致性,并且价廉易得,但其要求药物与细菌的孵育时间较另外2种染料长;DiOC5(3)仅可用于对AMB的最低抑菌浓度(MIC)测定,但其要求药物与细菌的孵育时间最短,只需0.5 h。结论利用FCM进行抗真菌药物敏感性试验,可大大缩短检测时间,但为获得与M27-A法较为一致的结果,应针对不同的药物选用不同的染料,设定各自的最佳检测条件。     

164株念珠菌培养与药敏分析

目的了解女性外阴阴道的感染情况,研究临床分离的真菌种类及其对药物的敏感性。方法对1184例标本进行回顾性分析,其中164例阳性标本的菌株用API真菌鉴定板条(API 20C AUX)鉴定,用Rosco纸片法对制霉菌素、益康唑、伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、两性霉素、克霉唑、氟康唑、氟胞嘧啶进行药物敏感性试验。结果 164例共有8个种,以白色念珠菌为主,占67.1%。各种念珠菌对9种抗真菌药物均有不同程度的耐药。结论白色念珠菌仍然是妇产科真菌感染主要菌种。氟胞嘧啶与两性霉素是治疗妇产科深部真菌病的首选药物。各种念珠菌对临床上常用抗真菌药物的敏感性具有明显不同,对于合理使用抗生素,减少真菌感染,特别是耐药菌株感染的发生有着重要的意义。     

医院念珠菌属感染的临床分布及药敏分析

[目的]调查医院念珠菌属感染的临床分布及药敏状况,提高临床诊治水平.[方法]时2004～2006年临床分离的207株念珠菌的感染及药敏试验分布进行统计分析.[结果]念珠菌感染菌株以白色念珠菌占首位(56.0%),其次是近平滑念珠菌(19.8%),热带念珠菌(12.1%);检出标本以痰液为主(80.2%),其次是白带(10.1%);临床科室中呼吸内科和ICU病房的检出率最高;严重的基础疾病,高龄以及滥用抗生索等因素是念珠菌感染的易感因素;念珠菌属主要对制霉菌素,两性霉素B敏感性最高,对吡咯类药物存在不同程度的耐药.[结论]念珠菌属是真菌性医院感染的主要病原菌,应加强对念珠菌属的监测,以指导临床正确合理地选用抗真菌药物.     

281株临床分离念珠菌的药敏结果分析

目的 对临床送检标本分离鉴定出的念珠菌进行细菌构成及药敏结果分析,促进临床合理使用抗真菌药物.方法 对2009年1月至2010年12月临床送检标本进行 5种常用抗真菌药(5-氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B)的体外敏感性检测及耐药分析.结果 281株念珠菌中白色念珠菌184株,占65.5%,其次是光滑念珠菌50株(17.8%),热带念珠菌19株(6.8%).结论 该院患者念珠菌感染以白色念珠菌为主,药敏结果显示两性霉素B、5-氟胞嘧啶、伏立康唑、氟康唑、伊曲康唑敏感性高,对送检标本及时进行真菌培养和药敏试验,可及时、合理地使用抗真菌药物,减少多重耐药和深部真菌感染的发生.     

255株真菌菌株鉴定与药敏分析

目的了解住院患者真菌感染的种类及其耐药特点,为使用抗真菌药物提供病原学依据。方法对各类临床标本进行分离和培养,采用科玛嘉显色培养基及ATBEpression全自动微生物鉴定仪进行分析,并用ATBFUNGUS3真菌药敏板条进行药敏试验。结果共分离真菌255株,以白色假丝酵母菌(60.39%)为主要菌种;分布以痰标本(65.10%)和尿标本(29.80%)为主;对5种抗真菌药物的敏感率,白色假丝酵母菌高于其他真菌。结论重视真菌的培养鉴定和药敏试验,以指导临床合理选择抗真菌药物。     

肠球菌体外药敏试验的流式细胞术研究

目的建立肠球菌体外药敏试验的流式细胞荧光法。方法以碘化丙啶(PI)作死体细胞染料,用流式细胞术检测1株肠球菌标准株和30株肠球菌临床菌株对万古霉素的敏感性。根据细菌培养物在不同浓度药物作用后所检测到的荧光强度来判断细菌的存活率,推断其MIC值,并与琼脂稀释法检测结果进行比较。结果31株肠球菌的流式细胞荧光法药敏结果与琼脂稀释法结果一致。结论流式细胞荧光法对肠球菌耐药性的体外监测具有快速、准确、客观等特点,有推广价值。     

临床分离206株念珠菌的培养鉴定及其耐药性分析

目的 对引起感染的206株临床分离的念珠菌进行分离鉴定和药敏试验,了解念珠菌耐药现状,以指导临床合理用药.方法 收集2010年1～12月临床送检的痰液、尿液、血液及各种分泌物等标本,采用常规方法培养和分离念珠菌,用法国生物梅里埃ATB express系统对念珠菌进行鉴定,用ATB fungus药敏试条进行药敏试验.结果...     

