葛花总黄酮对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的 观察葛花总黄酮预处理对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用.方法 取0～2 d SD乳鼠原代心肌细胞培养,不同剂量葛花总黄酮预处理24 h后,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4 )诱导心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,运用MTT法测定细胞存活率,同时测定细胞培养液中肌酸激酶(CK)含量和乳酸脱氢酶(LDH)释放量.结果 心肌细胞经过缺氧/复氧损伤后心肌细胞的存活率明显降低,上清液中心肌酸激酶的释放显著增加.葛花总黄酮预处理能浓度依赖性地升高细胞的存活率,同时降低培养液中CK和LDH释放量.结论 葛花总黄酮预处理对缺氧/复氧损伤心肌细胞都具有明显的保护作用.     

黄芪-莪术不同提取物抗肿瘤作用研究

目的研究不同方法提取的黄芪-莪术提取物的抗肿瘤作用。方法建立人肝癌细胞株HepG2模型,分别以95%乙醇、50%乙醇、水提醇沉、传统水煎四种方法为提取工艺,用CCK-8法检测不同提取物对HepG2细胞抑制生长作用,并用流式细胞法检测其体外诱导HepG2细胞凋亡的情况。用小鼠肝癌H22细胞建立移植性肝癌模型,检测上述提取物体内抗肿瘤活性,用免疫组织化学法检测H22肝癌组织中NF-κB p65的表达情况。结果CCK-8结果显示,与阴性组相比,黄芪-莪术95%乙醇和50%乙醇提取物组最高抑制率分别为89.13%、78.36%,差异有统计学意义(P0.05),醇沉和水煎提取物组最高抑瘤率分别为20.38%、18.78%,差异无统计学意义(P0.05)。流式细胞术结果显示,95%乙醇提取组和50%乙醇提取物组能明显诱导HepG2细胞凋亡,水提醇沉组和传统水煎组效果不明显。95%乙醇、50%乙醇、水提醇沉、传统水煎四种提取物对小鼠H22荷瘤均有一定的抑瘤效果,抑瘤率分别为47.55%、36.12%、29.96%、34.68%。与模型组相比,95%乙醇和50%乙醇提取物组能明显降低H22荷瘤组织中NF-κB p65水平的表达(P0.05)。结论黄芪-莪术95%乙醇、50%乙醇、水提醇沉、传统水煎四种提取物均有抑制小鼠H22荷瘤生长作用,但是只有95%乙醇和50%乙醇提取物能抑制NF-κB p65蛋白的表达,并有抑制人肝癌HepG2细胞生长及诱导其发生细胞凋亡的作用。     

加味桃核承气汤及其不同提取物对糖尿病大鼠心肌细胞超微结构的影响

目的观察加味桃核承气汤及不同提取物对糖尿病大鼠心肌病变的影响.方法 SD大鼠140只,除正常组20只外,其他大鼠均采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,观察加味桃核承气汤全方水煎剂及水提醇沉、正丁醇、乙酸乙酯不同提取物对糖尿病大鼠心肌病变的影响,并与达美康对照,共治疗8周.采用透射电子显微镜观察心肌病变区细胞超微结构的变化.结果心肌细胞电镜显示达美康组最接近正常,其次是正丁醇组;治疗效果由优至劣依次为达美康组、正丁醇组、水提醇沉组、乙酸乙酯组、全方水煎剂组.结论加味桃核承气汤的正丁醇提取成分对糖尿病大鼠心肌病变具有一定的治疗作用.     

地黄多糖对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤保护作用的研究

目的研究地黄多糖(RPS)对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法取出生3天的SD大鼠乳鼠分离心肌细胞,培养72h后分为6组:空白对照组、缺氧/复氧模型对照组、地黄多糖(10、20、40μg/ml)干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/ml)干预组,每组设10个复孔。各组细胞经药物干预6h后,通过倒置光学显微镜观察各组细胞形态变化,通过甲基四唑蓝(MTT)比色法测定细胞存活率,通过流式细胞术测定细胞凋亡率;测定各组细胞培养液中心肌酶[谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)]含量;测定各组细胞中抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)]活性和丙二醛(MDA)含量。结果与缺氧/复氧模型对照组相比,地黄多糖干预组心肌细胞形态明显好转,细胞存活率明显升高、凋亡率显著降低,培养液中AST、CPK、LDH含量显著降低,细胞中SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,其中以地黄多糖40μg/ml干预组效果最为显著,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论地黄多糖能够有效改善缺氧/复氧损伤心肌细胞形态、提高细胞存活率、降低细胞凋亡率、改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤,提示地黄多糖对缺氧/复氧损伤心肌细胞具有保护作用。     

