原发性干燥综合征患者外周血Th17细胞的检测及意义

目的探讨Th17细胞原发性干燥综合征（pSS）患者外周血中表达水平及意义。方法分离pSS患者和健康者外周血单个核细胞（PBMC）,磁珠阴选CD4＋T细胞,然后加佛波酯/离子霉素,经过固定及透膜处理后进行细胞内染色,流式细胞术（FCM）检测CD4＋T细胞内白细胞介素17（IL-17）水平。结果免疫磁珠阴选CD4＋T细胞纯度〉90%。pSS患者Th17细胞水平（2.14±0.91）显著高于正常对照组（0.56±0.21）,P〈0.01;pSS患者TH17细胞水平与ANA滴度、Anti-SSA、Anti-SSB、C3、C4无显著相关性（P〉0.05）。结论 pSS患者外周血中TH17细胞表达增高,Th17细胞表达异常增高可能是pSS发病的重要环节。     

B细胞激活因子在干燥综合征患者唇腺中的表达及其意义

目的 探讨B细胞激活因子（BAFF）及其受体（BAFF-R）在干燥综合征（SS）患者唇腺组织中的表达及与唇腺组织中淋巴细胞浸润的关系.方法 用免疫组化法检测唇腺组织中BAFF及BAFF-R的表达,以HE染色的方法来检测唇腺组织中淋巴细胞浸润情况,分析SS患者唇腺标本中BAFF的表达与淋巴细胞浸润情况的关系.结果 SS患者唇腺组织中BAFF及BAFF-R的表达均高于对照组（BAFF表达阳性率：90％vs.10％；BAFF-R表达阳性率60％vs.20％；P均＜0.05）.相关性分析结果提示BAFF及BAFF-R的表达与唇腺组织中淋巴细胞浸润呈正相关（分别为：r =0.457,P＜0.05;r =0.389,P＜0.05）.结论 SS患者BAFF的表达升高且与淋巴细胞浸润程度相关,提示BAFF可能在SS唇腺组织的破坏及SS发病过程中具有重要作用.     

TH17细胞及IL-17在原发性抗磷脂综合征中的表达及临床意义

目的观察T_H17细胞及相关细胞因子IL-17在原发性抗磷脂综合征(PAPS)中的表达水平,并初步探讨其临床意义。方法收集32例PAPS患者及33例健康对照者静脉血标本,分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测T_H17细胞百分率,ELISA法检测血浆IL-17的表达水平,并分析IL-17水平与PAPS患者临床病理特征及实验室指标[抗心凝脂抗体(a CL)、抗β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)和狼疮抗凝物(LA)]的关系。结果 PAPS患者外周血T_H17细胞百分率为(1.98±0.78)%,血浆IL-17水平为(60.72±18.71)pg/m L,均显著高于健康人对照组(P均0.01),且T_H17细胞百分率与血浆IL-17水平呈正相关(r=0.586,P0.01)。PAPS患者血浆IL-17水平与患者a CL、抗β2GPⅠ抗体和LA均无明显相关性(P均0.05)。与近期(≥3月)无相关临床事件发生的PAPS患者相比,新近(≤1月)发生动脉血栓事件的患者血浆IL-17水平差异无统计学意义(P=0.074),静脉血栓和血小板减少的PAPS患者IL-17蛋白水平显著升高(P0.01)。结论 T_H17细胞及IL-17与PAPS血栓形成和血小板减少密切相关,提示T_H17细胞及IL-17参与了PAPS脉管症状的发病机制。     

Th17细胞在过敏性哮喘患者中的临床研究

目的探讨Th17细胞及其分泌的细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)在过敏性哮喘患者外周血中的变化及临床意义。方法选取过敏性哮喘患者和健康体检者各60例,选用流式细胞术检测外周血Th17细胞的百分率;ELISA法检测外周血培养上清液中IL-17和IL-10的表达;电化学发光法检测血清中IgE的含量。结果哮喘组外周血Th17细胞比例、血清中IgE的含量及IL-17水平均高于健康对照组;而IL-10水平则低于健康对照组。结论 Th17细胞表达失衡可能在过敏性哮喘的发病机制中起重要作用。     

