正常人外周血单个核细胞P-170和MRP的表达及临床意义

目的 :探讨多药耐药相关蛋白 (MRP)和P - 170在正常人外周血单个核细胞中的表达。方法 :以免疫组化ABC法检测了 4 8例正常人外周血单个核细胞P - 170的表达和 37正常人外周血单个核细胞MRP的表达 ,并同时检测了 19例正常人外周血单个核细胞P170和MRP的表达。结果 :正常人外周血细胞P170表达为 2 .6 8%± 1.77% ;正常人外周血细胞为 1.6 9%± 1.0 1%。同时检测正常人外周血细胞P - 170和MRP表达分别为 3.5 8%± 1.89%、1.6 3%± 1.0 2 %。结论 :MRP - 170在正常人外周血细胞中有一定的表达 ,两者表达有一定的一致性。     

急性白血病病人GST-π、MRP1表达及其相关性的临床研究

目的：检测急性白血病（acute leukemia，AL）病人谷胱甘肽硫转移酶-π（glutathione—S—transferltse-π，GST-π）、多药耐药相关蛋白1（multi—drug resistance relevant protein 1，MRP1）的表达，探讨二者与AL多药耐药（multi—drug resistance，MDR）的关系及临床意义，明确二者在AL中的表达有无相关性以及两者表达与AL病人临床特征的关系。方法：采用免疫组织化学S—P法检测80例AL病人及30例正常人外周血单个核细胞GST-π、MPP1表达。运用SPSS10．0统计软件，采用X^2检验、四格表精确概率法、t检验、直线相关分析方法统计结果。结果：GST-π、MRP1在难治组的阳性率均高于初治组和完全缓解组；在初治组的阳性率均高于对照组。GST-π、MRP1在AL难治组中的表达具有高度相关性。GST-π、MRP1表达阳性组完全缓解率低于阴性组。GST-π、MRP1的表达与AL难治组病人年龄、性别、骨髓幼稚细胞比例及外周血白细胞计数无关。且两者在急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）组、急性非淋巴细胞白血病（acute nonlymphoblastic leukemia，ANLL）组表达无差别。结论：GST-π和MRP1的高表达与AL临床耐药有关；GST-π和MRP1在难治组中的表达密切相关；GST-π和MRP1表达阳性的AL病人的完全缓解率明显降低，两者可能是影响AL疗效的重要指标；GST-π和MRP1在难治组表达阳性率与年龄、性别、外周血白细胞计数、骨髓幼稚细胞比例可能无关，且在ALL组与ANLL组中差别无统计学意义。     

急性髓细胞性白血病病人TCRζ链基因表达特点

目的建立实时定量PCR方法检测TCRξ链表达水平的方法，了解急性髓细胞性白血病病人外周血TCRξ链基因表达水平。方法采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测31例急性髓细胞性白血病患者（M1型6例，M2型15例，M3型10例）和30例正常人外周血的单个核细胞的TCRξ链表达情况，以β2微球蛋白基因（β2M）作为内参，根据相对定量公式2^-△△α计算急性髓细胞性白血病患者与正常人TCRξ链表达差异倍数。结果与正常人相比，急性髓细胞性白血病患者TCRξ链表达特点可以分为表达缺失（16％）、表达下降（26％）和表达上升（58％）三种情况。而三种不同亚型急性髓细胞性白血病之间的TCRξ链表达模式相似。结论本研究成功建立了SYBR Green Ⅰ荧光实时定量PCR和相关定量分析TCRξ链表达水平技术，并首先报道了急性髓细胞性自血病病人TCRξ链表达水平的变化。     

