TGFβ1对胃腺癌细胞SGC-7901Bcl-2表达的影响

目的：研究转化生长因子β1（transforminggrowthfactorβ1，TGFβ1）对胃癌细胞Bcl-2表达的影响．方法：TGFβ1作用于人胃癌细胞SGC－7901，48h后收集细胞爬片．用抗Bcl－2mAb和免疫组织化学SABC法及图像分析技术分析Bcl－2．结果：TGFβ1作用的胃腺癌细胞Bcl－2表达量A值122．624±0．385，较对照组细胞108．925±0．094下降显著（P＜0．05）．结论：TGFβ1对胃癌细胞的凋亡诱导作用可能与其影响Bcl－2表达有关．     

SKI-Ⅱ抑制Sphk1的表达对胃癌细胞株SGC7901细胞周期的影响

目的研究SKI-Ⅱ对胃癌SGC7901细胞周期的阻滞作用,并探讨其相关分子机制。方法常规培养胃癌SGC7901细胞,SKI-Ⅱ单用或联合顺铂干预,流式细胞术检测细胞周期;免疫细胞化学、Western-blot检测药物作用后细胞中Sphk1、P27的表达。结果 SKI-Ⅱ单用或联合顺铂干预48 h后,各用药组细胞周期停滞在G0/G1期比例增多,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);联合用药组比SKI-Ⅱ单用组作用明显(P<0.05);SGC7901细胞中P27阳性表达率增加,Sphk1阳性表达率减少,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示:SGC7901细胞中Sphk1与P27的表达呈负相关。结论 SKI-Ⅱ通过抑制Sphk1的表达进而上调P27的表达诱导肿瘤细胞周期阻滞,抑制肿瘤细胞增殖。     

BMP-2和TGFβ1对培养兔关节软骨细胞代谢的影响

目的 探讨骨形态发生蛋白－２（ＢＭＰ－２）和转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对体个培养兔关节软骨细胞代谢的影响，从而了解其在关节软骨损伤修复中的作用。方法 利用荧光光度计，７２１－型分光光度计，＾３５Ｓ－Ｎａ２ＳＯ４同位素掺入法等测定兔原代及反分化关节软骨细胞羟脯氨酸和蛋白多糖（ＰＧ）的变化。结果 ＢＭＰ－２既能促进反分化关节软骨细胞ＤＮＡ合成又能增加原代、反分化关节软骨细胞羟脯氨酸的含量和＾３５Ｓ－Ｎａ２ＳＯ４掺入，而ＴＧＦβ１显著增加原代软骨细胞羟脯氨酸的合成和＾３５Ｓ－Ｎａ２ＳＯ４掺入。结论 ＴＧＦβ１不能阻止关节软骨细胞反分化，而ＢＭＰ－２能促进软骨细胞的增殖和维持其表型，还可使已丢失软骨表型的反分化软骨细胞有向恢复软骨表型方向分化的可能。     

TGF—β，对INF—γ诱导肺鳞癌细胞β2—M表达的影响

目的：探讨TGF－β1对肺鳞癌细胞MHC Ⅰ类抗原表达的影响。方法：以原代培养的人肺鳞癌细胞为对象，采用免疫荧光法，通过流式细胞仪分别检测加入rhINF-γ及rhTGF-β1,rhINF-γ肺鳞癌细胞β2－M的表达状态，结果：rhINF-γ能显著诱导肺鳞癌细胞β2－M的表达（P＜0．01），但这种诱导作用在各组癌细胞中均能被rhTGF-β1显著抑制（P＜0．01），且与其分化程度无关，结论：TGF－β1对INF－γ诱导人肺鳞癌细胞MHC I类抗原表达有明显抑制作用。     

大鼠肾脏系膜细胞转染人TGF—β1基因可增强MMP—2表达

目的 研究转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）对培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）基质金属蛋白酶－２（ＭＭＰ－２）表达的影响。方法 采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将人ＴＧＦ－β１基因转染培养的大鼠ＭｓＣ,经Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定其转染成功否;又分别应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ．Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ,酶谱分析法检测阳性表达人ＴＧＦ－β１的ＭｓＣＭＭＰ－２ｍＲＮＡ蛋白及酶活性变化。结果成功获得稳定过     

SKI-Ⅱ抑制Sphkl的表达对胃癌细胞株SGC7901细胞周期的影响

目的 研究SKI-Ⅱ对胃癌SGC7901细胞周期的阻滞作用,并探讨其相关分子机制.方法 常规培养胃癌SGC7901细胞,SKI-Ⅱ单用或联合顺铂干预,流式细胞术检测细胞周期;免疫细胞化学、Western-blot检测药物作用后细胞中Sphkl、P27的表达.结果 SKI-Ⅱ单用或联合顺铂干预48 h后,各用药组细胞周期停滞在G0/G1期比例增多,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05);联合用药组比SKI-Ⅱ单用组作用明显(P＜0.05);SGC7901细胞中P27阳性表达率增加,Sphkl阳性表达率减少,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).Pearson相关分析显示:SGC7901细胞中Sphkl与P27的表达呈负相关.结论 SKI-Ⅱ通过抑制Sphkl的表达进而上调P27的表达诱导肿瘤细胞周期阻滞,抑制肿瘤细胞增殖.     

