α-地中海贫血的产前基因诊断

目的应用PCR技术,对9例父母双方均为γ珠旦白基因缺失杂合子的胎儿进行羊水产前基因诊断.方法聚合酶链反应(PCR)技术.结果9例中3例胎儿表现为基因正常序列(aa/aa),4例胎儿纯合子(--/--),2例胎儿为杂合予(--/aa).B超检查疑有胎儿水肿的3例胎儿,经基因诊断仅有1例是纯合子,1例是杂合子和另1例是正常.结论PCR在α地中海贫血胎儿产前诊断决定胎儿是否存留的最可靠的方法,宣传教育和人群筛查十分必要,尽早发现杂合子夫妻,实施有效的产前诊断是降低水肿胎出生的根本所在.     

α-地中海贫血的产前基因诊断

目的研究聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在α地中海贫血产前诊断中的价值。方法应用ＰＣＲ技术,对１１例父母双方均为α珠蛋白基因缺失杂合子的胎儿（１例双胎）行羊水产前基因诊断,扩增产物中出现２２４ｂｐＤＮＡ片段为正常α类珠蛋白基因序列,出现６３０ｂｐＤＮＡ片段的扩增带代表有α类珠蛋白基因缺失,若同时出现２２４ｂｐ和６３０ｂｐ两个ＤＮＡ片段的扩增带,则表示为杂合子。结果３例胎儿表现为基因正常序列（αα／αα）,４例胎儿为杂合子（－－／αα）（其中１例为双胎之一）,４例胎儿为纯合子（－－／－－）（其中１例为双胎之一）。Ｂ超检查疑有胎儿水肿的３例胎儿,经基因诊断仅有２例为纯合子,而另外１例为杂合子。引产的４例胎儿为纯合子α－地中海贫血,其中有１例全身水肿,２例为典型的Ｂａｒｔ′ｓ水肿儿,１例四肢短小、腹疝形成。结论ＰＣＲ技术用于α－地中海贫血的产前诊断,具有快速、准确的特点     

2 171例地中海贫血产前基因诊断回顾性分析

目的：对广东省妇女儿童医院产前诊断中心1 506例α地中海贫血和665例β地中海贫血产前基因诊断进行回顾性分析。方法：对α地中海贫血产前基因诊断采取裂隙聚合酶链反应（gap-PCR）以及PCR结合反向点杂交（RDB）方法,β地中海贫血产前基因诊断采取PCR结合RDB方法,若夫妇一方携带少见突变则加用DNA测序方法。结果：1 506例α地中海贫血产前基因诊断病例中共检测出262例水肿胎,72例血红蛋白H病。665例β地中海贫血产前基因诊断病例中共检测出174例重型β地中海贫血。结论：地中海贫血产前基因诊断有效减少了水肿胎和重型β地贫患儿的出生,对于优生优育、减少围生期并发症具有重要意义。     

应用PCR-RDB技术对β地中海贫血进行快速产前基因诊断

目的　为了降低 β地中海贫血重症患儿的出生率 ,达到优生的目的。　方法　对 5 2 7对孕妇及其配偶进行血液学筛查 ,用 PCR- RDB法对夫妇双方均为 β地中海贫血携带者的孕期夫妇进行产前基因诊断 ,并取脐血验证结果。　结果　共筛出 β地中海贫血阳性患者 2 8例 ,轻型 β地中海贫血阳性率为 2 .6 6 %。男女阳性率为 1∶ 1.15 ,4例产前基因诊断中 ,确定正常胎儿 1例 ,重症胎儿 3例(纯合子 1例 ,双重杂合子 2例 ) ,重型 β地中海贫血胎儿于诊断后两周内终止妊娠。　结论　 PCR-RDB技术可有效减少 β地中海贫血重症患儿的出生 ,具有重要的优生学意义。     

280例β-地中海贫血高风险患儿的产前基因诊断分析

β—地中海贫血(β—地贫)是由β—珠蛋白链合成减少或缺乏引起的发病率很高的血液系统常染色体隐性遗传性疾病，发病原因是由于血红蛋白四聚体α—链和非α—链之间生成数量上失去平衡而导致溶血。华南地区为高发地区，广东β—地贫携带率为3．36％。目前，β—地贫重症患者缺乏有效的根治方法，患者大都幼年夭折。因此，高风险胎儿产前诊断，防     

