肺表面活性蛋白A、B在内毒素性急性肺损伤时变化的研究

目的：探讨内毒素性急性肺损伤(ALI)肺表面活性蛋白A和B(SP—A，SP—B)表达的变化及其机制。方法：用内毒素脂多糖(LPS)制备Wistar大鼠ALI模型，分加采用ELISA、免疫组化和反转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法动态观察LPS致伤后不同时间点肺组织TNF-α，SP—A和SP—B蛋白和mRNA表达的变化。结果：肺组织TNF—α蛋白含量和髓过氯化物酶(MPO)活性分别于LPS致大鼠ALI后0．5h和1h时显著高于对照组(P＜0．01，2h时达高峰；肺内SP—B阳性Ⅱ型肺泡上皮细胞数量减少，染色变浅，SP—B蛋白表达逐渐减弱，其灰度值于LPS致伤后2h时显著高于对照组(P＜0．01)；肺组织SP—A和SP—BmRNA的表达不同程度减弱，2h时明显弱于对照组(P＜0．05)，分别于8h和4h时达最低水平。结论：LPS致大鼠ALI时沸组织SP—A和SP—BmRNA的表达减弱，SP—B蛋白含量减少，这可能与多形核粒细胞在肺内的聚集和TNF—α水平的增加有关。     

围产期缺血缺氧对新生大鼠肺表面活性蛋白A、B基因表达的影响

目的：研究围产期缺血缺氧对新生大鼠肺表面活性蛋白A、B（SP－A，SP－B）基因表达的影响，探讨产期缺血缺氧新生大鼠肺损伤机制。方法；通过结扎孕鼠一侧子宫角血管（其另一侧宫内胎鼠作为对照），建立围产期缺血缺氧动物模型。采用RT－PCR半定量分析法观察不同程度缺血缺氧新生大鼠肺组织SP－A，SP－B,mRNA的表达。结果：正常21d胎鼠肺组织SP－A，SP－BmRNA已的明显的表达，宫内缺血缺氧20min时，新生大鼠肺组织SP－A，SP－B mRNA表达减弱，并随缺血缺氧时间的延长而逐渐加生。结论：围产期缺血缺氧致新生大鼠SP－A，SP－B mRNA表达减弱可能是新生大鼠肺损伤的重要机制。     

缺血缺氧新生鼠肺超微结构变化及 TNF-α和I-κBα表达的研究

目的:探讨围产期缺血缺氧对新生大鼠肺超微结构和肿瘤坏死因子α(TNF-d)及核因子κB抑制蛋白(I-κBα)表达的影响.方法:结扎孕鼠一侧子宫角血管(另一侧宫内胎鼠作为对照),建立围产期缺血缺氧动物模型.电镜下观察肺组织超微结构变化并分别采用ELISA、RT-PCR和Western blot杂交法观察不同程度缺血缺氧新生大鼠肺组织TNF-α蛋白和mRNA及I-κBα表达的变化.结果:宫内急性缺血缺氧20 min时,新生大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞受损;肺组织TNF-α蛋白和mRNA表达明显增强(P均＜0.01),I-κBα表达明显减弱(P＜0.05),并随缺血缺氧时间延长病变加重.结论:围产期急性缺血缺氧致新生大鼠肺损伤,I-κBα和TNF-α的异常表达可能是肺损伤的重要原因.     