恶性血液病患者CD54表达及其与临床特征、疗效的关系

目的 探讨细胞间黏附分子－1（CD54）在恶性血液病的表达。方法 用免疫荧光方法检测19例急性髓系白血病，34例急性淋巴细胞白血病，10例慢性粒细胞白血病，15例多发性骨髓瘤，21例非霍奇金淋巴瘤和16例正常人骨髓单个核细胞表达CD54。结果 （1）除多发性骨髓瘤，慢性凿细胞性白血病外，急性髓性白血病细胞，非霍奇金淋巴瘤，急性淋巴细胞白血病患骨髓单个核细胞表面CD54表达低于正常人。（2）CD54在急性早幼粒细胞白血病（M3）表达高于在其它类型急性髓系白血病细胞表达，在T－急性淋巴细胞白血病表达明显低于B－急性淋巴细胞白血病表达。（3）高白细胞数，中枢神经系统白血病，脾肿大表达水平下降（P＜0．05）。（4）CD54的表达在急性淋巴细胞白血病完全缓解组明显高于未缓解组，P＜0．01。随着病情缓解CD54表达可升至正常范围。结论 不同的恶性血液病，黏附分子CD54表达不同，并与细胞类型，临床特征及疗效有关。     

急性白血病细胞肿瘤坏死因子mRNA表达及其意义

目的 了解急性白血病不同类（亚）型及不同病期患者肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）在ｍＲＮＡ水平表达的差异。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ半定量法检测急性白血病患者６５例（初治４９例,复发８例,缓解８例）外周血或骨髓血单个核细胞ＴＮＦ－ｍＲＮＡ表达量,并以１５例献血员及健康志愿者为对照。结果 （１）急性白血病初治组的ＴＮＦｍＲＮＡ表达阳怀率虽低于对照组,但平均表达量显示高于对照组,其中Ｍ５ａ的ＴＮＦｍＲＮＡ表达量显示     

LAK细胞的抗白血病效应及其影响因素的研究

本实验研究了LAK细胞/IL—2过继输入对L_(615)白血病的治疗作用并用细胞毒试验研究了影响LAK细胞/IL—2临床治疗急性白血病的若干因素。实验结果表明,LAK细胞对急性白血病有治疗作用;急性白血病病人外周血单个核细胞诱生的LAK细胞活性极低,其血清对LAK细胞活性有抑制作用;用同种异体的正常人外周血单个核细胞或胎儿脾脏单个核细胞、胸腺细胞诱生的LAK细胞对急性白血病细胞有较强的杀伤活性,是临床治疗急性白血病的可靠的LAK细胞来源。     

囊性纤维化跨膜转导调节因子与急性白血病患者临床特征及预后的关系

  目的  检测细胞囊性纤维化跨膜转导调节因子（CFTR）在急性白血病及其亚型中的表达情况,分析其与急性白血病患者的临床特征及预后的关系。  方法  纳入115例急性白血病患者为实验组,以同期体检健康者为对照组,收集其外周血或骨髓,分离单个核细胞,采用Western blot法检测细胞的CFTR蛋白相对表达量,分析CFTR蛋白表达与急性白血病患者的临床特征及预后的关系。  结果  正常人外周血单个核细胞未检测出CFTR蛋白表达,而一半以上急性白血病包括急性髓系白血病（AML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）患者CFTR蛋白表达阳性,而急性早幼粒细胞白血病（M3）患者均未检测到CFTR蛋白阳性表达。在AML患者中,CFTR蛋白表达阳性和阴性患者在外周血白细胞计数（WBC）、外周血原始细胞数、血小板（PLT）和血红蛋白（HGB）等方面差异无统计学意义,也与NPM1、CEBPA、FLT3-ITD、C-Kit等基因突变无相关性,CFTR蛋白阴性患者2疗程完全缓解（CR）率略高于阳性患者,生存期略长于阳性患者,但差异无统计学意义。在ALL患者中,CFTR蛋白与患者的临床特征及预后均无关。  结论  本研究尚未发现CFTR蛋白与急性白血病患者临床特征、治疗反应及预后有相关性。     

