2,3-吲哚醌的抗衰老作用及机制研究

目的 研究2,3-吲哚醌(2,3-indolinedione,inatin,ISA)的抗衰老作用及其机制. 方法 昆明种小鼠随机分为6组:空白对照组,模型组,卵磷脂组(阳性对照组),ISA低、中、高剂量组.用Y型电迷宫法,测定小鼠的学习记忆能力;测定胸腺指数、脾指数和脑指数;测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,活性氧(ROS)和脂褐素(LF)含量. 结果 ISA中、高剂量组和卵磷脂组学习次数[分别为(14.33±4.32)次和(16.33±5.36)次]低于模型组(21.71±7.04)次(P＜0.05);反应正确率[分别为(90.00±11.55)%和(87.14±11.38)%]高于模型组(69.29±412.72)%,P＜0.05);胸腺指数、脾指数和脑指数明显增高(P＜0.01);与模型组比较,ISA提高SOD活性[(65.64 4±14.49)μmg-1 protein vs(50.23±15.88)μmg-1 protein,P＜0.05],降低ROS[(442.59 4±97.92)μmg-1 protein vs(540.20±89.02)μmg-1 protein]和LF含量[(0.96±0.26)μmg-1 protein vs(1.31±0.23)μmg-1 protein,P＜0.01]. 结论 ISA具有抗衰老作用,与其增强免疫功能和抗氧化有关.     

海洋活性物质2,3-吲哚醌对雄性大鼠生殖系统的作用研究

目的探讨2,3-吲哚醌对环磷酰胺诱导的大鼠少弱精症的作用。方法模型组与低中高治疗组连续腹腔注射环磷酰胺(30 mg/kgd)5天,建立大鼠少弱精模型后,正常对照组每天生理盐水灌胃,模型组每天1.25%西黄耆胶水溶液灌胃,低、中、高剂量组分别给予2,3-吲哚醌30 mg/kg、150 mg/kg、300 mg/kg,持续35天。普通光学显微镜观察附睾精子数目、精子活力;放射免疫法检测血清中睾酮(T)、促黄体激素浓度(LH)、促卵泡激素(FSH)含量;HE染色观察生精小管层数;测定睾丸、胸腺、肝、脾重量。结果各剂量治疗组与模型组比较,精子数目增加(P<0.05),a级、a+b级精子比率上升(P<0.05),血清促卵泡刺激素(FSH)下降(P<0.05),生精小管层数增加(P<0.05)。结论 2,3-吲哚醌治疗对环磷酰胺诱导的大鼠少弱精症具有改善作用。     

2,3-吲哚醌对小鼠的抗抑郁作用研究

目的观察2,3-吲哚醌（2,3-indolinedione,isatin,ISA）对小鼠实验性抑郁病的影响。方法 5O只昆明种小鼠随机分为5组：空白对照组、ISA（15 mg、45 mg、75 mg.kg-1）组和阿米替林（50 mg·kg^-1）组,各组给予相应药物10 d后,对小鼠进行强迫游泳实验。记录小鼠强迫游泳不动时间。结果 ISA（75 mg·k^g-1）组与阿米替林（50 mg·kg^-1）组的小鼠强迫游泳不动时间分别为（581±567）秒和（132±43）秒,均高于空白对照组（125±83）秒,并且两者之间存在显著性差异（P〈0.05）。结论 ISA能增加小鼠的游泳时间,具有抗抑郁作用。     

2,3-吲哚醌对小鼠PD模型黑质BAX基因表达影响

目的探讨2,3吲哚醌（isatin,ISA）对MPTP制备的C57BL/6J小鼠帕金森病（PD）模型黑质中BAX基因表达影响。方法 C57BL/6J小鼠随机分为五组,空白对照组,MPTP损伤组,ISA低（50 mg/kg,ig）、中（100 mg/kg,ig）、高剂量（200 mg/kg,ig）预处理＋MPTP组。结果与对照组相比,MPTP损伤的小鼠黑质中BAX免疫反应阳性表达增加（P〈0.01）;在ISA 100 mg/kg和200 mg/kg预处理组与MPTP损伤组相比,黑质中BAX免疫反应阳性表达显著降低（P〈0.05）。结论表明ISA对MPTP造成的PD小鼠有明显的保护作用。     

HPLC法测人体精液中2,3-吲哚醌的含量

目的建立测定人体精液中2,3-吲哚醌(ISA)浓度的液相方法。方法精液处理后用乙酸乙酯提取,提取液吹干加盐酸溶解后进样,采用高效液相色谱仪外标法检测2,3-吲哚醌的含量结果 2,3-吲哚醌在30～1000μg/L范围内线性关系良好(r=0.9996),回归方程为A=87.366c-381.68,最低检测限为9ng。结论该测定方法准确可靠,可用于精液中2,3-吲哚醌的含量测定。     