甘氨酸对SD乳鼠心肌细胞缺氧损伤的保护作用

目的探讨甘氨酸对缺氧心肌细胞的保护作用.方法台盼蓝排斥实验检测细胞的存活率;生化分析仪检测培养液中心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)的释放量;激光共聚焦显微镜技术检测缺氧后心肌细胞内游离钙的变化.结果甘氨酸可以明显提高缺氧后心肌细胞的存活率;减少缺氧后心肌细胞LDH的释放且作用随其浓度的升高而增强;减轻缺氧后心肌细胞的钙超载.结论甘氨酸提高缺氧后心肌细胞的存活率,减少LDH释放,减轻钙超载,对心肌细胞有保护作用.     

瓜蒌皮提取物对大鼠主动脉PDC Ca2＋内流的影响

为了研究瓜蒌皮治疗冠心病的有效成分,用醚醇法和水煎醇沉法提取瓜蒌皮的有效成分,并用＾４５Ｃａ跨膜测量方法研究各提取物对大鼠主动脉ＰＤＣ钙通道Ｃａ＾２＋内流的影响。发现氯仿和醇溶物能阻滞Ｃａ＾２＋内流,水溶物具有相反的作用,其中氯信提取物浓度为３０ｍｇ／ｍＬ时,使Ｃａ＾２＋内流量比对照下降３１．５７％,实验结果表明瓜蒌皮中可能有７种组分具有治疗冠心病的活性。     

九龙藤总黄酮对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究九龙藤总黄酮(BCF)对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法分离出生1~3 d的大鼠乳鼠心肌细胞,培养72 h后随机分为空白对照组、缺氧/复氧模型组、九龙藤总黄酮(60、120和240μg/ml)干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/ml)阳性对照组,每组设8个复孔。药物干预6 h后,观察各组细胞形态学变化,通过MTT比色法测定细胞存活率;测定各组细胞培养液中谷草氨酸氨基转移酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)释放量;测定各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量;通过流式细胞术测定细胞凋亡率。结果与空白对照组相比,缺氧/复氧模型组心肌细胞形态明显异常、细胞存活数明显减少,培养液中AST、CPK、LDH释放量显著升高,细胞中SOD、GSH-Px、CAT活性显著降低且MDA含量显著升高,差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01)。与缺氧/复氧模型组比较,九龙藤总黄酮120、240μg/ml干预组心肌细胞形态明显好转,存活细胞数明显增加,培养液中AST、CPK释放量显著减少,细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,细胞凋亡率显著降低,并且九龙藤总黄酮240μg/ml干预组培养液中LDH释放量显著降低及细胞中GSH-Px活性显著升高,差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论九龙藤总黄酮能够有效改善缺氧/复氧损伤心肌细胞形态、提高细胞存活率、改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤、并降低细胞凋亡率,提示九龙藤总黄酮对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有剂量依赖性的保护作用。     

姜黄素对培养乳鼠心肌细胞损伤的抗氧化作用

目的评价姜黄素对心肌细胞损伤的抗氧化保护作用。方法对培养的乳鼠心肌细胞加入异丙肾上腺素造成缺血缺氧损伤模型,比较正常对照组、异丙肾上腺素损伤组、以及不同剂量姜黄素组培养液中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和氧化亚氮（NO）含量。结果异丙肾上腺素损伤组SOD活性明显降低,MDA和NO含量显著升高;而姜黄素中、高剂量组上述指标都有不同程度的改善。结论姜黄素对异丙肾上腺素造成的心肌细胞损伤具有保护作用,并呈现剂量依赖关系,作用机制与增强细胞抗氧化作用,减轻自由基和脂质过氧化物导致的细胞膜损伤有关。     