MASPIN真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株SGC7901增殖的影响

目的 构建MASPIN真核表达载体,分析MASPIN过表达对胃腺癌细胞株SGC7901的影响.方法 PCR扩增MASPIN基因全长,用载体PCR2.1构建重组质粒,转染至胃癌细胞株SGC7901.RT-PCR、Western blot检测MASPIN基因表达变化,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期,观察过表达MASPIN对SGC7901细胞株的影响.结果 成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体并转染至胃癌细胞株SGC7901,转染上调了SGC7901细胞株MASPIN在mRNA、蛋白水平的表达.转染MASPIN的SGC7901细胞增殖率随时间而减慢,第24、48、72小时的细胞增殖率分别为93.07%、81.97%、66.5%,明显低于转染空载体组(95.98%、95.79%、95.59%,P<0.05).与转染空载体组相比,过表达MASPIN的SGC7901细胞株在G0/G1期所占比例明显提高(70.3% vs 55.6%),S期细胞减少(19.8% vs 34.9%,P<0.05).结论 成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体,过表达MASPIN 可抑制SGC7901细胞株的增殖.     

苦参碱对胃腺癌细胞SGC7901黏附和移动的影响

目的:探讨不同浓度苦参碱对SGC7901细胞黏附和移动能力的影响。方法:5,50,100,250和500 mg/L苦参碱作用SGC7901细胞24 h后,黏附实验检测细胞黏附率,划痕损伤实验(Wound healing assay)检测迁移速度,在Transwell培养体系中,观察苦参碱对SGC7901细胞的抑制作用,PKA试剂盒检测PKA活性。结果:5,50,100,250和500 mg/L苦参碱处理24 h后,SGC7901细胞黏附率分别为78.56%,44.28%,42.48%,39.75%和31.54%,总体呈下降趋势,50 mg/L组与5 mg/L和500 mg/L组比较差异有显著性(P<0.01);与100 mg/L和250 mg/L组比较差异无显著性(P>0.05)。50 mg/L苦参碱作用24 h后SGC7901细胞迁移速度显著降低(P<0.01),Transwell培养体系中,苦参碱组上层迁移到下层的细胞明显少于不加苦参碱组(P<0.01),且PKA活性明显降低(P<0.01)。结论:苦参碱能抑制SGC7901细胞黏附和运动。     

多氯联苯对大鼠肾脏bcl-2及TGFβ1表达影响的研究

目的探讨多氯联苯(polychlorinatedbiphenyl,PCB)对大鼠肾脏结构及功能的影响。方法用Wistar雄性大鼠40只随机分为4组,Ⅰ组饲喂正常饲料,Ⅱ组饲喂含10-8mol LPCB饲料,Ⅲ组饲喂含10-7mol LPCB饲料,Ⅳ组饲喂含10-6mol LPCB饲料,饲喂3个月后建立慢性PCB毒性动物模型,用光镜、免疫组化技术研究PCB对大鼠肾脏结构及功能的影响。结果PCB对大鼠肾脏结构的损伤同PCB剂量呈正相关,高剂量PCB组肾脏组织结构受损严重;PCB能诱导细胞凋亡抑制因子(bcl2)和转化生长因子β(transforminggrowthfactorβTGFβ)表达,两者的表达强度同PCB浓度呈正相关;高浓度组bcl2和TGFβ1的阳性率明显高于对照组和其他组(P<0.05);结论PCB对大鼠肾脏组织结构及功能产生明显的损伤作用。     

TGF—β1对瘢痕对纤维细胞α—SMA表达的诱导作用

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对瘢痕成肌纤维细胞中α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）表达的诱导作用。方法 以５例增生性瘢痕为标本,３例正常瘢痕为对照,２成纤维细胞二维培养和三维培养体系及ＬＳＡＢ免疫组织化学染色技术,观察了在不同ＴＧＦ－β１浓度条件作用下,来源的于增生性瘢痕和正常瘢痕在成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的情况。结果 （１）不同浓度的ＴＧＦ－β１诱导瘢痕成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的作用不     

反义核酸抑制TGF—β1表达及对肝纤维化调节的研究

反义核酸抑制ＴＧＦ┐β１表达及对肝纤维化调节的研究博士生论文摘要ＳｔｕｄｙｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＴＧＦ┐β１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｉｃｆｉｂｒｏ┐ｇｅｎｅｓｉｓｂｙａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡ梁志清何振平...     