Th17细胞在炎性疾病中的作用

Th17细胞是新近发现的一种CD4^＋T细胞亚群,其主要产生的效应因子是IL-17。过去研究认为,Th1型的干扰素-γ和IL-12在组织炎性损伤中发挥重要作用。随着对Th17细胞的深入研究,发现其在介导慢性炎性反应和自身免疫性疾病发病机制中是关键的致病因素。本文简要对Th17细胞在炎性疾病中的促炎作用作一综述。     

Th17细胞在系统性红斑狼疮伴发心血管疾病中的意义探讨

目的：分析 Th17细胞在系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）并发心血管疾病（cardiovascular disease,CVD）中的意义。方法按照1997年美国风湿病协会修订的 SLE分类标准收集河北医科大学第二医院2011年9月～2013年3月住院的 SLE患者共61例,同时以性别年龄匹配的健康对照组20例作对照。SLE实验组分为 SLE并发CVD患者22例,SLE不并发CVD患者39例。采用流式细胞分析技术测定 Th17细胞,酶联免疫吸附法检测 IL-17,并分析与疾病活动的相关性。结果①SLE并发 CVD组、SLE不并发 CVD组和健康对照组 Th17细胞的检测结果分别为（2.09±0.98）％,（1.75±0.75）％和（0.89±0.44）％,健康对照组与 SLE并发 CVD组、SLE不并发 CVD组相比,差异有统计学意义（t＝4.717～5.030,P值均＜0.001）;IL-17在 SLE并发 CVD组、SLE不并发 CVD组和健康对照组的水平分别为85.64±20.76 pg／ml,75.25±28.14 pg／ml和35.06±6.58 pg／ml,健康对照组与 SLE并发 CVD组和 SLE不并发CVD组相比,差异有统计学意义（t＝6.275～9.954,P 值均＜0.001）;两组 SLE之间 Th17细胞和 IL-17水平差异无统计学意义（t＝1.520,1.513,P＞0.05）。②SLE患者血浆 IL-17水平与 SLEDAI积分和抗 ds-DNA抗体滴度之间呈正相关（r＝0.393,P＝0.008;r＝0.558,P＜0.001）,与补体 C3水平呈负相关性（r＝－0.423,P＝0.005）。SLE患者中 Th17细胞在CD4＋T细胞中所占的比例与 SLEDAI评分和抗 ds-DNA抗体滴度之间呈正相关（r＝0.681.P＜0.001;r＝0.492,P＝0.015）,而与C3水平呈负相关（r＝－0.534,P＝0.027）。结论 Th17细胞和 IL-17在 SLE中表达均升高,且与疾病活动性相关。心血管因素并未影响 SLE患者中Th17细胞和 IL-17的表达水平。     

胃癌患者外周血Th17细胞相关因子检测及其临床意义

目的探讨检测外周血Th17细胞相关因子在胃癌患者中的意义。方法将我院收治的86例胃癌患者纳入胃癌组,并根据胃癌分期标准分为早期胃癌组46例和中晚期胃癌组40例,将同期35例健康体检者纳入对照组。检测所有研究对象的血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1水平。结果胃癌组患者的血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1水平均明显高于对照组(P<0.01);早期胃癌组患者血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1水平均明显低于中晚期对照组患者(P<0.01)。结论胃癌患者血清IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β1等Th17细胞相关因子明显升高,且随着病情的进展,Th17细胞相关因子水平持续升高,因此检测Th17细胞相关因子水平有助于疾病进展的判断。     