流式细胞术用于药物抗真菌效应的检测

目的尝试建立用流式细胞术检测药物抗真菌效应的新方法。方法以碘化丙锭为荧光染料,用流式细胞术检测标准菌株近平滑念珠菌ATCC22019在不同浓度氟康唑（FCZ）作用下各管平均荧光强度,探讨最佳实验条件。结果真菌MFI值随着FCZ浓度的增加而增强,其变化具有浓度依赖性,较好地反映了药物的抗真菌效应。结论成功建立用流式细胞术检测药物抗真菌效应的新方法,流式细胞术在该领域的应用值得进一步研究。     

流式细胞术在临床细菌学检测中的应用

流式细胞术（FCM）有快速，灵敏及同时进行多参数分析等优点，它应用于临床细菌学，使细菌实验室的传统试验模式发生革命性变化。它通过荧光染料标记可检测病原菌，毒素和血清抗体，还可用于抗生素敏感性试验，对抗生素后效应，细菌耐药的异质性等进行分析。本文对流式细胞术的检测原理和近年来在临床细菌学检测上的主要应用作了综述。     

菌尿症标本的直接药敏试验

目的　探讨菌尿症的快速药敏试验方法。方法　涂片镜检每个油镜视野平均菌数≥ 2的标本疑为菌尿症 ,直接进行纸片扩散法药敏试验 ,孵育 16～ 18h后观察结果 ,同时进行标本定量培养和菌落计数 ,得到的纯培养菌株按常规纸片扩散法做比较试验。结果　共检测了 16 6例革兰阴性菌和 5 1例革兰阳性菌菌尿标本 ,直接药敏试验与NCCLS推荐的纸片扩散法的结果比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　对于菌尿标本 ,直接药敏试验是一种快速、简便、经济的方法 ,可在 2 4h内报告初步的药敏结果 ,以供临床早期用药参考     

流式细胞仪与镜检法计数网织红细胞的比较

目的建立流式细胞仪计数网织红细胞的方法并应用于临床。方法5ul全血加入噻唑橙染液中，流式细胞仪计数10万个红细胞，分析其中的网织红细胞数并与镜检法比较。结果流式细胞仪法与镜检法计数网织红细胞结果差异无显著性。结论流式细胞仪计数网织红细胞快速．结果准确．且重复性好，适合临床常规检测网织红细胞。     

半自动细菌分析专家系统在细菌药敏试验中的应用

目的为了解半自动细菌分析（ATB）专家系统在临床应用情况,对近一年来的药敏报告进行分析。方法全部细菌用ATB—expression半自动细菌分析仪鉴定到种,药敏试验采用ATB配套的药敏卡,并接受ATB专家系统的建议及更正或补充试验采用纸片扩散法。结果专家系统对来自临床的715株细菌的药敏结果进行监控,其中166株（23．2％）细菌药敏结果得到纠正。从213株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌中检测出43株产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌,其中30株经纸片确证法证实阳性。ATB专家系统还从75株葡萄球菌中检测出59株耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）,比原药敏结果增加了4株,但经纸片法证实仍漏检了4株苯唑西林低耐药株。结论通过ATB专家系统的监控,有效减少了药敏结果的错误,使其更趋于准确。但药敏结果还存在一些问题,需经有经验的人员审核。     

半自动细菌分析专家系统在细菌药敏试验中的应用

目的为了解半自动细菌分析(ATB)专家系统在临床应用情况,对近一年来的药敏报告进行分析。方法全部细菌用ATB-expression半自动细菌分析仪鉴定到种,药敏试验采用ATB配套的药敏卡,并接受ATB专家系统的建议及更正或补充试验采用纸片扩散法。结果专家系统对来自临床的715株细菌的药敏结果进行监控,其中166株(23.2%)细菌药敏结果得到纠正。从213株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌中检测出43株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌,其中30株经纸片确证法证实阳性。ATB专家系统还从75株葡萄球菌中检测出59株耐甲氧西林葡萄球菌(MRS),比原药敏结果增加了4株,但经纸片法证实仍漏检了4株苯唑西林低耐药株。结论通过ATB专家系统的监控,有效减少了药敏结果的错误,使其更趋于准确。但药敏结果还存在一些问题,需经有经验的人员审核。     