吲哚-2,3-二酮抗阴道炎研究

目的研究吲哚-2,3-二酮（indole-2,3-dione）在治疗阴道炎中的作用。方法建立大鼠阴道炎模型,随机分为不给药的模型组、阳性对照组（双唑泰栓剂,每天阴道塞入含50 mg/kg的栓剂,连续7 d）和吲哚-2,3-二酮明胶栓剂高、中、低剂量组（剂量分别为50、25、10 mg/kg,每天阴道塞入受试栓剂1次,连续7 d）,各组动物分别在给药前,给药后4 d、8 d取阴道分泌物进行菌落计数,根据菌落数和阴道分泌物的多少进行量化评分,再根据评分进行治疗效果的评价。结果高、中、低剂量组吲哚-2,3-二酮明胶栓剂对白色念珠菌、脆弱拟杆菌感染的菌落计数疗效均优于模型对照组,给药后4 d显效,8 d菌落数继续下降（P〈0.01或P〈0.05）;对白色念珠菌、脆弱拟杆菌感染的阴道分泌物计数疗效均优于模型对照组,给药后4 d显效,8 d分泌物继续减少（P〈0.01或P〈0.05）。结论吲哚-2,3-二酮明胶栓剂对大鼠白色念珠菌和脆弱拟杆菌造成的实验性阴道炎具有良好的治疗作用。     

2,3-吲哚醌对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖影响

目的 研究2,3-吲哚醌对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖的影响。方法 应用MTT比色法观察2,3-吲哚醌对SH—SY5Y细胞生长的抑制情况;流式细胞仪检测2,3-吲哚醌对SH—SY5Y细胞周期分布的影响;Western blot方法观察其对细胞信号传导通路蛋白有丝分裂原激活的蛋白激酶（ERK）的作用,同时结合免疫细胞化学方法检测2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞caspase-3的影响。结果 2,3-吲哚醌能显著抑制SH—SY5Y细胞增殖,并使细胞周期阻滞于G0／G1期;caspase-3蛋白表达随着药物浓度的升高逐渐增加;加2,3-吲哚醌后磷酸化的有丝分裂原激活的蛋白激酶蛋白（ERK1／2）相对表达量降低。结论 2,3-吲哚醌对SH—SY5Y细胞具有抗增殖作用,其作用可能是通过诱导细胞凋亡、改变细胞周期以及作用于细胞通路而实现的。     

HPLC法测定尿液中2,3-吲哚醌的含量

①目的建立一种准确可靠的尿液中2,3-吲哚醌浓度的测定方法。②方法原尿用乙酸乙酯提取,提取液挥干后加盐酸溶解后进样,采用高效液相色谱仪检测2,3-吲哚醌的含量。③结果2,3-吲哚醌在200~5000μg/L范围内线性关系良好,回归方程为c=10.52x+129.62,r=0.9989,最低检测限为10ng。日内、日间变异系数均≤7%,平均回收率为98.4%。④结论该测定方法准确可靠,可用于尿液中2,3-吲哚醌的含量测定。     

吲哚胺2,3二氧化酶与肿瘤免疫耐受

肿瘤免疫耐受是一个获得性免疫应答的过程,许多机制参与调节。吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)是体内肝外色氨酸沿犬尿氨酸代谢的限速酶。其通过诱导"色氨酸删除"环境、色氨酸代谢产物的细胞毒性作用和调节Tregs等抑制T淋巴细胞增殖、活化,共同诱导肿瘤免疫耐受。抑制IDO可为今后肿瘤临床治疗提供新思路和方法。     

2,3-吲哚醌诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡作用及机制

目的 观察2,3-吲哚醌(ISA)经Caspase-3途径诱导人神经母细胞瘤凋亡的作用及机制.方法 以不同浓度ISA(0、100、200、400 ìmol/L)作用于SH-SY5Y细胞48 h,采用Hocehst33258/PI荧光染色技术观察细胞凋亡的形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,Western blot方法检测Caspase激活的脱氧核糖核酸酶抑制剂(ICAD)蛋白表达的变化.结果 Hochest33258/PI荧光染色可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡形态学特征.100、200、400 ìmol/L ISA处理组SH-SY5Y细胞的凋亡率均明显高于对照组(F=111.30,P<0.05).随着ISA浓度的升高,表达活化Caspase-3的细胞数逐渐增加(F=5.622,P<0.05).Western blot检测到其下游作用底物ICAD被降解.结论 ISA能诱导SH-SY5Y细胞凋亡,该作用可能通过激活Caspase-3来实现.     

