甲磺酸胺银杏内酯B冻干粉针的大鼠胚胎-胎仔发育毒性和遗传毒性实验研究

目的: 检测甲磺酸胺银杏内酯B的生殖毒性和遗传毒性.方法: 甲磺酸胺银杏内酯B 100、50、25 mg·kg-1于大鼠妊娠第6～15天连续尾静脉注射给药,观察孕鼠饮水、摄食、生长等一般状况.每周称重2次,妊娠第20天处死孕鼠,记录各项检查结果.采用Ames试验、中国仓鼠肺成纤维细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验观察其遗传毒性.结果: 供试品高、中、低剂量用药组母体未出现临床中毒症状.高剂量组和中剂量组吸收胎数、骨骼畸形与溶剂对照组相比有显著差异(P＜0.05),低剂量组与溶剂对照组相比未见统计学差异.各剂量组胎鼠身长、尾长和体重均未见明显改变(P＞0.05).高剂量组中未见内脏畸形.供试品在每皿50～5000 μg剂量范围内,未观察到回复突变菌落数明显增加.药物终浓度为800、400、200μg·ml-1时,染色体畸变试验结果为阴性.小鼠静脉注射本品260、130和65 mg·kg-1剂量,骨髓嗜多染红细胞微核数未见明显增加.结论: 在本试验条件下,甲磺酸胺银杏内酯B对大鼠母体一般状况和子代发育均安全的剂量为25 mg·kg-1;未见本品有潜在的遗传毒性.     

坤泰胶囊对大鼠胚胎和胎仔的发育毒性研究

目的 评价SD孕鼠在致畸敏感期（怀孕第6～15天）ig给予坤泰胶囊溶液对SD大鼠的母体毒性、胚胎-胎仔毒性和致畸性。方法 雌性SD大鼠低、中、高剂量组在怀孕第6～15天内分别ig给予2.5、5、10 g/(kg?d) 坤泰胶囊成品粉溶液，对照组给予双蒸水。试验期内每天观察动物的一般情况和临床毒性表现；记录孕鼠的体质量；在怀孕第20天进行剖腹检查，摘取卵巢和子宫，观察黄体数、着床数、胚胎生存及死亡情况、生存胎仔的外观、性别、体质量、骨骼及脏器发育等指标。结果 孕鼠及胚胎、胎仔发育的上述各观察指标未见明显异常，与对照组比较无显著差异。结论 在本实验条件下，坤泰胶囊成品粉未见明显的母体毒性与胚胎和胎儿发育毒性。     

SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验的基础数据

目的 检测胚胎-胎仔发育毒性试验中SD大鼠妊娠期的体重、生殖功能指标及胎鼠的各项发育指标,为SD大鼠的发育毒性研究提供参考数据.方法 395只SD雌性大鼠,交配成功后,于妊娠第20天剖检孕鼠,检查孕鼠的内脏器官有无异常,称量子宫重量、窝重和胎盘重量,计数黄体数、着床数、活胎数、吸收胎数和死胎数.胎鼠共5272只,将一半胎鼠放人固定液中做内脏检查,另一半胎鼠进行骨骼检查,检查胎鼠外观、内脏和骨骼有无异常和变异.结果 和结论 建立SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中各项指标的数据库,求得各指标的正常值及标准差,95％的可信区间,为生殖毒性研究提供正常值的参考依据.     

胶原在胎兔、成兔正常发育及创伤愈合过程中的变化

目的：为了探索胎兔及成兔在正常发育及创伤愈合过程中胶原合成特点，分析胎儿型及成年型创伤愈合差别的原因．方法：用胃蛋白酶对胎兔及成兔皮肤的胶原进行提取，用酸水解法使胶原水解，采用氯胺T法进行羟脯氨酸(HP)测定．结果：①正常成兔的HP含量明显高于正常胎兔，而正常胎兔不同孕期之间却无差别．②胎兔皮肤创伤后(1-6d)与对应的正常胎兔相比，只表现出第1d HP显增高．③成兔皮肤创伤后与正常成兔相比，除第1日无差别外，后5dHP显增高．④胎兔皮肤创伤后HP动态变化呈现线性下降趋势，而成兔呈现线性上升趋势．结论：成兔皮肤合成胶原的能力高于胎兔皮肤；创伤后，胎兔及成兔均表现出胶原合成增加，而前持续短暂，预示着愈合迅速；而后持续增高，表现出愈合缓慢及瘢痕的形成。     

