改良线栓法制备家兔大脑中动脉局灶性脑缺血模型

目的探讨采用改良线栓法建立家兔局灶性脑缺血模型。方法采用随机数字表法,造模前将45只健康清洁级成年新西兰家兔分为假手术组(5只)及模型组(40只),用自制头端蘸有石蜡的2-0钓鱼线作为线栓,由颈外动脉残端剪口,经颈内动脉置入颅内,堵塞大脑中动脉起始部,6 h后进行神经功能评分,神经功能缺损评分≥2分视为造模成功。麻醉处死家兔,用2%2,3,5-三苯基氯化四唑溶液对脑片进行染色,观察梗死灶情况。对模型组中造模成功、失败及死亡的实验兔进行线栓头端直径、线栓置入深度的比较。结果模型组40只,其中死亡6只,包括术后4 h内死于蛛网膜下腔出血4只、因麻醉意外死亡2只,死亡率为15.0%;失败7只,主要为脑血管痉挛及线栓置入深度不足;造模成功27只,成功率67.5%。假手术组全部存活。造模成功家兔的线栓头端直径、置入深度分别与死亡及失败结局家兔比较,差异均有统计学意义[直径(mm):(0.52±0.14)比(0.45±0.40)和(0.58±0.17);深度(cm):(5.49±0.17)比(6.04±0.11)和(4.26±0.30);均P0.05]。结论改良线栓法可成功制备家兔大脑中动脉局灶性脑缺血模型,操作简便,且可重复。     

井穴放血对大鼠脑梗死缺血再灌注损伤的脑保护作用

目的分析井穴放血治疗对大鼠缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法雄性SD大鼠90只中15只为假手术组,其余经线栓法建立脑梗死缺血再灌注损伤模型,随机将建模成功的75只大鼠分为模型组、井穴放血0、1、3、6 h组。假手术组麻醉后仅仅分离右侧大脑中动脉,不将线栓插入;模型组麻醉后,向右侧大脑中动脉插入线栓,血管堵塞60 min后将线栓拔除,血流恢复,制备模型成功;井穴放血各组在建模成功后分别于再灌注后0、1、3、6 h给予井穴放血治疗,并在治疗24 h测定各组神经功能评分,经三苯基四唑氯化物(TTC)染色测定梗死面积,经免疫组化法检测缺血半暗带相关细胞与蛋白表达。结果假手术组脑组织无梗死病灶,无神经功能异常与肢体瘫痪;模型组与井穴放血各组均有不同程度的梗死病灶,出现不同程度的神经功能缺损症状,其中模型组Longa评分最高、梗死面积最大,后由高至低依次为井穴放血6、3、1、0 h组,组间差异有统计学意义(P0.05);假手术组大脑胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞、Caspase-3阳性细胞、CD11蛋白表达均最低,Neun阳性细胞表达最高;后依次为井穴放血0、1、3、6 h组,模型组GFAP阳性细胞、Caspase-3阳性细胞、CD11蛋白表达均最高,Neun阳性细胞表达最低,组间差异有统计学意义(P0.05)。结论井穴放血治疗能够减少脑梗死缺血再灌注损伤大鼠梗死面积与神经功能损伤,促缺血半暗带小胶质细胞及星形胶质细胞活化增殖,大鼠神经细胞凋亡减少,特别是在再灌注后早期给药,获益更高。     

大鼠左右大脑中动脉缺血再灌注模型比较

目的探讨大鼠左右大脑中动脉缺血再灌注模型的差异。方法选择右利雄性Wistar大鼠48只,按照随机数字表分为左侧大脑中动脉缺血再灌注组(左侧优势组)、右侧大脑中动脉缺血再灌注组(右侧非优势组),每组24只,每组使用各自侧别的假手术对照。血管内线栓法阻塞大脑中动脉2h,然后再灌注。测试神经功能,取脑分别进行常规TTC染色和HE染色,测量脑梗死体积,光镜下观察脑组织病理变化。结果左侧优势组再灌注24、48和72h神经功能缺损评分明显低于右侧非优势组(P<0.05)。左侧优势组缺血程度较右侧非优势组重。左侧优势组神经元数量严重缺失,海马细胞排列紊乱,脑梗死体积明显大于右侧非优势组[(102.1±8.8)mm3 vs(97.0±11.2)mm3,P<0.05]。结论大鼠优势半球大脑中动脉阻塞后,神经功能缺损程度较非优势侧严重,脑梗死体积更大。大鼠优势半球局灶性脑缺血模型重复性好,而且可靠。     