慢病毒介导的 GFI －1基因沉默对慢性髓细胞白血病患者单个核细胞生长及凋亡的影响

目的：观察慢病毒介导的GFI－1基因沉默后对慢性髓细胞白血病患者单个核细胞生长及凋亡的影响，研究GFI－1在慢性髓细胞白血病发病中作用。方法收集16例慢性髓细胞白血病初治患者的外周血标本，以17例正常人的外周血作为正常对照。并采集患者及正常人的临床相关资料，以慢病毒感染方法沉默GFI－1基因，以实时定量PCR、Western blot、流式细胞术等方法研究慢性髓细胞白血病患者GFI－1在单个核细胞中的表达及基因沉默后对细胞生长及凋亡的影响。结果 GFI－1在慢性髓细胞白血病初治患者中的表达明显高于正常人，差异有统计学意义（P＜0.001）。 GFI－1沉默后72 h，与感染了空载体的慢性髓细胞白血病单个核细胞相比细胞增殖显著受抑制（P＜0.001），细胞凋亡也明显高于感染了空载体的慢性髓细胞白血病单个核细胞（P＜0.005），细胞周期阻滞。结论 GFI－1可能通过调控凋亡通路及细胞周期相关因子导致细胞凋亡周期阻滞，从而抑制细胞增殖。     

淋巴细胞肿瘤病人外周血单个核细胞中Elf-1基因表达特点

目的　了解T细胞特异性转录因子Elf-1基因在T细胞和B细胞肿瘤病人中的表达特点。方法　采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测20例健康人外周血及49例淋巴细胞肿瘤病人[急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）7例、T细胞非霍奇金淋巴瘤（T-NHL）6例、急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）10例、慢性B淋巴细胞白血病（B-CLL）7例和B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）19例]外周血单个核细胞中Elf-1基因表达情况,以β2微球蛋白基因（β2M)作为内参,采用公式2-△Ct×100%计算Elf-1基因表达水平。结果　与健康对照组（2.044±1.321%）相比,T细胞肿瘤组（12.050±10.334%）与B细胞肿瘤组（14.144±21.576%）患者外周血Elf-1基因表达均明显上升（P<0. 01,P<0. 01）。T细胞肿瘤组Elf-1基因表达水平与B细胞肿瘤组的差异无统计学意义（P>0.05）。但五种类型淋巴细胞肿瘤Elf-1基因表达水平有所不同,其中以B-ALL最高,T-ALL次之,而B-NHL组的Elf-1基因表达水平最低。结论　Elf-1基因在T细胞和B细胞肿瘤病人外周血单个核细胞中均呈高表达状态,其表达上调可能与机体T细胞免疫缺陷相关。     

急性髓细胞性白血病病人TCRζ链基因表达特点

目的 建立实时定量PCR方法检测TCRζ链表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病病人外周血TCRζ链基因表达水平.方法 采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测31例急性髓细胞性白血病患者(M1型6例,M2型15例,M3型10例)和30例正常人外周血的单个核细胞的TCRζ链表达情况,以β2微球蛋白基因(Β2m)作为内参,根据相对定量公式2-△△α计算急性髓细胞性白血病患者与正常人TCRζ链表达差异倍数.结果 与正常人相比,急性髓细胞性白血病患者TCRζ链表达特点可以分为表达缺失(16%)、表达下降(26%)和表达上升(58%)三种情况.而三种不同亚型急性髓细胞性白血病之间的TCRζ链表达模式相似.结论 本研究成功建立了SYBR Green Ⅰ荧光实时定量PCR和相关定量分析TCRζ链表达水平技术,并首先报道了急性髓细胞性白血病病人TCRζ链表达水平的变化.     

