ELISA法检测HBsAg中前带现象1例

在 ELISA试验中 ,前带现象 ( HBs Ag量过大 )是造成试验假阴性的重要原因之一 ,笔者在工作中发现 1例 ,现报告如下。材料与方法1　研究对象　献血者 ,男 ,3 8岁 ,O型 ,首次献血。2　试剂　试剂盒 A ( ELISA HBs Ag检测试剂盒 ,批号2 0 0 0 71 5 0 1 ) ,试剂盒 B( ELISA HBs Ag检测试剂盒 ,批号2 0 0 0 5 1 1 0 1 ) ,试剂盒 C( HBs Ag全血金标检测试纸试剂盒 ,批号 2 0 0 0 0 81 0 ) ,以上所有试剂均在有效期内使用。3　方法　试剂 A初检标本呈阴性 ( -) ,试剂盒 B复检标本呈阳性 ( +) ,试剂盒 C核对标本呈阳性 ( +)。再对标本…     

胶体金免疫层析法与ELISA检测HBsAg的比较

胶体金免疫层析法测定 ( GICA)乙型肝炎表面抗原 ( HBs Ag) ,具有简便、快速 ,不需要仪器设备等优点。我们介绍应用此法与酶联免疫吸附试验( ELISA)比较检测HBs Ag的结果。一、材料与方法1 .标本来源　本院患者和体检者血清 986份。2 .试剂　 GICA试剂由郑州博赛生物试剂实验研究所提供 ,ELISA试剂为上海科华生物技术有限公司产品。3.方法　 986份血清以 GICA、ELISA2种方法平行检测 ,操作均按说明书。二、结果和讨论1 .GICA的灵敏度　用 GICA试纸条检测 2ng/ml,1 mg/ml的质控品 ,其灵敏度可达 1 ng/ml,与文献报道相同。2 …     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎的评价

血清乙型肝炎标志物的检测通常采用酶联免疫测定法 ( ELISA) ,该方法须经孵育、洗涤、显色、判读等步骤 ,过程较为繁琐 ,检测时间长。而胶体金免疫层析技术具有简便、快速、特异性高、试剂稳定 ,无需检测仪器等优点 ,已在临床免疫学检验中得到广泛应用 [1,2 ]。本文采用胶体金免疫层析法检测血清HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag、HBe Ab和 HBc Ab,并与ELISA方法对比 ,以评价胶体金免疫层析法检测血清乙肝标志物的特异性和灵敏度。材料与方法1　试剂　乙肝 ELISA检测试剂盒由厦门新创生物有限公司提供 ,批号为 2 0 0 0 0 5 0 90 2 ( HBs…     

胶体金免疫层析法检测HBsAg漏检原因分析

胶体金免疫层析试纸条法 (GICA) ,其操作简便 ,快速、特异性高 ,试剂稳定 ,不需特殊设备且随时单份测定 ,适用于全血、血清和血浆 ,受到基层医疗检验者的重视和欢迎。我科于2 0 0 1 - 1 0起采用快速胶体金法对门诊患者 HBs Ag(乙肝病毒表面抗原 )检测 ,通过 GICA法检测的 HBs Ag阳性和阴性标本各1 0 0例与 ELISA法比较结果发现存在一定的漏检。现我们以此法与酶联免疫吸附试验 (ELISA)进行了对照比较 ,分析产生漏检原因。1　材料和方法1 .1　材料　 1 CF- 50 0 0型板式酶标仪 :(北京二航 ) ,Dn X- 962 0洗板机 (北京普朗 )。 2…     

计划无偿献血与自愿无偿献血人群血液安全性指标检测结果比较

为探讨献血模式改变对提高输血安全性的意义 ,笔者比较分析了 5 5 4 1 0例上海市区 2 0 0 2年 3～ 5月同期计划无偿献血 (初筛 )与自愿无偿献血人群的血液安全性检测指标 ,现将结果报告如下。材料与方法1　检测对象　 2 0 0 2年 3～ 5月上海市区的献血者5 5 4 1 0人 ,其中自愿无偿献血者 1 2 32 9人 ,计划无偿献血者 (初筛 ) 430 81人。2　试剂与仪器　 HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV的检测均采用上海科华生物技术有限公司 ELISA试剂盒 ,HBs Ag试剂盒的批号为 2 0 0 1 1 1 2 5、2 0 0 1 1 2 0 7;抗 - HCV试剂盒的批号为 2 0 0 1 1 0 0…     