盐酸柯诺拉赞的胚胎-胎仔发育毒性

柯诺拉赞为新型质子泵抑制剂沃诺拉赞-的结构类似物,具有相似的作用机制,但其用于孕期的安全性尚不明确。针对此,考察灌胃给予盐酸柯诺拉赞对大鼠胚胎-胎仔发育的影响及进行伴随的毒代动力学研究。将孕鼠随机分为溶剂对照组、阳性对照组(3.8 mg/kg注射用环磷酰胺)和盐酸柯诺拉赞低、中、高剂量组(20,60,200 mg/kg),在妊娠期(gestation day,GD)6~15时经口给药,GD 20时处死大鼠。观察并记录大鼠母体在孕期体重、增重及耗食量,有孕的子宫、胎盘总重、黄体数、着床数、活胎数、死胎和吸收胎数等,活胎的外观、身长、体重以及其骨骼和内脏的发育情况。同时检测盐酸柯诺拉赞在卫星组孕鼠血浆中原形和代谢产物的浓度及其在孕鼠和胎鼠体内的组织分布。结果发现,高剂量(200 mg/kg)组动物GD 10~16的耗食量、体重及体重增加值均小于溶剂对照组(P<0.05);同期,中剂量(60 mg/kg)组动物体重及增重方面也有相似变化(P<0.05)。高剂量组胎鼠顶臀长度明显较溶剂对照组短(P<0.05),高、中剂量组胎鼠产生的骨骼发育变异情况也较溶剂对照有明显增加(P<0.05)。在20~200 mg/kg剂量范围内,单次给予盐酸柯诺拉赞后的原形药物在孕鼠血浆内c_max呈线性动力学特征。此外,盐酸柯诺拉赞及其代谢产物均可透过胎盘屏障,且胎鼠体内的脏器分布趋势与母体相近。原形药物和代谢产物在胎鼠体内均以肝脏含量最高。在本试验条件下,20 mg/kg的盐酸柯诺拉赞未对母体和胎鼠发育产生明显毒性。而60和200 mg/kg剂量下所产生的致畸作用可能与药物可透过胎盘屏障有关。     

朱砂对孕大鼠母体及胚胎-胎仔发育的毒性作用

目的:观察大鼠妊娠第6～15天用朱砂连续给药对孕大鼠母体及胚胎-胎仔的毒性影响。方法:雌性SD大鼠确认受孕后按体质量随机分为阴性对照组、环磷酰胺阳性对照组(10 mg/kg)、朱砂低、中、高(0.1,0.3,1 g/kg)剂量组,共5组。分别给予相应药物干预。妊娠第20天处死解剖,检查孕鼠肝肾功能、骨髓增生及朱砂高剂量组脏器病理,观察并记录胎仔活胎数、死胎数(含吸收胎)、畸胎数、胎仔总重、胎盘重量、胎仔性别等。每窝胎仔中取1/2进行Bouin液固定及染色,用于内脏检查;另取1/2进行骨骼染色,用于骨骼畸形情况的观察。结果:朱砂低、中、高3个剂量组对孕鼠肝肾功能、骨髓细胞和主要脏器均无明显的毒性作用;对胚胎形成和胎仔的一般生长发育等观察指标无明显影响,但在晚期胚胎流失率(朱砂低剂量组)、胎仔体质量和胎仔身长(朱砂高剂量组)等指标方面与阴性组比较差异有统计学意义;内脏检查和骨骼检查未见明显畸形。结论:朱砂对孕大鼠母体无明显毒性作用,对胚胎-胎仔发育有轻微的毒性影响。     