地中海贫血高风险胎儿的产前基因诊断

目的　探讨地中海贫血 (简称地贫 )高风险胎儿宫内基因诊断的价值。　方法　 12 8例地中海贫血高风险胎儿于妊娠中期抽取羊水 10～ 2 0 ml或脐血 1m l进行基因诊断。　结果　 12 8例被检胎儿中基因正常 32例 ,α地贫缺失杂合子 38例 ,纯合子 2 7例 ;β地贫单一突变杂合子 18例 ,纯合子 4例 ,双重杂合子 9例 ;β地贫基因突变类型及频率依次为 :CD41- 42 (47.5 % ) ,IVS- - 6 5 4(42 .5 % ) ,CD17(A- T) (7.5 % )及 - 2 8(A- G) (2 .5 % )。无一例发生严重母胎并发症 ,重型地贫胎儿 40例均在知情同意前提下及时终止妊娠。　结论　筛查地贫高风险胎儿并及时进行产前基因诊断安全、有效、准确。在地贫高发区域 ,应作为常规产科检测方法。     

206例地中海贫血家系产前基因诊断结果分析

目的 总结206例地中海贫血(简称地贫)产前诊断家系资料,分析其地域分布、基因型分布以及胎儿产前基因诊断结果,用于指导临床遗传咨询,避免高风险地区严重类型地贫患儿的出生. 方法 206例地贫产前诊断家系来自2008年1月至2009年12月期间于广州南方医科大学南方医院产前检查的地贫携带者孕妇及其配偶,抽取夫妇双方外周血和胎儿绒毛、羊水或脐血样本并提取DNA,以跨越断裂位点的聚合酶链反应(gap-polymerase chain reaction,gap-PCR)技术和反向点杂交技术(reverse dot blot,RDB)对a和β-地贫常见突变位点进行检测,同时对临床表型阳性而常见突变位点检测结果阴性的样本进行DNA测序.婴儿出生后半年电话随访婴儿表型. 结果 206例产前诊断家系来自包括黑龙江在内的12个不同省份和地区.a-地贫的基因突变类型有--SEA/、-a 3.7/、-a4.2/、αCSα/和αQSα/,全部为试剂盒中可检测的突变类型;而β-地贫的基因突变除常见的试剂盒中可检测到的类型外,还有中国型G γ+(Aγδβ)0、-28(A→C)、CD54-58 (-TATGGGCAACCCT)和CD37(G→A)等4种突变类型无法用常规试剂盒做出诊断.57例α-地贫家系中,产前诊断严重类型地贫11例(19.3％),包括巴氏水肿胎8例和Hb H病3例,杂合子26例(45.6％),正常胎儿20例(35.1％);149例β-地贫产前诊断家系中,严重类型地贫28例(18.8％),杂合子82例(55.0％),正常胎儿39例(26.2％),其中1例β-地贫杂合子合并13-三体.11例严重类型α-地贫胎儿、28例严重类型β-地贫胎儿和1例β-地贫杂合子伴13-三体胎儿均在围产期前后接受了终止妊娠的处理.结论　地贫的发病地域从长江以南各省逐渐扩散至一些北方地区.运用gap-PCR和PCR-RDB技术对地贫家系进行产前基因诊断,检出严重类型地贫胎儿,是降低高危地域严重类型地贫患儿出生的有效手段.但目前的试剂盒覆盖的检测位点在β-地贫筛查中存在漏诊现象,因此对临床表型阳性而常见突变位点检测结果阴性的样本进行DNA测序是十分必要的.此外,在进行地贫产前诊断的同时,也要注意染色体病产前诊断指征的确定.     

引物延伸预扩增在β-地中海贫血产前基因诊断中的应用研究

目的探讨孕妇外周血中单个胎儿有核红细胞(NRBC)经引物延伸预扩增(PEP)后在β-地中海贫血产前基因诊断中应用的可行性。方法以2004年7月至2005年6月在广西医科大学第一附属医院行产前诊断,夫妇均为轻型β-地中海贫血,孕龄9～34周的28例孕妇为研究对象。显微操作获取母血中NRBC,PEP对单个NRBC进行全基因组扩增,短串联重复序列(STR)鉴定所取细胞的来源。证实为胎儿细胞的PEP产物作为模板进行β-珠蛋白基因扩增,反向点杂交确定胎儿β-珠蛋白基因型。结果每例发现NRBC4～13个,约43.6%的NRBC来源于胎儿。单个NRBC经PEP后STR及β-珠蛋白基因扩增成功率分别为100.0%和90.8%。经反向点杂交可鉴定胎儿β-珠蛋白基因点突变类型,与传统的产前诊断结果相比较,符合率为85.7%,误诊率14.3%。结论母血中单个胎儿NRBC经PEP后可以进行产前基因诊断,不仅可以应用于β-地中海贫血,也可应用于其它遗传病,是一条可供尝试的无创性产前诊断途径。     