小鼠体内2-甲氧基雌二醇静脉乳剂的药动学及组织分布特征

目的:考察2-甲氧基雌二醇(2-ME)静脉乳剂在小鼠体内的药动学及组织分布特征.方法:小鼠尾静脉注射2-ME静脉乳剂和对照液后,血浆及组织匀浆液经液-液萃取,采用反相高效液相色谱法测定2-ME浓度,用3P97药动学软件进行体内药动学及组织分布分析.结果:小鼠尾静脉注射2-ME静脉乳剂22.5 mg/kg后,血药浓度经时...     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中吉非替尼浓度及其药动学

目的建立灵敏、准确的高效液相色谱方法（HPLC）测定大鼠血浆中吉非替尼的浓度,并研究其在大鼠体内的代谢动力学。方法大鼠灌胃或尾静脉注射给予吉非替尼后,自眼球后静脉丛采血,以埃罗替尼为内标物,HPLC法测定血药浓度：甲醇-10mmol／L乙酸铵（70：30）为流动相,流速：1．0mL／min;检测波长：330nm。结果测定吉非替尼的线性范围是0．02016～6．72ug／mL,精密度,稳定性（RSD）均小于15％,口服吉非替尼片绝对生物利用度59．81％。结论该分析方法专属性强,灵敏度高,吉非替尼血浆药物清除曲线符合二室模型。     

水飞蓟素PLGA肠溶纳米粒大鼠体内药代动力学研究

目的 研究水飞蓟素PLGA肠溶纳米粒在大鼠体内的药动学行为.方法 利用高效液相色谱(HPLC)法测定大鼠灌胃市售制剂水飞蓟素片益肝灵片与水飞蓟素PLGA肠溶纳米粒后的血药浓度,并采用3P97药代动力学软件处理数据.结果 在25.3～5 051.0 ng/mL范围内,水飞蓟宾血药浓度呈线性关系,r=0.999 9,日内、日间精密度RSD均小于8.5％;灌胃给药水飞蓟素PLGA肠溶纳米粒后,药-时曲线符合二室模型,药代动力学参数Cmax为(2 255.84±315.44)ng/mL,t1/2p为(13.85±2.29)h,相对益肝灵片的生物利用度为126％.结论 本方法准确、简单、专属性好,适合大鼠血浆中水飞蓟素PLGA肠溶纳米粒药代动力学学研究.水飞蓟素PLGA肠溶纳米粒提高了口服生物利用度.     

给药途径对左氧氟沙星在模型大鼠前列腺组织中药动学的影响

目的结合前期口服给药的实验结果,分析在静脉、口服两种不同给药途径中,左氧氟沙星在模型大鼠前列腺组织中药动学的差异。方法将60只细菌性前列腺炎模型大鼠静脉注射左氧氟沙星注射液(44 mg/kg),分别于给药后1、3、7.5、15、30、60、120、240、480、720 min采集动物前列腺标本并制作成组织匀浆。HPLC法测定各组织中左氧氟沙星浓度,3p97软件计算药动学参数。其结果与前期口服给药结果进行对比分析。结果静脉给药的药时曲线符合二室模型,主要动力学参数如下:t1/2β(2.1±0.7)h、tmax(0.6±0.2)h、Cmax(72.3±23.3)μg/g及AUC0-12(253.7±91.7)μg/(h.g)。与前期口服给药相比,t1/2β、tmax、Cmax及AUC0-12在两种不同给药途径下有显著性差异(P<0.01)。结论静脉给药能够明显提高左氧氟沙星在前列腺炎组织中的药物分布浓度,而口服给药能够显著延长其在前列腺炎组织中的半衰期。     