兔胎仔实验性膈疝肺发育不全组织形态学研究——光镜检查肺发育不全的特点

在兔仔胎龄23～25d行实验性膈疝于29d剖腹取得存活模型8例。同时取19～29d的正常兔胎仔20例。均行光镜检查其肺发育情况。实验性膈疝的肺发育组织形态学显示中央发育较快而周围成熟迟缓。肺发育不全和肺发育的不一致性为其特征     

产前给药地塞米松对大鼠胎肺形态发育的影响

目的:比较产前给予不同剂量、不同疗程的地塞米松(DEX)对大鼠胎肺形态发育的影响.方法:15只孕鼠随机分为5组,每组3只.小剂量DEX单程组:孕16、17天注射等量生理盐水,孕18天腹腔注射DEX 0.4 mg/(kg·d).小剂量DEX多程组:孕16、17、18天腹腔注射DEX 0.4 mg/(kg·d).大剂量DEX单程组:孕16、17天注射等量生理盐水,孕18天腹腔注射DEX0.8 mg/(kg·d).大剂量DEX多程组:孕16、17、18天腹腔注射DEX 0.8 mg/(kg·d).生理盐水组:孕16、17、18天注射等量生理盐水.孕19天每只孕鼠取6只胎鼠肺组织作为早产鼠肺模型,通过光镜观察及电镜技术,分析比较各组用药对胎肺形态发育的影响.结果:光镜下,小剂量DEX单程、多程组及大剂量DEX单程、多程组每视野肺泡计数,平均肺泡间隔厚度均低于生理盐水组(P＜0.01),平均肺泡表面积均高于生理盐水组(P＜0.01).透射电镜观察,地塞米松治疗组Ⅱ型肺泡上皮内多见板层小体且染色深、致密;胞质内线粒体等细胞器多见,而生理盐水组内难见板层小体、少见细胞器;基底膜呈现由完整到断裂不连续、由厚薄均一到厚薄不均甚至无法辨认的变化.结论:产前给药地塞米松能显著促进胎肺发育,但随着给药剂量和次数的增多,肺泡化受阻和基底膜受损现象逐渐明显.     

巴马小型猪胚胎-胎仔发育毒性试验基础数据的建立

目的检测巴马小型猪胚胎-胎仔发育毒性试验的生殖功能指标和胎仔的各项发育指标,为巴马小型猪的发育毒性研究提供参考数据。方法 12只雌性巴马小型猪分别于妊娠第30、40、50、60、70、80、90、100、112天剖检胎仔,计数黄体数、着床数、活胎数、吸收胎数和死胎数,测量胎仔身长、尾长、脑直径,X光拍照后进行内脏和骨骼检查。结果巴马小型猪妊娠40 d胎仔性别可辨,内脏器官、骨骼系统基本发育成型。得到妊娠不同天数的小型猪胎仔各项发育指标的正常值和标准差,及95%的可信区间。结论巴马小型猪可以作为胚胎-胎仔发育毒性试验的观察对象,此次研究得到这些基础数据可以为评价外源化合物的生殖毒性试验提供背景参考数据。     

胚胎停止发育的病因探讨

就近年来有关造成胚胎停止发育的各种原因进行了系统的综述,认为病因虽多,但如果认真检查、治疗,部分胚胎停止发育仍可避免,提高妊娠成功率。     

孕期补充锌减轻镉引起的小鼠胚胎发育毒性

目的研究孕期补充锌对镉所致胎儿死亡、外观畸形和生长发育迟缓的保护作用。方法孕鼠随机分为对照组、单纯锌处理组、单纯镉处理组和锌+镉处理组。单纯镉处理组和锌+镉处理组孕鼠于受孕第9天经腹腔注射氯化镉(4.5 mg/kg),锌处理组和锌+镉处理组小鼠于受孕第1～18天饮用硫酸锌水溶液(186 mg/L)。于受孕第18天剖杀所有孕鼠,记录活胎、死胎和吸收胎数,称量活胎体重,测量胎鼠身长,并评价胎鼠外观畸形和骨骼发育情况。结果与对照组比较,镉处理组平均每窝死胎数和畸形胎鼠数明显升高,活胎平均身长和体重明显降低,胸骨、尾骨和后掌(趾)骨骨化程度明显滞后;孕期补充锌对抗镉引起的胎儿死亡和致畸作用,减轻镉引起的胎鼠生长发育迟缓和骨骼发育不全。结论孕期补充锌明显减轻镉引起的小鼠胚胎发育毒性。     

