胃癌患者外周血癌胚抗原mRNA的检测及临床意义

目的 探讨胃癌患者外周血中癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)mRNA的表达及临床意义.方法 采用巢式RT-PCR方法检测50例胃癌术前患者、20例健康志愿者外周血以及10例新鲜胃癌组织中CEA mRNA的表达,并同期测定胃癌患者及健康志愿者血清CEA水平.结果 胃癌患者外周血中CEA mRNA表达阳性率为48.00%,明显高于外周血中的CEA阳性率20%,差异有统计学意义(P＜0.05);胃癌患者外周血中CEA mRNA阳性率与组织学类型、临床分期具有相关性(P＜0.05),而与患者性别、年龄及有无淋巴结转移无明显相关性(P＞0.05),20例健康志愿者无阳性表达,10例胃癌组织均为阳性表达.结论 检测外周血中的CEA mRNA表达可能是检测胃癌微转移一种较理想的方法,对判断患者预后及进一步治疗有积极意义.     

肝癌病人外周血及骨髓AFP mRNA的检测及意义

目的 通过检测AFP mRNA在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC)病人外周血和骨髓中的表达，探讨AFP mRNA作为HCC微转移指标的可能性。方法 建立敏感的巢式逆转录聚合酶链反应体系（Nested-RT-PCR)，检测71例HCC、36例肝硬化、9例肝血管瘤、11例肝转移瘤、30例正常对照外周血AFP mRNA和19例HCC、15例血液病骨髓AFP mRNA。结果 71例HCC外周血中38例AFP mRNA表达阳性（53．5％），肝硬化、肝血管瘤、肝转移瘤和正常对照均为阴性。HCC外周血AFP mRNA检出率与血清AFP值无明显相关（P＞0．05），而与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝内转移、肝外转移等临床参数有明显相关（P＜0．05）。19例HCC骨髓中9例AFP mRNA表达阳性（47．4％），15例血液病为阴性。骨髓AFP mRNA检出率与血清AFP值、肝内转移无明显相关（P＞0．05），与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝外转移明显相关（P＜0．05）。外周血和骨髓AFP mRNA的表达呈一致性（P＜0．05）。结论 血循环AFP mRNA可作为CC微转移的早期检测指标。HCC病人外周血和骨髓AFP mRNA的表达与复发转移显著相关，且HCC病人外周血和骨髓AFP mRNA的表达呈一致性，联合检测有助于提高结论的可靠性。     

大肠癌患者外周血中癌细胞检测的临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血微转移的检测及临床意义。方法以CK20非同位素RT．PCR方法,检测54例大肠癌患者术前和术后不同时间外周血中结肠癌细胞。结果54例病人外周血中查出CK20阳性表达32例,阳性率59．63％,CK20阳性检出与Duke’s分期、淋巴转移存在差别有显著性。术后3天内外周血CK20阳性检出较术前多出3例,术后早期短程化疗结束后16例转阴。结论大肠癌在早期就可能已累及全身,外周血中CK20的检测可帮助综合判断疾病恶性程度及患者预后,为指导辅助化疗提供了理论依据。术后早期短程化疗对控制大肠癌微转移具有一定的作用。     

围手术期检测肝细胞癌病人外周血AFP mRNA的临床意义

目的 检测围手术期肝细胞癌病人外周血AFP mRNA，通过随访评估其预后价值。方法 通过巢式RT-PCR的方法，在围手术期检测了45例肝细胞癌病人外周血中AFP mRNA的表达，并进行了1～20个月不等的随访。结果 在45例肝细胞癌病人外周血中，AFP mRNA的检出率分别是术前51．1％，术后7d24．4％，术后28d22．2％。多因素统计分析提示，术后28d外周血检出AFP mRNA是提示病人复发的独立预后因素。结论 采用巢式RT-PCR的方法检测肝细胞癌病人术后28d外周血AFP mRNA有助于预测肝癌转移复发。     

