c—myc基因特异核酶的设计及其对靶mRNA的切割

目的：针对ｃ－ｍｙｃ基因第二外显子部分序列设计核酶，探讨生理温度下核酶的切割活性，方法：计算机模拟分析ｃ－ｍｙｃ基因第二外显子部分二级结构，选择核酶切位点，设计核酶，分别构建ｃ－ｍｙｃ基因第二外显子部分序列和核酶体外转录载体并经双脱氧末端终止法测定核酶序列正确无误，体外转录核酶和靶ＲＮＡ分子，生理温度下测定核酶切割活性，结果：所设计的核酶可有效地切割靶ｍＲＮＡ分子。结论：所设计的核酶在生理温度下具     

c—erbB—2反义核酸真核表达载体pDOR—AE的构建及鉴定

许多研究表明，c－erbB－2在腺癌，特别是在乳腺癌、胃癌和卵巢癌中的表达明显增高．这些高表达与肿瘤的生长和转移有着密切的关系．反义核酸技术是近年发展起来的抑制有害基因表达的新技术，利用这一技术已在体外使多种肿瘤细胞的生长受到了抑制．为探讨c－erbB－2反义核酸对胃癌细胞生物学行为的影响，本研究拟构建c－erbB－2反义核酸的真核表达载体PDOR－AE．1材料和方法1．l材料含有c－erbB－2基因。DNA全长的质粒PSVZerBZ由美国Anderson癌症研究中心的Hung教授惠赠，4．4kb的c－erbB－2cDNA克隆在pSVZ的Hind皿位点；PDIR…     

c—erbB—2基因产物表达与膀胱移行细胞癌相关性研究

为探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２基因产物（简称产物）表达与膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）分级，分期的关系，以及肿瘤复发与肿瘤分级，分期及ｃ－ｅｒｂＢ－２产物表达间的关系，采用ＳＡＢＣ免疫组化法检测４８例膀胱ＴＣＣ中ｃ－ｅｒｂＢ－２产物的表达。实验结果显示：膀胱ＴＣＣ有较高的ｃ－ｅｒｂＢ－２产物表达水平（５４％），并与肿瘤的分级，分期有良好的相关性，ｃ－ｅｒｂＢ－２产物表达作为膀胱ＴＣＣ的预后指标，尚有待于大样本长     

慢性粒细胞白血病特异性bcr—abl三核酶体外转录载体的构建及鉴定

0引言her－abl融合基因编码的具有异常蛋白酪氨酸激酶活性的P210蛋白，是导致慢性粒细胞白血病（。hronicmveloidleukemia，CML）发生的主要原因．针对her－abl的核酶能有效抑制PZ10蛋白的合成，诱导CML细胞凋亡，是CML基因治疗的新思路．有关核酶及多核酶治疗CMI。的试验研究国内尚未见报道．成功构建了her－abl单核酶、双核酶及三核酶体外转录载体，为今后透选特异、高效的核酶载体，进一步开展CML的试验治疗奠定基础．互材料和方法1．l材料pGEM－3Zf载体购自华美公司，核酶基因单链由上海生工生物工程有限公司合成．1．2质粒提…     

c—erbB—2过表达及点突变与喉癌发生的关系

目的：探讨喉癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２点空及过表达同喉癌发生发展的关系。方法：应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ对ｃ－ｅｒｂＢ－２的点突变进行检测,采用免疫组化法分析ｃ－ｅｒｂＢ－２的过表达。结果：４０例喉癌阳性表达率为５２．５％（２１／４０）。其中２４例声门上癌表达率为５７％（１７／３０）,６例声带癌表达率为５０（３／６）,４例声门下癌表达率为２２．５％（１／４）,同前者差异有高度显著性（Ｐ〈０．０１）,本见ｃ－     

肺癌nm23,c—erbB—2基因表达及其临床意义

为探讨ｎｍ２３、ｃ－ｅｒｂＢ－２基因在评估肺癌生物学行为及预后中的作用，应用免疫组化ＡＢＣ法检测了４１例肺癌及３０例癌旁组织中ｎｍ２３及ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达。     

切割bcl—2RNA核酶的逆转录病毒载体的构建与鉴定

构建逆转录病毒载体介导的切割ｂｃｌ－２ＲＮＡ的核酶（ＲＺ）基因真核细胞表达载体，方法：合成带有和表达载体克隆位点相匹配酶切位上的ＲＺ基因，先克隆于ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（－）的ＨｉｎｃⅡ位点，命名为３ＺＲＺ（＋）／（－），用Ｓ ａｎｇｅｒ以脱氧链终止法进行测序，体外转录，进行体外切割反应，ＲＺ基因酶切回收后，定向克隆于逆转录病毒载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ中，结果：ＲＺ基因序列正确，具有切割活性，经酶切鉴定ＲＺ     

c—erbB—2基因对小鼠成纤维细胞生长特性的影响

为探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２基因对细胞增殖的影响。本实验通过构建ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的表达载体一转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，观察了转染细胞的生长特性。发现其对数生长期提前，群体倍增时间缩短，并且其克隆形成率，软琼脂集落形成能力，及裸鼠致瘤能力均明显高于对照组。     

