细胞凋亡在阿霉素大鼠肾病模型中的作用

目的：探讨细胞凋亡在阿霉素肾病中的作用及其机制。方法：将30只体重250－300g的Wistar雄性大白鼠随机分为3组,给模型组和SOD组一次性尾静脉注射阿霉素7．0mg/kg,SOD组于注射阿霉素30min后,每天尾静脉注射超氧化物歧化酶（SOD)1．8mg/kg,对照组注射等量生理盐水,于实验第7天,第14天,第28天分别用代谢笼留取24h尿液,测定尿蛋白,第28天末处死动物,取贤皮质做常规病理检查,电镜检查,并用原位末端标记法检测肾小球,肾小管细胞凋亡情况,肾皮质匀浆丙二醛（MDA）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)水平分别用硫代巴比妥酸比色法,还原型谷胱甘肽消耗法测定。结果：模型组肾小球,肾小管细胞凋亡数及肾皮质MDA水平明显高于对照组（P＜0．01）,GSH－Px水平则明显低于对照组（P＜0．01）,SOD组肾小球,肾小管,细胞凋亡数及肾皮质MDA水平明显低于模型组（P＜0．01）,GSH－Px水平则明显高于模型组（P＜0．01）,结论：阿霉素肾病鼠发病与病鼠肾小球,肾小管细胞亡有密切关系,而病鼠肾小球,肾小管细胞凋亡与氧自由基（OFR）有关。     

阿霉素肾病大鼠肾小管Smad7表达与细胞凋亡的关系

目的 研究阿霉素肾病大鼠肾小管Smad7表达改变与细胞凋亡的关系.方法 建立大鼠阿霉素肾病模型,RT-PCR半定量分析肾皮质中Smad7 mRNA的表达水平,免疫组化分析Smad7蛋白的定位和表达,用TUNEL法分析细胞凋亡.结果 肾病组肾小管中Smad7 mRNA、蛋白的表达均上调,与肾小管上皮细胞凋亡呈正相关.结论 阿霉素肾病大鼠肾小管中Smad7表达增加与肾小管上皮细胞凋亡相关.     

辛伐他汀对高脂血症大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的观察辛伐他汀对高脂血症大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡的影响。方法采用高脂饲料喂养的方法建立高脂血症大鼠模型,将普通饲料喂养的SD大鼠设为正常对照组7只,成模大鼠随机分为高脂血症组10只及辛伐他汀组10只,药物干预4周后,处死大鼠取主动脉测定平滑肌细胞凋亡率。结果与高脂血症模型组比较,辛伐他汀组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)均明显下降(P<0.05或P<0.01)。与高脂血症模型组比较,辛伐他汀组肝细胞脂肪变性的程度明显减轻。辛伐他汀组主动脉平滑肌细胞凋亡率为(34.8±1.86)%,高于高脂血症组主动脉平滑肌细胞凋亡率(27.1±1.37)%(P<0.01)。结论辛伐他汀能够降低高脂血症大鼠血脂,增加高脂血症大鼠平滑肌细胞凋亡率,延缓动脉粥样硬化的发生。     

辛伐他汀对糖尿病肾病大鼠尿足细胞排泄的影响

目的:观察辛伐他汀对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠尿蛋白及尿足细胞排泄的影响?方法:雄性SD大鼠运用STZ法制作DN模型,设立正常对照组?DN组及辛伐他汀处理组?于实验第12周收集大鼠24 h尿检查尿白蛋白,间接免疫荧光法检测大鼠尿沉渣的podocalyxin用于检测尿中足细胞的数量?结果:他汀药物组与糖尿病肾病模型组(DN组)相比,空腹血糖(FBG)无明显下降,但总胆固醇(TCHO)?血肌酐(Scr)?24 h尿蛋白定量均显著下降?同时,对照组SD大鼠尿中很少见到足细胞的排泄,而DN组尿排泄足细胞显著增多,应用辛伐他汀治疗12周后,排泄足细胞数虽然仍比正常对照组高,但与DN组相比明显减少,差异有显著性?结论:糖尿病大鼠尿足细胞排泄明显增加,而辛伐他汀处理可减少尿蛋白及足细胞的排泄,可保护肾功能?     