双胎及三胎妊娠地中海贫血产前基因诊断研究

目的:探讨双胎妊娠和三胎妊娠地中海贫血的产前基因诊断情况。方法:对27例双胎妊娠和三胎妊娠患者进行绒毛膜穿刺或羊膜囊穿刺胎儿取样,采取裂隙聚合酶链反应以及聚合酶链反应结合反向点杂交方法进行产前基因诊断。结果:在进行α地中海贫血产前基因诊断的20例双胎妊娠及1例三胎妊娠中,共对43个胎儿进行取材,共检测出6例Bart's水肿胎,3例血红蛋白H病。在进行β地中海贫血产前基因诊断的6例双胎妊娠中,共对9个胎儿进行取材,共检测到3例中重型β地中海贫血。结论:地中海贫血的多胎妊娠孕妇产前基因诊断能较有效检出Bart's水肿胎和中重型β地中海贫血患儿,可预防重型地中海贫血患儿的出生。     

福建地区孕妇α地中海贫血基因突变类型及产前诊断

目的:了解福建地区孕妇α地中海贫血的基因突变类型及其分布特征,对高风险胎儿进行产前诊断。方法:应用聚合酶链反应(PCR)和反向斑点杂交(RDB)技术,进行α地中海贫血基因分析和产前诊断;对少见的泰国缺失型α地中海贫血基因类型进行测序确认。结果:1502例孕妇中检出314例α地中海贫血患者,阳性率为20.9%,其中东南亚缺失型杂合子(--SEA/αα)225例,右缺失型杂合子(-α3.7/αα)30例,左缺失型杂合子(-α4.2/αα)10例,左缺失型纯合子(-α4.2/-α4.2)1例,右缺失型纯合子(-α3.7/-α3.7)1例,血红蛋白H病27例(-α3.7/--SEA9例,-α4.2/--SEA13例,ααCS/--SEA2例,ααQS/--SEA2例,ααWS/--SEA1例),另外检出少见泰国缺失型α地中海贫血4例;非缺失型α地中海贫血中,ααQS/αα8例,ααCS/αα6例,ααWS/αα2例。对28对夫妇均为地中海贫血携带者胎儿进行了产前基因诊断,确定正常胎儿6例,地中海贫血杂合子9例,巴氏水肿胎儿(HbBart's)13例。结论:福建地区α地中海贫血基因突变类型较为复杂,首次报道福建地区非缺...     

2414例胎儿羊水细胞的体外培养及染色体核型分析

目的:探讨羊水细胞染色体分析在产前诊断中的应用价值。方法:无菌条件下,经B超介导,对2 414名孕16~25周的孕妇行羊膜腔穿刺术,每例抽取羊水20 ml,经体外培养后进行G显带,显微镜下做核型分析,并了解异常核型的相应高危因素分布情况。结果:共收集到2 414例羊水标本,2 407例培养成功,成功率为99.7%。核型异常124例,异常率为5.1%。其中,染色体数目异常46例,三体综合征38例,占数目异常的82.6%(38/46);结构异常56例,随机的平衡易位、倒位及罗氏易位共47例,占结构异常的83.9%(47/56);22例嵌合体均进行了脐带血核型分析,结果核型均正常。将孕妇按行穿刺的首要指征分为7组,唐氏综合征筛查高危组和高龄组的受检人数分别占48.3%和36.6%,显著多于其他组(P<0.05);B超检查示胎儿异常组、颈后透明层(nuchaltranslucency,NT)增厚组及夫妇一方为染色体异常携带者组的核型异常检出率分别为25.5%、19.0%及17.2%,与其它组比较差异显著(P<0.05)。结论:改进的羊水细胞体外培养方法对核型分析更具实用性。羊水染色体核型分析是安全、有效的诊断胎儿染色体病的方法,在产前诊断中占有重要地位。     

羊水栓塞的发病机制及诊治进展

目前认为羊水栓塞是白三烯、前列腺素、血栓素等物质进入母血循环引起的"妊娠过敏样综合征”.因而,促使肺支气管痉挛、血小板聚集、血管内凝血,主要表现为左心功能障碍导致的肺动脉压轻到中度增高.除临床症状、体征外,早期诊断依靠中心静脉及肺动脉插管吸出物中找到胎儿鳞状上皮细胞或碎屑及右心导管插入术获得血流动力学资料,免疫组化测定肺循环中的ET-1浓度及母亲血清中的sialy1Tn抗原的水平.羊水栓塞的确切诊断,主要是尸检发现肺血管内有胎儿细胞成分.羊水栓塞的治疗,主要是改善低氧血症,防止ARDS发生,保护心肌,抢救休克,保持心输出量及纠正血管内凝血.     

