5-羟甲基-2-糠醛(5-HMF)在中药复方中的研究现状及相关药效探讨

本文总结了化合物5-羟甲基-2-糠醛（5-hydroxymethyl-2-furfural）的一般形成过程和存在状况，归纳了其药理作用，并概括了5-HMF在中药复方中的研究现状。作者在此基础上提出：5-HMF可能是中药复方中的一个未被人们所了解的活性成分，其在中药复方中可能发挥着独特药效。     

5-羟甲基-2-糠醛（5-HMF）在中药复方中的研究现状及相关药效探讨

本文总结了化合物5-羟甲基-2-糠醛（5- hydroxymethyl-2-furfural）的一般形成过程和存在状况,归纳了其药理作用,并概括了5-HMF在中药复方中的研究现状。作者在此基础上提出:5-HMF 可能是中药复方中的一个未被人们所了解的活性成分,其在中药复方中可能发挥着独特药效。     

5-羟甲基糠醛（5-HMF）在中药中的研究现状探讨

总结了5-HMF的形成、存在、性质等概况，归纳了其毒副作用及药理作用的研究现状，并且探讨了实验室现阶段的研究结果，提出5-HMF可能会被作为中药中一个新的活性成分加以研究，并认为它对阐明中药的作用有着重要的意义。     

HPLC-UV法测定五味子中5-羟甲基糠醛

目的建立五味子药材中5-羟甲基糠醛(5-HMF)的定量测定方法。方法采用HPLC-UV,Diamonsil C18(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.5%醋酸水(15∶85);检测波长284 nm;体积流量1 m L/min;柱温30℃。结果 5-羟甲基糠醛在1.14~18.21μg/m L范围内线性关系良好,平均回收率为100.1%,RSD为1.0%。五味子鲜果和干燥种子中均未检出5-HMF,干燥果肉中5-HMF含有量较高,12批五味子中5-羟甲基糠醛的含有量范围为0.09~2.40 mg/g。结论五味子中的5-羟甲基糠醛主要是由五味子鲜果果肉在加热烘干过程中产生,不同批号的五味子中5-HMF的量差异较大。     

2 - 羟甲基 - 3 ， 5 ， 6 - 三甲基吡嗪 棕榈酸酯的合成及其静脉乳剂的制备

 目的 研制 2- 羟甲基 -3,5,6- 三甲基吡嗪的前药 2- 羟甲基 -3 , 5 , 6- 三甲基吡嗪棕榈酸酯静脉乳剂,以期延长川芎嗪的生物半衰期。 方法 以川芎嗪为原料,经氧化、酰化、水解、酯化等反应合成 2- 羟甲基 -3 , 5 , 6- 三甲基吡嗪棕榈酸酯,进而以大豆油为油相,注射用大豆磷脂与泊洛沙姆 188 为乳化剂,制备其初乳,再经高压乳匀机匀化,制得其静脉乳剂。 结果 所得产物经核磁共振氢谱、质谱、元素分析及紫外光谱确证其结构为 2- 羟甲基 -3 , 5 , 6- 三甲基吡嗪棕榈酸酯,色谱纯度大于 98% , 乳剂平均粒径为 253.2 nm , Zeta 电位为 - 28.7 mV ;长期留样放置 12 个月,制剂外观性状、粒径、 Zeta 电位、 pH 及含量等指标均未见明显变化。 结论 研制的 2- 羟甲基 -3 , 5 , 6- 三甲基吡嗪棕榈酸酯乳剂理化性质稳定,可达到静脉注射制剂要求,为进一步考察其药动学奠定了基础。     

山茱萸炮制前后5-羟甲基糠醛的含量变化研究

目的:测定并考察山茱萸炮制前后5-羟甲基糠醛的含量变化。方法:采用RP-HPLC法测定山茱萸生、制品不同溶剂提取液中的5-羟甲基糠醛的含量。结果:山茱萸经酒蒸制后,甲醇超声提取液中5-羟甲基糠醛含量由0.06上升到0.78,上升率为1200;水煎液中5-羟甲基糠醛含量由0.24上升到0.84,上升率为250。结论:山茱萸经酒蒸制后,5-羟甲基糠醛含量显著地提高,加热也使5-羟甲基糠醛含量增加,实验结果为制定山茱萸饮片的质量标准提供了一定的依据。     