山茱萸有效成分对高糖致心肌细胞损伤的保护作用

目的 研究山茱萸有效成分莫诺苷及马钱苷对高糖致心肌细胞损伤的保护作用.方法 采用高糖诱导的乳鼠心肌细胞损伤模型,观察细胞形态学改变,运用MTT.法检测细胞存活率,并用试剂盒检测细胞上清液中GOT、LDH及SOD、MDA含量.结果 高糖组细胞搏动加快、存活率降低,上清液中GOT及LDH含量增高,SOD活性降低,MDA含量增加(P<0.01),提示心肌细胞受损,抗氧化能力降低.而莫诺苷、马钱苷组细胞形态基本正常,存活率较高,二者均能降低GOT、LDH含量,提高SOD活力.减少MDA含量,与高糖组相比差异显著(P<0.05,0.01).结论 山茱萸有效成分能保护高糖诱导的心肌细胞损伤,可能是通过提高心肌细胞抗氧化能力产生作用的.     

苦参素对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞保护作用研究

目的:研究苦参素(Oxymatrine,OMT)对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞的保护作用。方法:于无菌环境下分离SD大鼠乳鼠心肌细胞并培养72 h后随机分为:空白对照组、缺氧/复氧(H/R)模型对照组、OMT(20、40、80μg/m L)干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/m L)干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。药物干预6 h后,通过倒置光学纤维镜观察细胞形态;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;检测细胞培养液中谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)释放量;测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫法(ELISA)测定培养液中TNF-α、IL-1、IL-6含量水平;通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过RT-PCR检测细胞中bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果:与模型对照组比较,OMT 40、80μg/m L干预组乳鼠心肌细胞形态和生存状态均明显好转,存活率显著升高,培养液中AST、CPK、LDH释放量显著降低,细胞中SOD活性显著升高且MDA含量显著降低,细胞凋亡状况显著改善、凋亡率显著降低,细胞中bcl-2 m RNA表达显著上调且Bax m RNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,培养液中TNF-α、IL-6含量水平显著降低,上述差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01);其中OMT 80μg/m L干预组细胞中GSH-Px活性显著升高(P0.05),培养液中IL-1含量显著降低(P0.05)。结论:苦参素能够有效改善缺氧/复氧损伤心肌细胞形态、提高细胞存活率、改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤、降低细胞凋亡率、并抑制炎症反应,提示苦参素对缺氧/复氧损伤乳鼠心肌细胞具有保护作用。     

马齿苋总黄酮对缺血再灌注心肌细胞损伤的保护作用

目的 研究马齿苋总黄酮(portulaca total flavone,PTF)对新生大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用.方法 取体外培养的新生大鼠心肌细胞于缺氧24h复氧lh造成缺血再灌注(I/R)损伤模型,观察细胞损伤情况,并将PTF终浓度为5、10、20mg/L分别加入培养基中,预处理24h后,再置于上述缺氧复氧环境中培养,测定以上不同条件下心肌细胞上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,并测定各组细胞内Ca2+浓度.结果 与正常对照组相比较,缺血组和再灌组细胞上清液中LDH、CK、MDA含量明显升高(P＜0.01),SOD活力则显著降低(P＜0.01),缺血组和再灌组细胞内Ca2+浓度均明显升高(P＜0.01).而用PTF预处理后缺血组和再灌组的LDH、CK、MDA显著低于用药前(P＜0.01),SOD高于缺血组和再灌组(P＜0.01);PTF组(20mg/L)对正常心肌细胞内Ca2+浓度影响小(P＞0.05);与PDGF-BB诱导增殖组比较,PIF(5、10、20 mg/L)药物干预组心肌细胞Ca2+浓度明显降低(P＜0.05),且存在明显的剂量效应关系.结论 PTF对缺血再灌心肌细胞有保护作用,其作用机制可能与增强抗氧化能力、减轻钙超载有关.     

茶多酚和维生素C对人胚肾293细胞缺糖缺氧损伤保护作用的比较

目的从细胞水平研究茶多酚(TP)对人胚肾293细胞缺糖缺氧性损伤的保护作用,并与抗氧化剂维生素C(VC)进行比较。方法采用缺糖培养基并以连二亚硫酸钠消除培养基中的氧,诱导产生缺氧缺糖损伤模型,测定细胞的存活率、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及总抗氧化能力,并计算IC50。结果在细胞损伤模型中,TP和VC均表现出极强的抗氧化能力,TP能显著提高细胞的存活率、SOD活性和总抗氧化能力并抑制LDH的活性,TP的作用均大于VC。结论TP和VC体外具有强大的自由基清除作用,且呈现明显的剂量依赖性,TP在细胞损伤模型中的抗自由基作用均大于VC。     