Levery-Jennings 室内质控图的建立

室内质控 ( IQC)是血液学实验室内部进行的最基本的质量监督、检测、评价和改进 ,是全面质量管理体系中的一个重要环节 ,目的是对质控品的各项测得数据进行统计学处理 ,从而保证实验室结果的可重复性和精密度 ,判断检验报告是否可发出。目前 ,血站采用 ELISA法检测 ,其室内质控仍沿用 Levery-Jennings质控图 (简称 L-J质控图 ) ,此法科学性强、规范、实用。现以 HBs Ag为例 ,报告如下。材料与方法1　材料1 .1　试剂 :上海科华试剂盒 ,批号 :2 0 0 2 0 5 2 6。1 .2　质控血清 :上海血液中心生产 ,低值含量 ( 2 .0± 0 .5 )ng/ ml,批号 …     

无偿献血300ml与200ml献血反应的比较分析

ELISA检测室内质控与临床化学测定的质控方法相比有其特殊性 ,由于 ELISA试剂盒的有效期短 ,批号更换频繁 ,短时间内难以积累最佳条件下 2 0次质控物的检测结果。而采用“即刻法”质控统计方法 ,只需连续测 3次 ,即可对第 3次检验结果进行质控。笔者在免疫实验室 ELISA检测室内质控中采用了即刻法取得了良好的效果 ,现以检测HBs Ag室内质控为例 ,简述如下。材料与方法1　材料　 1 ng HBs Ag质控血清 (由卫生部临床检验中心提供 ) ;酶标仪 (美国伯乐 5 5 0 ) ;洗板机 (美国伯乐 1 5 75 ) ;40～ 2 0 0 μl加样枪 (芬兰产 ) ;检测HBs…     

乙型肝炎表面抗原检测中假性问题探讨

目前国内临床检测乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)多采用 ELISA双抗体夹心一步法 ,该方法检测 HBs Ag时 ,当标本中的 HBs Ag浓度过高 ,可造成假阴性。针对此现象 ,笔者从常规 844例乙肝五项指标检测血清中 ,收集其中 1 0例 HBe Ag、HBc Ab两项阳性 ,而 HBs Ag阴性的血清标本 ,对其稀释后分别进行 ELISA一步法和两步法检测 ,解决因 HBs Ag浓度过高而产生的假阴性问题。材料与方法1　标本来源　从住院及门诊检测乙肝五项指标的患者中选择 1 0例 ,共同特点是 HBe Ag和 HBc Ab的 S/CO>1 .0 (阳性 ) ,HBs Ag的 S/CO<1 .0 (阴性 )。2…     

滴金免疫法与酶免疫法检测HBsAg的结果分析

滴金免疫测定 ( DIGFA)近年来被用于乙型肝炎表面抗原 ( HBs Ag)的检测。由于该法简易、快速、不需任何仪器 ,且使用于血清、血浆、全血 ,已广泛用于血站对献血员现场筛查的试验。我们报告用滴金免疫法和酶联免疫吸附试验 ( ELISA)检测 1 3657份血液标本的结果。　　一、材料( 1 )全血标本 1 3657份 ,本站提供。 ( 2 ) HBs Ag滴金免疫试剂 ,北京万泰药业公司。 ( 3) HBs AgELISA试剂 ,上海科华实业有限公司 ;美国Abbott公司。 ( 4 )仪器 ,芬兰产 Wellscan Mk2酶标仪。二、方法1 .用 HBs Ag滴金免疫试剂和科华 ( ELISA)试剂检…     

溶血对抗—HCV，HBsAg等检测结果的影响

采血过程、运输及保存不当都易造成血液标本溶血 ,用溶血的标本进行抗 - HCV、HBs Ag、AL T、抗 - HIV的检测 ,其结果准确与否 ,笔者实验报告如下。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　仪器与试剂　 1酶标仪 CF- 2 0 0 0 MK2 (英国 ) ;2洗板机 CSM10 0 (芬兰 ) ;372 2光栅分光光度计 (上海分析仪器厂 ) ;4AL T试剂 (郑州中亚生物工程有限公司 ,批号 2 0 0 30 7) ;5HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV试剂 (上海科华生物技术有限公司 ,批号依次为 2 0 0 915、2 0 0 82 5、2 0 0 90 1)。1.1.2　溶血标本的配制　将抗 - HCV、抗 - HIV、HBs…     