缺血缺氧新生鼠肺超微结构变化及TNF-α和Ⅰ-κBα表达的研究

目的：探讨围产期缺血缺氧对新生大鼠肺超微结构和肿瘤坏死因子α（TNF—α）及核因子κB抑制蛋白（Ⅰ—κBα）表达的影响。方法：结扎孕鼠一侧子宫角血管（另一侧宫内胎鼠作为对照），建立围产期缺血缺氧动物模型。电镜下观察肺组织超微结构变化并分别采用ELISA、RT-PCR和Western Not杂交法观察不同程度缺血缺氧新生大鼠肺组织TNF-α蛋白和mRNA及Ⅰ—κBα表达的变化。结果：宫内急性缺血缺氧20min时，新生大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞受损；肺组织TNF-α蛋白和mRNA表达明显增强（P均〈0．01），Ⅰ—κBα表达明显减弱（P〈0．05），并随缺血缺氧时间延长病变加重。结论：围产期急性缺血缺氧致新生大鼠肺损伤，Ⅰ—κBα和TNF—α的异常表达可能是肺损伤的重要原因。     

急性肺损伤新生大鼠肺表面活性蛋白A变化的研究

目的:探讨肺表面活性物质蛋白A(SP-A)在急性肺损伤(ALI)/ARDS发病机制中的作用及其在ALI早期诊断中的意义。方法:采用内毒素(LPS)腹腔注射的方法复制新生大鼠ALI模型,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清、BALF中的SP-A水平。结果:ALI组血清SP-A水平在1h已明显高于对照组(P<0.05),8h时达高峰值,之后虽略有下降,但仍明显高于对照组(P<0.05);ALI各组BALF中的SP-A水平与对照组相比,有下降趋势,但无统计学意义(P>0.05)。结论:ALI新生大鼠SP-A的变化,可导致PS各组分比例的改变,在ALI发病机制中发挥重要作用;ALI发病初期,血清SP-A水平即可出现显著升高,反映了肺泡上皮细胞的损伤和肺毛细血管通透性的增高。因此,检测血清SP-A水平可作为ALI早期诊断的指标。     

腹部不同刺激强度手术对大鼠肺肿瘤坏死因子α和肺表面活性物质相关蛋白A表达的影响

目的：探讨腹部不同强度的手术刺激对肺部的影响。方法：将100只SD雄性大鼠随机分为5组,每组 20只。分别为麻醉对照组(A组),腹部皮肤2 cm切口组(B组),腹部皮肤+肌肉2 cm切口组(C组),腹部皮肤+肌肉+ 腹膜2 cm切口组(D组),腹部皮肤+肌肉+腹膜2 cm切口+腹腔探查2 min+牵拉肠管组(E组)。经大鼠尾静脉注射丙泊 酚10 mg/kg诱导,术中静脉泵注丙泊酚35~45 mg/(kg.h),维持麻醉深度在适度镇静而无明显镇痛作用的水平。根据 术后取标本的时间不同每组各分为6 h,1 d,3 d,7 d组4个亚组,每亚组5只。按分组取大鼠肺组织,采用免疫组织 化学方法测定各组大鼠肺组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和肺表面活性物质相关蛋白A(surfactant protein-A,SP-A)的表达水平,并进行比较分析。结果：术后6 h,3 d,7 d,5组大鼠肺组织TNF-α的表达差异无统计学 意义(P>0.05)。术后1 d,D和E组大鼠肺组织TNF-α的表达明显高于A组(P<0.05)。术后1和3 d大鼠肺组织TNF-α的表达 E组>D组>C组>B组,B~E组各组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后6 h,3 d,7 d,5组大鼠肺组织SP-A的表达 比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1 d,D和E组大鼠肺组织SP-A的表达明显高于A组(P<0.05),D和E组组间比 较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：腹部手术刺激强度增加对大鼠术后肺部影响增大,腹腔内手术对术后肺部的 影响比非腹腔内手术大,但尚处于代偿范围内。     

急性肺损伤早期肺表面活性蛋白A、B含量的变化

目的　探讨油酸性急性肺损伤早期表面活性蛋白A、B(SP A、SP B)含量的变化。方法　复制油酸性大鼠急性肺损伤模型 ,采用WesternBlot和ELISA术检测支气管肺泡灌洗液 (BALF)中SP A、SP B的含量。结果　BALF中SP A、SP B的含量在急性肺损伤后 1h就出现明显降低 (P <0 .0 1) ,并在 6h内维持较低水平。结论　急性肺损伤早期即出现SP A、SP B含量下降 ,同时 ,本研究所建立的表面活性蛋白含量监测方法灵敏度高 ,特异性好 ,可供实验研究采用。     

