雷公藤甲素对肺癌细胞Spc-A1 VEGF表达的影响

目的研究雷公藤甲素(TP)对人肺癌细胞Spc-A1增殖及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法细胞生长增殖抑制试验(MTT法)检测TP对Spc-A1细胞的增殖抑制作用；反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测TP对VEGF信使核糖核酸(VEGF mRNA)表达的影响；Western blot检测TP对VEGF蛋白表达的影响。结果TP对人肺癌细胞Spc-A1的生长和增殖都具有一定程度的抑制作用,药物作用24 h抑制率为2．16±2．10～13．33±1．43,药物作用48 h抑制率为7．97±2．13～29．27±7．28,与对照组相比差异有显著意义(P＜0．05)；TP作用于人肺癌细胞Spc-A1 24 h,下调VEGF mRNA及蛋白的表达。结论不同浓度的TP干预Spc-A1细胞24 h、48 h后,Spc-A1细胞的增殖受到一定程度的抑制,抑制率随浓度(剂量)和时间的增加而增加；不同浓度的TP作用24 h后的Spc-A1细胞VEGF mRNA及蛋白表达均明显减少。     

亚砷酸钠对人肺癌Spc-A1细胞端粒酶活性的影响

目的:研究亚砷酸钠( NaAsO2)对人肺癌Spc-A1细胞株端粒酶活性及其催化亚单位hTERT表达的影响,探讨其抗癌机制.方法:四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测亚砷酸钠对Spc-A1细胞增殖的抑制作用;端粒酶活性采用端粒末端重复序列扩增-酶联免疫吸附法(TRAP-ELISA)测定;端粒酶催化亚单位hTERT mRNA表达采用反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)测定.结果:亚砷酸钠对人肺癌细胞株Spc-A1的增殖具有一定程度的抑制作用.在12h、24h和48h三个时间段均可见Spc-A1细胞端粒酶活性随着药物浓度的增加逐渐下降.并且,hTERT mRNA表达下调与端粒酶活性下降一致.结论:亚砷酸钠对Spc-A1细胞的增殖具有一定的抑制作用,下调癌细胞hTERT mRNA的表达来抑制端粒酶活性可能是其中一种机制.     

亚砷酸钠对人肺癌Spc-A1细胞Bcl-2、Fas表达的影响

目的:探讨亚砷酸钠对人肺癌细胞株Spc-A1的抗癌机制。方法:用MTT法检测亚砷酸钠对Spc-A1细胞的增殖抑制作用;用Hoechst33258荧光染色法观察凋亡细胞的形态学改变;细胞凋亡率及相关蛋白Bcl-2和Fas的表达采用流式细胞仪测定。结果:亚砷酸钠对人肺癌细胞株Spc-A1的增殖具有一定程度的抑制作用。2μg/ml亚砷酸钠干预Spc-A1细胞12h、24h和48h后,在Hoechst荧光染色图片上可见细胞染色质浓缩及细胞核碎裂等典型的凋亡改变。给与1μg/ml、2μg/m l和4μg/ml亚砷酸钠作用Spc-A1细胞24h后,可以见到亚G1期凋亡峰,凋亡率随着药物浓度的增加明显增加。同时,流式细胞仪显示Bcl-2蛋白表达减少,而Fas蛋白表达增加。结论:亚砷酸钠对Spc-A1细胞的生长有明显的抑制作用,并可诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡和坏死。Bcl-2的下调和Fas的上调可能是其中一种作用机制。     

