1,25二羟维生素D3联合他莫西芬对转染VDRE-Tk-ERα表达载体的MDA-MB-231细胞周期和凋亡的影响

目的构建受1,25二羟维生素D3调控的雌激素受体α真核表达载体(VDRE-Tk-ERα),并观察其对雌激素受体阴性乳腺癌细胞的细胞周期相分布和凋亡的影响.方法利用PCR法体外构建得到含有4个拷贝VDRE和Tk启动子的VDRE-Tk-ERα表达载体,并将其和空载体质粒分别转染入MDA-MB-231细胞中,通过流式细胞仪检测乳腺癌细胞周期相的分布,用TUNEL法检测细胞凋亡的发生. 结果 1,25二羟维生素D3和他莫西芬联合作用较对照组和单独作用组能够显著抑制乳腺癌细胞的周期进程,并能有效诱导肿瘤细胞发生凋亡.结论利用1,25二羟维生素D3靶控雌激素受体α表达载体联合他莫西芬可以阻止雌激素受体α阴性的MDA-MB-231乳腺癌细胞的周期进程并诱导其发生凋亡,从而使原本对他莫西芬耐受的乳腺癌细胞恢复对其的化疗敏感性.     

1,25-二羟维生素D3对胃癌细胞增殖和TNF-α表达的影响

摘要：目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对胃癌SGC-7901 细胞增殖和细胞周期的影响,以及对细胞因子TNF-α
mRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度1,25(OH)2D3处理胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞
仪检测细胞生长周期;RT-PCR和Western blotting分别检测TNF-α在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果1,25(OH)2D3对胃癌
SGC-7901细胞增殖有抑制作用（P<0.05）,并呈时间剂量依赖性。经1,25(OH)2D3处理72 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的动
力学改变（F=9.81,P<0.05）。TNF-α mRNA及蛋白的表达水平均呈剂量依赖性减少（P<0.05）。结论1,25(OH)2D3可抑制胃癌
细胞增殖,且与其抑制TNF-α的表达可能有相关性。
     

1,25-二羟维生素D_3对人胃腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法:1,25-二羟维生素D3作用于MGC-803细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力、平板克隆试验测定细胞集落形成率、流式细胞仪测定细胞周期。结果:1,25-二羟维生素D3作用后胃腺癌细胞生长受抑制,细胞集落形成率明显下降(P<0.05);处理48 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变。结论:1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞有抑制增殖、诱导分化作用。     

1,25-二羟维生素D3的免疫调节机理及其应用进展

1,25-二羟维生素D3[1,25（OH）2D3]不仅具有调节钙磷代谢的作用,还可影响多种细胞的生长和分化,具有调节免疫系统的作用.该文综述1,25（OH）2D3的免疫调节机制,为进一步开发更安全有效的类似物,并作为新兴的免疫调节剂应用于临床提供理论依据.     

维生素D及其活性形式1,25-二羟维生素D_3与糖尿病的关系

糖尿病的发病机制正在研究中,近些年的研究发现,维生素D及其活性形式1,25-二羟维生素D3除传统的调节钙、磷代谢的作用外,还通过刺激胰岛素分泌和减少细胞因子介导的β细胞凋亡途径,在糖尿病的发生、发展中起着关键作用。     

1,25-二羟维生素D3对胃癌细胞增殖和TNF-α表达的影响

目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对胃癌SGC-7901细胞增殖和细胞周期的影响,以及对细胞因子TNF-αmRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度1,25(OH)2D3处理胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期;RT-PCR和Western blotting分别检测TNF-α在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果 1,25(OH)2D3对胃癌SGC-7901细胞增殖有抑制作用(P<0.05),并呈时间剂量依赖性。经1,25(OH)2D3处理72 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的动力学改变(F=9.81,P<0.05)。TNF-αmRNA及蛋白的表达水平均呈剂量依赖性减少(P<0.05)。结论 1,25(OH)2D3可抑制胃癌细胞增殖,且与其抑制TNF-α的表达可能有相关性。     