外源性核苷酸对酒精发育毒性的拮抗作用

目的:研究外源性核苷酸(exogenous nucleotides,EN)对乙醇发育毒性的拮抗作用。方法:将C57BL/6J孕鼠随机分为空白对照组、乙醇对照组和4个EN干预组(EN的质量分数分别为0.01%、0.04%、0.16%、0.64%);孕6～15 d时空白对照组以每千克体重5 g蒸馏水灌胃,乙醇对照组和EN干预组以相同剂量的乙醇灌胃,建立乙醇发育毒性动物模型;整个实验周期内,2个对照组动物喂饲普通小鼠饲料,4个EN组动物喂饲含有相应剂量核苷酸的干预饲料。孕第18天收集母鼠血液,检测血清中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力;称量活胎和胎盘重量,观察胚胎毒性;并进行活胎骨骼和内脏畸形检查。结果:与乙醇对照组相比,核苷酸干预组平均活胎重量、胎盘重量均有所改善;孕鼠血清中SOD活力和GSH-Px活力明显提高(P0.05),MDA含量显著降低(P0.01);胎鼠活胎率显著增加,吸收胎率显著下降(P0.01);胎鼠四肢骨和尾椎骨骨化数目均明显增加(P0.01)、枕骨和胸骨骨化异常发生率有明显下降(P0.05),其中以0.04%EN组最为明显。结论:孕期补充EN对乙醇的发育毒性具有一定的拮抗作用。     

胎兔视网膜色素上皮移植的初步研究

目的:观察受体Bruch膜和视网膜色素上皮(retrial pigment epithelial,RPE)受损情况下供体RPE细胞的增殖、分化和凋亡状况。方法:制备有色素胎兔RPE细胞悬液,移植至破坏了Bruch膜和RPE细胞的12只成年新西兰大白兔的视网膜下腔。左眼作为实验组,右眼作为对照,于术后3、7和14d, 采用Ki-67免疫组化和TUNEL染色,并提取RPE细胞DNA作琼脂糖凝胶电泳,观察Ki-67阳性RPE细胞及移植的RPE细胞和受体ONL细胞的凋亡百分率,行统计学分析。结果:术后随着时间的延长,实验组或对照组Ki-67阳性RPE细胞数显著增加(P<0.05);术后14 d实验组或对照组的TUNEL染色ONL核阳性百分率较术后3 d显著减少(P<0.05);术后实验组TUNEL染色阳性和细胞核深染的RPE细胞无显著增加(P>0.05);细胞核深染的RPE细胞百分率明显高于TUNEL阳性的细胞(P<0.01)。对照组未见TUNEL阳性的RPE细胞。术后14d,移植的RPE细胞DNA电泳出现典型的凋亡带。结论:在受体Bruch 膜、RPE受损状态下,供体的RPE细胞具有良好的增殖和分化能力。     