实时荧光定量检测胃癌患者MUC1基因表达及临床意义

目的:检测胃癌患者肿瘤组织及外周血MUC1 mRNA的表达水平,探讨MUC1 mRNA表达的临床意义.方法:利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测胃癌组织、正常组织及外周血中MUC1mRNA水平,分析其表达与肿瘤临床病理因素的关系.结果:胃癌患者肿瘤组织及外周血MUC1 mRNA表达水平高于正常对照组(P<0.05),肿瘤组织MUC1 mRNA的检出率与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、血行转移及临床分期有关(P<0.05),外周血MUC1 mRNA的检出率与肿瘤的淋巴结转移、血行转移及临床分期有相关(P<0.05).结论:检测胃癌组织及外周血MUC1 mRNA的表达有助于早期发现胃癌及其微转移.     

围手术期检测肝细胞癌病人外周血AFP mRNA的临床意义

目的　检测围手术期肝细胞癌病人外周血AFPmRNA ,通过随访评估其预后价值。方法　通过巢式RT PCR的方法 ,在围手术期检测了 4 5例肝细胞癌病人外周血中AFPmRNA的表达 ,并进行了 1～ 2 0个月不等的随访。结果　在 4 5例肝细胞癌病人外周血中 ,AFPmRNA的检出率分别是术前 5 1.1% ,术后 7d 2 4 .4 % ,术后 2 8d 2 2 .2 %。多因素统计分析提示 ,术后 2 8d外周血检出AFPmRNA是提示病人复发的独立预后因素。结论　采用巢式RT PCR的方法检测肝细胞癌病人术后 2 8d外周血AFPmRNA有助于预测肝癌转移复发     

淋巴结微转移检测对胃癌病理分期的影响

目的 分析淋巴结微转移对胃癌pN分期的影响。方法 采用CK-20 mRNA逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对2003年12月至2004年4月间行手术切除的30例胃癌患者共计850枚淋巴结扩增检测微转移。结果 应用苏木精-伊红染色法淋巴结转移检出率为27．1％（233／850），而RT-PCR法淋巴结转移的检出率则为36．5％（310／850）；两种方法比较，P〈0．01，差异有统计学意义。77枚淋巴结检出有微转移（12．5％，77／617）。有7例（23．3％）患者的肿瘤TNM分期提高，分别为IB→Ⅱ、IB→ⅢA、Ⅱ→ⅢA、ⅢA→ⅢB、ⅢA→Ⅳ各1例，ⅢB→Ⅳ2例。结论 RT-PCR法可以显著提高淋巴结转移的检出率，有助于更准确地进行临床病理分期。     

胃癌患者外周血CD133 mRNA检测及其临床意义

目的 探讨胃癌患者外周血CD133 mRNA表达情况及其临床意义.方法 抽取10名健康志愿者（组1）、5例胃溃疡穿孔患者（组2）,18例胃癌术前患者（组3）及19例胃癌术后患者（组4）外周静脉血2 ml,分离单核细胞,采用半定量RT-PCR检测CD133 mRNA表达水平.结果 组3患者外周血CD133 mRNA灰度值显著高于组1和组2（P=0.001）.组4患者中12例复发转移者外周血CD133mRNA灰度值显著高于7例无复发转移者（P=0.042）.CD133 mRNA表达与淋巴结转移和肿瘤分期有关（P＜0.05）.CD133 mRNA灰度值与淋巴结转移率呈正相关（P=0.007）.结论 胃癌患者外周血高表达CD133 mRNA,其表达与淋巴结转移率正相关.胃癌术后外周血高表达CD133mRNA提示肿瘤复发或转移.     