糖尿病大鼠肾皮质细胞过度凋亡

目的 研究糖尿病大鼠肾皮质细胞凋亡的可能机制及其对糖尿病肾病的影响.方法 20只雄性SD大鼠随机分为糖尿病组和对照组.糖尿病大鼠模型采用链脲佐菌素65 mg/kg腹腔注射诱导建立.12周后观察2组体质量、血糖以及血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白等肾功能指标;采用透射电镜和原位末端标记法（TUNEL法）检测大鼠肾皮质细胞凋亡,并用免疫组织化学的方法检测增殖细胞核抗原（PCNA）以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达.结果 建模12周的糖尿病组肾小球和肾小管细胞凋亡明显增多（P＜0.01）,肾小球和肾小管细胞PCNA表达无明显差别（P＞0.05）;与对照组比较,糖尿病组肾小管Bax和Caspase-3表达明显增加（P＜0.01）,Bcl-2表达明显减少（P＜0.05）;2组肾小球都不表达Bax和Bcl-2,糖尿病组肾小球有少量Caspase-3表达.结论 糖尿病大鼠肾皮质细胞过度凋亡.包括Bax、Bcl-2和Caspase-3在内的Caspase依赖的线粒体凋亡途径可能参与了糖尿病状态下肾小管细胞的凋亡;细胞凋亡的增多可能是糖尿病肾病发展的原因之一.     

辛伐他汀诱导大鼠血管平滑肌细胞凋亡及对凋亡相关基因表达的影响

目的 :观察辛伐他汀诱导大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡及可能参与其中的凋亡相关基因。方法 :贴块法体外培养 VSMC,以透射电子显微镜技术、流式细仪 PI/Annexin 双重染色等鉴定细胞凋亡 ;Western印迹杂交法检测 Bax、Bcl- 2蛋白表达及 caspase- 3的激活情况。结果 :加入 30μmol/L辛伐他汀 2 4 h后电镜显示细胞呈典型的凋亡形态 ,PI/Annexin 染色流式细胞仪检测凋亡细胞占 (35 .5± 5 .8) %显著多于对照组 (15 .1± 5 .0 ) %(P<0 .0 5 ) ;辛伐他汀不改变 Bcl- 2蛋白的表达 ,而使 Bax蛋白表达增高并激活 caspase- 3。结论 :辛伐他汀能诱导VSMC产生凋亡 ,并与 Bax表达增高及 caspase- 3的激活有关     

表阿霉素和阿霉素诱导人肝癌细胞凋亡

目的　观察和比较表阿霉素和阿霉素诱导肝癌细胞凋亡的作用 ,为临床治疗肝癌的药物选择提供依据 .方法　用 2 0 μmol· L- 1表阿霉素和阿霉素分别作用于人肝癌细胞株HCC- 92 0 4细胞 3h,换液继续培养 8h.用细胞形态学观察、DNA电泳和流式细胞仪判定细胞凋亡情况 .结果　表阿霉素和阿霉素分别作用于 HCC- 92 0 4细胞 11h后 ,细胞形态学改变均符合凋亡细胞特征 .凋亡细胞分别占细胞总数的13.8%和 13.1% .MTT试验示各实验组与空白对照组间比较相差显著 ,表阿霉素和阿霉素相同剂量处理组之间比较无显著差异 .细胞周期检测表阿霉素组 G1 期、G2 期和 S期分别为 5 6 .4% ,10 .4%和 38.2 % ,阿霉素组分别为 6 1.1% ,8.6 %和 30 .3% ,对照组为 31.1% ,6 1.9%和 6 .0 % .结论　表阿霉素和阿霉素均能有效地诱导人肝癌细胞株 HCC- 92 0 4细胞发生凋亡 ,无明显差异 .     

CXCL16在阿霉素肾病小鼠中的表达及辛伐他汀对其的影响

目的 观察CXC趋化因子配体16(CXCL16)和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)在阿霉素肾病小鼠中表达的变化及其与肾组织形态学的关系,探讨辛伐他汀对阿霉素肾病肾脏保护作用的机制。方法 将15只雄性Balb/c小鼠分为正常对照组、阿霉素肾病组、辛伐他汀治疗组,每组5只,分别进行相应处理。5周后留取血液、24 h尿液,进行一般生化指标及血清ox-LDL的检测;此后处死小鼠,摘取肾脏组织,采用光镜、电镜和双重免疫荧光技术分别观察肾组织形态结构、超微结构和CXCL16、ox-LDL的表达。结果 与正常对照组相比,阿霉素肾病组与辛伐他汀治疗组小鼠血清总胆固醇和ox-LDL水平升高,肾组织CXCL16、ox-LDL表达增强(P均<0.05)。与阿霉素肾病组相比,辛伐他汀治疗组小鼠肾组织CXCL16、ox-LDL表达均有不同程度的降低(P均<0.05),但血清总胆固醇和ox-LDL水平没有明显下降。相关分析显示,肾组织CXCL16表达水平与肾组织病理学慢性指数、肾组织ox-LDL水平呈明显正相关(r结论 辛伐他汀可能通过抑制肾小球足细胞CXCL16的表达,进而减少足细胞对ox-LDL的摄取而发挥肾脏保护作用。     

