血、尿淀粉酶三种测定方法的参考值调查和临床应用比较

目的了解三种血、尿淀粉酶(AMS)测定方法的临床应用价值,我们在调查并确定其参考值上限的基础上,同时用这三种方法测定临床已确诊为急性胰腺炎患者血、尿AMS含量。方法1.碘-淀粉比色法;2.对硝基苯酚麦芽七糖苷(PNPG7)法;3.2-氯-4-硝基苯酚麦芽三糖苷(CNPG3)法。结果三种AMS测定方法的参考值上限参考人群血清中测得的AMS值(±2s)分别为263U(碘-淀粉比色法),45U/LPNPG7法),66U/L(CNPG3法),尿液中测得的AMS值单侧95%上限分别为692U,260U/L,323U/L。用三种AMS测定方法同时对15例临床确诊为急性胰腺炎患者的血、尿AMS测定结果表明,三种方法测定结果之间具有良好的一致性,其中6例用三种方法测得的血、尿AMS均高于各自参考值的上限;5例血清AMS均高于各自参考值的上限,而尿AMS则均在参考值范围以内;另有4例血清AMS均正常而尿AMS则均超过各自参考值的上限。结论三种AMS测定方法在诊断性能上基本相同,因此在实际应用中各个实验室可根据本实验室的条件加以选用。     

血清淀粉酶两种测定方法医学决定水平值测定

目的 探讨用碘-淀粉比色法测定的血清淀粉酶500苏氏单位与用EPSG7法和CNPG3法测定的对应值.方法 取碘-淀粉比色法测定的高值血清稀释至500苏氏单位,分别用碘-淀粉比色法、亚乙基-NP-麦芽糖庚苷法(EPSG7)法和CNP-麦芽三糖法(CNPG3)法测定,取均值,进行相关和回归分析,通过回归方程计算对应值.结果 以碘-淀粉酶比色法为比较方法,EPSG7法和CNPG3法相关系数(r)与回归方程分别为r=0.978,Y=1.47X-169;r=0.952,Y=1.24X-92.结论 通过计算,EPSG7法和CNPG3法、对应碘-淀粉比色法测定的血清淀粉酶500苏氏单位的值分别为565、528 U/L.     

α-淀粉酶连续监测法的建立

[目的]建立以亚乙基封闭的4-硝基酚-1，4-α-D-麦芽七糖苷（EPS-G7）为底物的一种新的α-淀粉酶的测定方法。[方法]在SPS-100全自动分析仪上，研究连续监测法，建立实验参数。[结果]本法测定α-Amy的Km=0．179mmol／L；4-硝基酚（4-NP）在405nm时的摩尔吸光系数1200．9mol／L选取HEPES缓冲液为缓冲体系；延迟时间2min，测量时间2min；线性反应期11min，线性范围0-1400U／L；最适温度37℃；最适pH7．15；精密度实验，批内CVs为1．4％～2．6％，批间CVs为1．9％-2．8％；平均回收率为96．3％；与Boehringer方法比较，相关系数为0．994；血红蛋白、胆红素、葡萄糖、蛋白质对测定结果无影响；本法参考值范围血33．9-96．2U／L，尿65．4～187．6U／L。[结论]此方法重复性好，线性范围广，准确度好，灵敏度高，干扰因素少，适用于常规自动化分析。     

利用猪胰α—淀粉酶测定血清钙和尿钙的酶学方法

本文提出了一种应用Cobas Bio离心分析仪测定血清钙和尿钙的动力学方法。该法应用猪胰α-淀粉酶被Ca~(++)活化后作用于2-氯-4-硝基笨-α-麦芽三糖底物,生成2-氯-4-硝基苯酚和α-麦芽三糖。2-氯-4-硝基苯酚可在405nm监测,且其产生速率与Ca~(++)的浓度成比例。血清钙批内和日间变异系数分别为0.96～1.26％和1.07～1.63％,尿钙批内和日间变异系数分别为1.50～2.54％和1.70～2.64％。经与原子吸收分光光度法对比具有良好的相关性(r_(血清)=0.974,r_尿=0.981)。     

