土大黄苷对乳腺癌细胞SK-BR-3增殖的影响

目的观察土大黄苷对乳腺癌细胞SK-BR-3增殖的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT法检测土大黄苷对SK-BR-3细胞的增殖抑制作用,倒置显微镜下观察细胞的形态学变化,W estern印迹检测Akt及p-Akt蛋白的表达情况。结果土大黄苷可抑制SK-BR-3细胞增殖,其作用具有浓度和时间依赖性,72 h的IC50为（181.3±11.4）μmol/L。200、400μmol/L土大黄苷作用48 h后显示出明显的细胞毒作用,显微镜下可见细胞碎片增多、细胞密度减小。土大黄苷在100、200、400μmol/L浓度时均可抑制p-Akt蛋白的表达。结论土大黄苷可抑制SK-BR-3细胞的增殖,其机制可能与抑制p-Akt表达有关。     

尿多酸肽对乳腺癌细胞周期蛋白D1表达的影响

目的研究肿瘤细胞分化诱导剂尿多酸肽（CDA-Ⅱ）对乳腺癌细胞周期蛋白D1（cyclin D1）表达的影响。方法将CDA-Ⅱ与不同生物学特性的乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231进行体外培养,同时以维甲酸为阳性对照,观察CDA-Ⅱ对乳腺癌细胞生长曲线、cyclin D1表达等方面的影响。结果CDA-Ⅱ可减缓两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力,减少乳腺癌细胞cyclin D1表达。结论CDA-Ⅱ可抑制不同生物学特性的两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力,减少乳腺癌细胞cyclin D1表达,为CDA-Ⅱ治疗乳腺癌提供了实验依据。     

LINE-1 ORF-1p对肝脏肿瘤细胞系和肝源永生化细胞系增殖的调控作用

目的 研究反转座子LINE-1编码蛋白LINE-1 ORF-1p对肝脏肿瘤细胞系以及肝源永生化细胞系增殖能力的影响.方法 构建针对LINE-1 ORF-1编码序列的siRNA表达载体(LINE-1 ORF-1p psilence2.1-U6-siRNA),转染肝脏肿瘤细胞系Bel-7402、SMMC-7721、HepG2和肝源水生化细胞系LO2.采用Western blotting检测LINE-1 ORF-1p siRNA表达载体对LINE-1 ORF-1编码蛋白LINE-1 ORF-1p表达的影响,采用MTT法检测LINE-1 ORF-1p表达受抑对细胞增殖的影响.结果 在肝脏肿瘤细胞HepG2、Bel-7402、SMMC-7721和肝源永生化细胞LO2中,转染LINE-1 ORF-1p siRNA表达载体均能降低LINE-1 ORF-1p的表达水平,并从第3天起显著抑制前述细胞的增殖(P＜0.05),其抑制率分别为63％、51％、40％、43％.结论 抑制LINE-1 ORF-1p蛋白表达后可使肝脏肿瘤细胞系和永生化细胞系的增殖受抑.     

miRNA-33a抑制人结肠癌细胞HCT-116增殖的机制研究

目的 探讨miRNA-33a抑制人结肠癌细胞HCT-116增殖的机制.方法 化学法合成miRNA-33a mimics、miRNA-33a inhibitor及阴性对照(NC)序列,然后转染至HCT-116细胞.转染后48h,采用Real-time PCR检测细胞中miRNA-33a含量的变化,Western blotting检测细胞中Twist蛋白含量的变化;转染后24、48、72h,采用CCK-8的检测肿瘤细胞增殖活性的变化.采用信息学软件预测miRNA-33a与Twist的结合位点,并通过荧光素酶报告基因法证实预测的结合位点.结果 miRNA-33a mimics及miRNA-33a inhibitor转染后可明显上调或下调HCT-116细胞内miRNA-33a的相对含量(P＜0.05),而NC转染组细胞miRNA-33a含量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);miRNA-33a mimics及miRNA-33a inhibitor转染后可明显下调或上调HCT-116细胞内Twist蛋白的表达,与对照组比较差异有统计学意义(p＜0.05),而NC转染组细胞内Twist含量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);miRNA-33a mimics及miRNA-33ainhibitor转染后可明显下调或上调HCT-116细胞对数生长期的增殖活性,转染后48h和72h与对照组比较差异均有统计学意义(p＜0.05),而NC转染组细胞增殖活性与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).荧光素酶实验显示,miRNA-33amimics和miRNA-33a inhibitor转染可以抑制或促进野生型报告基因荧光素酶活性(P＜0.05),而对突变型报告基因荧光素酶活性无明显影响(P＞0.05).结论 miRNA-33a可以通过抑制其靶基因Twist的表达抑制HCT-116细胞的增殖活性.     