阿霉素导致大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

应用免疫组化、电泳及电镜观察方法，探讨阿霉素与心肌细胞凋亡的关系。实验结果提示，阿霉素引起心肌细胞凋亡的严重程度与其每次注射的剂量有关，凋亡细胞多呈灶状分布，在坏死灶及其周边多见。     

阿霉素肾病大鼠肾小球中足细胞数量及nephrin、VEGF的表达变化

目的 探讨足细胞的数量及nephrin、VEGF 在阿霉素(ADR)肾病大鼠肾小球中的表达变化及意义.方法 建立ADR诱导的大鼠肾病模型,于不同实验时间点检测血尿生化指标;光镜、电镜观察肾脏病理学改变;免疫组化技术观察足细胞数量、nephrin、VEGF的表达变化.结果 肾病模型组大鼠在第2次注射ADR后1周末足细胞nephrin表达减弱(P<0.05);8周末肾小球VEGF表达增强(P<0.05)、足细胞数量减少(P<0.05);nephrin、足细胞数量与24 h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐呈负相关;VEGF与24 h尿蛋白定量、尿素氮、血肌酐呈正相关.结论 足细胞nephrin的表达减少和分布方式改变可能是大量蛋白尿发生的重要因素,VEGF既参与蛋白尿的产生,又参与肾小球硬化.     

三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织ET-1蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织内皮素-1蛋白及mRNA表达的影响。方法将45只大鼠随机分为5组,正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和三七总皂苷组,手术切除大鼠右侧肾脏并腹腔注射阿霉素建立模型,10周末处死大鼠,无菌取肾脏,进行肾组织HE染色及masson染色,观察肾组织病理形态学改变,采用免疫组织化学及原位杂交方法分析肾组织内皮素-1蛋白及mRNA的表达。结果模型组大鼠肾组织肾小管上皮细胞(TEC)、肾小球系膜细胞(GMC)及肾小球上皮细胞(GEC)胞浆中ET-1蛋白及mRNA表达强阳性,三七总皂苷组大鼠肾组织ET-1蛋白及mRNA表达较模型组显著减少,有统计学意义(P<0.05)。结论三七总皂苷能够减少阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞及肾小球上皮细胞胞浆中内皮素-1蛋白及mRNA的表达,进而起到保护肾功能、延缓慢性肾衰竭的病程进展。     

海带多糖对大鼠阿霉素肾病的抗炎症性损伤治疗作用

目的观察海带多糖对阿霉素肾病大鼠肾组织的抗炎症性损伤治疗作用。方法建立大鼠慢性阿霉素肾病模型,设正常对照组、阿霉素肾病组、海带多糖治疗组,观察比较各组大鼠尿蛋白定量、肾功能、肾组织炎性细胞浸润、外周血淋巴细胞类肝素酶(heparanase,Hpa)mRNA表达,以及肾组织Hpa、IL-6、IL-8表达变化。结果海带多糖治疗组尿蛋白定量、肾功能、肾组织间质炎性细胞浸润、外周血淋巴细胞Hpa mRNA含量、肾组织Hpa、IL-6及IL-8表达均不同程度低于阿霉素肾病对照组。结论海带多糖对阿霉素肾病具有治疗作用,其机制可能通过抑制Hpa以及促炎性因子表达,从而发挥抗炎性损伤治疗作用。     

Protective effect of sulodexide on podocyte injury in adriamycin nephropathy rats

This study examined the effect of sulodexide on podocyte injury in rats with adriamycin nephropathy （AN）. A total of 36 healthy male SD rats were randomly assigned to three groups： control group, AN group and sulodexide treatment group. Rat models of AN were established by a single tail intravenous injection of adriamycin （6.5 mg/kg） in both AN group and sulodexide treatment group. Sulodexide （10 mg/kg） was administered the rats in the treatment group once daily by garage from the first day of model establishment until the 14th day or the 28th day. Samples of 24-h urine and renal cortex tissues were harvested at day 14, 28 after the model establishment. Excretion of 24-h urinary protein was measured by Coomassie brilliant blue method. The pathological changes in renal tissues were observed by light microscopy and electron microscopy respectively. Heparanase mRNA was detected by RT-PCR. Expressions of desmin, CD2AP and heparanase were determined by immunohistological staining. The results showed that the expressions of heparanase mRNA and protein were increased in the glomeruli of AN rats at day 14 and 28 after the model establishment, which was accompanied by the increased expression of desmin and CD2AP. The mRNA and protein expression of heparanase was decreased in the sulodexide-treated rats as compared with AN rats at day 14 and 28. And, the protein expression of desmin and CD2AP was reduced as with heparanase in the sulodexide-treated rats. Proteinuria and podocyte foot process effacement were alleviated in the AN rats after sulodexide treatment. There was a positive correlation between the expression of heparanase and the expression of desmin and CD2AP （as well as 24-h urinary protein excretion）. It was concluded that increased heparanase is involved in podocyte injury. Sulodexide can maintain and restore podocyte morphology by inhibiting the expression of heparanase in AN.     