Mithramycin A对肝癌Huh-7细胞增殖和基因表达的影响

目的:研究光辉霉素A(mithramy-tin A,MIT)对人肝癌细胞Huh-7的作用.方法:CCK-8法观察MIT对Huh-7细胞的生长抑制作用;Real time-PCR法和蛋白质印迹法检测MlT作用后Huh-7细胞中Spl、VEGF和c-Met表达情况.结果:MIT作用Huh-7细胞48 h时细胞生长抑制作用与浓度成正相关.5×10-4μmol/L时细胞增殖的抑制率为2.9%,5μmol/L时达92.4%.随时间延长抑制率逐渐增高.作用24 h时抑制率为6.15%,60 h达72.65%.半数抑制浓度(IC50)为60.12 nmol/L.与对照组Spl mRNA表达量(1.459 9±0.269 6)相比,其表达量与浓度有关,500 nmol/L时其表达量(0.274 3±0.104 3)下降约为81.21%,P=0.002 7.且其表达量与时间有关,与表达量(1.459 856±0.269 603)相比,加药72 h时其表达量(0.430 778±0.125 143)明显下降,P=0.003 4.VEGF和c-Met的mRNA表达量变化有一个相同的趋势,随浓度和时间增加表达逐渐下调.MIT对Spl、VEGF和c-Met在蛋白水平的表达有抑制作用.结论:MIT对Huh-7细胞有明显的生长抑制作用.MIT能抑制人肝癌Huh-7细胞Spl及其下游基因表达.     

伊班膦酸对人肺癌细胞株A549生长及其对VEGF表达的影响

目的:观察伊班膦酸对人肺癌A549细胞株体外增殖抑制作用及对血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响. 方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度伊班膦酸对A549细胞的生长抑制作用;酶联免疫吸附试验(ELISA)和RT-PCR检测不同药物浓度下VEGF表达水平变化. 结果: 伊班膦酸对人肺癌细胞的生长抑制率随时间和浓度的增加呈明显的上升趋势,表现出一定的剂量时间依赖关系,差异有统计学意义;不同药物浓度作用后,A549细胞VEGF表达与对照组相比逐渐减少.结论: 伊班膦酸能抑制A549细胞的生长增殖,抑制VEGF表达可能为其机制之一.     

神经节苷脂GM3对人宫颈癌HeLa细胞凋亡和血管内皮生长因子表达的影响

目的 研究外源性神经节苷脂GM3对人宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡和VEGF表达的影响.方法 不同浓度GM3干预HeLa细胞24 h后,MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞学技术检测细胞凋亡率,RT-PCR技术检测细胞VEGF mRNA表达水平,Western blot技术检测细胞VEGF蛋白水平.结果 (1) GM3浓度分别为2、10、50和250 μmol/L时,HeLa细胞生长抑制率分别为9.8％、32.9％、50.7％和78.6％,半数抑制浓度(IC50)为49.8 μmol/L.(2) GM3浓度分别为10、50和250 μmol/L时,HeLa细胞凋亡率分别为(4.9±0.4)％、(15.1±0.3)％、(24.4±0.7)％.(3)当GM3浓度高于10 μmol/L时,HeLa细胞VEGF mRNA表达水平以及VEGF蛋白表达水平均显著下降(P＜0.05).结论 外源性神经节苷脂GM3能呈浓度依赖性抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖,促进HeLa细胞凋亡,下调HeLa VEGF mRNA水平和蛋白水平,提示GM3可能通过调节肿瘤细胞凋亡和肿瘤血管生成而发挥双重抗肿瘤作用.     

姜黄素抑制HeLa细胞诱导的血管内皮细胞增殖作用及其机制研究

目的:研究姜黄素对HeLa细胞诱导的血管内皮细胞增殖的抑制作用及其机制.方法:采用台盼蓝排染法计数人脐静脉内皮细胞系ECV304细胞,MTT法测定不同浓度姜黄素对ECV304细胞和HeLa细胞诱导的ECV304细胞增殖的抑制,采用RT-PCR和Western blot检测40 μmol/L姜黄素作用于HeLa细胞诱导的血管内皮细胞4、8、16和24 h后,血管内皮生长因子(VEGF)及其受体VEGFR2(KDR)基因及蛋白的表达.结果:姜黄素直接作用于ECV304细胞,其细胞计数较对照组显著减少(P<0.05),并呈浓度依赖性.MTT法测得不同浓度姜黄素作用后,可产生显著的细胞增殖抑制作用,48 h体外半数抑制浓度(IC50)值为(38.4±0.031) μmol/L.随着姜黄素浓度的增加,其时ECV304细胞和HeLa细胞诱导的ECV304细胞的增殖有明显的抑制作用,P值分别为0.000 0和0.000 1.姜黄素作用于HeLa细胞诱导的血管内皮细胞4、8、16和24 h后,能明显下调VEGF与KDR的mRNA和蛋白表达.结论:姜黄素能直接抑制血管内皮细胞的增殖,对HeLa细胞诱导的血管内皮细胞的增殖也有抑制作用.此作用可能是通过押制VEGF及其受体KDR的mRNA和蛋白表达来实现的.     