用选择性淀粉酶抑制物测定α-淀粉酶同工酶

测定血清和尿内α-淀粉酶总活性对于诊断各种疾病具有重要意义。人体各部位组织器官所特有的α-淀粉酶对6~3-脱氧麦芽三糖(DOG3)的抑制活性不同。DOG3对胰淀粉酶(HPA)的抑制活性为86.9％,对唾液淀粉酶(HSA)为32.1％,因此测定血清α-淀粉酶同工酶可鉴别胰腺和腮腺疾病。测定α-淀粉酶同工酶的方法很多,近年来适合于自动分析仪的方法有单克隆抗体(mAb)、麦胚抑制物法(WGI)需要较长时间才能获得恒定抑制常数。为此作者以2-氯-4-硝基酚-6~5-叠氮-6~5-脱氧β-麦芽五糖苷(N3G5CNP)为底物,以6~3-脱氧麦芽三糖(DOG3)作为α-淀粉酶选择性抑制物,应用日立917自动分析仪建立一种快速简单的自动化测定α-淀粉酶同工酶方法鉴别HPA和HSA。反应原理为     

选择抑制法测定淀粉酶同工酶

在以PNPG7底物酶偶联速率法测定淀粉酶的基础上 ,对选择抑制法测定淀粉酶同工酶的实验条件作了探讨 ,通过数学推讨和实验 ,建立了结果计算公式和标准曲线。本法线性范围为 0～ 15 0 0u/L ,批内、批间CV均 <9% ,参考值范围 :血清胰型淀粉酶 (P Amy) 5 .5～ 6 7U/L ,唾液型淀粉酶 (S Amy) 1.2～ 78.2U/L ;尿P Amy4 .3～ 2 7.6U/L ,S Amy1.9～ 2 9.2U/L。本法试剂稳定期长 ,保存使用方便。选择抑制法测定淀粉酶同工酶@王建国$四川省林业中心医院检验科…     

CNP—G3法测定淀粉酶和统一测定标准的建议

目的对2-氯对硝基苯麦芽三糖苷（CNP—G3）法进行试验和评价,讨论统一测定标准的可行性。方法测试CNPG3法的精密度、线性、参考范围和干扰试验,同时检测健康体检人群的血清109例,尿液106例。结果反应线性范围达2673U／L,批内精密度分别达到0．6％（83U／L）和O．4％（300U／L）,批间精密度分别达到2．26％（77U／L）和2．53％（244U／L）,血清参考范围26～87u／L（双侧）,尿液参考范围22～504U／L（双侧）。抗坏血酸、胆红素、浊度不影响测定结果,但血红蛋白达3g／L以上时结果出现负偏差。结论CNP—G3法作为直接测定法之一,其性能满足临床要求。但目前方法学混乱,建议统一用临床化学国际联盟法的靶值作为标准进行校正,以期缩小各实验室的变异系数。     

IgD型多发性骨髓瘤并自发脾破裂一例

患者,男,51岁,因“腰痛3个月,肾功能异常3 d”于2018年3月19日入院。患者3个月前无明显诱因出现腰痛伴双下肢麻木,就诊于当地医院,诊断为腰椎间盘突出症,行L3-4椎间盘切除+Cage植骨融合内固定术。术后患者自觉乏力,3 d前就诊于我院肾内科。血常规:WBC 3.8×109/L,中性粒细胞占70.1%,淋巴细胞占19.6%,HGB 84 g/L,PLT 266×109/L。血液生化检查:白蛋白37.8(正常参考值:40.0~55.0)g/L,血尿素氮9.86(正常参考值:3.10~8.80)mmol/L,血清肌酐246(正常参考值:41~111)μmol/L,LDH 764(正常参考值:50~240)U/L。血IgG 4.92(正常参考值:7.00~16.00)g/L,IgA 0.35(正常参考值:0.70~4.00)g/L,IgM 0.22(正常参考值:0.50~2.20)g/L,IgD 6.80(正常参考值:0.00~0.10)g/L,血κ轻链0.91(正常参考值:1.70~3.70)g/L,血λ轻链2.69(正常参考值:0.90~2.10)g/L,血清游离κ轻链6.40(正常参考值:3.30~19.40)mg/L,血清游离λ轻链>3675.00(正常参考值:5.71~26.30)mg/L,尿λ轻链4888 mg/24 h,血β2微球蛋白9886(正常参考值:1010~1730)μg/L。     