淫羊藿苷对阿霉素肾病大鼠肾损伤的影响及其协同激素增效机制的研究

目的 探究淫羊藿苷（ICA）通过炎症-纤维化反应对阿霉素肾病模型大鼠肾损伤的影响及其协同激素增效的作用机制。方法 60只SD大鼠随机取12只作为空白组,其余48只复制阿霉素肾病模型,分为模型组、泼尼松组、ICA组及联合组,每组12只。泼尼松组按6.3 mg/（kg·d）剂量予以泼尼松,ICA组按50 mg/（kg·d）剂量予以ICA,联合组按泼尼松组和ICA组的药物剂量予以泼尼松+ICA,空白组和模型组仅予以0.9%生理盐水按1 mL/100 g剂量灌胃,并连续灌胃6周。全自动血液生化分析仪检测血清白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）;酶联免疫吸附试验检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、纤维黏连蛋白（FN）;Western blotting检测SPARC蛋白表达;Masson染色法观察肾组织病理学改变。结果 与空白组相比,模型组大鼠肾小球基底膜沉积物逐渐增多,肾小球硬化和肾小管间质纤维组织增生,广泛间质纤维化;与空白组相比,24 h尿蛋白量升高,ALB、Scr降低,BUN、IL-1β...     

柴苓归芪汤加蚓激酶对实验性肾病综合征大鼠肾功能的保护作用

目的:探讨柴苓归芪汤加蚓激酶对实验性肾病综合征大鼠肾功能的保护作用.方法:采用尾静脉一次性注射阿霉素5 mg/kg制作肾病大鼠模型,随机分为模型组、辛伐他汀组、柴苓归芪组,并设正常对照组.造模1周后,予以药物干预,共用药5周.采用三氯乙酸法测定大鼠24 h尿蛋白含量;全自动生化分析仪检测血清总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,Alb)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)、肌酐(creatinine,Cr)及血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN).光镜、电镜下观察肾组织病理形态学变化.结果:模型组与正常对照组比较,24 h尿蛋白定量及血清TC、TG、LDL、Cr、BUN均明显升高(P＜0.05或P＜0.01);血清TP、Alb、HDL则明显降低(P＜0.01).柴苓归芪汤组24 h尿蛋白定量及血清TC、TG、LDL、Cr、BUN均明显低于模型组(P＜0.05或P＜0.01);而血清TP、Alb和HDL则明显高于模型组(P＜0.05或P＜0.01).肾组织病理形态学观察:模型组光镜下部分肾小球呈局灶节段性硬化,近曲小管上皮细胞变性肿胀,部分小管腔内可见蛋白管型,间质可见散在的纤维增生;电镜下肾小球上皮细胞足突广泛融合.柴苓归芪汤组未出现肾小球硬化,肾小管间质病变明显减轻,肾小球上皮细胞足突少量融合.结论:柴苓归芪汤能够降低大鼠尿蛋白,调节脂质代谢紊乱,保护肾脏功能,延缓肾脏疾病进展.     

Protective effects of eplerenone on podocyte injury in adriamycin nephropathy rats

To investigate the protective effects of eplerenone on adriamycin-induced renal injury and the possible mechanisms involved,36 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into control group,adriamycin nephropathy(AN) group and eplerenone-treated group(100 mg.kg-1.d-1 eplerenone).Blood pressure,24-h urinary protein,serum potassium,sodium and creatinine were measured 28 days after adriamycin injection(a single tail intravenous injection of 6.5 mg/kg adriamycin).The morphological changes of renal tissues were observed by light and electron microscopy.Immunohistochemistry and Western blotting were performed to examine the expression of TGF-β1 and desmin in renal cortex.The results showed that 28 days after adriamycin injection,there were no significant changes in the level of serum potassium,sodium,creatinine concentrations and blood pressure values in the rats of the three groups.Meanwhile,the 24-h proteinuria excretion in the AN group was significantly higher than that in the control group(P<0.01),but that in the eplerenone-treated group was substantially reduced when compared with that in the AN group(P<0.05).Mild mesangial cell proliferation and matrix expansion,diffuse deformation and confluence of foot processes in podocytes were found in the AN group.By contrast,rats in the eplerenone-treated group exhibited obvious attenuation of these morphological lesions.The protein expression of TGF-β1 and desmin in the AN group was markedly up-regulated in contrast to that in the control group(P<0.01),whereas that in the eplerenone-treated group was much lower than in the AN group(P<0.05).It was concluded that eplerenone may ameliorate the proteinuria and the development of pathological alteration in adriamycin-induced nephropathy presumably via the inhibition of cytokine release,and restore the morphology of podocytes independent of its blood pressure-lowing effects.     