HPLC法测定党参中5-羟甲基糠醛的含量

目的：建立党参中己糖降解产物5-羟甲基糠醛（5-HMF）的含量测定方法,对党参药材中的5-羟甲基糠醛进行含量测定。方法：采用Agilent Extend-C18（250 mm＆#215;4.6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.3%醋酸溶液（3∶97）为流动相,检测波长284 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃。结果：5-羟甲基糠醛在浓度为2.538～63.45μg/mL范围内与峰面积具有良好的线性关系（r=0.9998）,精密度和重复性的RSD分别为0.8％和2.5%。结论：该方法操作简便,结果准确可靠,可用于党参中5-羟甲基糠醛的含量测定,为进一步评价党参的安全性提供参考。     

地黄炮制前后5-羟甲基糠醛含量的研究

目的研究地黄炮制前后5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量变化。方法采用RT-HPLC法测定生地黄与熟地黄5-HMF的含量。结果不同地区生地与熟地5-HMF含量明显存在差异,以河南产地的熟地5-HMF含量最高,炮制后增加约20倍。同一产地河南,而不同药店的熟地5-HMF的含量也存在明显差别,以广济药业的熟地含量最高,其含量也相对稳定约2.3μg/g。结论地黄炮制为熟地后5-HMF会大量产生,且地区不同其含量也不同。     

女贞子炮制前后5-羟甲基糠醛的含量变化

目的 研究女贞子炮制前后5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl furfural,5-HMF)的含量变化.方法 制备不同炮制条件的女贞子,采用HPLC法测定女贞子生品及炮制品中5-HMF的含量.结果 女贞子生品未检测到5-HMF,炮制后产生5-HMF,不同炮制品中的含量依次为:酒炖品＞清蒸品＞酒蒸品,且随蒸制时间延长含量增加.结论 首次建立了HPLC测定女贞子中5-HMF含量的方法,该法稳定可靠,可用于其质量控制;蒸制方法和蒸制时间均对5-HMF的含量变化有影响,这种改变是否与炮制增效有关,值得进一步研究.     

炮制对女贞子中多糖和5-羟甲基糠醛含量的影响

目的:研究炮制对女贞子中多糖和5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量的影响,探讨女贞子酒制过程中多糖和5-HMF含量的变化规律.方法:对女贞子生品和加黄酒炖制不同时间(4、8、12、16、20、24 h)酒炖品中多糖和5-HMF含量进行测定比较.结果:6种酒炖品中多糖含量较生品降低5.54%～49.88%;女贞子生品中5-HMF含量仅有0.015%,而6种酒炖品中5-HMF含量较生品增加2 146.67%～7 326.67%;且随着炖制时间的延长,炮制品中多糖含量逐渐降低、5-HMF含量逐渐增加.结论:炖制时间对女贞子中多糖和5-HMF含量均有显著影响,女贞子炮制后可产生5-HMF.     