两种干化学生化分析仪血清淀粉酶测定结果的偏倚分析

目的 对SPOTCHEM-4430(SP-4430)半自动干化学生化分析仪与VITROS-350(V350)全自动干化学生化分析仪检测血清淀粉酶(Amy)结果 进行比较分析.方法 收集46份血清标本分别采用两台生化分析仪对Amy测定结果 进行相关分析及偏倚评估.结果 两种干化学生化分析仪检测血清Amy结果 差异无统计学意义(P>0.05),两种分析方法 的结果 一致.相关回归分析r=0.966 3,SP-4430检测系统血清Amy(U/L)在参考值上限(Xc=75)和3个医学决定水平(Xc=50、120、200)处的相对偏差分别为16.23%、 5.90%、23.98%和29.14%.结论 两种检测系统具有较好的精密度;测定血清Amy结果 相对偏差在Xc=50 U/L时临床可接受;另外两个医学决定水平和参考值上限临床不可接受.     

用2-氯-4-硝基酚麦芽三糖作底物测定淀粉酶

淀粉酶测定是诊断急性胰腺炎最灵敏和实用的过筛试验。测定淀粉酶方法至今已有数百种。用低聚糖作底物的动力学测定已成为常规方法，本文介绍一种用2-氯-4-硝基酚麦芽三糖（CNPG3）作底物测定淀粉酶含量的方法。原理：在高浓度硫氰酸盐存在下，淀粉酶水解底物反应如下：2-氯-4-硝基酚麦芽三糖＋H2O→麦芽三糖2-氯-4-硝基酚→2-氯-4-硝基酚→2-氯-4-硝基酚α－D-麦芽糖甙＋葡萄糖。这些反应的水解率依次为0．92和0．08，在405nm测定黄色的氧化型2-氯-4-硝基酚含量，淀粉酶活性与质成正比。此种方法经国际临床化学协会（IFCC）工作组研究…     

酶单位换算法(1)

名称 (代号 )测定方法习用单位换算系数国际单位 (SI)酸性磷酸酶 (ACP)麝香草酚肽法 U/ ml 0 .0 16 6 7μmol· s- 1 / L5 -核甘酸酶 (5 - NT) U/ ml 16 .6 7μmol· s- 1 / L淀粉酶 (AMY) Somogyi法 U/ dl 0 .343 μmol· s- 1 / L尿淀粉酶 Somogyi法 U/ h 0 .0 343 μmol· s- 1 / L胆碱酯酶 (Ch E)比色法 U/ ml 0 .8335 μmol· s- 1 / L酶单位换算法(1)…     

福州地区健康成人血清腺苷脱氨酶参考值调查

目的建立适合本地区健康成人血清腺苷脱氨酶(ADA)的参考值范围。方法用酶比色法测定2 030名健康体检者血清ADA水平。结果适合福州地区的ADA参考值范围:男性为4.86～17.38U/L,女性为5.15～17.19U/L,男女统一参考值范围:5.01～17.29U/L。男性与女性间差异无统计学意义(P>0.05),各年龄组间差异也无统计学意义(P>0.05)。结论血清ADA水平与性别、年龄无关,实验室有必要建立和使用适合本实验室的参考值范围。     

快速检测尿胰蛋白酶原-2在急性胰腺炎诊断中的意义

目的 探讨快速检测尿胰蛋白酶原-2在急性胰腺炎诊断中的意义。方法 收集347例急腹症患者血清和尿液标本，分别测定尿胰蛋白酶原 2和血、尿淀粉酶(AMS)活性，并将结果进行比较。结果 尿胰蛋白酶原-2检测对急性胰腺炎诊断的敏感性、特异性分别为89．3％和90.3％，血AMS为80．2％和81．9％，尿AMS为74．8％和77．8％。尿胰蛋白酶原-2的敏感性和特异性均显著高于血、尿AMS检测。结论 试纸法快速检测尿胰蛋白酶原-2诊断急性胰腺炎具有较高的精确性，是筛选急性胰腺炎简便而快速的方法。     