急性白血病多药耐药相关蛋白基因表达及临床意义

（１）目的 探讨急性白血病（ＡＬ）多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因的表达及临床意义。（２）方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,对７７例ＡＬ病人及１０例健康人基因表达进行检测。（３）结果 ７７例ＡＬ病人ＭＲＰ平均表达水平与对照组比较差异无显著性,复发组ＭＲＰ平均表达水平与初治组比较差异有显著性（ｔ＝５．３２,Ｐ〈０．０１）。（４）结论 ＡＬ的复发与ＭＲＰ表达有关,ＭＲＰ基因的过度表     

急性白血病患者JAK家族基因的表达及临床意义

目的 探讨不同时期急性白血病(AL)细胞中JAKs基因的表达情况及其临床意义.方法 将入选患者分为初治组、复发组、完全缓解组(CR组)和正常对照组(NC组),RT-PCR方法检测AL患者和正常对照者骨髓MNC中JAKI～3和TYK2mRNA的表达.结果 (1)AL患者JAK2、JAK3、TYK2 mRNA平均表达水平较CR组和NC组差异有统计学意义(P＜0.05).初治AL患者JAK1mRNA表达水平较NC组略增高,但差异无统计学(P＞0.05),复发AL患者JAK1 mRNA表达水平较NC组差异有统计学意义(P＜0.05);(2)TYK2阳性组的AL患者缓解率较TYK2阴性患者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 JAK家族基因在白血病患者的高表达可能在白血病的发生发展中起重要作用.急性髓性白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)在激活JAK/STAT信号传导通路的方式有所不同.     

急性白血病多药耐药相关蛋白及P糖蛋白表达与临床耐药的关系

目的 :研究急性白血病患者多药耐药相关蛋白 (MRP)及P 糖蛋白 (P 170 )的表达与临床耐药的关系。方法 :采用免疫组织化学方法检测 72例急性白血病患者骨髓单个核细胞MRP和P 170的表达。结果 :72例化疗后急性白血病患者中 ,MRP阳性表达 39例 ,阴性表达 33例 ,MRP阳性表达者疗效显著差于阴性表达者 (P <0 .0 1) ;P 170阳性表达 4 6例 ,阴性表达 2 6例 ,P 170阳性表达者疗效显著差于阴性表达者 (P <0 .0 1) ;MRP与P 170表达有一定的一致性 (Kappa系数 =0 .4 2 7,P<0 .0 1) ,两者同时检测对耐药患者的灵敏度为 97 5 % ,高于P 170检测的灵敏度 (90 % )和MRP检测的灵敏度 (77 5 % )。结论 :P 170和MRP表达与临床化疗耐药密切相关 ,P 170和 或MRP阳性表达者临床疗效显著差于阴性表达者。MRP与P 170两者同时检测可提高对耐药白血病患者的判断及预后估计     

急性白血病多药耐药相关蛋白及P糖蛋白表达与临床耐药的关系

OBJECTIVE: To investigate the relevance between the expression of P-170 and MRP and clinical drug resistance in acute leukemia. METHODS: The expression of P-170 and MRP in mononuclear cells of bone marrows was analyzed by the immunohistochemical technique in 72 acute leukemia patients. RESULTS: The expression of P-170 was positive in 46 and negative in 26 of the 72 post-chemotherapy acute leukemia patients. The therapeutic effect of the P-170 positive expression patients was significantly poorer than that of the negative expression patients (P < 0.01). The expression of MRP was positive in 39 and negative in 33 of the 72 post-chemotherapy acute leukemia patients. The therapeutic effect of the MRP positive expression patients was significantly poorer than that in the negative expression patients (P < 0.01). The expression of P-170 and MRP had a significant concordance (Kappa = 0.427, P < 0.01). The sensitivity of P-170 and MRP which were analyzed simultaneously was 97.5%, which was higher than that of P-170 (90%) or MRP (77.5%) analyzed respectively in drug resistance patients. CONCLUSION: The expression of P-170 and/or MRP was significantly related with drug resistance in clinical chemotherapy. The therapeutic effect was significantly poorer in P-170 and/or MRP positive expression patients than that in negative expression patients. These data suggest that P-170 and MRP analyzed simultaneously can improve the value of diagnosis and prognosis in patients with drug resistance leukemia.     