补肾调肝清心方对围绝经期抑郁症睡眠障碍大鼠模型海马5-羟色胺1A受体、5-羟色胺2A受体的影响

目的：观察补肾调肝清心方对围绝经期抑郁症睡眠障碍模型大鼠海马5-羟色胺1A受体（5-hydroxytryptamine 1A receptor,5-HT1AR）、5-羟色胺2A 受体（5-hydroxytryptamine 2A recep-tor,5-HT2AR）的影响。方法将60只围绝经期大鼠按体重随机分为5组,每组12只：围绝经期正常对照组（ A）;围绝经期抑郁症睡眠障碍模型组（ B）;围绝经期抑郁症睡眠障碍补佳乐治疗组（ C）;围绝经期抑郁症睡眠障碍米氮平治疗组（ D）;围绝经期抑郁症睡眠障碍中药治疗组（ E）;A组为围绝经期正常大鼠,其余4组进行18天不可预知慢性应激。于应激后对造模动物进行72小时连续快速眼相睡眠剥夺（ REM）。每天在应激前1小时按组给药。在末次灌胃24小时后,颈椎脱臼法处死大鼠,取大鼠海马,分别用荧光定量检测海马5-HT1ARmRNA和5-HT2ARmRNA、蛋白印迹和免疫荧光检测海马5-HT1AR和5-HT2AR的表达。结果蛋白印迹检测（ western blot）海马及免疫荧光检测海马CA1区均显示：海马区5-HT1AR表达水平各组无明显差异（P〉0．05）,而5-HT2AR表达水平上,模型组显著低于正常组（P〈0．05）,治疗组提高了5-HT2AR的表达水平,且与模型组相比存在显著性差异（P〈0．05）;RT-PCR显示：海马区5-HT1AR mRNA水平各组无明显差异（P〉0．05）,而5-HT2AR mRNA水平,模型组明显低于正常组（P〈0．01）,米氮平组较模型组有极显著性差异（P〈0．001）,中药组较模型组有显著性差异（P〈0．05）。结论补肾调肝清心方能提高5-HT2AR的mRNA及蛋白水平的表达,免疫荧光的结果表明在海马CA1区发挥作用,表明补肾调肝清心方可以通过调节海马CA1区5-HT2AR表达来改善睡眠障碍。     

慢性应激对大鼠海马区5-HT2AR及其mRNA表达的影响

目的：探讨慢性应激对大鼠海马区5-HT2A受体及其mRNA表达的影响。方法：选择open-feild法评分相近的20只成年SD大鼠随机分为对照组和模型组。应用分养和长期不可预见的中等强度应激造成大鼠抑郁模型，以免疫组化法和原位杂交法检测大鼠海马5-HT2AR及其mRNA的表达。结果：（1）模型组体重增长14d时明显低于对照组。（2）模型组水平活动和垂直活动于第7天后明显降低；糖水消耗量于第14天后明显减少。（3）模型组海马5-HT2AR及其mRNA表达均低于对照组（均P〈0．01）。结论：慢性应激能诱发大鼠轻度抑郁，其机制与海马5-HT2AR及其mRNA的低表达有关。     

针刺对5-HT致痒大鼠IgE与5-HT2A受体的影响

[目的]观察针刺对5-HT致痒大鼠的止痒效果,探讨针刺对5-HT致痒大鼠的行为学指标,以及血清中IgE与皮肤中5-HT2A受体的影响。[方法]64只大鼠随机分为8组,分别为空白对照组、模型组、阳性药物组、常规治疗组、针刺治疗1组、针刺治疗2组、中药治疗1组、中药治疗2组,每组8只。空白对照组和模型对照组予生理盐水灌胃,阳性药物组予喂饲酮舍林,常规治疗组予喂饲开瑞坦,针刺治疗1组针刺委中等穴位,针刺治疗2组针刺血海等穴位,中药治疗1组予当归、生地等中药灌胃,中药治疗2组予乌梅等中药灌胃。取空白对照组大鼠于其颈背部皮内注射10μL0.9%生理盐水,取其余各组大鼠于其颈背部皮内（肩胛连线中点上方5mm处）注射10μL2%5-HT（94mmol/L）溶液。建立瘙痒模型后,观察大鼠搔抓次数,并测定大鼠血清中IgE和皮肤中5-HT2A受体含量。[结果]模型组大鼠血清IgE升高,皮肤内5-HT2A受体升高,搔抓次数增加;两组针刺治疗组大鼠血清IgE降低,皮肤内5-HT2A受体降低,搔抓次数减少。[结论]针刺治疗可降低5-HT致痒大鼠血清中IgE和皮肤内5-HT2A受体的浓度,对其搔抓症状有明显的抑制作用。     