莱菔硫烷对乳鼠心肌细胞缺血缺氧损伤的保护作用

目的 探讨莱菔硫烷(SFN)对乳鼠心肌细胞缺血缺氧损伤的保护作用及可能机制.方法实验随机分为4组:正常对照组、模型组、SFN低剂量组(10 μmol/L)、SFN高剂量组(30 μmol/L).建立心肌细胞缺血缺氧损伤模型,予以SFN干预6 h后,AnnexinV荧光染色检测心肌细胞凋亡,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,蛋白印迹法(Western Blot)检测心肌细胞核因子-κB(NF-κB)水平.结果 SFN减少缺血缺氧心肌细胞的凋亡,减少LDH释放,降低MDA水平,增加SOD水平,心肌细胞NF-κB蛋白表达下降,SFN高剂量组则更明显.结论 SFN对心肌细胞缺血缺氧损伤具有保护作用,作用机制与增强心肌细胞抗氧化能力、抑制NF-κB生成有关.     

加味桃核承气汤及其提取物对糖尿病大鼠主动脉弓超微结构的影响

【目的】观察加味桃核承气汤及不同提取物对糖尿病大鼠主动脉弓超微结构的影响。【方法】SD大鼠140只,除正常组20只外,其他大鼠均采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,观察加味桃核承气汤全方水煎剂及水提醇沉、正丁醇、乙酸乙酯不同提取物对糖尿病大鼠主动脉弓病变的影响,并与达关康对照,共治疗8周。采用透射电子显微镜观察主动脉弓病变区细胞超微结构的变化。【结果】主动脉弓电镜结果显示达关康组最接近正常,其次是正丁醇组;治疗效果由优至劣依次为达关康组、正丁醇组、全方水煎剂组、水提醇沉组、乙酸乙酯组。【结论】加味桃核承气汤的正丁醇提取成分对糖尿病大鼠主动脉弓病变具有一定的治疗作用。     

“钾异心”停搏液对培养心肌细胞缺血损伤的保护作用

目的 研究“钾异心”停搏液对缺血心肌的保护作用并探讨其机理，方法 用原代培养的乳鼠心肌细胞为材料，缺糖缺氧处理３ｈ造成缺血损伤，以培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性及细胞含钙量为指标，比较高钾，钾异心停搏液对缺血心肌的保护作用。结果 “钾异心”停搏液能显著降低缺血处理的心肌细胞培养液的ＬＤＨ活性及细胞含钙量，与高钾停搏液相比效果显著。结论 “钾异心”停搏液保护缺血心肌的效果优于高钾液，其机理与降低细     

不同提取方法对银杏叶多糖含量的影响

【目的】分析不同提取方法对银杏叶中多糖含量的影响,为其进一步开发应用提供依据。【方法】采用水提醇沉法、酶解—水提醇沉法、超声波—水提醇沉法、微波—水提醇沉法制备银杏叶多糖,以称质量法测定提取物得率,同时以苯酚—硫酸法进行显色后通过紫外—可见分光光度计测定多糖含量。【结果】不同提取方法的银杏叶多糖提取物得率及含量分别为:水提醇沉法,12.58%、5.69%;酶法—水提醇沉法,14.05%、6.68%;超声波—水提醇沉法,14.12%、6.82%;微波—水提醇沉法,13.31%、6.15%。其中,含量比较具有显著性差异(P 0.05或P 0.01)。【结论】不同提取方法制备的银杏叶多糖提取物得率和含量不一,其中以超声波—水提醇沉法最高、水提醇沉法最低。     