FHL2抑制乳腺癌MCT-7细胞增殖与侵袭生长的机制探讨

目的探讨FHL2对分化抑制蛋白1(Id1)的转录调控活性及Id1促乳腺癌细胞侵袭生长效应的影响.方法采用共转染双荧光素酶相对活性检测方法检测乳腺癌MCF-7细胞中FHL2对Id1介导的转录抑制功能的影响,MTT方法检测细胞的增殖能力,Transwell方法观察细胞的侵袭能力.结果 Id1对碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子E47介导的转录激活功能具有显著抑制作用,而FHL2明显削弱了该效应,并呈现出对FHL2转染剂量的依赖性;与空载体转染组比较.Id1明显促进了MCF-7细胞的增殖速率与侵袭能力,而该效应可被FHL2显著削弱(P<0.05).结论 FHL2可通过抑制Id1的功能活性来抑制乳腺癌细胞的增殖及侵袭生长,为深入研究FHL2-Id1信号途径在乳腺癌发生发展中的功能效应奠定了基础.     

乳腺癌普查初步报道及资料分析

乳腺癌是人类常见的恶性肿瘤.近20年来,我国乳腺癌的发病率以3%左右的速度逐年增加,已经成为威胁女性健康的主要疾病,采取积极有效的措施控制并降低乳腺癌的发病率已经成为全社会关注的问题.     

外源性p27KIP1基因抑制SGC7901细胞的增殖

研究p27^KIP1基因对胃癌细胞的细胞周期及细胞增殖的影响。采用脂质体转染法将p27^KIP1全长cDNA转入胃癌细胞系SGC7901中，通过免疫屯迹分析以及RNA斑点杂交方法检测p27^KIP1基因在蛋白质和mRNA水平的表达，细胞活力实验及软琼脂集落形成实验显示转染p27^KIP1基因对细胞增殖的作用；流式细胞仪观察目的的基因对该细胞的细胞周期的影响。结果显示，转染p27^KIP1的SGC7901细胞在mRNA和蛋白质水平均有高水平p27^KIP1的表达；细胞活力检测显示在外加Zn离子48h后细胞生长被抑制42％；转染p27^KIP1的SGC7901细胞的集落形成率较对照组明显减少（P＜0．01）；p27^KIP1的过表达能够显著地增加G1期的细胞数，由33．68％增加到69．29％（P＜0．01）。研究表明，p27^KIP1基因可抑制SGC7901细胞由G1期向S期过渡，从而抑制细胞增殖。     

MR背景抑制扩散加权成像在乳腺癌的应用

目的 探讨MR扩散加权成像(DWI)结合短时间反转恢复回波成像(STIR-EPI)背景抑制(BS)技术在乳腺癌成像的技术参数及其可行性.方法 回顾性分析26例乳腺癌的MR DWIBS测得各组织的表观扩散系数(ADC),利用三维最大强度投影(3D-MIP)重组及黑白反转技术,观察病变显示效果.观察乳腺痛DWI及DWIBS两种方法的显示率.对乳腺各组织的ADC值进行随机区组设计的方差分析,在乳腺癌与良性病变ADC值的比较中,采用t检验.对两种成像方法乳腺癌的显示率进行配对资料X2检验.结果 在扩散敏感因子(b)=800 mm2/s的图像中,乳腺癌多表现为高信号,其ADC值分别为:肿瘤实质(0.93±0.25)×10-3 mm2/s、瘤内坏死灶(2.06±0.17)×10-3 mm2/s、正常腺体(1.92±0.23)×10-3 mm2/s、转移性淋巴结(1.10 ± 0.14)×10-3mm2/s,各种组织间两两比较,差异具有统计学意义(P值均＜0.01).DWIBS经MIP重组及黑白反转技术,病变周围组织信号被抑制,得到类正电子发射体层成像(PET)图像.在乳腺癌中,DWIBS对肿瘤实质(92.3/)及转移性淋巴结(88.4/)的显示率要高于DWI序列(分别为57.6/和42.3/),差异有统计学意义(x2值分别为8.307、12.235,P均＜0.05).乳腺癌与良性病变ADC值分别为(1.092±0·17)×10-3和(2.154±0.53)×10-3mm2/s,差异有统计学意义(t=8.626,P＜0.05).结论 MRDWIBS在显示病灶方面有一定优势,应用DWI结合ADC值对乳腺癌的诊断具有临床应用前景.     