维甲酸和1,25二羟维生素D3对LoVo细胞株细胞周期的影响

目的 观察全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）和１,２５－二羟维生素Ｄ３对大肠部细胞株ＬｏＶｏ细胞周期的影响。方法 流式细胞术测定细胞周期的分布。结果 ＡＴＡＲ和１,４５－二羟维生素Ｄ３使ＬｏＶｏ阻止在Ｇ０／Ｇ１期,未发现明显的亚Ｇ１峰。结论 单独或联合使用ＡＲＴＡ和１,２５－二羟维生素Ｄ３均具有诱导分化ＬｏＶｏ细胞的作用,这种诱导分化与细胞凋亡无关。     

1,25-二羟维生素D3与小儿呼吸系统疾病研究进展

1,25-二羟维生素D3除调节人体内钙磷平衡外,在呼吸系统还具有重要作用。临床研究发现,1,25-二羟维生素D3缺乏可使罹患支气管哮喘、反复呼吸道感染、肺炎、肺结核、肺癌危险性增高。其在呼吸系统疾病中的作用机制可能包括以下四方面:对免疫细胞的作用;对细胞周期的作用;对细胞凋亡的作用;对生长因子和癌基因的影响。     

1,25-二羟维生素D3及其类似物对免疫系统的调节作用

1,25-二羟维生素D3是维生素D的活性形式,是一种第二类固醇类激素,和维生素D受体（VDR）结合发挥作用。VDR是核受体超家族中的一员,这一核受体超家族还包括类固醇激素受体,甲状腺激素受体和维甲酸受体。1,25-二羟维生素D3调节钙磷代谢,控制细胞的增殖和分化,产生免疫调节作用。对1,25-二羟维生素D3及其类似物功能研究的进展和免疫调节机制的新认识,提示它们在治疗自身免疫性疾病和诱导同种异体移植耐受上可有广泛的应用。1,25-二羟维生素D3及其类似物除了直接作用于T细胞外,还通过各种机制调节抗原呈递细胞的表型和功能,尤其是树突细胞。体内和体外实验都已证明1,25-二羟维生素D3及其类似物诱导树突细胞获得致耐受性,这一特性可被用于人类自身免疫性疾病及同种异体移植排斥的治疗。作者就1,25-二羟维生素D3及其类似物功能研究的新进展和免疫调节机制的新认识作一综述。     

1,25-二羟维生素D3治疗IgA肾病的临床观察

目的 观察1,25-二羟维生素D3治疗IgA肾病的疗效及其安全性.方法 将30例IgA肾病患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组各15例.两组均用双嘧达莫150 mg/d、厄贝沙坦150～300 mg/d,观察组加用1,25-二羟维生素D3 0.25～0.5 μg/d,观察8周.检测治疗前后尿蛋白、肾功能、血钙.结...     

1,25-二羟维生素D3对人胃黏膜上皮细胞恶性转化过程的影响

目的 研究1,25-二羟维生素D3(骨化三醇)在化学致癌剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导的恶性转化过程中对人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞生长、凋亡及Shh、Gli1基因表达的影响. 方法 MNNG诱导GES-1细胞作为对照组,诱导后用不同浓度(10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L)1,25-二羟维生素D3干预(实验组),采取四甲基固氮唑盐(MTT)检测实验组和对照组细胞增殖并确定实验组最佳药物浓度.分为GES-1细胞组、对照组和实验组,流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡率,RT-PCR检测各组细胞Shh、Gli1 mRNA基因的表达. 结果 MTT法显示,对照组细胞出现大量死亡,实验组给予10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L的1,25-二羟维生素D3干预后存活细胞较对照组增多(P＜0.05).取最佳药物作用浓度10-6 mmol/L为实验组,FCM测各组细胞7d的凋亡率分别为实验组(45.73±2.08)％、对照组(85.23±2.08)％、GES-1细胞组(4.9±0.91)％.与对照组相比,实验组细胞凋亡明显减少(P＜0.05).RT-PCR显示Shh mRNA在实验组(0.674 7±0.011 6)、对照组(0.661 6±0.0095)均表达(P＞0.05),Gli1 mRNA实验组(0.338 2±0.015 0)表达低于对照组(0.532 8±0.011 5)(P＜0.05). 结论 1,25-二羟维生素D3有阻止GES-1细胞恶性转化的作用,从而可达到延缓或阻止细胞恶变的目的.其机制可能与通过阻断Sonic Hedgehog(SHH)信号通路有关.     