白细胞介素-6在绝经后女性原发性干燥综合征患者中的表达及意义

目的探讨白细胞介素-6（IL-6）在原发性干燥综合征（pSS）患者中的表达及意义。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测绝经后女性 pSS组患者（30例）和健康女性对照组（30例）血清及唾液中 IL-6,分析其与血清中C反应蛋白（CRP）、免疫球蛋白G （IgG）、免疫球蛋白M （Ig M）、免疫球蛋白A（IgA）及红细胞沉降率（ESR）的相关性。结果 pSS组患者血清及唾液中 IL-6的浓度显著高于健康对照组（P ＜ 0.01）;pSS 组患者血清中IL-6的浓度与血清中CRP、ESR 和 IgG的浓度呈正相关（r分别为0.506、0.621、0.632;P 分别为0.008、0.007、0.006）;与血清 IgM 和 IgA浓度无相关性（r分别为0.354、0.312;P分别为0.085、0.081）;pSS组患者血清和唾液中的 IL-6浓度呈正相关（r为0.658,P为0.006,P＜ 0.01）。结论 IL-6可能通过诱导 IgG的合成与分泌进而影响CRP、ESR的变化,影响 pSS的疾病进展,血清和唾液 IL-6水平可用来评估 pSS的进展情况。     

Th17细胞与过敏性疾病

Th1/Th2平衡是免疫反应分子机制和/或疾病研究的重要发现,在过去的20年被广泛视为重要的免疫调节＂模式＂,用以解释和研究基础免疫和免疫性疾病的发生机制。新近发现的Th17细胞为揭示Th1/Th2模式不能解释的免疫现象提供了新的依据。Th17细胞是以产生白细胞介素17（IL-17）类细胞因子为特征的CD4＋T辅助细胞亚群，     

Th17细胞相关因子在重症肺炎克雷伯菌肺炎大鼠中的调控作用

目的探究辅助性T细胞17(Th-17)相关因子在重症肺炎克雷伯菌肺炎发病过程中的调控作用。方法将60只SD大鼠随机分为对照组(10只)和重症肺炎组(50只),采用气管滴注肺炎克雷伯菌建立重症肺炎大鼠模型,重症肺炎组根据肺炎克雷伯菌感染时间分为12 h组、1 d组、3 d组、5 d组和7 d组,每组各10只。观察大鼠行为学变化、肺组织形态学变化,检测肺泡灌洗液中白细胞和中性粒细胞的数量,采用ELISA检测肺泡灌洗液中白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素23(IL-23)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的表达。分析中性粒细胞数目与IL-17、IL-23水平的相关性。结果与对照组相比,重症肺炎组大鼠出现明显的感染症状,呼吸加重、颜面部和四肢呈紫绛色等,且肺组织表现出明显病变,接种第3天最为严重;肺泡灌洗液中白细胞和中性粒细胞的数目、IL-17、IL-23、TNF-α、IL-1β水平显著升高(P 0. 05),白细胞和中性粒细胞的数目、IL-17、IL-23水平于第3天达到峰值,TNF-α、IL-1β水平于第5天达到峰值;肺泡灌洗液中IL-17、IL-23水平分别与中性粒细胞的数目呈正相关(P 0. 05)。结论 IL-17、IL-23为重症肺炎克雷伯菌肺炎中早期促炎因子,可通过刺激中性粒细胞的活性,参与重症肺炎的发生发展。     