乳腺癌患者使用紫杉醇序贯化疗的观察及护理

紫杉醇目前是乳腺癌术后化疗的一线新型药物,单用和联合应用均显示很好的疗效。它主要是通过诱导促进微蛋白聚合、微观装配与稳定的作用从而阻止肿瘤细胞的生长[1]。其毒性有过敏反应神经毒性、骨髓抑制、心脏及肝脏毒性反应等。我科于2006年6月~2010年5月收治8例乳腺癌患     

乳腺癌患者围化疗期间的护理

乳腺癌的治疗方法包括手术、化疗、放疗、内分泌和生物靶向治疗。应用化学药物治疗恶性肿瘤的方法称为化学治疗法,简称化疗[1]。本组对29例乳腺癌患者围化疗期的全面护理,取得满意的效果,现报道如下。1对象与方法1.1研究对象2009年1月~2010年5月在我院肿瘤内科住院的乳腺癌术后的化疗患者,共29例,均为女性。年龄32~71岁,平均年龄53.7岁。右     

敲低PES1基因抑制舌癌细胞的生长

目的：构建稳定表达PES1 shRNA的舌癌细胞系,研究敲低PES1基因对舌癌细胞生长的影响。方法在293 T细胞中包装并获得敲低PES1基因的病毒,然后将病毒感染Tca8113、SCC6和SCC153种舌癌细胞并筛选稳定克隆,Western印迹检测PES1蛋白的表达水平;利用生长曲线检测敲低PES1对舌癌细胞生长的影响,流式细胞术检测敲低PES1对舌癌细胞周期的影响。结果成功构建稳定表达PES1 shRNA的舌癌细胞系,敲低PES1基因能够抑制舌癌细胞的生长,使细胞周期阻滞在G0／G1期,敲低PES1抑制cyclin D1的表达。结论敲低PES1抑制舌癌细胞的生长,诱导细胞周期阻滞在G0／G1期,抑制cyclin D1的表达,因此PES1可能成为舌癌基因治疗的靶标。     

RNA干扰组蛋白去乙酰化酶1对人胰腺癌细胞增殖、凋亡的调控机制研究

目的观察沉默组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法胰腺癌PaTu8988细胞株分为空白对照组(不予任何处理)、阴性对照siRNA组(予以30nmol/L阴性siRNA)、siRNA1组(予以15nmol/LHDAC1siRNA)和siRNA2组(予以30nmol/LHDAC1siRNA)。siRNA转染48h后,用相对实时定量RT-PCR法和West-ernblotting检测HDAC1基因表达情况;相对实时定量RT-PCR法检测细胞增殖凋亡相关基因p21、Bcl-2、Bax的表达;WST-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果转染HDAC1siRNA48h后人胰腺癌PaTu8988细胞中HDAC1mRNA表达量在siRNA1组和siRNA2组分别为46.1%±6.1%和32.3%±1.4%,均显著低于空白对照组(100.0%±3.4%)和阴性对照siRNA组(87.4%±28.3%,P<0.05)。Westernblotting显示HDAC1蛋白表达量亦明显下降,以siRNA2组表达量最低(P<0.05)。WST-8法检测显示4组细...     

布美他尼对肿瘤细胞增殖的抑制作用及其与NKCC1表达的相关性

目的：探索布美他尼在抑制肿瘤细胞增殖中的应用。方法采用免疫印迹杂交技术,验证不同肿瘤细胞中钠钾氯协同转运蛋白1（NKCC1）的表达情况;运用CCK-8法,测定布美他尼对不同肿瘤细胞的IC50值。结果肺癌细胞系（A549）、结直肠癌细胞系（HCT116）中靶蛋白NKCC1表达量显著高于慢性粒细胞白血病细胞系（K562）、食管癌细胞系（Eca109）、宫颈癌细胞系（HeLa）、T淋巴细胞白血病细胞系（Jurkat）和乳腺癌细胞系（MCF7）;布美他尼对A549、HCT116的IC50值明显低于K562、Eca109、HeLa、Jurkat和MCF7,且其抑制率与靶蛋白NKCC1的表达量呈正相关。结论布美他尼能抑制肿瘤细胞增殖,NKCC1可作为潜在的抗肿瘤药物作用靶点。     

乳腺癌MCF-7细胞系9p21缺失断点的精确定位分析

目的 对乳腺癌MCF-7细胞系9p21区缺失断点进行精确定位.方法 采用多重连接探针扩增技术(MLPA)检测MCF-7细胞系9p21区缺失断点的大致区间,采用长PCR扩增缺失断点,引物步移缩小缺失断点的所在区间,测序确定缺失断点的位置.结果 MLPA检测探明MCF-7细胞系的端粒侧断点位于MTAP基因内,着丝粒侧断点位于CDKN2A基因内;通过长PCR、引物步移及测序确定在MCF-7细胞系中,缺失位点位于chr9:21819532至chr9:21989622之间,大小为170kb;断点端粒侧位于MTAP基因的内含子4内,着丝粒侧位于CDKN2A(p14)基因的内含子1内近外显子1β处.结论 长PCR是缺失断点定位的良好方法.在MCF-7细胞系中,存在一个起于MTAP基因内、止于CDKN2A基因内、大小为170kb的缺失片段,其意义有待进一步研究.     