Expression of MRP1 gene in acute leukemia

CONTEXT AND OBJECTIVE: Overexpression of the multidrug resistance-associated protein 1 (MRP1) gene has been linked with resistance to chemotherapy in vitro, but little is known about its clinical impact on acute leukemia patients. Our aim was to investigate the possible association between MRP1 gene expression level and clinical outcomes among Iranian leukemia patients. DESIGN AND SETTING: This was an analytical cross-sectional study on patients referred to the Hematology, Oncology and Stem Cell Research Center, Sharyatee Public Hospital, whose diagnosis was acute myelogenous leukemia (AML) or acute lymphoblastic leukemia (ALL). All molecular work was performed at NIGEB (public institution). METHODS: To correlate with prognostic markers and the clinical outcome of acute leukemia, MRP1 gene expression was assessed in 35 AML cases and 17 ALL cases, using the quantitative real-time polymerase chain reaction and comparing this to the chemotherapy response type. RESULTS: Mean expression in AML patients in complete remission (0.032 +/- 0.031) was significantly lower than in relapsed cases (0.422 +/- 0.297). In contrast, no significant difference in MRP1 mRNA level was observed between complete remission and relapsed ALL patients. There was a difference in MRP1 expression between patients with unfavorable and favorable cytogenetic prognosis (0.670 +/- 0.074 and 0.028 +/- 0.013, respectively). MRP1 expression in M5 was significantly higher (p-value = 0.001) than in other subtypes. CONCLUSIONS: The findings suggest that high MRP1 expression was associated with poor clinical outcome and was correlated with the M5 subtype and poor cytogenetic subgroups among AML patients but not among ALL patients.     

nm23-H1基因在急性白血病中表达及与多药耐药关系

①目的 检测急性白血病病人nm23-H1基因表达,探讨其与病人预后和多药耐药的关系。②方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测46例初诊急性白血病病人及15例正常对照组骨髓细胞nm23-H1表达,同时检测其多药耐药基因MDR1及MRP表达。③结果 正常骨髓细胞nm23-H1表达阴性;46例急性白血病病人中,43例有nm23-H1表达。且其表达水平与MDR1及MRP表达水平无明显相关性（r=0．39、0．21,P〉0．05）。④结论 nm23-H1高表达与急性白血病发生有关,但与MDR1及MRP基因的表达无关。     

急性白血病患者骨髓细胞CHFR基因表达及其临床意义

目的:探讨成人急性白血病(AL)患者骨髓细胞中有丝分裂早期稽查点CHFR基因的。方法　采用流式细胞术检测HL 60细胞的细胞周期,逆转录聚合酶链反应对65例初治(45例)及复发(20例)的AL患者进行CHFR基因mRNA水平的检测,对其中32例AL患者,用免疫印迹法检测CHFR蛋白表达水平。8名正常人作为对照。结果　(1)CHFR蛋白表达水平与S期细胞所占比例相关。(2) 60 .0% ( 27 /45 )的AL患者CHFR基因mRNA表达水平和40. 6% ( 13 /32)的AL患者CHFR的蛋白表达水平明显低于正常对照相。( 3 )复发组急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者的CHFR蛋白中位表达水平(0 .71)明显高于初治组(0 38),差异有统计学意义(t=2. 54,P=0. 017)。(4)CHFR的蛋白或mRNA高表达患者完全缓解率(分别为30. 2%, 42 .4% )明显低于CHFR蛋白或mRNA低表达患者(分别为88. 6%, 85. 4% ),差异有统计学意义(均P<0. 05 )。结论　在AL患者骨髓单个核细胞中CHFR基因高表达是一个耐药标志,是影响患者对化疗敏感性的因素,其低表达可能是AL患者对化疗敏感的指标之一。     