针刺对5-HT致痒大鼠IgE与5-HT2A受体的影响

[目的]观察针刺对5-HT致痒大鼠的止痒效果,探讨针刺对5-HT致痒大鼠的行为学指标,以及血清中IgE与皮肤中5-HT2A受体的影响。[方法]64只大鼠随机分为8组,分别为空白对照组、模型组、阳性药物组、常规治疗组、针刺治疗1组、针刺治疗2组、中药治疗1组、中药治疗2组,每组8只。空白对照组和模型对照组予生理盐水灌胃,阳性药物组予喂饲酮舍林,常规治疗组予喂饲开瑞坦,针刺治疗1组针刺委中等穴位,针刺治疗2组针刺血海等穴位,中药治疗1组予当归、生地等中药灌胃,中药治疗2组予乌梅等中药灌胃。取空白对照组大鼠于其颈背部皮内注射10μL0.9%生理盐水,取其余各组大鼠于其颈背部皮内(肩胛连线中点上方5mm处)注射10μL2%5-HT(94mmol/L)溶液。建立瘙痒模型后,观察大鼠搔抓次数,并测定大鼠血清中IgE和皮肤中5-HT2A受体含量。[结果]模型组大鼠血清IgE升高,皮肤内5-HT2A受体升高,搔抓次数增加;两组针刺治疗组大鼠血清IgE降低,皮肤内5-HT2A受体降低,搔抓次数减少。[结论]针刺治疗可降低5-HT致痒大鼠血清中IgE和皮肤内5-HT2A受体的浓度,对其搔抓症状有明显的抑制作用。     

调肝方药对愤怒、郁怒模型大鼠下丘脑 5-HTR2C基因表达的影响

目的:通过研究愤怒和郁怒模型大鼠下丘脑5-HTR2C基因的表达,探讨愤怒和郁怒的微观发生机制及中药经前平颗粒、经前舒颗粒的作用靶点。方法:居住入侵法制备愤怒和郁怒证模型大鼠,经前平颗粒、经前舒颗粒干预,均10 g·kg-1,ig,分别为正常组、模型组、经前舒组、经前平组;运用半定量RT-PCR和Western blot方法检测大鼠下丘脑区5-HTR2C mRNA及其蛋白表达水平。结果:与正常组相比较,愤怒组和郁怒组大鼠下丘脑中5-HTR2C mRNA和蛋白相对水平均极显著性降低(P<0.01);愤怒组大鼠的相对表达水平改变明显强于郁怒组大鼠;用药后,与模型组相比较,5-HTR2C mRNA均得到显著性改善,但与正常组相比仍极显著性下降(P<0.01),而蛋白改变均得到极显著性改善,与正常组相比无统计学差异。结论:模型组大鼠下丘脑与5-HTR2C基因表达极显著降低,调肝方药干预可显著上调模型大鼠下丘脑5-HTR2C mRNA和蛋白表达,说明5-HTR2C基因与愤怒和郁怒证相关,并且可能是经前平颗粒和经前舒颗粒治疗该证的作用机制之一。     

5-杂氮-2’-脱氧胞苷抑制人喉癌细胞生长机制的研究

 目的观察5-杂氮-2’-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌细胞系生长增殖的影响,探讨其抗肿瘤效应及可能的机制。方法用5- 杂氮-2’-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌细胞系处理后,甲基化特异性PCR(MSP),T-A克隆测序分析死亡相关蛋白激酶(death-associ- ated protein kinase,DAPK)基因甲基化状态,逆转录聚合酶链反应、免疫细胞化学、流式细胞仪检测用药前后DAPK mRNA和蛋白的表达情况及细胞凋亡和周期的变化。结果未经5-杂氮-2’-脱氧胞苷处理的Hep-2细胞中DAPK基因CpG岛甲基化,且 DAPK mRNA不表达。经5-杂氮-2’-脱氧胞苷处理后,甲基化的DAPK基因部分去甲基化,大于或等于10^-7 mol·L^-1组的细胞中有DAPK mRNA表达,且表达随浓度增高而增强。免疫细胞化学染色显示,经处理后的肿瘤细胞DAPK蛋白表达呈阳性,而对照组不表达。流式分析结果为处理后凋亡率明显增加,且G₁期细胞增加,G₂/M期减少。结论 5-杂氮-2’-脱氧胞苷能抑制喉癌细胞的生长和增殖,可能的机制是其能使因甲基化而失活的DAPK基因再转录,诱导该基因的重新表达。     