临床分离念珠菌对5种常用抗真菌药物的体外敏感试验结果分析

目的　了解临床分离的念珠菌对氟康唑、两性霉素B、氟胞嘧啶、伊曲康唑及酮康唑体外敏感性。方法　采用SensititreYeastOne试验板以微量稀释法测定上述 5种抗真菌药物对临床分离的 10 8株念珠菌最低抑菌浓度 (MIC)。结果　 10 8株念珠菌中达到氟康唑、伊曲康唑、氟胞嘧啶耐药标准的分别有 8株 (7.4%)、15株(13.9%)、2株 (1.9%) ,念珠菌属MIC值分布种间差异较大。白色念珠菌对 5种药物的MIC90 值最低 ,6 0株白色念珠菌中仅 2株耐氟康唑 ,3株耐伊曲康唑 ,对氟胞嘧啶无耐药株 ;光滑念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、酮康唑的MIC值分布呈高值 ,10株光滑念珠菌中 4株耐氟康唑 ,3株剂量依赖性敏感 ,7株耐伊曲康唑 ,且吡咯类之间有交叉耐药。其他菌株 ,除季也蒙念珠菌对伊曲康唑有一定的耐药 (2 /6 )外 ,对 5种抗真菌药物的MIC分布均较低。结论　不同念珠菌对常用抗真菌药物敏感性存在差异 ,准确分离鉴定和药敏试验 ,对于指导临床合理选药有重要意义。     

Development of a rapid assay methodology for antimicrobial susceptibility testing of Staphylococcus aureus

Development of a new phenotypic technique for rapid antimicrobial susceptibility testing (AST) of methicillin-resistant Staphylococcus aureus is presented. The new technique combines bacterial culturing and specific immunometric detection in a single separation-free process. The technique uses dry chemistry reagents and the recently developed two-photon excitation detection technology, which allows online detection of bacterium-specific growth. The performance of the new technique was evaluated by monitoring the growth of S. aureus reference strains and determining their susceptibility to oxacillin. In the direct analysis of clinical specimens, method specificity and tolerance to interferences caused by other bacteria present in the sample are pivotal. Other bacteria can compete with the bacteria of interest for nutrients, for example. Specificity and tolerance were studied against Staphylococcus epidermidis reference strains. The results suggest that the new technique could allow rapid AST directly from clinical samples within 6 to 8 h. Such a rapid and simple testing methodology would be a valuable tool in clinical microbiology because it would shorten the turnaround times of microbiologic analyses. Advantages of the new approach in relation to conventional methods are discussed.     

恶性肿瘤患者念珠菌临床分离株的药物敏感性分析

目的 以美国临床实验室标准化委员会（NCCLS） M27-A方案的微量肉汤稀释法为金标准,评价丹麦ROSCO公司的纸片扩散法在检测念珠菌耐药性方面的应用价值,为临床实验室寻找一种简便的念珠菌药敏试验方法.方法 分别采用丹麦ROSCO公司抗真菌药敏纸片和法国生物梅里埃公司ATBFUNGUR2念珠菌药敏板条来检测78株常见念珠菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑等4种抗真菌药物的敏感性,以NCCLS的微量稀释法作为金标准,评价纸片扩散法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值.结果 纸片扩散法检测5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑的药敏结果,其Kappa值达到了0.89,未出现一种方法敏感而另一种方法耐药的严重错误现象;对78株念珠菌的药敏结果进行分析,5-氟胞嘧啶、两性霉素B敏感性高,分别为88.20％和89.17％,氟康唑和伊曲康唑敏感性较低,分别为56.34％和52.12％.白色念珠菌和热带念珠菌对4种抗真菌药物的敏感性较高,分别为90.95％、85.71％,而光滑念珠菌和克柔念珠菌的敏感性低,分别为67.50％、41.67％.结论 纸片扩散法与微量稀释法一致性高,在临床实验室可以替代微量稀释法进行念珠菌的药敏分析.我院念珠菌对两性霉素B的敏感性最高,对伊曲康唑的敏感性最低;抗真菌药物对白色念珠菌的抑菌率最高,对克柔念珠菌的抑菌率最低.     

Identification of treatment strategies for Mycoplasma genitalium-related urethritis in male patients by culturing and antimicrobial susceptibility testing

Mycoplasma genitalium was first isolated from urethral swab specimens of male patients with non-gonococcal urethritis. However, the isolation of M. genitalium strains from clinical specimens has been difficult. Co-cultivation with Vero cells is one available technique for the isolation of M. genitalium. The strains that can be used for antimicrobial susceptibility testing by broth dilution or agar dilution methods are limited. Macrolides, such as azithromycin (AZM), have the strongest activity against M. genitalium. However, AZM-resistant strains have emerged and spread. Mutations in the 23S rRNA gene contribute to the organism’s macrolide resistance, which is similar to the effects of the mutations in macrolide-resistant Mycoplasma pneumoniae. Of the fluoroquinolones, moxifloxacin (MFLX) and sitafloxacin have the strongest activities against M. genitalium, while levofloxacin and ciprofloxacin are not as effective. Some clinical trials on the treatment of M. genitalium-related urethritis are available in the literature. A doxycycline regimen was microbiologically inferior to an AZM regimen. For cases of treatment failure with AZM regimens, MFLX regimens were effective.