促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注的保护作用及对VEGF及ICAM-1表达的影响

目的观察促红细胞生成素(EPO)对大鼠脑缺血再灌注后梗死面积及血管内皮生长因子(VEGF)及细胞间黏附分子(ICAM)-1表达的影响。方法雄性Wistar大鼠32只,随机分为正常对照组(A组)、假手术组(B组)、缺血再灌注模型组(C组)、EPO干预组(D组)。C组、D组采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉制作大鼠局灶性缺血再灌注模型。EPD预处理组于缺血开始前2 h予腹腔注射EPD3 000 U/kg;缺血再灌注模型组和假手术组在手术前2 h予腹腔注射等量生理盐水。再灌注24 h后进行脑组织石蜡包埋切片,行HE染色、Nissl染色以及VEGF和ICAM-1免疫组化染色,光镜观察组织学变化,计算缺血侧大脑皮层VEGF及ICAM-1的表达情况。另选健康成年雄性SD大鼠32只,按上述方法造模及分组,在缺血再灌注24 h后行10%红四氮氯唑(TTC)染色,测脑梗死的面积。结果 C组梗死体积占全脑体积的百分比与D组明显增大(P<0.01),B组未见脑梗死灶。光镜下A、B组仅见少数VEGF、ICAM-1阳性细胞,C、D组VEGF、ICAM-1阳性细胞数均高于A、B组(P<0.01),D组VEGF阳性细胞数高于C组(P<0.01),D组ICAM-1阳性细胞数低于C组。结论 EPD预处理可抑制缺血损伤,减小脑梗死体积,其机制可能是通过上调VEGF表达、下调ICAM-1而实现的。     

尤瑞克林通过MAPK/ERK信号通路改善小鼠脑缺血再灌注损伤

目的 探讨尤瑞克林(HUK)对脑缺血再灌注损伤小鼠脑组织保护作用的机制.方法 60只ICR小鼠随机分为3组:假手术组、I/R+NS组和I/R+HUK组,用线栓法制作小鼠大脑中动脉短暂性脑缺血再灌注损伤模型,治疗72 h后,观察各组小鼠神经功能缺损评分,采用2,3,5-苯氯化四氮唑(TTC)染色检测梗死面积百分比,Wes...     

小鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞变化的研究

目的观察小鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞的动态改变。方法昆明小鼠64只随机分为脑缺血组48只、正常组4只和假手术组12只。脑缺血组用线栓法制作小鼠右侧大脑中动脉缺血模型;TTC染色观察缺血1、3、6、12、24和48h的脑缺血部位及范围;HE染色法观察不同缺血时间海马神经元的变化;用免疫组织化学方法观察不同缺血时间海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化。结果与正常组比较,脑缺血组3、6、12、24和48h脑梗死体积显著增加[(19.67±5.46)%,(33.68±3.46)%,(54.65±6.13)%,(76.85±7.15)%,(81.81±4.09)%,P=0.000]。HE染色显示,脑缺血组缺血侧海马神经元产生损伤并不断加重,缺血6h后出现不可逆性损伤。与正常组及假手术组相比,脑缺血组缺血侧海马各区GFAP表达随缺血时间的延长数量不断增多(P0.05),细胞体肿胀,突起不断增粗延长,GFAP阳性细胞增长在6h时增速最快,48h达到高峰(P0.05)。结论小鼠大脑中动脉缺血后,可引起缺血侧海马神经元损伤,并刺激星形胶质细胞过度反应和增殖。     

辛伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时间窗的影响

目的研究辛伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血不同灌注时间窗的脑保护作用;探讨药物干预再灌注时间窗的可行性。方法线栓法制作大鼠缺血再灌注损伤模型,实验随机分为假手术组（A组）、缺血组（B组）、缺血/再灌注组（C组）、缺血/再灌注组加辛伐他汀组（D组）。C组、D组又各分为MCAO术后2h、4h、6h再灌注组。在完成预定操作后进行神经功能评分优于B组,测梗死体积,脑组织病理变化情况。结果D组各时间点神经功能评分优于B组,梗死体积小于B组（P〈0.05或P〈0.01）,脑组织病理变化改善。结论辛伐他汀预处理可改善神经功能评分,缩小梗死体积,改善脑组织病理变化,延长再灌注时间窗。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后凋亡诱导因子的表达及其与神经细胞凋亡的关系