外周血液沉淀试验对羊水栓塞早期诊断的价值

目的：探讨外周血液沉淀试验对羊水栓塞早期诊断的价值。方法：采用血液沉淀试验对１５例羊水检塞患者（观察组）和１００例健康产妇（对照组）血清中羊水成分进行了检测。结果：观察组血清中均出现脂肪球、上皮细胞和毳毛等有形成分，而对照组孕妇血清中则没有上述成分，两组比较，差异有极显著性（Ｐ＜０．００５）。结论：外周血液沉淀试验对羊水栓塞有早期诊断价值     

妊娠晚期特发性羊水量异常羊水的生化改变探讨

目的:探讨妊娠晚期特发性羊水量异常者的羊水生化改变.方法:对73例妊娠晚期特发性羊水异常患者(59例特发性羊水过少、14例特发性羊水过多)进行羊水10项生化指标检测和分析,与同期随机选取的50例无妊娠合并症和并发症的单胎足月孕妇羊水进行比较.结果:特发性羊水过少组羊水中钠浓度、钙浓度、葡萄糖及渗透压较正常组降低,肌酐浓度升高,其差异有统计学意义(P<0.05);特发性羊水过多组各项羊水生化参数与羊水量正常组差异无统计学意义(P>0.05).结论:妊娠晚期特发性羊水过少者羊水中的钠浓度、钙浓度、葡萄糖及渗透压有改变.     

病理学诊断在羊水栓塞诊断中的价值

目的:评价病理学诊断在羊水栓塞诊断中的价值.方法:健康孕晚期山羊12只,根据其股静脉中注入不同羊水性质随机分成3组:原羊水组、过滤羊水组、胎粪污染羊水组,每组4只.在羊水注入3小时后取心脏血和股静脉血查找羊水成分,同时将动物处死,取肺组织行病理学检查.结果:12只动物的中心血和外周血均找到羊水成分,肺组织均可见不同程度的肺水肿及炎性反应,原羊水组1只(25.0%)、胎粪组4只(100%)动物肺组织中找到了羊水成分,过滤羊水组无一例见羊水成分.结论:依靠病理学诊断羊水栓塞可能是不可靠的.     

Prenatal Diagnosis of Duodenal Atresia Using Third Trimester Amniotic Fluid Immunoreactive Trypsin

A previous report (1) demonstrated that the fetal exocrine pancreas is capable of trypsin synthesis in the second trimester and that amniotic fluid immunoreactive trypsin concentration decreased with advancing gestation. Later work (2), confirmed these earlier findings and further investigated the significance of second trimester amniotic fluid immunoreactive trypsin in fetal abnormalities.     

临床早期诊断羊水栓塞的进一步探讨

目的 :进一步探讨羊水栓塞 (AFE)的临床早期确诊。方法 :前瞻性地对 5例临床拟诊AFE者 ,取中心静脉血或外周血涂片 ,H E滴染 ;取同期 2 2例无心肺功能改变的足月孕妇及同期 4例死亡孕妇作对照组。结果 :5例拟诊羊水栓塞者 ,从作出临床诊断至发病的时间为 4～ 9小时 ,5例细胞学检查均找到角化与不全角化上皮细胞 ;对照组 2 2例孕妇中除 1例HELLP综合征的外周血涂片偶见角化上皮细胞外 ,余 2 1例及 4例死亡孕妇血中均未找到角化或不全角化上皮细胞。结论 :前瞻性地对有典型临床表现或疑诊AFE者进行细胞学检查是一种简单、迅速、可靠的AFE早期诊断方法     

羊水栓塞38例临床分析

目的 通过对３８例羊水栓塞患者的临床分析,找出其诱发高危因素,并提出防治措施,方法 对苏州市及所属６个县,市１９８４－１９９８年中发生的３８例羊水栓塞患者的临床资料进行回顾性分析,按每３年为１个阶段划分为５个阶段。结果 在１９８４～１９９８年的１５年中,共发生羊水栓塞３８例,其中初妇产３０例（含双胎１例）,经产妇８例,开始的前４个阶段。３１例全部死亡。第５阶段。７例中有３例死亡,４例存活。羊水栓塞