光照对ELISA试验结果的影响

EL ISA法作为血站最常用的试验 ,具有灵敏、特异、重复性好的特点 ,但影响因素也很多 ,尤其是试验过程中底物的避光问题常被一些操作者忽视 ,有些商品试剂盒在说明书中指明加入底物溶液后应避光 ,但有些试剂说明书则未特别强调 ,且光照对 EL ISA的影响也少见报道。本文着重探讨了光照对 EL ISA试验结果的影响材料与方法1　试剂盒　上海科华抗 - HCV (批号 2 0 0 1110 5 )、HBs Ag(批号 2 0 0 112 0 7) ,厦门新创 HBs Ag(批号 2 0 0 110 2 5 0 1) ,美国雅培抗 - HCV (批号 M80 6 310 ) ,荷兰欧嘉隆抗 - HIV (批号A4 2 KA)。均…     

低滴度HBsAg胶体金免疫层析测定可行性探讨

HBs Ag 胶体金免疫层析测定 (Goldimmnnochromatography,GICA) (简称金标法 ) ,由于操作简单、快速、特异性高、易观察 ,已广泛应用于非固定采血点对献血者 HBs Ag进行初筛。但对低滴度 HBs Ag的应用价值值得商榷。本文就三种国产金标试纸条的渗透速度、均一性进行观察以及其敏感性与酶联免疫吸附法进行对比 ,以探讨其对低滴度 HBs Ag测定的可行性。1　材料与方法1 .1　检测样品　A组 :1 ng/ml、2 ng/ml、5 ng/ml HBs Ag质控血清购自卫生部临床检验中心。 B组 :自制参考品 :收集 HBs Ag(ELISA )高值阳性血清 ,混合后经 AXSYM…     

胶体金免疫层析法检测HBsAg漏检原因分析

胶体金免疫层析法 (简称 GICA)检测 HBs Ag具有简便、快速、可单份操作的优点 ,适合就诊者急诊检验的需要 ,尤其为无偿献血者现场采血前检测 HBs Ag提供了便利条件 [1 ,2 ] ,在利用GICA法检测 HBs Ag的过程中 ,常会出现 HBs Ag阳性漏检 ,甚至强阳性漏检 ,我们对 GICA法进行了探讨 ,报告如下。1　对象和方法1.1　对象　采集无偿献血者的标本及部分 HBs AG阳性患者的标本。HBs Ag金标试剂 ,HBs Ag EIA试剂 ,均为北京万泰公司产。 Anothos ht3酶标仪 ,奥地利产。 AT/2全自动加样器 ,FAME2 4/2 0酶免分析系统 ,均为瑞士产。1.…     

一种避免乳汁中乙肝标志物假阳性的方法

目前 ,针对血清乙肝标志物 ,特别是表面抗原( HBs Ag)、e抗原 ( HBe Ag)阳性的产妇 ,临床要进行乳汁乙肝指标的检测 ,方可哺乳 ,以避免母婴传播 ,但在乳汁检测中 ,易出现假阳性结果 ,为此 ,我们在实际操作中做了改进 ,收到了很好效果。现报告如下。1　材料与方法1 .1　标本来源　本院妇产科产妇之初乳 34例 ,均为血清HBs Ag或 HBe Ag阳性 ,另取血清乙肝标志物阴性者之初乳 1 0例为对照。1 .2　试剂　酶免疫法 ( ELISA) :所用试剂盒为洛阳华美公司产品 ,操作严格按说明书进行。1 .3　仪器　酶标仪 :日本产 BIORAD Model550型 ;洗板…     

乙肝病毒DNA与乙型肝炎表面抗原含量关系的探讨

通过对乙肝病毒 DNA(HBV- DNA)和乙型肝炎表面抗原 (HBs Ag)的定量检测 ,以鉴别HBs Ag阳性人群中的具有传染性的部分 ,对乙型肝炎的预防和治疗提供帮助。方法 :测定 443例不同人群血清中的 HBV- DNA的同时应用酶联免疫吸附法对该血清进行 HBs Ag定量检测。结果 :HBs Ag含量在 1 0 ng/ ml水平以下时 ,HBV- DNA阳性率为 1 .4% ;当 HBs Ag含量大于 1 0 ng/ ml范围时 ,HBV- DNA阳性率随浓度的增加而增大。结论 :HBs Ag含量与 HBV- DNA在一定范围有关系。当 HBs Ag大于 1 ng/ml时 ,体内就可能有病毒复制。     