目的观察大鼠脑缺血再灌注(I/R)后凋亡诱导因子(AIF)的表达,探讨I/R脑区AIF变化与神经细胞凋亡的关系。方法应用线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,TTC染色观察梗死灶的形成,应用原位末端标记(TUNEL)和免疫组化技术分别观察大鼠假手术组、MCAO90min再灌注0、3、6、12、24、48、72h时额顶叶皮层缺血脑区AIF表达及神经细胞凋亡程度的变化。结果脑I/R24h,TTC染色见明显的梗死灶形成。除缺血90min凋亡细胞数量与假手术组比较无统计学意义外,其余各指标与假手术组相比均有统计学意义(P<0.01),除6与12h以及24与48hAIF含量的差异无统计学意义,24与48h凋亡细胞数量的差异无统计学意义外,其余各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论I/R可诱导AIF阳性细胞表达增加,并引起神经细胞凋亡。     

托吡酯对脑缺血再灌注后脑保护作用的研究

目的 探讨托吡酯对大鼠高血压急性脑缺血再灌注后的脑保护作用。 方法 将25只大鼠制成高血压模型,喂养2个月。随机分为3组:即托吡酯治疗组(9只)、缺血再灌注组(9只)和假手术组(7只)。将大鼠用线栓法制成大脑中动脉闭塞模型,缺血时间为2 h,将线栓拔除即形成缺血-再灌注模型。假手术组末置入线栓。再灌注后6 h,将大鼠快速断头取脑,经TTC染色,用计算机病理图像分析仪测量鼠脑梗死体积及鼠脑总体积,并将两者的比值作为脑梗死体积比。结果 托吡酯治疗组的脑梗死体积比为0.1087±0.0426,明显小于缺血-再灌注组脑梗死体积比0.286 3±0.064 7(P<0.05)。假手术组未见梗死灶。结论 托吡酯使大鼠高血压脑缺血-再灌注后的脑梗死体积减小,对脑缺血-再灌注损伤的脑组织有保护作用。     

小鼠脑缺血/再灌注损伤皮质区超氧化物歧化酶、丙二醛、活性氧表达与细胞凋亡的关系及姜黄素的干预作用

目的探讨姜黄素对小鼠皮质区缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响及与超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)表达的关系。方法采用线栓法阻塞小鼠大脑中动脉(MCAO),建立小鼠局灶性脑缺血/再灌注实验模型,90只昆明小鼠被随机分为假手术组(S组)、缺血/再灌注组(I组)和姜黄素(缺血前30 min腹腔给予10、20、40 mg/kg)组(C1、C2和C3组),每组18只。各组于缺血2 h分为再灌24、48、72 h等三个亚组。在预定时间点观察小鼠神经功能缺失的评分;TTC染色测定脑梗死体积;TUNEL法检测细胞凋亡变化。测定各组小鼠血浆中SOD活性,MDA、ROS含量。结果 24 h神经功能评分及脑梗死体积I组明显高于S组,C1、C2、C3组神经学评分及脑梗死体积低于I组(P0.05)。SOD活力I组与S组相比较明显下降。C1、C2、C3组与I组相比SOD活力升高(P0.05)。ROS、MDA含量I组与S组相比较明显上升,C1、C2、C3组与I组相比ROS、MDA含量明显下降(P0.05)。结论姜黄素对脑缺血再灌注氧自由基损伤具有保护作用,其抗氧化作用机制可能与调节相关凋亡基因表达减轻细胞凋亡有关。     

老年脑出血与脑梗死心电图分析

目的观察老年患者不同部位脑出血及脑梗死的心电图特征。方法回顾同期住院的126例老年脑出血及151例老年脑梗死患者的心电图资料,分析其表现。结果2组心电图异常改变均主要表现为ST-T异常和(或)心律失常。脑出血组窦性心动过速、左室肥大和病死率(15.9%、15.9%和12.7%)明显高于脑梗死组(6.0%、6.0%和4.0%,P<0.01),脑梗死组的窦性心动过缓并心律不齐、房颤和期前收缩的发生率(12.6%、11.2%、11.2%)明显高于脑出血组(3.2%、7.1%、7.1%,P<0.05)。结论脑出血、脑梗死的心电图异常与疾病的严重程度密切相关。     

