影响透射是生物样品超薄切片效果因素分析

由于电镜技术的不断发展,样品制备技术的不断改进,制备切片厚度在50nm 以下的超薄切片已成为透射电镜生物样品制备的常规制样技术。但是如何制得高质量的超薄切片,得到清晰的高反差电镜图像客观存在很多因素影响,比如超薄切片机性能好坏、玻璃切片刀是否锋利、组织包埋块硬度怎样、操作者技术经验等等。笔者根据几年的切片经验就上述影响超薄切片的几个因素作简略分析如下。1 具有性能良好的超薄切片机一台性能良好的超薄切片机是切出没有刀痕与颤痕的优质超薄切片的重要保证。我们电镜室1997年购置的德国徕卡牌超薄切片机,就是性能优…     

透射电镜样品制备中常见污染问题的探讨

透射电镜生物样品制备最常用的是超薄切片法,超薄切片技术的制片过程很复杂,要求很细致,稍有不慎便会造成污染,影响图片质量.本文就如何减少样品制备污染问题,总结了本实验室长期以来的制样经验,供广大电镜工作者,特别是初学者借鉴.     

电镜超薄切片技术实践的探讨

在21世纪的今天 ,电子显微镜技术早已在工业、农业、地矿、环境科学尤其在生物医学、计量医学、远程病理诊断等方面得到普遍的应用。在整个电子显微镜技术中 ,超薄切片技术是技术的难点与关键 ,因电镜下观察样品制备的优劣直接反映在超薄切片上。影响切片质量的因素很多 ,不论什么样的组织 ,不论何种病变基础 ,不论标本块包埋的软硬度如何 ,超薄切片者保证要切出良好的切片 ,否则将给电镜观察者带来很多困难。现根据多年来超薄切片技术的经验 ,浅谈切片缺陷的产生及对策。1超薄切片的常见问题切片缺陷大致可分为10种。有刀痕、颤痕、皱褶、…     

透射电镜超薄切片法与负染法探讨

透射电镜生物样品超薄切片技术是医学生物学研究中常用的方法。其它一些制备技术如免疫电镜、电镜细胞化学、放射自显影等,都必须进行超薄切片;而超薄切片所显示的生物样品的微细结构,也是识别扫描电镜图像、冷冻蚀刻复型及其他电镜图像的基础。负染色是相对正染色而言...     

非生物标本的电镜样品制备及超切技术的探讨

目的：探讨非生物标本的电镜样品制备及超薄切片技术。方法：选择无色透明纤维，黑色纤维及无色透明薄膜等材料，进行脱水，环氧树脂包埋，超薄切片。结果：切出满意切片，并在电镜下拍摄出高质量的照片。结论：根据非生物标本的特性成功地进行了电镜样品制备及超薄切片，使材料科学的超微结构研究成为可能。     

制作和选择锐利玻璃切片刀的体会

在透射电镜生物样品制备过程中,超薄切片是最基本的常规制样技术。要想切出厚度仅有30～40nm的超薄切片并不是一件容易的事。除了要求电镜制样人员在取材、固定、脱水、浸透、包埋等步骤严格保证质量外,最关键的是制作并选择出锐利的玻璃切片刀。现结合自己的制作经验谈几点粗浅体会: 1.制作玻璃刀所用的玻璃条必须为不含杂质的硬质玻璃,其厚度要求为5～6mm,最好选用进口玻璃条。     

疑难超薄切片技术的探讨

超薄切片工作是整个电子显微技术工作中的重点与难点。一个电镜室具有水平高超的观察经验和电镜调试维修的技能,如没有一张好的切片,也无法进行观察。因此,超薄切片的质量是电镜技术的基础。影响切片质量的因素很多,现总结多年来超切实践和克服疑难切片的经验,供同行参考、讨论。     

浅谈超薄切片实验教学

超薄切片技术是电镜技术的基础，其制备和观察是研究生电镜实验课学习的重点和难点。如何在有限的时间内使学生较有兴趣地主动地制样和观察，并获得最好的学习效果，是值得探讨的问题。笔者在几届研究生超薄切片实验教学中的经验和体会如下。１　激发学生学习兴趣，提高学生动手能力超薄切片技术程序繁琐，每一步都有严格要求，对初学者有一定的难度。笔者针对授课对象是研究生，先介绍数篇往届研究生毕业论文的电镜部分内容，一方面说明电镜是研究生开展科研工作的手段，从某种意义上讲，是其完成学位论文的先决条件；另一方面使学生清楚超…     

介绍一种免疫电镜标本定位方法

免疫电镜标本制备方法有:组织块免疫染色法,冰冻切片免疫染色法,超薄冰冻切片法。其中以冰冻切片法最常用,免疫电镜成功与否受很多因素影响,标本块的定位十分重要。国外多用半簿切片定位,即先切一、二张0.5～2μ的大面积切片,在光学显微镜观察,找出免疫酶反应部位。然后将标本与切片对照,进行修块,再制超薄切片。最近我们开展对免疫电镜研究,发现用上法对冰冻切片免疫染色的电镜标本定位不     

电镜半薄切片制备方法的改进

透射电子显微镜生物标本制备中，半薄切片(厚度0．6～0．8μm)的制备是一种常用制样手段。半薄切片图像的清晰度、分辨率远优于石蜡切片，视野大于超薄切片，有利于获得高质量的光镜图像，同时也是电镜超薄切片技术中一种有效的定位方法。半薄切片制备中的一些关键技术如切片、捞片、脱脂、     