尿β-D-半乳糖苷酶活性检测方法的建立及临床意义探讨

目的以2-氯-4-硝基苯基-β-D-半乳糖苷(CNP-GAL)为底物,建立测定尿β-D-半乳糖苷酶(GAL)活性的连续监测法,并探讨GAL在肾小管病变早期诊断中的临床意义。方法基于GAL能催化水解底物生成色原2-氯-4-硝基苯酚(CNP)的原理,对最适p H值、底物浓度、反应时间等条件进行研究,建立用于检测尿GAL的连续监测法,并用该法检测125例肾脏病变(30例继发性肾损伤、36例肾小管肾炎、25例肾癌、34例肾囊肿)患者及80名健康体检者(正常对照组)尿GAL活性。结果建立了检测尿GAL活性的连续监测法,采用柠檬酸缓冲液为最佳缓冲体系,酶促反应最适p H值为4.8,最适底物浓度为2.0 mmol/L。该法批内、批间平均变异系数(CV)分别为2.44%、4.47%,线性范围为3.2~25.6 U/L,当GAL1.6 U/L时不能被检出。继发性肾损伤、肾小管肾炎、肾癌患者的尿GAL活性均明显高于正常对照组(P0.05),而肾囊肿患者的尿GAL活性无明显增高。结论建立的GAL活性连续监测法敏感性高,结果准确,操作简便,可用于肾小管疾病的早期诊断。     

用Reflotron试剂载体系统测定淀粉酶及同工酶活力

在Reflotron 淀粉酶干燥试剂载体系统中,作者采用了一种新的底物:吲哚-α-D-麦芽庚糖苷。该方法的实验原理为:吲哚麦芽庚糖苷(以下简称基质)(α-淀粉酶)/(α-葡萄糖苷酶)吲哚,吲哚+2-甲氧基-4-吗啡啉重氮苯四氯化锌(以下简称重氮盐)→吲哚偶氮[2-甲氧基-4-吗啡啉]苯,生成物呈紫色,最大吸收峰在520nm。该方法精密度较高(中值CV<3.2%),与常规方法(包括对硝基酚麦芽庚糖苷法,以下简称PNP 法)比较相关性良好(γ=0.994);与PNP 法相比,一个突出的优点是水解产生的吲哚对胰淀粉酶和唾液淀粉酶的活力均无影响,适合于淀粉酶同工酶活力测定;应用范围广,血清、血浆和全血均能适应;反应所需时间短(小于3分钟),特别适用于急诊。     

献血者筛查ALT活性标准研究分析

目的　探讨分析ALT活性作为献血者检测标准及其参考区间。方法　选择从未受血和HBV、HCV标志物均为阴性的 2 84 9名健康人和献血者作为研究对象 ,采用连续监测技术测定其血清ALT活性 ,又在其中随机选取 6 85名以赖氏法测定ALT活性。结果　血清ALT的测定值在各年龄组无显著性差异 ;男性ALT活性明显高于女性 ,具有明显的统计学差异 (连续监测法 :Ρ<0 .0 0 1 ;赖氏法 :Ρ<0 .0 5 )。ALT活性连续监测法测定 x± 2s上限为 5 3 4 9U/L , x± 3s限为 6 6 .5 9U/L ;ALT活性赖氏法测定 x± 2s上限为 2 4 96U , x± 3s上限为 38 89U。结论　参照赖氏法参考区间 ,ALT连续监测法参考区间上限应该为 5 3.4 9U/L。     