银杏黄酮对环磷酰胺所致睾丸毒性的保护作用的实验研究

目的:在先期研究已证实环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)代谢产物丙烯醛(Acrolein,ACR)的氧化应激作用损伤支持细胞是CP所致睾丸损伤的原因之一的基础上探讨具有抗氧化作用的银杏黄酮对其损伤的保护作用.方法:以原代培养的新生Wistar大鼠支持细胞为模型,实验组分为1)添加银杏黄酮孵育细胞12h后加入ACR组;2)银杏黄酮、ACR同时加入组;3)银杏黄酮和ACR孵育12h后再加入细胞组.对照组分为添加维生素E孵育细胞12h后分别加入ACR组,仅添加ACR的阴性对照组及不添加任何处理因素的阳性对照组.各组3h后用MTT法测定细胞活性,考马斯亮蓝法测定蛋白浓度;硫代巴比妥法和Fenton法检测细胞丙二醛(MDA)、羟自由基(OH)含量,三价铁还原法、黄嘌呤氧化酶法和NADPH还原法测定细胞总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽还原酶(GR)活性.结果:银杏黄酮与ACR同时加入细胞组和银杏黄酮与ACR孵育12h后同时加入组较阴性对照组各测量参数无显著性差异(P＞0.05).而提前添加银杏黄酮组较阴性对照组各参数均有显著性差异:1)细胞活力较阴性对照组显著升高(P＜0.05);2)MDA和T-ACO含量较阴性对照组明显降低(P＜0.05);3)T-AOC、SOD和GR活性较阴性对照组明显升高(P＜0.05).且银杏黄酮上述抗氧化作用明显强于Vit E组(P＜0.05)结论:CP代谢产物ACR在对未成熟睾丸支持细胞产生氧化应激损害时,银杏黄酮可以提高支持细胞的抗氧化酶活性,清除氧自由基,对支持细胞具有明显的保护作用.为进一步探讨CP致睾丸损伤的防护措施奠定了基础.     

人原核期胚胎的核仁数量与胚胎质量的相关性研究

目的:探讨受精卵核仁的具体数量与受精卵卵裂、可移植胚胎和优质胚胎率间的相关性。方法:精卵结合后16～18h观察受精情况,分别计数雌、雄原核的核仁数目,相对应观察每个受精卵的发育情况。分析两个原核核仁数目之间的比值、和值以及差值与移植当日胚胎质量之间的相关性。结果:雌、雄原核核仁数目之间的比值与移植当日的优质胚胎率存在显著相关。当核仁数的比值>1.25时,受精卵的卵裂率、可移植胚胎和优质胚胎率均有降低趋势。虽然核仁数目之间的差值、和值与卵裂率、可移植胚胎和优质胚胎率均无显著相关,但随着核仁数目之间差值的逐渐增大,受精卵的卵裂率、可移植胚胎和优质胚胎率均有下降趋势;而随着核仁数目之间和值的逐渐增大,受精卵的优质胚胎率有逐渐升高的趋势。结论:受精卵核仁的具体数量与受精卵卵裂、可移植胚胎和优质胚胎率之间存在相关性。核仁的具体数量对预测种植日的胚胎质量有一定的价值。用于移植应选择两个原核间核仁数目比值相对较小的受精卵。     

小剂量环磷酰胺、甲基强的松龙治疗狼疮性脑病

目的通过应用小剂量环磷酰胺(CTX)和甲基强的松龙(MP)冲击治疗系统性红斑狼疮性脑病,对其方法和疗效进行评价.方法44例狼疮性脑病患者分别应用大剂量CTX+MP和小剂量CTX+MP进行冲击治疗,观察两组治疗前后各项临床指标和实验室指标变化及改善情况,进行评价.结果小剂量CTX+MP组近期疗效有效率82.6%,死亡率17.4%,大剂量CTX+MP组有效率52.4%,死亡率47.6%,两组差异有显著性(P＜0.05).小剂量组副作用发生率明显小于大剂量组(P＜0.01)长期疗效没有显著性差异.结论小剂量CTX+MP组对狼疮脑病有良好疗效,副作用明显少于大剂量CTX+MP组,长期疗效两组相同.     