1,25二羟维生素D_3缺乏与衰老的研究进展

1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]是维生素D的活性形式,其不仅参与调节机体钙磷代谢,还对心血管系统、免疫系统、泌尿系统、神经系统等多系统的活动具有调节作用。研究显示维生素D的减少与多种老年性疾病密切相关,维生素D在控制和改善与衰老相关的疾病方面起到了积极的作用。其机制可能与1,25(OH)2D3可通过调控与细胞衰老和凋亡的相关基因、降低氧化应激、抑制肾素-血管紧张素系统以及减少端粒耗损等有关。     

1,25-二羟维生素D_3对棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的研究1,25-二羟维生素D_3(1,25(OH)_2D_3)对棕榈酸(PMA)诱导THP-1巨噬细胞炎症因子表达的影响及其机制。方法用1,25(OH)_2D_3(10 nmol/L)和/或PMA(250μmol/L)处理THP-1巨噬细胞6 h,采用荧光定量PCR和酶联免疫吸附法(ELISA)法检测肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10的表达水平;用1,25(OH)_2D_3和/或PMA处理THP-1巨噬细胞60 min,采用免疫印迹(Western-blot)法检测AMPKα1和磷酸化AMPKα1(p-AMPKα1)水平。结果 1,25(OH)_2D_3(10μmol/L))明显抑制PMA(250μmol/L)作用下THP-1巨噬细胞TNFα、IL-1β和IL-6的表达,并上调IL-10的表达;1,25(OH)_2D_3显著上调THP-1巨噬细胞AMPKα1的磷酸化水平。结论 1,25(OH)_2D_3抑制PMA诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子表达,该效应可能与其激活AMPKα1有关。     

1,25-二羟维生素D3联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株HS578T增殖的影响

目的 研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株HS578T生长的影响.方法 采用四唑氮蓝比色(MTT)法检测细胞增殖,免疫组化法检测Ki-67表达变化.结果 10-7mol/L、10-8mol/L的1,25(OH)2D3及塞莱昔布(50μmol/L)均可抑制乳腺癌细胞增殖,呈时间...     

1,25-二羟维生素D_3对大鼠肾间质纤维化的作用研究

目的：研究1,25-二羟维生素D3〔1,25-（OH）2D3〕对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的影响。方法：45只大鼠随机分为假手术组（n=15）、UUO组（n=15）和1,25-（OH）2D3干预组（n=15）,建立UUO大鼠肾间质纤维化模型,干预组于术后第1天起每天腹腔注射1,25-（OH）2D3,假手术组及UUO组腹腔注射等量生理盐水。分别于术后第3天、第7天和第14天处死大鼠,每次5只,取梗阻侧肾脏行HE、Masson染色及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫组化标记,观察肾损伤程度和肾间质纤维化程度;取血测定肌酐和尿素氮水平观察肾功能;处死前1天收集24 h尿液,检测尿中蛋白含量。结果：与假手术组相比,UUO组和干预组各时间点HE、Masson染色和α-SMA表达变化明显,呈逐渐加重趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）;肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白含量术后第3和第7天时表现为升高,术后第14天时出现下降,差异有统计学意义（P〈0.05）。与UUO组相比,干预组各时间点各项指标变化明显改善,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：1,25-（OH）2D3可抑制UUO大鼠肾间质纤维化进程,改善肾功能。     

胃癌组织中1,25-二羟维生素D3、TGF-β1和Smad2蛋白的表达

目的:探讨1,25-二羟维生素D3及TGF-β/Smads信号通路与胃癌的关系。方法:收集93例胃癌组织和30例正常胃黏膜组织,采用免疫组化染色法检测1,25-二羟维生素D3及TGF-β1、Smad2蛋白的表达。结果:胃癌组织中1,25-二羟维生素D3表达水平低于正常胃黏膜组织(t=133.850,P<0.001),TGF-β1、Smad2表达水平高于正常胃黏膜组织(t=71.502、35.988,P<0.001)。1,25-二羟维生素D3、TGF-β1和Smad2的表达水平与胃癌的分化程度、临床分期、浸润深度及淋巴结转移关系密切(P<0.001)。胃癌组织中1,25-二羟维生素D3与TGF-β1、Smad2的表达呈负相关(r=-0.583,-0.462,P<0.001),TGF-β1与Smad2的表达呈正相关(r=0.425,P<0.001)。结论:1,25-二羟维生素D3可能通过调控TGF-β/Smads信号通路参与了胃癌的发生发展。     