常见革兰阴性杆菌氨基糖苷修饰酶基因的初步研究

目的了解浙江省绍兴地区常见对氨基糖苷类药物耐药的革兰阴性杆菌氨基糖苷类修饰酶aac(3)-Ⅰ[编码:3-乙酰转移酶-Ⅰ]、aac(6′)-Ⅱ[编码:6′-乙酰转移酶-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ[编码:3″-核苷转移酶-I]、aph(3′)-Ⅳ[编码:3′-磷酸转移酸-Ⅳ]存在状况.方法收集21株铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌和肺炎克雷伯菌等耐氨基糖苷类药物的革兰阴性杆菌进行4种基因PCR检测.结果3株鲍曼不动杆菌均检出aac(3)-Ⅰ和ant(3″)-Ⅰ基因;3株嗜麦芽窄食单胞菌中有1株检出ant(3″)-Ⅰ基因,经对PCR产物测序测得序列与美国GenBanK核酸库中已登陆的ant(3″)-Ⅰ基因序列一致.结论浙江绍兴耐氨基糖苷类药物的鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌存在aac(3)-Ⅰ和/或ant(3″)-Ⅰ基因.而其它耐药菌可能存在本研究所检测的4种基因以外的基因.     

尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活性测定在高尿酸血症中的临床意义

目的:探讨尿NAG活性测定对高尿酸血症患者尿酸盐晶体对肾损害的早期诊断。方法:用对硝基苯酚(PNP)比色法测定55例高尿酸血症患者和20例正常健康对照者的尿NAG值,以尿NAG测定值与尿Cr比值表示其活性。结果:高尿酸血症患者尿NAG值较正常对照组明显增高(Z=-4·271,P<0·01),患者组尿NAG活性为3·5796±3·3957(U/mmolCr),以正常人尿NAG的-x 2s(1·8798U/mmolCr)为阳性界值,阳性率为69·1%。结论:提示尿NAG可作为高尿酸血症患者早期肾功能损害的观测指标,尤其对痛风肾的早期诊断有重要意义。     

血清氯化物酶法测定

目的建立血清氯化物的α-淀粉酶及其底物2-氯-4-硝基苯-α-D-麦芽三糖苷(CNP-G3)直接测定方法。方法根据氯离子是α-淀粉酶的激动剂原理建立氯化物测定方法,并做方法学评价。结果测定结果的平均偏差率为0.46%;线性范围50~150mmol/L;平均回收率为100.62%;批内CV<1.24%,日间CV<1.86%,总CV1.45%~2.24%;加入高浓度的维生素C、葡萄糖、蔗糖、果糖、α-淀粉酶、三酰甘油、血红蛋白、胆红素、钙离子、溴离子、碘离子、氟离子、硫氰酸钾、对硝基酚、叠氮钠和硫酸铵均未显示干扰。与硫氰酸汞比色法(MTC)(x±s)比较:MTC法(x):(95.66±14.45)mrnol/L,酶法(Y):(95.62±14.93)mmol/L,t=0.078,P>0.5,Y=1.016X-1.587,r=0.984,n=93,P<0.001;与离子选择电极法(ISE)(x±s)比较:ISE法(X):(99.00±13.11)mmol/L,本法(Y)(98.61±12.70)mmol/L,t=0.140,P>0.5,Y=0.962X+3.375,r=0.993,n=44,P<0.001。溶解的工...     

常见革兰阴性杆菌氨基糖苷修饰酶基因的初步研究

目的了解浙江省绍兴地区常见对氨基糖苷类药物耐药的革兰阴性杆菌氨基糖苷类修饰酶aac(3)-I[编码:3-乙酰转移酶-I]、aac(6')-Ⅱ[编码:6'-乙酰转移酶-Ⅱ、ant(3")-I[编码:3"-核苷转移酶-I]、aph(3')-Ⅳ[编码:3'-磷酸转移酸-Ⅳ]存在状况。方法收集21株铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌和肺炎克雷伯菌等耐氨基糖苷类药物的革兰阴性杆菌进行4种基因PCR检测。结果3株鲍曼不动杆菌均检出aac(3)-I和ant(3")-I基因;3株嗜麦芽窄食单胞菌中有1株检出ant(3")-I基因,经对PCR产物测序测得序列与美国GenBanK核酸库中已登陆的ant(3")-I基因序列一致。结论浙江绍兴耐氨基糖苷类药物的鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌存在aac(3)-I和/或an(t3")-I基因。而其它耐药菌可能存在本研究所检测的4种基因以外的基因。