鼻咽癌及癌旁粘膜组织中c—erbB—2,EGFR mRNA的表达

应用地高辛配基标记探针和ＤＮＡ－ＲＮＡ原位杂交技术，检测了鼻咽部的癌组织，癌旁粘膜和慢性炎症膜组织中Ｃ－ｅｒｂＢ－２，ＥＧＦＲｍＲＮＡ的表达，结果显示：（１）ＣｅｒｂＢ－２和ＥＧＦＲｍＲＮＡ阳性表达率在癌组织分别为８６．７％（２６／３０）和８３．３％（２５／３０），癌旁粘膜分别为８０．０％（１６／２０）和７０．０％（１４／２０）；慢性炎症粘膜均无表达，（２）二基因同时表达者在癌组织中有２５例（８３     

P53和c—erbB—2基因在胃癌及其癌旁病变中的表达

目的 为了研究胃癌发生发展的机理。方法 采用免疫组化方法研究了８８例胃癌及其癌旁肠上皮化生，异型增生中Ｐ５３和ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白的表达。结果 ８８例胃癌中ｐ５３和ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白阳性率分别为５２．３％和２０．５％，Ｐ５３在高分化腺癌和低分化腺癌的阳性率（分别为６１．８％和５７．９％）明显高于粘液癌（１８．８％，Ｐ〈０．０１）；癌旁肠上皮化生和异型增生中Ｐ５３全部为阴性，ｅ－ｅｒｂＢ－２在     

抗c—erbB—2 ribozyme的计算机设计

设计能特异性切割人癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２ｍＲＮＡ的核酶。概据Ｓｙｍｏｎｘ的“猛士锤头结构”,以人癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２ｍＲＮＡ为靶ＲＮＡ,用计算机对其可能为核酶切割的位点进行分析以寻找最佳切点。对底物及核酶的二级结构进行预测。     

乳腺癌原癌基因c—erbB—2扩增与过度表达

目的;探讨原癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２扩增与过表达在乳腺癌的临床意义。方法：应用原位杂交和免疫组化对８１例乳腺癌原癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２扩增与过表达进行检测。结果：在８１例乳腺癌中,３７例显示ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增,２４例显示ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白过表达,基因扩增与蛋白过度表达呈显著相关关系（Ｐ〈０．０５）。基因扩增与过表达均与乳腺癌病理分级,肿瘤大小,临床分期及淋巴结转移呈正相关。结论：ｃ－ｅｒｂＢ     

乳腺癌组织c—erbB—2癌基因产物蛋白表达及其临床意义

目的 探讨c-erbB-2在乳腺癌表达中的意义。方法 采用免疫组化（S－P法）对54例乳腺癌组织中c-erbB-2进行检测,并结合临床资料及癌组织雌激素受体（ER）、孕激素受体(PR)水平进行分析。结果c-erbB-2在乳腺癌组织中的阳性表达率为55.6%,c-erbB-2表达与乳腺癌组织学类型无关,与ER、PR表达呈负相关,c-erbB-2阳性率在乳腺癌伴淋巴结转移组为73.3%,无淋巴结转移组为33.3%,两组间存在显著性差异（P＜0.05）。结论 c-erbB-2与乳腺癌预后及选择内分泌治疗有关。     

切割bcl─2RNA核酶的逆转录病毒载体的构建与鉴定

目的：构建逆转录病毒载体介导的切割ｂｃｌ－２ＲＮＡ的核酶（ＲＺ）基因真核细胞表达载体．方法：合成带有和表达载体克隆位点相匹配酶切位点的ＲＺ基因，先克隆于ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（－）的ＨｉｎｃⅡ位点，命名为３ＺＲＺ（＋）／（－），用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链终止法进行测序，体外转录，进行体外切割反应．ＲＺ基因酶切回收后，定向克隆于逆转录病毒载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ中．结果：ＲＺ基因序列正确，具有切割活性，经酶切鉴定ＲＺ基因已被克隆于ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ位点，重组逆转录病毒载体命名为ｐＤＲＺ－ＲＺ．结论：体外合成ＲＺ基因后，可定向克隆逆转录病毒载体，为细胞内合成ＲＺ提供了手段     

乳腺癌c—erbB—2癌基因表达与预后的关系

乳腺癌ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因表达与预后的关系高维实张境吴晓梅胡小丽德力郑建华杜纯礼近年来，一些作者认为ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白在乳腺癌过度表达提示患者预后不良，已将它视为确定乳腺癌病人预后的一项指标。我们对我院乳腺癌病人进行随访，探讨ｃ－ｅｒｂＢ－...     

大肠癌中C—erbB—2基因扩增的研究

应用差异ＰＣＲ技术研究了大肠癌中Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的扩增情况。结果发现,大肠癌组织中Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因存在明显扩增,该基因的扩增与大肠癌组织学分级、远处转移之间均有非常显著的关联。大肠癌中随着癌组织学分级程度的加重,Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增逐渐向高、低拷贝转移,说明,Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增在一定程度上反映着大肠癌分化状态和生物学行为,可作为大肠癌患者预后的重要参数,并可指导临床治疗。     

ras,c—erbB—2,p53基因在卵巢浆液性肿瘤中的表达

采用链蛋白生物素标记（ＬＳＡＢ）免疫组化方法，检测了３９例卵巢浆液性囊腺癌中ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ５３基因的表达情况，并以７例交界性、１０例良好浆液性囊腺瘤作为对照。结果：良性、交界性、癌３组中３种基因的表达率依次增高，差异显著，表达强度与癌组织学分级有关，分化越差，表达越强；ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达与临床分期有关，临床期别越晚，表达率提高。提示：３种基因的激活在卵巢浆液性肿瘤的演进过程中起着