急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB表达的研究

目的 在脂多糖（LPS）复制的急性肺损伤（ALI）大鼠模型，观察NF—κB改变。探讨NF-κB在ALI发病中的作用。方法 在LPS复制的大鼠ALI模型，观察动脉血气、肺湿／干（W／D）比值、肺组织病理。用RT-PCR法检测肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达，用ELISA法检测TNF-α蛋白变化。并使用Western blot方法观察肺组织NF-κB的改变。结果 在ALI大鼠，动脉血氧分压显著降低（P〈0．05），肺W／D比值均显著高于对照组（P〈0．01），MPO活性均显著高于对照组（P〈0．01），病理显示肺组织受损；肺组织TNF-α mRNA即显著升高（P均〈0．01），与此同时肺组织匀浆和血浆中TNF-α亦显著升高。2h达高峰。致伤后肺组织胞浆中P65蛋白的表达强度均较对照组显著降低（P〈0．01），而胞核中P65蛋白表达强度均较对照组显著升高（P〈0．01）。结论 LPS引起肺组织和血中TNF-α大量释放。肺组织NF-κB由细胞浆向细胞核转移而活化，提示NF-κB参与炎症的调控，在ALI中起重要作用。     

孕期被动吸烟对新生大鼠肺SP-A和SP-B mRNAs表达影响的研究

目的研究孕期被动吸烟对新生大鼠肺表面活性蛋白A、B(SP-A,SP-B)基因表达的影响,探讨产前被动吸烟对新生大鼠肺损伤的机制.方法分别将SD大鼠于妊娠第1、8和15天置于吸烟箱内每天2 h被动吸烟建立孕鼠被动吸烟动物模型,孕鼠每天置于吸烟箱内2 h不吸烟者为对照组,于妊娠第20天剖宫取胎鼠,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测新生鼠肺组织SP-A、SP-B mRNAs的表达.结果不同孕期被动吸烟SD大鼠所产新生鼠肺组织SP-A、SP-B mRNAs的表达与对照比较和组间无明显差异(P＞0.05).结论孕期被动吸烟对新生大鼠肺组织SP-A和SP-B mRNAs的表达无明显影响.     

支气管异常黏膜肺表面活性蛋白A的表达

目的了解支气管异常黏膜组织是否存在肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)的异常表达。方法支气管镜下钳取异常组织黏膜34例,用SP免疫组织化学方法检测SP-A的表达,同时标本行光镜病理学检查。结果(+++)8例(炎症8例);(++)10例(炎症2例,鳞癌8例);(+)6例(均为中分化鳞癌);(-)10例(小细胞癌8例,低分化鳞癌2例)。结论SP-A可能有助支气管黏膜炎症与高恶度肿瘤组织的鉴别。     

慢性缺氧性肺动脉高压大鼠心,肺心房钠尿肽的含量变化

观察慢性缺氧性肺动脉高压（ＣＨＰＡＨ）大鼠心、肺心房钠尿肽（ＡＮＰ）含量变化。结果显示右心室、肺组织、肺灌流液及动脉血浆ＡＮＰ含量较对照组显著增加（Ｐ〈０．０５￣０．０１），但右房心肌组织ＡＮＰ含量与对照组相比相差不显著（Ｐ〉０．０５）。提示ＣＨＰＡＨ大鼠心、肺合心ＡＮＰ代谢代偿性增加，并以右心室尤为显著。     

Changes of type I collagen in the lungs of rats with hypoxic pulmonary hypertension]