急性脑梗死患者合并脑微出血的心脑血管事件发生的研究

目的研究急性脑梗死合并脑微出血(CMB)患者后期心脑血管事件的发生率和危险因素。方法将109例急性脑梗死患者分为CMB组38例和无CMB组71例,对其进行前瞻性研究,给予梯度回波T_2~*WI或磁敏感加权成像,并对患者的临床资料和影像学特点进行分析。平均随访(9.5±3.7)个月。结果与无CMB组比较,CMB组脑梗死和脑出血两者兼有,单纯脑出血比例明显升高(7.9%vs 1.4%,P<0.05;10.5%vs 0,P<0.01)。CMB组共检出CMB 153个。在随访中,1 6例患者再发脑卒中,包括11例脑梗死,5例脑出血。5例脑出血患者中有3例服用阿司匹林,2例接受抗凝治疗。CMB组有2例脑出血患者的出血部位与CMB部位相同。结论 CMB是脑微小血管病变特征之一;是急性缺血性脑血管病患者后期发生脑出血的危险因素之一;CMB对脑卒中患者长期服用阿司匹林或者抗凝治疗具有重要意义。     

Effects of blockade of cerebral lymphatic drainage on cerebral ischemia after middle cerebral artery occlusion in rats

This experiment aimed to investigate the effects of blockade of cerebral lymphatic drainage on cerebral ischemic damage. Seventy six Wistar rats were divided randomly into middle cerebral artery occlusion (MCAO) group and MCAO plus cerebral lymphatic blockade (MCAO+CLB) group for the experiment. The contents of water and electrolytes, the activity of superoxide dismutase (SOD) and the content of malondialdehyde (MDA) in the ischemic brain tissue were detected at 24, 48 and 72 hours after the operation. The morphologic examination was also performed. In MCAO group, contents of water, sodium and calcium in the ischemic brain tissue increased significantly at any time after the operation. The SOD activity decreased while the MDA content increased markedly. The morphologic findings showed severe damage of ischemic brain tissue and neurons. In MCAO+CLB group, the above parameters were altered more obviously. The present observation suggests that blockade of cerebral lymphatic drainage may deteriorate ischemic brain damage after MCAO.     

Neuroprotective effects of magnesium on cerebral ischemia and cerebral contusion

Neuroprotective effects of magnesium (Mg(2+)) have been shown in experimental studies by using animal models of the cerebral ischemia and cerebral contusion. We review the neuroprotective effects of Mg(2+) in the histological and behavioral studies. In the animal models of cerebral ischemia, Mg(2+) treatment reduces the infarct volume, inhibits the neuronal death, and attenuates the motor impairments. In the animal models of cerebral contusion, Mg(2+) treatment inhibits the neuronal death and edema, and attenuates not only the motor impairments but also cognitive dysfunction.     

老年脑梗死患者伴脑微出血的临床观察

目的探讨老年脑梗死患者伴脑微出血(CMB)的危险因素及治疗预后。方法连续入选2010年2～3月的100例老年脑梗死患者,根据MRI检查分为CMB组23例和无CMB组77例,记录一般临床资料、影像学表现及神经功能缺损评分。2组均给予丹红注射液治疗,无CMB组口服拜阿司匹林,14 d后再进行神经功能缺损评分及有效率的评价。结果与无CMB组比较,CMB组年龄更高,高血压和既往脑卒中患病率高,服抗血小板药物>3个月比例高(P<0.05)。CMB灶数目与腔隙性脑梗死灶数目及脑白质病变的程度呈正相关。治疗14 d后,无CMB组患者神经功能缺损评分低于CMB组(P<0.05),总有效率高于CMB组(P<0.05)。结论 CMB是由高龄、高血压及既往脑卒中等所致的血管壁病变。CMB可能在预测高血压患者发生脑出血的风险中产生作用。     

超早期溶栓联合围术期护脑药物治疗进展性脑梗死(附423例报告)

目的 观察超早期(首次病情进展至溶栓时间≤3 h)溶栓联合围术期护脑药物治疗进展性脑梗死(PCi)的疗效与安全性.方法 将846例PCI患者随机分为观察组和对照组各423例,两组均予抗炎、钙离子拮抗剂、减轻脑水肿、调治血压药、降糖药等常规及对症治疗,采用尿激酶超早期溶栓抗凝联合围术期应用护脑药物(黄芪注射液30 ml 葛根素注射液15 ml 复方丹参注射液20 ml静滴)治疗;对照组仅行早期(首次病情进展至溶栓时间3～6 h)溶栓治疗及抗凝治疗,方法同上.结果 观察组总有效率显著高于对照组,并发症发生率显著低于对照组,P均＜0.01.结论 超早期溶栓联合围术期应护脑药物治疗PCI能有效防治脑缺血和再灌注后脑损伤,且较为安全.