血浆置换联合小剂量环磷酰胺、糖皮质激素治疗重型系统性红斑狼疮的临床效果

目的 探讨血浆置换联合小剂量环磷酰胺(CTX)、糖皮质激素治疗重型系统性红斑狼疮(SLE)的疗效。方法 选取2015-01-01~2018-03-31在延安大学附属医院住院治疗的67例重型SLE患者,并将其随机分为研究组(33人)和对照组(34人),研究组治疗方案:糖皮质激素+血浆置换+环磷酰胺(诱导期: CTX 400 mg,静滴,每2周一次,共6次;维持期:CTX 400 mg,静滴,每月一次,两期共8.0 g)。对照组治疗方案:糖皮质激素+CTX(诱导期:CTX 800 mg,静滴,每5天1次,共6次,维持期:CTX 800 mg每3月一次,两期总量共8.0 g)。比较两组患者治疗前后狼疮疾病活动指数(SLEDAI)、补体C4、抗dsDNA抗体、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)的变化、及临床症状的改善情况。结果 治疗后研究组临床改善率要高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后1月、3月、1年,研究组患者的SLEDAI、补体C4、抗dsDNA抗体、ESR、CRP较对照组下降更明显,差异有统计学意义(P＜0.05);研究组发生副作用的人数为7人(21.2%),对照组发生副作用的人数为18人(52.9%),差异有统计学意义(P＜0.05),对照组的副作用发生率要高于研究组。结论 血浆置换联合小剂量CTX、糖皮质激素治疗重型SLE的临床效果显著,值得进一步临床推广使用。     

不同孕周超声筛查胎儿结构异常的临床研究

目的:探讨不同孕周超声筛查胎儿结构异常的临床价值。方法:根据不同孕周11~13+6周、20~24周、28~32周实施阶段性超声筛查,对胎儿结构异常做出诊断。结果:7 800例胎儿中,经产后及引产证实胎儿畸形105例,产前超声筛查诊断胎儿畸形100例,检出率95.2%,但复合畸形中漏诊单个畸形率20%。结论:不同孕周的产前超声筛查能根据胎儿生长发育规律清晰显示胎儿各时期的形态结构,是及时发现胎儿结构异常、降低出生缺陷的重要手段,在临床中价值很大。     

胎儿畸形产前超声诊断132例研究

目的分析产前超声在胎儿畸形诊断中的临床价值,为临床诊断提供依据。方法对2011年1月～2012年12月于我院妇产科经超声产前检查诊断为畸形胎儿的超声检查结果进行分析。结果132例畸形胎儿中,103例为单系统畸形（78．03％）;29例存在两个或两个以上系统畸形（21．97％）;88例为单系统单一畸形（66．67％）;44例为单系统多发畸形（33．33％）。在〈25岁孕妇中,检出55例畸形胎儿（41．67％）;在25～29岁孕妇中,检出37例畸形胎儿（28．03％）;在30～35岁孕妇中,检出24例畸形胎儿（18．18％）;在〉35岁孕妇中,检出16例畸形胎儿（12．12％）。在孕周〈20周的孕妇中,检出23例畸形胎儿（17．42％）;在孕周20～28周的孕妇中,检出59例畸形胎儿（44．70％）;在孕周〉28周的孕妇中,检出50例畸形胎儿（37．88％）。结论产前超声检查具有诊断准确、操作简便易行、无创伤、可反复进行检查等优点,是我国预防畸形胎儿出生的有效干预措施之一。     

环磷酰胺对小鼠免疫抑制作用过程中代谢通路变化的代谢组学研究

目的 采用代谢组学方法,研究环磷酰胺对小鼠免疫抑制作用过程中代谢通路的变化。方法 采用流式细胞术了解免疫细胞变化情况,通过建立偏最小二乘法模型多结果进行判别。以偏最小二乘法模型中变量重要性投影（variable importance in projection,VIP）参数筛选潜在的生物标志物,通过统计分析确定差异性代谢物,借助代谢组学小分子化合物快速鉴定分析软件系统对差异性代谢物进行进一步鉴定分析,通过搜库及运算最终确定差异代谢物质9种,通路富集结果分析差异代谢通路3条。结果 环磷酰胺对正常机体的不饱和脂肪酸的生物合成、线粒体脂肪酸代谢、甘油磷脂代谢、甾类激素的生物合成、花生四烯酸代谢、脂肪酸代谢、嘧啶的生物合成等代谢通路均产生明显影响。结论 环磷酰胺在正常组与实验组中影响最重要的代谢通路为花生四烯酸代谢、甘油磷脂代谢和嘧啶代谢。