2型糖尿病患者血浆抵抗素和炎性细胞因子水平的变化及临床意义

目的研究2型糖尿病(DM)患者血浆抵抗素及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平的变化,探讨其与DM及胰岛素抵抗的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定57例2型DM患者[按体质量指数分为非肥胖组(DM1)25例和肥胖组(DM2)32例]及40例正常对照者(NC)血浆抵抗素、TNF-αI、L-6浓度,同时测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果DM1组和DM2组比对照组血浆抵抗素水平(16.6±5.8)mg/L(、25.1±9.5)mg/L vs(12.2±3.4)mg/L,TNF-α水平(60.67±17.33)ng/L、(82.42±35.51)ng/L vs(43.25±12.91)ng/L,IL-6水平(81.25±15.62)ng/L、(108.63±31.02)ng/L vs(61.30±16.82)ng/L明显升高(P<0.05~0.01),且DM2组的抵抗素、TNF-αI、L-6水平高于DM1组(P<0.05)。相关分析发现血浆抵抗素水平与HOMA-IR、BMI、FINS、TNF-α、IL-6呈正相关(r值分别为0.415,0.564,0.665,0.315,0.454,P值均<0.01);TNF-α水平与HOMA-IR、BMI、FINS呈正相关(r值分别为0.459,0.326,0.308,P值均<0.01);IL-6与HOMA-IR、BMI、FINS呈显著正相关(r值分别为0.395,0.375,0.279,P值均<0.01)。结论2型DM患者血浆抵抗素、TNF-αI、L-6水平升高,与肥胖有关,三者相互作用,参与糖尿病及胰岛素抵抗的发生发展。     

充血性心力衰竭患者血清炎性反应因子检测的临床意义

目的探讨充血性心力衰竭（CHF）患者血清炎性反应因子的变化及临床意义。方法采用放射免疫分析法分别测定110例CHF患者（CHF组）和60例健康体检者（健康对照组）白细胞介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,同时采用胶乳增强免疫透射比浊法检测两组患者的血清C反应蛋白（CRP）水平。检测CHF组治疗后上述3种血清炎性反应因子水平,并与治疗前相比较。结果CHF组血清IL-6、TNF-α和CRP水平明显高于健康对照组,且随心功能分级增加依次增高,差异有统计学意义（P〈0．01）。CHF组患者左室射血分数（LVEF）与血清IL-6（r=0．585,P〈0．01）、TNF-α（r=0．312,P〈0．01）和CRP（r=0．458,P〈0．01）水平呈显著正相关。与治疗前相比,治疗后CHF组患者LVEF较治疗前明显增加,而血清IL-6、TNF-α和CRP水平明显下降,差异有统计学意义,均P〈0．01（t=12．144,9．835,7．847,4．616）。结论血清炎性反应因子IL-6、TNF-α和CRP检测有助于CHF患者的病情评估、疗效监测和预后判断。     

Th17细胞在结直肠癌患者外周血中的达及临床意义

目的 研究结直肠癌（colorectal carcinoma,CRC）患者外周血中Th17细胞的含量及其效应分子白介素17（interleukin-17,IL-17）的表达情况,探讨Th17与CRC发生和发展之间的关系.方法 采用流式细胞术和ELISA方法,检测25例Ⅰ-Ⅱ期CRC患者、18例CRC Ⅲ-Ⅳ期患者和10例健康志愿者（对照组）外周血中CD4＋IL-17＋细胞所占比例及血清中IL-17表达量的变化,分析Th17细胞与CRC患者各临床病理特征之间的关系.结果 Ⅰ-Ⅱ期患者血清中IL-17表达量为（47.72±12.89） ng/L,Ⅲ-Ⅳ期患者IL-17表达量为（58.69±12.81） ng/L,均明显高于健康对照组（16.63±6.41） ng/L.Ⅰ-Ⅱ期患者外周血中CD4＋IL-17＋细胞占（2.24±0.54）%,Ⅲ-Ⅳ期患者外周血中CD4＋IL-17＋细胞占（2.65±0.63）%,均高于健康对照组（1.34±0.61）%.IL-17表达水平的上升与患者的性别和年龄无关（P＞0.05）,而与肿瘤的大小、淋巴结转移、Dukes分期及病理组织学分型明显相关（P＜0.01）.结论 CRC患者外周血中Th17细胞含量和血清中IL-17的表达水平与肿瘤的进展相关,预示Th17细胞直接或间接参与了CRC 发生和发展的调控.     