超氧化物歧化酶对阿霉素肾病大鼠的保护作用

目的：探讨超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）在肾病变的发病机理及保护作用。方法：制造阿霉素（ＡＤＲ）大鼠肾病模型,测定ＳＯＤ活性及相关生化指标,并给予ＳＯＤ治疗。结果：ＡＤＲ组红细胞ＳＯＤ及血浆蛋白浓度明显低于正常对照组,ＳＯＤ治疗后２４ｈ尿蛋白定量及相应生化指标均有明显改善。结论：ＳＯＤ有助于防治并改变微小病变型肾病变的病程。     

金钱草提取物对阿霉素肾病大鼠血脂及凝血功能的影响

目的观察金钱草提取物对阿霉素肾病血脂、凝血功能的影响,进一步对其疗效作出客观的评价。方法将雄性SD大鼠6O只,随机分为6组：空白对照组、模型对照组、激素对照组、激素加中药低剂量组、激素加中药中剂量组、激素加中药高剂量组。检测尿蛋白定量、血脂及出凝血时间。结果金钱草提取物对尿蛋白升高有抑制作用;激素加金钱草低、中、高剂量组Tch水平较激素组明显降低、而对TG、LDL的作用中、低剂量组不明显,高剂量组降低较明显;激素加金钱草提取物高剂量组TT、PT、APTT较单纯激素治疗组明显延长（P〈0.05）,FIB含量明显减少。结论金钱草提取物对阿霉素肾病大鼠有调节脂质代谢紊乱,改善凝血的作用。     

甘草甜素对大鼠阿霉素肾病的保护作用

目的观察甘草甜素对大鼠阿霉素肾病肾组织层黏连蛋白(laminin,LN)的表达及尿蛋白排泄的影响,探讨甘草甜素对大鼠阿霉素肾病的发生、发展是否具有保护作用。方法18只SD雄性大鼠随机分为3组正常对照组、模型组、甘草甜素治疗组。模型组和甘草甜素治疗组大鼠采用尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型。甘草甜素治疗组予以甘草甜素灌胃8周,正常对照组和模型组大鼠予以等量生理盐水灌胃。检测各组大鼠24h尿蛋白定量及血清肾功能指标。观察各组大鼠肾组织病理学改变。采用免疫组织化学方法检测肾组织LN的表达水平。结果甘草甜素治疗组于用药第4、8周24h尿蛋白定量与同期模型组相比,均有明显改善,差异有统计学意义。甘草甜素治疗组大鼠肾组织病理学改变亦较模型组明显减轻,且肾组织LN的表达亦明显下降,差异有统计学意义。结论甘草甜素对大鼠阿霉素肾病具有一定的保护作用,可以减少尿蛋白的排泄、改善肾功能及减轻肾小球硬化的病理学改变。甘草甜素延缓肾小球硬化的进程,可能与降低肾组织LN的表达从而抑制细胞外基质的积聚相关。     

海昆肾喜对阿霉素肾病大鼠肾组织PDGF-BB蛋白及mRNA表达的影响

目的:研究海昆肾喜对阿霉素肾病大鼠肾组织血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)蛋白及mRNA表达的影响。方法:将54只阿霉素肾病模型大鼠随机分为6组:正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、海昆肾喜低剂量组及高剂量组。实验第10周观察各组大鼠24 h尿蛋白定量,肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平及肾组织形态学变化;应用免疫组化及原位杂交方法分别观察PDGF-BB蛋白及mRNA在肾组织中的表达。结果:海昆肾喜低剂量组及高剂量组24 h尿蛋白定量和SCr、BUN水平较模型组均明显降低。PDGF-BB蛋白及mRNA的表达见于肾小管上皮细胞胞浆及肾小球系膜细胞,其表达较模型组显著减少。结论:海昆肾喜能抑制阿霉素肾病大鼠肾组织PDGF-BB蛋白及mRNA的表达,这可能是该药物防治肾小球硬化的作用机制之一。