逆转录聚合酶链反应扩增细胞角蛋白20 mRNA诊断胃癌淋巴结微转移的研究

目的探讨逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增细胞角蛋白（CK）20 mRNA法检测胃癌淋巴结微转移的可行性。方法用RT-PCR方法扩增CK20 mRNA,检测胃癌患者的淋巴结及胃溃疡患者的淋巴结,与常规病理切片法检测淋巴结微转移进行比较,并分析与病理组织学类型的关系。结果受检132枚淋巴结中54枚CK20 mRNA表达阳性,常规病理结果38枚阳性,微转移检出率为17%,胃溃疡患者16枚淋巴结均阴性;6例黏液腺癌10枚淋巴结,病理结果8枚有转移,而无1枚CK20 mRNA表达。结论扩增CK20 mRNA的RT-PCR法是检测胃癌病人淋巴结微转移敏感而较特异的方法,其假阴性结果与病理组织学类型有关。     

肾癌患者外周血中survivin mRNA的表达

目的探讨肾透明细胞癌患者外周血中survivin mRNA的表达及其临床意义。方法用RT-PCR方法检测30例肾透明细胞癌患者、10例正常健康人外周血中survivin mRNA的表达。结果30例肾透明细胞癌患者中有23例外周血中survivin mRNA表达阳性，阳性率为76．7％，与正常健康人（0％）相比差异有统计学意义（P〈0．001）；survivin mRNA的表达与临床分期密切相关（P〈0．01）；随肿瘤组织分化程度的降低，survivin阳性率有增加的趋势，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肾透明细胞癌患者外周血中survivin mRNA可作为肾透明细胞癌微转移的一个监测指标。     

胃癌术中腹腔灌洗液的CEA mRNA的检测及意义

目的　探索建立一种较敏感的检测胃癌手术时腹腔灌洗液中游离癌细胞的方法。方法　应用实时荧光逆转录 -多聚酶链反应 (RT PCR )方法定量检测 65例胃癌术中腹腔灌洗液的CEA mRNA ,同时用腹腔冲洗细胞学方法 (PLC )涂片寻找癌细胞。设 5例良性胃疾病的术中腹腔灌洗液及5例健康志愿者血液为阴性对照。结果　 (1)良性胃病组和对照组CEA mRNA均为阴性 ;(2 )胃癌组中RT -PCR方法检测游离癌细胞的阳性率为 47.7% ,无假阳性 ;而PLC的检出率仅为 12 .3 %。胃癌组中CEA mRNA阳性率与肿瘤浸润深度、病理分期 (I II和III IV期 )、有无腹膜转移均有明显相关性 (均P 0 .0 5 )。结论　实时荧光RT PCR较PLC方法检测胃癌患者腹腔灌洗液中的游离癌细胞具有更高的敏感性及特异性 ;游离癌细胞的存在和肿瘤临床病理因素有一定的相关性。     

中期因子mRNA在非小细胞肺癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌( NSCLC)患者外周血中中期因子(MK)mRNA的表达及其临床意义.方法 采用定量聚合酶链反应(PCR)法检测87例NSCLC患者、35例肺良性疾病患者及30例健康志愿者外周血中MK mRNA的表达.结果 NSCLC患者外周血中MK mRNA的相对表达(6.749±1.117)与良性疾病患者(7.988 ±0.633)和健康志愿者(8.156±0.525)比较,差异有统计学意义(P＜0.05),而后两者比较差异无统计学意义(P ＞0.05)NSCLC患者外周血中MK mRNA表达水平与其临床TNM分期,细胞分化程度及淋巴结转移密切相关(P＜0.05),而与年龄、性别、吸烟与否和病理类型无明显相关(P＞0.05).结论 外周血MK mRNA有望成为NSCLC微转移检测的有效标志物.     

胃癌相关激肽释放酶的筛选及其临床意义

目的:筛选并探讨胃癌相关激肽释放酶(kallikrein,KLK)在胃癌中的表达,及其与胃癌临床病理和预后的关系。方法:用cDNA微阵列检测胃癌组织及正常胃黏膜标本,筛选出在胃癌组织中差异表达的KLK;用real-timePCR方法进一步验证;再用免疫组化检测胃癌组织石蜡切片中之目标KLK表达水平,并分析其与胃癌病人临床特征及预后的关系。结果:胃癌组织中,KLK10表达上调9.55倍,KLK11表达下调12.02倍。KLK10的表达水平与肿瘤直径、肿瘤浸润深度及淋巴结转移情况明显相关,而KLK11的表达水平与这些临床病理学特征均无关;肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及KLK10和KLK11表达状况与病人的总体生存率明显相关。结论:胃癌组织中差异表达的KLK主要包括KLK10及KLK11;KLK10的表达水平与肿瘤直径、肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及病人的总体生存率明显相关;而KLK11的表达水平与这些临床病理学特征均无相关,而与病人的总体生存率明显相关。     