60Co-γ照射对肺癌A549细胞VEGF表达的影响

目的:探讨60Co -γ射线照射肺癌A549细胞后血管内皮生长因子(vascula endothelial growth factor ,VEGF)表达变化.方法:2 Gy剂量60 Co-γ射线照射肺癌A549细胞,以荧光定量PCR法检测照射后4、12、24、48、72 h VEGF mRNA表达改变, 以ELISA法检测各组培养液上清中VEGF蛋白表达量变化.结果:以对照组(未照射组)VEGF mRNA表达量为1,照射后4 h VEGF mRNA表达开始升高,12、24小时达到高峰(8.83±3.01,P＜0.05 ;14.67±7.18,P＜0.01),48-72 h随后降至接近对照组水平.ELISA检测培养液上清中VEGF蛋白表达量,在照射后4 h 降低,随后开始升高,24、48 h达到高峰(600.86±20.87,P＜0.05;594.75± 2.52,P＜0.05),72 h降至对照组水平.结论:2 Gy剂量60Co-γ射线照射肺癌A549细胞后早期VEGF表达升高,我们推测此时可能是联合抗VEGF药物抑制肺癌转移的最佳时机.     

姜黄素抑制结肠癌SW480细胞的增殖及其机制

目的:研究姜黄素对人结肠癌SW480细胞增殖以及survivin、caspase-3和p-Akt表达的影响。方法:用不同浓度姜黄素(5～40μmol/L)作用SW480细胞24、48和72 h,MTT法检测姜黄素对SW480细胞生长的抑制作用,Western blotting法检测SW480细胞中survivin、caspase-3和p-Akt蛋白的表达。结果:姜黄素以剂量(5～40μmol/L)和时间(24～72 h)依赖的方式抑制SW480细胞的增殖(P<0.01),40μmol/L姜黄素作用72 h对SW480细胞生长的抑制率可达(75.86±3.93)%。姜黄素抑制SW480细胞中p-Akt、survivin蛋白的表达、促进caspase-3蛋白的表达,均呈时间和剂量依赖性;40μmol/L姜黄素作用SW480细胞48 h后p-Akt和survivin蛋白表达显著减少[(0.204±0.025)vs(0.367±0.035),P<0.01;(0.208±0.014)vs(0.385±0.034),P<0.01],caspase-3蛋白表达显著增加[(0.371±0.028)vs(0.127±0.023),P<0.01]。结论:姜黄素抑制SW480细胞增殖,其机制可能与抑制Akt磷酸化、下调survivin和上调caspase-3蛋白的表达有关。     

沉默survivin基因抑制Lovo细胞生长的体外实验研究

目的 探讨survivin基因沉默对人结肠癌Lovo细胞体外生长的抑制作用.方法 构建靶向survivin的shRNA载体质粒,然后转染结肠癌Lovo细胞.用RT-PCR和Western Blot方法检测survivin的Mrna和蛋白的表达情况.MTT实验评价转染后各组细胞的增殖抑制情况.结果 靶向survivin的shRNA能够明显下调survivin Mrna和蛋白质表达(P＜0.05),其抑制率分别是39.59%和42.32%.MTT实验提示转染特异性靶向survivin shRNA的Lovo细胞在转染48小时后出现呈时间依赖性的生长抑制.在转染后72 h,该细胞存活率仅为41.8%.与空白对照组相比有显著性的降低(P＜0.05).结论 靶向survivin的特异性shRNA能够有效地沉默结肠癌Lovo细胞的survivin基因表达,体外实验能显著抑制肿瘤细胞增殖.     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。