Bcl—2蛋白与胃癌相关性的研究

目的：探讨Bcl-2蛋白在胃癌发展过程中的表达和作用。方法：对50例临床病理诊断的胃癌患者标本及10例正常胃粘膜标本进行Bcl-2表达蛋白的免疫组织化学检测,并结合胃癌的分级及癌前病变等分类比较。结果Bcl-2的表达在进展期胃癌（68．0％）、早期胃癌（64．0％）、不同共型性增生（59．0％）、肠化生（57．9％）中均高于正常胃粘膜（20．0％）;按胃癌的分化程度;高分化腺癌（82．4％）＞中分化腺癌（50．0％）＞低分化腺癌（17．6％）,并且在癌旁组织中可见增殖带拉长,Bcl-2蛋白在此增殖细胞及周围增生腺体中的表达为强阳性。结论：灵重要的癌基因,在肿瘤发生中起重要作用,胃癌组织中Bcl-2蛋白的表达与组织分化程度,癌前病变及细胞增殖情况有关,提示有可能抑制细胞凋亡,促进肿瘤发生,或通过与其他基因的协同作用细胞增殖,导致癌变。     

多发性硬化患者血清TGF—β1及sIACM—1水平测定

目的：探讨可溶性细胞间粘附分子（ｓＩＣＡＭ－１）和转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）在多发性硬化（ＭＳ）发生、发展中的作用。方法：采用ＥＬＩＳＡ方法,测定了３０例ＭＳ患者血清中ｓＩＣＡＭ－１和ＴＧＦ－β１的水平。结果：与对照组和ＮＩＮＤ组相比,ＭＳ患者血清ＴＧＦ－β１水平明显下降,而ＳＩＣＡＭ－１水平则明显升高。动态观察显示,随着病情的好转,ＴＧＦ－β１水平逐渐升高,而ＳＩＣＡＭ－１水平逐渐下降,     

P53,Bcl—2癌基因蛋白表达与胃癌生物学行为的关系

目的 探讨Ｐ５３,ｂｃｌ－２表达与胃癌生物学行为的关系。方法 采用免疫组织化学法,研究６０例胃癌中Ｐ５３,ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果 ６０例胃癌中,Ｐ５３阳性率为５３．３％,ｂｃｌ－２阳性率为７０．０％。Ｐ５３和ｂｃｌ－２表达与胃癌分期有关（Ｐ〈０．０５）。Ｐ５３阳性率随着胃癌分期的增加而升高。相反,ｂｃｌ－２阳性率随着胃癌分期的增加而降低。Ｐ５３表达与胃癌分化程度有关（Ｐ〈０．０５）,但ｂｃｌ－     

海马微量注射β淀粉样蛋白对Bax／Bcl—2的表达的影响

探讨Ｂａｘ／Ｂｃｌ－２基因表达在β－淀粉样蛋白脑内致凋亡机制中的作用。方法用微量注射器将Ａβ１－４０注射到大鼠右侧海马ＣＡ１区诱发Ａβ在脑内该区域的沉积，７ｄ后，用免疫组化ＳＡＢＣ法检测Ｂａｘ／Ｂｃｌ－２的表达。结论Ａβ脑内沉积诱导神经元凋亡的机制可能与其增强了Ｂａｘ的表达有关。     

肝细胞癌组织凋亡基因Bcl—XL,Bcl—2的表达及意义

目的 探讨凋亡抑制基因Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２在肝细胞癌组织中的表达及相互关系。方法 用免疫组化ＳＰ法检测５７例肝细胞癌组织中Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２的表达。结果 ５７例肝细胞癌组织中的Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２阳性表达分别为３６例（６３．２％）、２３例（４０．４％）。两者表达阳性率差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。Ｂｃｌ－２－ＸＬ、Ｂｃｌ－２各组表达水平及组织学分级表达差异无显著性。低分化组１７例中,Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２阳性表达分别为１０例（５５．８％）、４例（２３．５％）。两组表达阳性率差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。５７例肝细胞癌中,Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２同时阳性１７例,同时阴性１５例,单独阳性各为１９例、６例。结论 凋亡抑制基因Ｂｃｌ－ＸＬ、Ｂｃｌ－２在肝细胞癌组织中既可同时发挥抑制细胞凋亡作用,也可单独     

华蟾素对人胃癌SGC7901细胞增殖及Rho GTPase表达的影响

目的 研究华蟾素对人胃癌SGC7901细胞增殖及Rho GTPase表达的影响.方法 将人胃癌SGC7901细胞分为华蟾素组和对照组,利用Cell Counting Kit-8检测(0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL)华蟾素组和对照组的人胃癌SGC7901细胞的增殖抑制情况,利用Western blot和RT-PCR分别检测不同浓度(0.5、1.0、2.0 ng/mL)华蟾素组和对照组的人胃癌SGC7901细胞内Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)蛋白和mRNA表达的水平.结果 与对照组相比,0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL华蟾素组对SGC7901细胞均具有增殖抑制作用(P＜0.05).0.5、1.0、2.0 mg/mL华蟾素组的SGC7901细胞内Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)蛋白和mR-NA表达明显降低且呈剂量依赖性(P＜0.05).结论 华蟾素抑制胃癌SGC7901的增殖的机制可能与下调Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)信号通路的表达有关.