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目的 观察大肠癌病人血循环中肿瘤细胞的存在与大肠癌的分期以及术后发生肝转移之间的关系。方法 以CEAmRNA为肿瘤细胞的标志物，利用RT-PCR检测了38例大肠癌病人的术前外周血、术中门静脉血和术后外周血中微转移的肿瘤细胞。结果 血循环中CEAmRNA的阳性检出率与大肠癌的Dukes分期密切相关，即使在Dukes A期的病人中也有术前外周血和术中门静脉血中CEAmRNA的表达阳性者（33.3%）。随访发现，血循环中尤其术后外周血中CEAmRNA呈阳性的大肠癌病人日后发生肝转移的机率大大高于CEAmRNA呈阴性的病人[5/9（55.6%)vs3/26(11.5%),P=0.024]。结论 检测大肠癌病人血循环中的肿瘤细胞对于准确评估大肠癌预后具有较为重要的临床意义。     

高迁移率族蛋白1在胃癌病人血清中的含量及意义

目的:高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)是一个多功能细胞因子,与细胞移动和肿瘤浸润有关。本研究通过检测胃癌病人血清HMGB1水平,分析其与胃癌临床病理特征的关系,并与肿瘤标志物CA19-9、CEA进行比较,探讨胃癌病人血清中HMGB1的含量及其临床意义。方法:分别采用ELISA法和化学发光免疫法检测160例胃癌病人术前血清HMGB1、CA19-9和CEA含量和52例胃良性疾病病人、60例正常对照者的血清HMGB1含量,123例胃癌病人同时检测根治术后血清HMGB1含量。结果:胃癌病人血清HMGB1水平(13.1±7.6)ng/mL明显高于正常对照组(4.5±2.9)ng/mL(Р<0.001)。分层分析发现,随着疾病的进展,血清HMGB1水平逐渐升高,TNMⅢ期和Ⅳ期分别与Ⅰ期进行比较,均有显著差异(Р<0.001)。肿瘤浸润浆膜(Р<0.001)、有淋巴结转移(Р<0.001)。此外,160例病人血清HMGB1、CA19-9和CEA的阳性率分别为66.2%、14.3%和8.7%,HMGB1阳性率明显高于CA19-9(Р<0.001)和CEA(Р<0.001)。结论:胃癌病人血清HMGB1水平明显高于正常对照组和胃良性疾病组,且血清HMGB1的表达水平与胃癌的浆膜浸润、淋巴结转移及肝脏转移呈正相关,血清HMGB1表达水平可作为反映胃癌生物学行为和术后随访、监测的参考指标。     

Cyclin E在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Cyclin E蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理和生存时间的关系。方法采用免疫组化过氧化物酶标记链霉卵白素法（SP法）检测胃癌及正常胃黏膜组织100例、胃癌转移淋巴结组织66例中Cyclin E蛋白的表达,分析其与患者的年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、分化程度、淋巴结转移和远处转移等临床病理因素的相关关系。结果 Cyclin E蛋白在胃癌组织、正常胃黏膜组织及转移淋巴组织中均有表达,三者之间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.01）。Cyclin E蛋白表达与癌发部位、肿瘤大小、组织类型及有无淋巴结转移有显著的相关性（P〈0.05）,与患者的性别、年龄、远处转移、浸润深度及TNM分期无相关关系。结论 Cyclin E蛋白表达与胃癌患者发生淋巴结转移及肿瘤组织分化程度、大小有相关关系,可作为胃癌诊断及判断预后的一项新指标。