格雷夫斯病患者抗甲状腺药物治疗前后细胞因子的动态变化及其临床意义

目的：测定格雷夫斯病患者血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、白细胞介素-2、白细胞介素-6水平及在抗甲状腺药物治疗过程中的变化，探讨其与格雷夫斯病发生发展之间的联系。方法：32例格雷夫斯病患者分别在确诊时、治疗约2个月和6个月时用放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、白细胞介素-2、白细胞介素-6、TSH，TT3，TT4，FT3，FT4，TRAb，28例年龄与性别相匹配的健康志愿者作为正常对照。结果：①格雷夫斯病患者白细胞介素-2在治疗前明显低于正常对照组（P〈0．05），治疗2个月开始升高，治疗后6个月继续升高，与治疗前比较有显著差异（P〈0．05），与正常对照组比较无明显差异（P〉0．05）；肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、白细胞介素-6在治疗前明显升高（P〈0．05），治疗2个月即降低，治疗6个月时白细胞介素-1与对照组比较无明显差异（P〉0．05），肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6仍明显高于正常对照组（P〈0．05），均与治疗前比较有显著差异（P〈0．05）。②格雷夫斯病患者肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、白细胞介素-2、白细胞介素-6水平与血清甲状腺激素浓度无明显相关性（P〉0．05）。白细胞介素-1、白细胞介素-6治疗前、治疗后2个月及6个月均与TRAb正相关，而白细胞介素-2水平与TRAb负相关。结论：格雷夫斯病患者血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、白细胞介素-2、白细胞介素-6的异常与格雷夫斯病的发生发展密切相关；在治疗前后的变化能反映出格雷夫斯病的免疫动态和治疗效果；患者的免疫缓解明显滞后于功能缓解。     

辅助性T细胞17及其分泌的白细胞介素17在类风湿性关节炎患者的表达

目的 通过检测辅助性T细胞17(Th17)及其分泌的白细胞介素17(1L-17)在类风湿性关节炎(RA)患者的表达,探讨其在RA发病机制中的作用及其临床意义.方法 应用流式细胞术检测39例RA患者和20例健康对照者外周血Th17的比率,同时用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-17的水平.结果 RA患者外周血Th17比率和血清中IL-17的水平均较健康对照组显著增高,(1.86±0,75)％ vs (0.46±0.73)％,(13.42±0.62) ng/L vs(5.38±1.67)ng/L (P＜0.01).RA未治疗组外周血Th17比率和血清中IL-17的水平显著高于治疗后未复发组,(2.42±0.69)％ vs (0.84±0.62)％,(14.63±6.02) ng/L vs (8.86±1.35) ng/L(P＜0.01),但未治疗组与治疗后复发组比较差异无统计学意义(P＞0.05);RA患者关节液中IL-17水平明显高于血清中的水平(13.76±0.49)ng/Lvs (12.38±0.54) ng/L( P＜0.05).结论 RA患者Th17的比率及其IL-17的水平均高,它们可能参与了RA的发病和病情进展.     

原发性干燥综合征患者唇腺组织中基质金属蛋白酶9、上皮型钙黏附蛋白的表达

目的探讨基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin,E-cad)在原发性干燥综合征(primary Sjgren syndrome,PSS)发病过程中的作用及意义。方法采用免疫组化链霉素抗生物素-过氧化酶(SP)法检测52例PSS患者、30例正常对照组唇腺中MMP-9,E-cad表达及分布情况。结果52例PSS患者唇腺组织中MMP-9均阳性高表达,导管区平均表达水平,面积为(2 135.50±566.75)μm2,光密度为(0.211±0.068)A/μm2,累积光密度为(460.26±357.17)A,高于正常对照组(均P<0.01),腺泡区平均表达水平,面积为(19 981.15±3551.38)μm2,光密度为(0.167±0.027)A/μm2,累积光密度为(3 320.53±1 132.99)A,低于正常对照组(均P<0.01),MMP-9表达随着淋巴细胞浸润灶数的增加而增强。52例PSS组E-cad均低表达,导管区平均表达水平,面积为(2 493.05±997.14)μm2,光密度为(0.209±0.007)A/μm2,累积光密度为(489.33±248.21)A,低于正常对照组(P<0.05或P<0.01),腺泡区平均表达水平,面积为(1 1957.66±6 975.28)μm2,光密度为(0.108±0.003)A/μm2,累积光密度为(1 291.42±951.79)A,低于正常对照组(P<0.01),E-cad表达随着淋巴细胞浸润灶数的增加而降低。PSS患者唇腺组织中MMP-9与E-cad的表达呈负相关(P<0.01)。结论MMP-9、E-cad在PSS患者唇腺组织中存在异常表达,二者的表达情况与病理分级相关,MMP-9、E-cad参与了原发性干燥综合征的发病过程。     