延边地区乙型肝炎患者感染丁型肝炎病毒分析

为了了解本地区乙型肝炎合并感染丁型肝炎病毒(HDV)的状况 ,我们对 1 5 0名乙型肝炎患者进行了调查 ,结果报告如下。1　材料与方法1 .1　标本来源　 1 5 0例乙型肝炎患者的血清 ,其中男性 87名 ,女性 6 3名 ,朝鲜族 78名 ,汉族 72名 ,年龄 1 8～ 6 0岁之间。乙型肝炎诊断的标准 ,根据 2 0 0 0年 9月 (西安 )中华医学会病毒性肝炎防治方案中的病毒性肝炎诊断标准。1 .2　试剂与仪器　HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc检测用厦门新创公司ELISA试剂盒 ;HDAg和抗HD IgG、抗HD IgM测定用北京现代高达公司的ELISA试剂盒。仪器为A…     

献血现场HBsAg金标法检测最适时间的探讨

我国是乙型肝炎的高度流行区 ,人群中乙型肝炎病毒表面抗原 ( HBs Ag)携带者接近 1 0 % [1] ,而HBs Ag阳性是造成血液检验不合格的主要原因之一。随着献血模式的转变 ,街头 (流动献血车或献血屋 )无偿献血已占相当份额。为减少因 HBs Ag阳性导致的血液报废 ,胶体金免疫结合试验 (简称金标 )已被广泛用于献血前 HBs Ag检测。由于街头采血工作的特殊性 ,应尽可能缩短献血者等候时间 ,为此笔者以 1 0 0例 HBs Ag酶标试剂 ( ELISA)检测阳性标本作参照 ,测定不同时间段金标试剂HBs Ag阳性检出率 ,以确定 HBs Ag金标法检测的最适显色时…     

S／CO值在病毒性肝炎标志检测中的应用及其局限性

目的了解酶联免疫吸附试验 (EL ISA)法在病毒性肝炎标志检测中吸光度值 /临界值 (S/ CO)的意义和局限性。方法采用 4种乙型肝炎试剂盒检测不同浓度的 HBs Ag阳性血清 ,比较其 S/ CO值的线性走势。结果HBs Ag在高浓度时 S/ CO值并不能客观地反映其真实浓度。 (t=0 .43,P>0 .0 1)差异无显著性。结论 EL ISA法由于其技术的局限和试剂盒质量的不同 ,病毒性肝炎诊断指标以 S/ CO值报告时不能完全客观地反映血清中病毒性肝炎标志的含量 ,必须采取质控措施防止假阴性     

用ELISA试剂盒的剩余A、B液作游离Hb测定

全国临床检验操作规程推荐用邻 -甲联苯胺法测定血浆、体液及血液制品中的游离血红蛋白含量 [1] ,该法较过去的联苯胺法简捷、敏感 ,且试剂无致癌作用 ,环境污染少。笔者根据四甲基联苯胺( TMB)的呈色原理 [2 ] ,用以 TMB为色原的酶联免疫吸附试验 ( ELISA)试剂盒的剩余 A、B液作为显色剂 ,检材易得 ,试剂稳定 ,获得满意效果 ,现报告如下。材料与方法1　试剂1 .1　色原 A、B液 :收集厦门新创公司生产 ,用于检测 HCV、HIV抗体的 ELISA试剂盒剩余 A、B液各 5 0 ml;南京军区医学研究所测定 HBs Ag的EL ISA试剂盒 A、B液各 5 0 …     

金标法筛查HBsAg在无偿献血工作中的应用评价

金标法试纸以其灵敏、特异、简便、快速等优点而在检验医学领域得到了广泛的应用 ,尤其在输血方面 ,以其可避免血液资源浪费、节省献血资金并可用于外出采血、急诊用血及大批量非固定采血点献血者 HBs Ag的筛查[1 - 5] 等观点而褒扬者不少。而笔者通过用金标试纸法在流动采血现场筛除 HBs Ag阳性者 ,并与 EL ISA法检测结果进行比较分析后认为 ,金标法快速筛查 HBs Ag在无偿献血工作中的实际应用价值还有待磋商。1　材料和方法1.1　材料　 HBs Ag金标试纸由厦门新创公司生产 ,批号2 0 0 0 4 12 0 5 ;HBs Ag EIA试剂盒由厦门新创公…