Relationship between cancer cell proliferation and thallium-201 uptake in lung cancer

Although thallium-201 (201Tl) uptake is related to perfusion in many normal tissues, the biologic rationale for 201Tl uptake in tumors is uncertain. To determine if tumor uptake is related to cell proliferation, we correlated the relative retention of 201Tl in lung tumors with expression of Ki-67, an indicator of cell proliferation. METHODS: Sixty patients with lung tumors, included small cell carcinoma (n = 8) and non-small cell carcinoma (n = 52), underwent 201Tl single photon emission computed tomography (SPECT) imaging. The 201Tl lesion uptake was determined on early and delayed images and the radiotracer retention index (RI) was calculated. Tumor specimens were obtained at surgery or bronchoscopy. The cell proliferation ratio was estimated with MIB-1, a monoclonal antibody that recognized the nuclear antigen Ki-67. RESULTS: The average 201Tl index was 2.13+/-0.61 (early) and 2.46+/-0.83 (delayed). The average RI was 17.44+/-35.01. Overall, the 201Tl index (delayed) and the cancer cell proliferation were correlated (r = 0.70, p < 0.0001). Of interest, there was a significant correlation (r = 0.872, p < 0.0005) between the 201Tl index on delayed images and the cell proliferation ratio in patients with small cell but not non-small cell lung carcinoma. The 201Tl index (delayed) was significantly higher (p < 0.0001) in patients with small cell lung carcinoma than in patients with non-small cell lung carcinoma. CONCLUSION: 201Tl imaging appears to be useful for evaluating patients with small cell lung carcinoma but not non-small lung carcinoma, and is correlated with the monoclonal antibody MIB-1, a marker of cell proliferation.     

上调microRNA-150表达对肝癌SMMC7721细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨上调microRNA- 150 (miR- 150)表达对肝癌SMMC7721细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法 SMMC7721细胞分成miR-150感染组(加入pGIPZ-miR-150慢病毒表达载体)、阴性对照组(加入只含GFP的慢病毒载体)和空白对照组(不转染).采用荧光定量PCR检测miR-150的表达情况,Western blotting检测靶基因c-Myb蛋白的表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 荧光定量PCR结果显示,转染miR-150pGIPZ后,SMMC7721细胞miR-150表达量(2.48±0.15)较阴性对照组(0.81±0.09)增加了2倍(p＜0.01).CCK-8法检测结果显示,与阴性对照组和空白对照组比较,miR-150组的细胞增殖率显著降低(P＜0.05).Western blotting检测结果表明,miR-150组细胞c-Myb蛋白表达(0.31±0.07)与空白对照组(0.80±0.09)及阴性对照组(0.81±0.08)相比明显减少(P＜0.0l).流式细胞仪检测结果显示,miR-150组细胞凋亡率(19.36％±1.78％)与阴性对照组(5.12％±0.54％)及空白对照组(4.68％±0.35％)相比明显增加(P＜0.01).结论 上调miR-150表达可通过降低靶基因c-Myb的表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,miR-150可能成为肝癌靶向治疗新的靶基因.     

乳腺癌保乳治疗304例的临床分析

目的 探讨Ⅰ～Ⅱ期乳腺癌保乳治疗的临床效果及存活率和局部复发的影响因素.方法 收集1988年6月～2005年6月在解放军总医院住院的304例临床Ⅰ～Ⅱ期乳腺癌患者,所选患者均行乳腺肿瘤局部切除,腋窝淋巴结清扫及术后放疗.所有患者接受了术后化疗,雌激素受体阳性者口服三苯氧胺.中位随访时间8.1年.结果 患者5年总存活率,疾病特异性存活率及无局部复发存活率分别为92.58%,93.46%,86.26%.10年总存活率,疾病特异性存活率及无局部复发存活率分别为85.29%,88.27%,77.75%.5年和10年的局部复发率分别为5.5%和11.7%.统计结果 显示,年龄(＜40岁),腋窝转移淋巴结数量(＞4)与疾病特异性存活率相关联;而年龄(＜40岁),雌激素受体阴性与局部复发相关联.24例局部复发者均切除了同侧乳腺,随访5～130个月,有5例死亡.并发症为30例次.结论 保乳治疗具有很高的长期存活率,局部控制率和较低的并发症发生,是治疗Ⅰ～Ⅱ期乳腺癌的可靠方法 .