糖尿病肾病患者血清1,25-二羟维生素D_3水平变化

目的观察血清1,25-二羟维生素D_3[1,25-(OH)_2D_3]水平在糖尿病肾病(DN)进展中的变化。方法选择2013年8月至2015年5月深圳市龙岗中心医院收治的2型糖尿病患者157例,按照Mogensen分期标准将患者分为单纯糖尿病(DM)组(n=36)、早期DN(EDN)组(n=38)、临床DN(CDN)组(n=42)和DN终末期(ESDN)组(n=41),另选择同期体检健康者36例作为对照组。对5组受试者的尿白蛋白排泄率(UAER)、肾小球滤过率(GFR)及血清1,25-(OH)_2D_3水平进行比较。结果对照组与DM组患者UAER、GFR比较差异均无统计学意义(P>0.05);EDN组、CDN组和ESDN组患者UAER显著高于对照组和DM组(P<0.05),EDN组、CDN组和ESDN组患者GFR显著低于对照组和DM组(P<0.05);CDN组和ESDN组患者UAER显著高于EDN组(P<0.05),但CDN组与ESDN组患者UAER比较差异无统计学意义(P>0.05);ESDN组患者GFR显著低于EDN组和CDN组(P<0.05),但EDN组与CDN组患者GFR比较差异无统计学意义(P>0.05)。DM组、EDN组、CDN组和ESDN组患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著低于对照组(P<0.05),EDN组、CDN组和ESDN组患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著低于DM组(P<0.05),CDN组和ESDN组患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著低于EDN组(P<0.05),ESDN组患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著低于CDN组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,糖尿病患者血清1,25-(OH)_2D_3水平与GFR呈正相关(r=0.389,P<0.001),与UAER呈负相关(r=-0.450,P<0.001)。结论 DN患者血清1,25-(OH)_2D_3水平显著降低,检测血清1,25-(OH)_2D_3水平可能对早期发现DN及其病情判断有积极意义。     

1，25－二羟维生素D3 对人卵巢癌HO－8910 细胞增殖、凋亡影响的研究

目的: 通过1,25－( OH)
2－VD3
在体外对人卵巢癌HO－8910 细胞进行诱导,探讨其在卵巢癌细胞凋
亡过程中的作用机制。方法: 以体外人卵巢癌HO－8910 细胞培养为基础,采用MTT 法检测1,25－( OH)
2 －VD3
对HO－8910 细胞增殖的抑制作用,通过ELISA 法、免疫细胞化学法检测P27 蛋白表达的改变。结果: MTT 结果
显示1,25－( OH)
2 －VD3
能抑制HO－8910 细胞的增殖,并呈时间及剂量效应依赖性( P＜0．05) 。ELISA 结果显
示,经诱导的HO－8910 细胞P27 蛋白表达升高( P＜0．05) 。结论: 1,25－( OH)
2－VD3
能够通过上调P27 蛋白的表
达,抑制人卵巢癌HO－8910 细胞增殖。     

血清1,25-二羟维生素D3水平与慢性肾病患儿并发症及肾功能的关系

目的:探讨血清1,25-二羟维生素D3(1,25-(OH)2D3)水平与慢性肾病患儿并发症及肾功能的关系. 方法:随机抽选120例慢性肾病患儿为研究对象,其并发症包括肾性骨病、继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)、心血管疾病(CVD),分别36例、54例、30例. 同时选择同期门诊体检健康儿童120例(对照组). ELISA法检测1,25-(OH)2D3水平,同时监测肾功能指标以及血磷、钙等水平. 结果:观察组患儿1,25-(OH)2D3表达水平和血钙水平降低,与对照组比较差异明显(P<0.05),血磷水平升高不明显;BUN、SCr、24小时尿蛋白均较对照组异常;1,25-(OH)2D3与血钙呈正相关(r=0.446,P<0.05),与肾功能指标呈负相关(r=0.466、0.563、0.662,P<0.05). 结论:1,25-(OH)2D3一定程度上反应CKD患儿肾功能损伤情况,3种并发症中均可出现1,25-(OH)2D3水平降低现象.