The changes of type I collagen in the lung tissues of rats with hypoxic pulmonary hypertension (HPH) and its relationship to the mean pulmonary arterial pressure (mPAP) were investigated. The blood dynamic indexes of pulmonary circulation were measured by using Swan-Ganz. The distribution of type I collagen in pulmonary arteries, bronchi and plumonary interstitial was observed by using streptavidin peroxidase method (SP). The morphologic changes of small pulmonary arteries and the level of type I collagen were determined by image pattern analysis technique and gray scale scanning, respectively. The results showed, compared with the controls, mPAP of the hypoxic rats elevated (from 2.12 +/- 0.25 to 3.95 +/- 0.43 kPa, P < 0.01), their small pulmonary arteries, walls thickened (MT% from 16.35 +/- 2.64 to 35.83 +/- 3.55, MA% from 26.83 +/- 3.40 to 59.68 +/- 4.90, P < 0.01) and lumen narrowed. The distribution of type I collagen was mainly in the external layer of pulmonary arterial walls; the positive degrees of gray scale scanning increased and had a positive linear relationship to the mPAP and MT%. These findings suggest that the increase of type I collagen contents in pulmonary arteries is closely related to the development of HPH.     

实验性肺纤维化大鼠肺组织Cathepsin B表达的动态变化

目的探讨溶酶体组织蛋白酶B(cathepsinb,CB)在肺纤维化发病中的作用。方法应用博莱霉素(5mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,采用HE染色、Masson三联染色、免疫组织化学染色、RT-PCR等方法,观察实验性大鼠肺纤维化的发病过程及其肺组织中CathepsinB蛋白及mRNA表达水平的动态变化。结果实验性大鼠肺纤维化发病过程中,呈现典型的肺泡炎(7d)、纤维组织增生(14d)及稳定的肺纤维化(28～35d)等表现;CathepsinB在正常肺组织表达较弱,在肺纤维化组7d时表达增强,14d进一步增强,28d明显增强,35d时较28d开始减弱,但仍强于正常组;CathepsinBmRNA在正常肺组织中表达较弱,在肺纤维化组7d时表达增强,14d进一步增强,28d明显增强,35d时较28d开始减弱,但仍强于正常组。结论CathepsinB在实验性大鼠肺纤维化发病过程中起重要作用,其过度表达可能参与了肺纤维化的发生发展过程。     

Changes of AQP2 expression in neonatal rats with acute renal ischemic failure

目的:观察新生鼠急性缺血性肾功能衰竭时AQP2表达的改变特点,探讨其在肾脏缺血和再灌注损伤时的病理生理中的意义.方法:选用生后7dSD大鼠行单侧肾结扎,对侧肾无创伤夹闭肾蒂30 min后,松夹恢复肾灌注复制新生鼠模型,复流6h处理,设立仅作假手术处理的对照组.取标本透射电镜下观察肾脏超微结构变化,并测定血清肌酐Cr水平和以免疫组化法检测肾组织中AQP2的表达.结果:新生鼠肾缺血再灌注后血清Cr明显升高,同时肾组织中AQP2的表达水平明显降低,均低于对照组,统计学上有显著性差异(P＜0.05).结论:实验对象肾缺血再灌注6h后出现严重的肾功能损伤,同时肾组织中的AQP2的表达下调,其可能与肾IRI代谢紊乱后肾小管产生炎症反应和细胞因子有关,同时也说明存在尿浓缩能力的破坏.     

新生鼠急性缺血性肾功能衰竭时AQP2表达的改变

目的:观察新生鼠急性缺血性肾功能衰竭时AQP2表达的改变特点,探讨其在肾脏缺血和再灌注损伤时的病理生理中的意义.方法:选用生后7dSD大鼠行单侧肾结扎,对侧肾无创伤夹闭肾蒂30 min后,松夹恢复肾灌注复制新生鼠模型,复流6h处理,设立仅作假手术处理的对照组.取标本透射电镜下观察肾脏超微结构变化,并测定血清肌酐Cr水平...     

Massive pulmonary hemorrhage in neonatal infection.