新正天丸对偏头痛患者血小板5-HT2A受体和粘附分子表达的影响

目的探讨新正天丸对偏头痛患者血小板5-HT2A受体mRNA和粘附分子表达的影响及其相互的关系。方法将68例患者分为2组,治疗组(35例)口服新正天丸,对照组(33例)口服氟桂嗪胶囊。利用RT-PCR技术检测偏头痛患者血小板中的5-HT2A受体mRNA,应用流式细胞仪检测偏头痛患者全血血小板膜CD41和CD62P。结果治疗组疗效优于对照组。偏头痛患者5-HT2A受体mRNA的表达发作期与正常人有显著差异,经新正天丸治疗后可显著降低其表达。偏头痛患者发作期、间歇期血小板膜粘附分子表达均较正常人为高,而新正天丸能明显降低其表达。结论偏头痛患者5-HT2A受体mRNA的表达和血小板膜粘附分子的表达水平均显著增强,新正天丸可能通过降低上述指标的表达抑制血小板活化,从而达到治疗目的。     

槲皮素对自身免疫性前列腺炎模型COX-2及5-LOX表达的影响

目的:建立两种慢性自身免疫性前列腺炎模型,探讨槲皮素(Quercetin)对模型大鼠前列腺组织中炎症因子环氧化酶-2活性(COX-2)、5-脂氧酶(5-LOX)活性、排尿量及尿离子浓度的影响。方法:采用两种自身免疫性前列腺炎大鼠模型:雌二醇诱导的模型(M1)及纯化大鼠前列腺蛋白联合免疫佐剂诱导的模型(M2),分别给药30 d后测定大鼠0⁴h排尿量及尿离子浓度(M1);处死大鼠,取前列腺称重计算前列腺指数;取前列腺液镜下观察白细胞数及卵磷脂小体密度;HE染色制备前列腺组织病理切片并镜下观察;Western Blot法及免疫组化法测定前列腺组织内COX-2及5-LOX的表达。结果:两个模型中,槲皮素200 mg/kg给药组前列腺液内卵磷脂小体密度均明显增加,M1中槲皮素200 mg/kg给药组前列腺指数降低,M2中槲皮素200 mg/kg能明显降低前列腺液中的白细胞数;病理切片中均可见病变明显改善;两种模型中前列腺组织内COX-2及5-LOX表达明显被抑制;槲皮素200 mg/kg组对模型大鼠尿液中的Na+和Cl-的排出有明显的促进作用,但对K+的影响并不十分显著(M1);槲皮素(200 mg/kg、100 mg/kg)组能明显增加水负荷大鼠04h排尿量及尿离子浓度(M1);处死大鼠,取前列腺称重计算前列腺指数;取前列腺液镜下观察白细胞数及卵磷脂小体密度;HE染色制备前列腺组织病理切片并镜下观察;Western Blot法及免疫组化法测定前列腺组织内COX-2及5-LOX的表达。结果:两个模型中,槲皮素200 mg/kg给药组前列腺液内卵磷脂小体密度均明显增加,M1中槲皮素200 mg/kg给药组前列腺指数降低,M2中槲皮素200 mg/kg能明显降低前列腺液中的白细胞数;病理切片中均可见病变明显改善;两种模型中前列腺组织内COX-2及5-LOX表达明显被抑制;槲皮素200 mg/kg组对模型大鼠尿液中的Na+和Cl-的排出有明显的促进作用,但对K+的影响并不十分显著(M1);槲皮素(200 mg/kg、100 mg/kg)组能明显增加水负荷大鼠0⁴h的排尿量,与对照组比较差别具有统计学意义(M1)。结论:槲皮素可能是通过抑制前列腺组织内COX-2及5-LOX表达从而改善慢性前列腺炎并可能通过促进Na+和Cl-的排出改善模型大鼠排尿困难症状。