茯苓多糖的分离纯化、组成及其抗氧化活性研究

目的 分离纯化得到带电性不同的茯苓多糖组分,分析其化学组成性质,比较多糖粗提物和其不同组分的抗氧化活性。方法 采用水提醇沉法提取茯苓多糖粗提物（Poria cocos Polysaccharide,PCP）,利用二乙氨基乙基（diehlaminowthy,DEAE）-纤维素阴离子交换色谱柱法对多糖粗提物进行分离纯化,得到不同带电性的多糖组分PCP-1（水洗糖）和PCP-2（盐洗糖）。结合紫外-可见光分光光度测定法、傅里叶红外光谱法、高效液相色谱-衍生化法、高效凝胶渗透色谱法和扫描电子显微镜法等方法对多糖粗提物和2种不同组分的化学组成性质进行研究。以多糖的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐自由基和羟基自由基的清除能力作为评估体外抗氧化活性指标。结果 PCP、PCP-1和PCP-2的多糖含量分别为78.16%、93.53%、90.84%,红外光谱出现相似吸收峰,均有多糖的典型吸收。3种多糖均为主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和岩藻糖按照不同比例组成的杂多糖,分别由不同分子量的多糖片段构成,微观形态没有显著差异。体外抗氧化实验提示PCP-2的体外抗氧化活性最高。结论 经过分离纯化后的不同茯苓多糖组分的化学结构性质不同,相较于茯苓多糖粗提物体外抗氧化活性更强,其中PCP-2的活性最强。     

卡维地洛对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究卡维地洛对缺氧／复氧损伤心肌细胞的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法新生1-3 d的Sprague-Dawley鼠,原代分离,培养其心肌细胞72 h后,随机分为正常对照组、单纯缺氧／复氧组及卡维地洛 缺氧／复氧组。先将培养板中的心肌细胞缺氧(氧浓度<1％)120 min,再复氧30 min,造成缺氧／复氧损伤模型,测定细胞存活率;抽取细胞培养上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB);并破碎细胞,测定丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果卡维地洛 缺氧／复氧组的细胞培养液中LDH和CK-MB漏出量分别为(32．32±1．46)和(28．33±2．12)U／L,均显著低于缺氧／复氧组[(50．28±1．22)和(42．45±3．22)U／L,P值均<0．05];卡维地洛 缺氧／复氧组的细胞存活率为(70．21±2．12)％,显著高于缺氧／复氧组[(58．39±3．22)%,P<0．05]。卡维地洛 缺氧／复氧组的细胞内MDA含量为(5．32±0．32)nmol／mL,显著低于缺氧／复氧组[(8．32±0．42)nmol／mL,P<0．05];SOD活性为(10．32±0．42)U／mL,显著高于缺氧／复氧组[(7．42±0．20)U／mL,P<0．05]。结论卡维地洛对心肌细胞缺氧／复氧损伤具有保护作用,能清除氧自由基,提高心肌细胞抗氧化能力。     

葛根素对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:研究葛根素对培养SD乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的拮抗作用。方法:葛根素(50和100mg/L)预处理24h后作用于乳鼠心肌细胞A/R损伤模型,运用MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养液中LDH和细胞内SOD活性及MDA含量。运用流式细胞术Annexin V-PI双染法测定细胞凋亡变化。结果:与A/R模型组比较,葛根素明显提高细胞存活率,增加胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放量和胞内MDA含量;同时降低细胞的凋亡率。结论:葛根素对A/R损伤心肌细胞具有保护作用,其机制可能与清除自由基的产生有关。     

决明子对老龄大鼠晶状体抗氧化作用的有效活性部位研究

目的:研究决明子对老龄大鼠晶状体抗氧化作用的有效活性部位。方法:80只Wistar大鼠分为正常对照组、空白对照组、超临界提取物组、石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组、70%乙醇提取物组、水提取物组及水提醇沉物组,分别选用CO2超临界、系统溶媒(石油醚、乙酸乙酯、70%乙醇、水)和水提醇沉的方法对决明子进行提取,观察各提取物对老龄大鼠晶状体中GSH、SOD、MDA的影响,初步明确决明子对老龄大鼠晶状体抗氧化作用的有效活性部位。结果:与正常对照组比较,空白对照组谷光苷肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)均显著降低,丙二醛(MDA)含量升高(P0.05,P0.01)。与空白对照组比较,超临界提取物组、乙酸乙酯提取物组、70%乙醇提取物组、水提取物组GSH、SOD显著升高,MDA含量明显下降。结论:随年龄增长,大鼠晶状体GSH、SOD呈降低趋势,而MDA表现为升高趋势。超临界提取物部位、70%乙醇提取物部位、水提取物部位、乙酸乙酯提取物部位都能在一定程度上抗老龄大鼠晶状体氧化,超临界提取物部位抗氧化作用最佳。