HBV逆转录酶mRNA在乙型病毒性肝炎病人 PBMCs中的表达

①目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）逆转录酶mRNA在乙型病毒性肝炎病人外周血单个核细胞（PMBCs）中的表达及临床意义。②方法 选择30例乙型病毒性肝炎病人，分别提取其PMCs中的总RNA，逆转录合成cDNA，设计引物进行PCR扩增以检测HBV逆转录酶mRNA的表达情况。③结果 30例乙型病毒性肝炎病人PBMCs中HBV逆转录酶mRNA的表达阳性率为13.3%（4 /30),慢性乙型病毒性肝炎病人表达阳性率为16.0%（4/25），其中慢性轻度，中度和重度乙型病毒性肝炎病人表达的阳性率分别为11.1%（1/9）、16.7%(1/6)、20.0%(2/10)，5例急性乙型病毒性肝炎病人表达均阴性。④结论 HBV逆转录酶mRNA在PBMCs中的表达与乙型病毒性肝炎的慢性及重症化有关。     

PTEN?VEGF?FLT1基因在髓系白血病中的表达及其相关性研究

目的:探讨肿瘤抑制基因PTEN及血管内皮生长因子(VEGF)及其受体FLT1(VEGFR1)在白血病中的表达及其相关性。方法:应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测50例初治急性髓系白血病(AML),10例缓解期AML,10例慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)、10例CML急变期(CML-BC)患者和10例正常人骨髓单个核细胞(MMNCs)中PTEN、VEGF、FLT1 mRNA的表达。结果:初治AML患者PTEN mRNA表达水平明显低于缓解组AML和正常对照组,CML-BC患者PTEN mRNA表达水平低于CML-CP患者,在AML初治白血病中PTEN mRNA与VEGF和FLT1 mRNA表达负相关,PTEN低表达、VEGF和FLT1高表达与AML缓解率及髓外浸润相关。结论:髓系白血病患者中低表达PTEN基因,高表达VEGF及FLT1基因,并与白血病预后不良及髓外浸润密切相关,三者相互作用共同参与了白血病的发病。     

BMI-1基因在66例白血病中的表达及其意义

目的：观察BMI—1（B-cell-specific moloney leukemia virus insert site 1）基因在白血病中的表达及其与白血病的关系。方法：应用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）技术，分别检测慢性粒细胞白血病细胞株（K562），26例慢性粒细胞白血病（CML）患者，6例慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者，34例急性白血病（AL）患者和10例对照的骨髓单个核细胞（BMMNC）中BMI-1 mRNA的表达情况，分析其在白血病中的表达规律及临床意义。结果：BMI-1基因在10例对照组标本中无表达；K562细胞株中BMI-1纂因呈阳性表达；CML组中BMI-1基因的阳性率为15．4％，其中包括CML慢性期（CML—CP）及CML急变期（CML-AP），其阳性率分别为5％和50％；CLL组中BMI-1基因无表达；AL组中BMI-1基因表达率为47．1％，其中包括急忡髓系白血病（AML）及急性淋巴细胞白血病（ALL），其阳性率分别为57．7％和12．9％；CML-CP组与CML-AP组阳性率比较差异有统计学学意义（P〈0．05），初诊AL中，AML组和ALL组阳性率比较差异有统计学意义（P〈0．05），CML—AP组与初诊AL组阳性毕比较差异无统计学意义（P〉0.05）。对2例初诊BMI-1基因阳性表达患者随诊发现，初诊时BMI-1基因表达阳性，完全缓解后无表达，复发后再次表达，经再次治疗后仅达部分缓解，其BMI—1基因表达持续阳性。结论：BMI-1基因红出缸病中存在较高的表达，在正常人及完全缓解病例中无表达，且与疾病的转归相关，提示BMI-1基因高表达可能参与白血病的发生、发展过程，有可能作为一种分子标志，为白血病的靶向治疗提供新的位点。