紫杉醇纳米脂质体大鼠体内药物动力学研究

目的 研究紫杉醇纳米脂质体(PTXN)动物体内药物动力学参数,为临床用药提供依据.方法 HPLC法测定血浆中的紫杉醇(PTX)药物浓度,测定动物体内药物动力学参数.结果 该试验采用的高效液相法具有较高的专属性,在血浆浓度为0.51～25.60μg/mL范围内线性良好,有良好的相关(r=0.9996),回收率RSD＜9％.紫杉醇和紫杉醇纳米脂质体在大鼠体内符合二室房室模型,紫杉醇和紫杉醇纳米脂质体的t1/2β分别为(1.301±0.213)h、(0.516±0.228)h;t1/2β分别为(34.361±5.981)h、(11.223±1.191 )h;Vd分别为(0.621±0.078)L、( 0.823±0.079)L;CL分别为(0.038±0.017)L/h、(0.098±0.012)L/h;K10分别为(0.044±0.011)h、(0.136±0.018)h;K12分别为(0.238±0.041)h、(0.768±0.251)h;K21分别为(0.332±0.056)h、(0.589±0.189)h;AUC0→24分别为(341.123±19.342 )mg/(h·L)、(198.124±23.857 )mg/(h·L);AUC0→∞分别为(735.201±168.260)mg/(h·L)、(269.298±35.435 )mg/(h·L).结论 紫杉醇和紫杉醇纳米脂质体均符合二室房室模型,但紫杉醇纳米脂质体药时曲线下面积增大,有效作用时间延长,有利于抗肿瘤,降低毒性.     

哈巴俄苷及其代谢产物在大鼠体内的药代动力学

采用LC-MS技术对哈巴俄苷单体给药后在大鼠体内的药动学进行了研究,发现并鉴定其主要代谢产物可能为肉桂酸,在此基础上应用HPLC法测定了哈巴俄苷经口给药或静脉给药后的药代动力学特征。色谱分离采用C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-水-醋酸溶液（60∶40∶0.1）,检测波长为279 nm。结果表明,哈巴俄苷经口给药后吸收迅速,达峰后迅速消除,t_max和t_1/2分别为（0.47 ± 0.21 ）h和（4.96 ± 0.98）h,4 h后血药浓度降至约0.1 μg/mL。其代谢产物肉桂酸在给药后迅速出现并缓慢消除,t_max和t_1/2分别为（4.17 ± 1.39）h和（5.78 ± 2.67）h。哈巴俄苷静脉给药后消除迅速,t_1/2为 （1.89 ± 0.32）h,而肉桂酸的消除速度仍与口服相近,t_1/2为（5.16 ± 2.27）h。实验结果显示哈巴俄苷口服吸收迅速,生物利用度低,在大鼠体内可能主要代谢为肉桂酸,后者在给药后迅速出现并缓慢消除。     

阿霉素纳米脂质体大鼠体内的药动学研究

目的 研究阿霉素纳米脂质体的动物体内药物动力学参数,为临床用药提供依据.方法 建立HPLC法测定血浆中的阿霉素药物浓度,测定动物体内药物动力学参数.结果 该试验采用的高效液相法具有较高的专属性,在血药浓度为0.25～25.00μg/mL范围内线性良好,有良好的相关系数(r=0.9996),回收率(RSD＜9%).阿霉素和阿霉素纳米脂质体在大鼠体内符合三室房室模型,阿霉素和阿霉素纳米脂质体的t1/2α分别为(0.031±0.012)h和(0.060±0.013)h,t1/2β分别为(2.57.±1.20)h和(5.45±0.72)h,AUC分别为(2 821.7±791.3)μg/L·h和(4012.2±804.8)μg/L·h.结论 阿霉素和阿霉素纳米脂质体均符合三室房室模型,但阿霉素纳米脂质体药时曲线下面积增大,有效作用时间延长,有利于抗肿瘤作用,降低心脏毒性.     

重组水蛭素在大鼠体内的药动学研究

目的研究重组水蛭素iv给药在大鼠体内的药动学。方法采用125-标记的放射性同位素法(RA法)、三氯醋酸沉淀结合放射性检测法(TCA-RA法)研究重组水蛭素iv给药在大鼠体内的药动学。结果大鼠iv0.5、1.0和2.0mg/kg重组水蛭素,以RA法检测,该药的消除半衰期(t1/2ke)分别为162.8、147.5和172.8min,AUC分别为264.9、429.9和1112.9(μg·min)/mL;以TCA-RA法检测,该药的t1/2ke分别为100、101和107min,AUC分别为160.7、327.7和551.3(μg·min)/mL。两种方法所得结果均证明AUC与剂量呈正相关,相关系数均大于0.99。大鼠iv重组水蛭素1.0mg/kg后用RA法和TCA-RA法测定不同组织的药物质量浓度,在各时间点以肾脏含药量显著高于其他组织,肺、胃、脾、心、肝、性腺等组织次之,脑、脂肪最少。大鼠iv重组水蛭素1.0mg/kg后,用RA法测定不同时间段内尿、粪的放射性总量,在96h内70.16%放射性从尿中回收,1.35%从粪中回收到,24h内胆汁排泄量为3.46%。结论RA法和TCA-RA法测得重组水蛭素在大鼠体内的药动学结果不同,但整体趋势一致;重组水蛭素主要由尿排泄。