Of 35 newborn infants who died from an infection 19 had postmortem evidence of massive pulmonary hemorrhage. All but 1 of the 19 had evidence of antimortem formation of intravascular fibrin clots in lung tissue. Seventeen infants had low platelet counts. Of the 11 infants in whom coagulation studies were done, 8 had evidence of disseminated intravascular coagulation (DIC) during life. Vasculitis in the lungs, associated with fibrin clots and hemorrhages, was detected in two infants. It is postulated that sepsis is an important cause of hemorrhage in the newborn, probably as a result of the development of DIC.     

血管内皮生长因子在低氧性肺动脉高压大鼠肺内的分布和水 …

This study was designed to elucidate whether the level and distribution of vascular endothelial growth factor (VEGF) are changed in the lungs of rats with hypoxic pulmonary hypertension. 13 male Wistar rats were exposed to isobaric hypoxia for 3 weeks. The pulmonary artery pressure was measured by right cardiac catheterization. The level of VEGF in pulmonary homogenate was measured by Elisa method. The distribution of VEGF in the rat lung was examined by immunohistochemistry. The results showed that the pulmonary artery pressure was significantly increased after hypoxic exposure. The level of VEGF in pulmonary homogenate of rats treated with hypoxia (466.9 +/- 75.5 pg/g) were significantly increased as compared with taht of normal rats (376.2 +/- 47.1 pg/g). The contents of VEGF in the wall of pulmonary arteriole were significantly increased in rats with pulmonary hypertension. So we suggest that chronic hypoxia can strongly stimulate VEGF secretion, and VEGF may mediate the process of hypoxic pulmonary vascular remodeling and pulmonary hypertension.     

PKM2在新生鼠缺血缺氧性脑病中的表达变化*

目的：观察新生鼠缺血缺氧性损伤后,丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2, PKM2)在大脑皮层中的表达变化。方法：选取9 d SD新生鼠40只,按随机数字表法分为假手术组(10只)和缺血缺氧性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy, HIE)模型组(30只)。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色法检查两组的脑组织梗死面积;Western Blot法检测PKM2在大脑皮层的表达水平变化;组织免疫荧光染色检测PKM2在大脑皮层中的定位;将原代神经元经缺氧缺糖(oxygen glucose deprivation, OGD)处理后,通过细胞免疫荧光染色检测PKM2的入核情况。结果：TTC染色结果显示,HIE模型组新生鼠的大脑右侧半球发生梗死;PKM2在大脑皮层的神经元中表达;在OGD刺激之后PKM2的表达在神经元中出现入核现象。结论：新生鼠在缺血缺氧损伤后,PKM2可能通过O-乙酰氨基葡萄糖糖基化对大脑皮层神经元的应激性过程起到一定作用。     

新生儿肺出血发病机制的研究进展

新生儿肺出血的病因很多,本文就其发病机理的研究进展做一综述。     

SP-A在急性坏死性胰腺炎肺损伤大鼠的表达和意义

目的探讨肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)在急性坏死性胰腺炎(ANP)并发急性肺损伤(ALI)发病中的意义及其可能的机制。方法将健康SD大鼠100只随机分成两组:假手术组(SO组)和模型组(ANP组)。成功制模后,各组分别在6、12、24、36、48 h采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清及肺泡灌洗液(BALF)中SP-A的浓度。同时进行肺湿/干质量比値(W/D)测定,观察胰腺和肺组织病理形态学的改变。结果 ANP组血清SP-A浓度从6 h开始明显上升,36 h达到高峰,48 h仍强烈表达,数值仍高于SO组(P<0.01)。ANP组BALF中SP-A浓度较SO组相同时间点明显下降(P<0.01)。随着胰腺损伤的逐渐加重,肺损伤程度也逐渐加重。结论血清SP-A浓度的增高及BALF中SP-A浓度减少程度与病情严重程度呈正相关。