TH17细胞、IL-21因子在鼠肺纤维化中的表达及意义

目的探讨Th17细胞、白介素21（interleukin 21,IL-21）因子在肺纤维化发病机制中的表达及意义。方法采用64只SD大鼠随机分为3组：肺纤维化模型组（P,n=24）、地塞米松3mg/kg干预组（D,n=16）、生理盐水对照组（N,n=24）。P、D组均采用一次性气管内注射博来霉素（Bleomycin,BLM）（5mg/kg）方法建立大鼠肺纤维化模型,N组气管内灌注等量0.9%氯化钠注射液。D组从第7天开始1次/日腹腔注射地塞米松;N、P组腹腔注射等量0.9%氯化钠注射液。造模后7、14、28天每组随机分批处死大鼠（8只/组）观察大鼠肺组织病理变化及测定肺组织中羟脯氨酸（HYP）含量;流式细胞术检测肺组织中Th17细胞占CD4＋T细胞的比例;用荧光RT-PCR法检测IL-21的表达水平。结果 P、D组大鼠肺组织早期炎症反应明显,并逐渐出现纤维化及胶原纤维沉积。P组IL-21表达水平、Th17细胞占CD4＋T细胞的比列均较N组明显升高（P〈0.05）,在第7天表达水平最高,此后逐渐下降,第28天最低。结论 Th17细胞、IL-21因子在大鼠肺纤维化发病过程中起重要作用,可能参与了肺纤维化的发生与发展。     

The relationship between inflammation,endothelial dysfunction and proteinuria in patients with diabetic nephropathy

Abstract

Objectives. Diabetic nephropathy (DN) is a major manifestation of microangiopathy in patients with Diabetes Mellitus (DM). Inflammation is one of the major factors in the formation of endothelial dysfunction. Endothelial dysfunction is a major contributor to the complications of DM. The aim of the present study was to investigate the possible relationship between inflammation, endothelial dysfunction and proteinuria in patients with diabetic nephropathy. Materials and methods. Plasma TNF-α and IL-6, pro-inflammatory cytokines, concentrations were measured in 25 patients with DN and in 30 diabetic control subjects. Also, we evaluated the markers of endothelial dysfunction such as flow mediated dilatation (FMD), nitrate-mediated dilatation (NMD) and carotid intima-media thickness (CIMT). Results. TNF-α, IL-6 and high-sensitivity C-reactive protein concentrations were significantly higher (p = 0.012, p = 0.006 and p < 0.001, respectively) in the patients with DN than the controls. And, urinary protein concentrations were significantly higher (p < 0.001) but eGFR levels were significantly lower (p < 0.001) in the patients with DN. FMD was significantly lower in DN patients (p < 0.001). We have observed that FMD correlated negatively with body mass index (r = ?0.424, p < 0.05). And there was also a positive correlation between TNF-α and urinary protein concentrations in the patients with DN (p < 0.05). Conclusion. TNF-α, IL-6, hsCRP and urinary protein concentrations are higher in the DN patients. There were no correlations among pro-inflammatory cytokines concentrations and markers of vascular endotelial disfunction. These findings did not show vascular endothelial dysfunction, but may indicate glomerular endothelial dysfunction.