超薄切片玻璃刀“废刀”的再用

在电镜观察生物样品中,以超薄切片最为常用。要研究细胞超微结构必须用超薄切片机,将标本切成适宜于电镜观察厚度的超薄切片。目前国内外电镜实验室在制作超薄切片时,除少数采用钻石刀外,绝大多数是用玻璃刀来切片。此种制刀的玻璃要求较高,制成的刀口要锋利平整,但玻璃刀一般在切过一个组织块后就不能再用,因此制刀玻璃的耗量较大。有些电镜单位为了寻找合用的玻璃,要花不少代价,甚至向国外进口,有时因找不到适用的玻璃,而影响科研工作的开展。为了适应科技工作要大干快上的形     

应用Spurr树脂包埋剂结合多次离心技术制备血液电镜标本

目的：探讨Spurr树脂包埋剂是否适合制备血样电镜样品。方法：多次离心技术制备血样，并对原始的Spurr配方进行改良。改变增塑剂乙二醇二甘油醚的量，调节包埋块的硬度，使其适合制备体液样品的电镜超薄切片。结果：超薄切片上红、白细胞排列紧密，每个视野可见多个细胞。与常规的Epon树脂包埋剂相比，明显增加了可供观察的信息量。细胞的结构清晰，未见明显的聚合损伤以及人工假象等。结论：Spurr树脂包埋剂是制备血样电镜标本的良好包埋剂。     

一种改进的厚切片染色法

在电子显微镜技术中,为了观察正常或病变组织细胞,样品必须切得很薄,通常为500左右,这种切片叫做超薄切片。在进行超薄切片之前,为了得到电镜包埋材料进行定位,同时便于光学显微镜观所见同电镜     

超薄切片玻璃刀应用中的体会

超薄切片玻璃刀应用中的体会段玮北京市海军总医院电镜室，１０００３７关键词电子显微镜；标本；切片刀；玻璃刀下面就超薄切片中玻璃刀应用谈一些体会。１方法切片刀的制备是超薄切片成败的关键之一。玻璃刀制作简便，且价格低廉。制作得法也可得到很锐利的刀刃。制刀的...     

河北医学院举办“电镜技术与超微结构”讲习班

受河北省教委和省分析仪器技术学会,河北省电镜分会委托,于1989年10月9日至10月21日举办“电镜技术与超微结构讲习班”。来自北京、内蒙、青海、河南及河北省有关大专院校及科研人员近30人参加学习。讲习班任课教师为河北医学院电镜中心及有关教研组,具有一定育学经验的教师担任。育学内容包括两品分:①电镜技术部分:透射与扫描电镜的结构、原理及使用,超薄切片技术,扫描电镜样品的制备,生物样部     

滴管式超薄切片染色法

超薄切片染色是电镜生物样品制备过程中的重要环节,染色的好坏直接影响到电镜观察。在常规铅染色过程中常因空气中微量的二氧化碳介入,与染液中的铅反应,形成颗粒大小不等的碳酸铅沉淀附着在超薄切片上污染切片、污染严重时甚至无法观察。为此,人们为了克服超薄切片的污染问题采用了一系列措施,但这些措施各有不足之处。我们在工作实践中,并在有关文献的启示下,制作了一种封闭式超薄切片染色器,经近1年的使用,效果良     

透射电镜样品取材应注意的问题

医学超微结构是一个不断被刷新的形态学领域,透射式电子显微镜技术被广泛地应用于生物医学的研究中。生物医学的研究对象很多,有组织、细胞、微生物及生物大分子等等,在做这些电镜样品超薄切片前的制样过程时间长而复杂,尤其对取材有严格的要求。标本的质量好坏,直接影响到观察和超微病理诊断的正确性,值得格外重视,因此对标本制备的每一个步骤都要重视。而标本的收集则为制备工作的第一步,它的好坏直接影响到标本制备的后续步骤与最后结果。在实际工作中有些十分珍贵的样品,由于固定原因,样品大小不符和规定或部位不准确,造成超薄切片的定…     

环氧树脂连续半薄切片制备技术

在制备超薄切片之前,有些生物样品需要制作半薄切片,在光镜下确定所要观察的结构,并在环氧树脂包埋块上对此结构进行准确的定位,避免盲目的超薄切片,从而提高电镜的观察效率。用环氧树脂包埋的生物样品,如果采用适宜的染色方法对半薄切片进行染色,在光镜下观察,可获得比石蜡切片保存的更多的结构     

半薄切片技术

半薄切片(semithin section)又称厚切片(thick section).是相对于电镜的超薄切片(Ultrathin section)而讲的。半薄切片厚度是0.5～2μ,介于光镜石蜡切片(7μ)和电镜超薄切片(0.07μ)之间。半薄切片的制法是按电镜常规制备的树脂包埋组织块,在超薄切片机或经     

透射电镜样品超声波和微波处理快速制备方法的研究

目的：透射电镜样品制备时间比较长,而临床病理诊断要求提高电镜样品制备速度,以满足临床电镜病理诊断的需要。方法：通过超声波和真空对样品在固定过程和浸透过程进行处理,以提高样品制备速度。结果：实验表明利用超声波和微波处理的样品仅用24h左右,而且样品固定充分,浸透均匀,样品硬度适中,半薄和超薄切片质量比较好。结论：电镜下图像清晰,能够反映细胞的超微结构,可以满足临床电镜病理诊断的需要。