黄芩苷对脑组织缺血模型大鼠神经营养因子含量的影响

目的:研究黄芩苷抗脑缺血损伤的机制。方法:参照Longa法复制脑缺血大鼠模型,酶联免疫吸附法测定脑组织神经生长因子(NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、脑源性神经营养因子(bDNF)3种神经营养因子(NTF)含量。结果:与假手术组比较,大鼠脑缺血12h和24h时,模型组脑组织3种NTF含量均反应性增加。与模型组比较,脑缺血12h时,黄芩苷组脑组织NGF、bFGF含量相似,bDNF含量显著降低(P<0.05);脑缺血24h时,黄芩苷组脑组织NGF、bDNF含量均降低,bFGF含量增加(P<0.05)。结论:黄芩苷对脑缺血损伤神经元的保护作用中,促进星形胶质细胞等产生bFGF可能是其主要途径。     

蒙药新黑苏嘎乌日勒对脑中动脉阻塞-再灌注损伤模型大鼠神经功能损伤的改善作用及机制研究

目的:研究蒙药新黑苏嘎乌日勒对脑中动脉阻塞-再灌注损伤模型大鼠神经功能损伤的改善作用及机制。方法:将80只大鼠随机分为假手术组、模型组、新黑苏嘎乌日勒组(540 mg/kg)、化学药阳性对照组(尼莫地平片,16.12 mg/kg)、中药阳性对照组(银杏叶片,5.18 mg/kg),每组16只;除假手术组外,其余各组大鼠采用Zea-Longa线栓法复制脑中动脉阻塞-再灌注损伤模型;造模成功后,各给药组大鼠灌胃相应药物,假手术组和模型组灌胃等量蒸馏水,连续灌胃14 d。末次给药1 h后,对各组大鼠进行神经功能损伤评分;采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑法计算各组大鼠脑梗死率、脑含水率及脑指数;苏木精-伊红染色观察各组大鼠脑组织海马区神经元病理学变化;免疫组化染色法检测各组大鼠脑前额叶脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能损伤评分、脑梗死率、脑含水率、脑指数和BDNF、NGF蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),脑组织海马区神经元细胞排列松散,形状不规则,部分胞体皱缩,胞浆内尼氏小体减少,核仁消失。与模型组比较,新黑苏嘎乌日勒组、化学药阳性对照组、中药阳性对照组大鼠神经功能损伤评分、脑梗死率、脑含水率、脑指数均显著降低(P<0.05或P<0.01),脑前额叶BDNF、NGF蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),脑组织海马区神经元细胞排列整齐紧密,细胞核圆整,细胞质染色均匀。结论:蒙药新黑苏嘎乌日勒对脑中动脉阻塞-再灌注损伤模型大鼠神经功能损伤具有一定的改善作用,其作用机制可能与增加BDNF及NGF蛋白的表达有关。     

红景天苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用

目的探讨红景天苷(salidroside,Sal)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法健康成年♂SD大鼠36只,随机分为3组:假手术组(sham)、模型对照组(MCAO组)、红景天苷给药组(MCAO+Sal组)。通过线栓法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,Longa评分法对大鼠神经功能损伤评分,焦油紫染色法对神经细胞内尼氏(Nissl)小体染色,RT-q PCR技术检测大鼠缺血侧脑组织Neun、Nogo-A与Ng R m RNA的表达,Western blot法检测大鼠缺血侧脑组织Bcl-2、Neun、BDNF、NGF、Nogo-A与Ng R蛋白的表达。结果与MCAO组比较,红景天苷能明显降低神经功能损伤,增加Nissl阳性细胞的数量,促进Bcl-2、Neun、NGF、BDNF的蛋白表达,降低Nogo-A及其受体Ng R的m RNA及蛋白表达。结论红景天苷能够降低MCAO模型大鼠神经功能损伤,增加Nissl阳性细胞数目,提高Neun的表达,具有神经保护作用,此作用是通过促进抗凋亡因子Bcl-2及神经营养因子NGF、BDNF的蛋白表达,下调轴突生长抑制因子Nogo-A及其受体Ng R的蛋白表达所实现。     

糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织脑源性神经生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的表达及意义

目的探讨糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织脑源性神经生长因子(brain-drived neurotropic factor,BDNF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的表达及意义。方法41只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、正常血糖脑缺血再灌注组(NIR)和糖尿病性高血糖脑缺血再灌注组(DIR),用链脲佐菌素腹腔注射和线栓法分别诱发大鼠糖尿病和复制大脑中动脉缺血再灌注模型,应用免疫组化法检测再灌注6h和24h脑组织BDNF和bFGF蛋白表达。结果大鼠脑缺血再灌注后BDNF主要在梗死区表达,bFGF主要在梗死灶周边区表达,NIR组BDNF和bFGF的表达在再灌注6h组和24h组均较假手术组和正常对照组明显增加(P<0.05);DIR组BDNF和bFGF的表达在再灌注6h组和24h组较NIR组明显下降(P<0.05)。结论大鼠脑缺血再灌注后脑组织BDNF和bFGF表达增加可能是内源性保护机制;糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织BDNF和bFGF表达降低可能是糖尿病加重缺血损伤的机制之一。     

新生鼠脑缺血预处理后海马CA1区脑源性神经营养因子的表达和意义

目的观察脑缺血预处理对新生Wistar大鼠脑缺血再灌注后海马CAl区脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响和意义。方法通过阻断7日龄新生Wistar大鼠右侧颈总动脉45分钟制备脑缺血模型,设置假手术组、缺血再灌注组和预缺血-缺血再灌注组。采用免疫组化方法和计算机图像分析技术检测3组新生鼠不同时点海马CAl区脑组织BDNF的动态变化及3组光镜下脑组织病理改变。结果(1)脑组织病理改变:预缺血组病理损伤较缺血再灌注组轻。(2)BDNF表达: 预缺血-缺血再灌注组BDNF表达在再灌注后3h开始增高,12h达高峰,24h开始下降,与假手术组和缺血再灌注组比较均有显著性差异(P<0．05),3天降至假手术组水平。结论新生鼠脑缺血预处理早期可诱导海马CAl区BDNF表达和合成增加,对防止再次严重的脑缺血损伤有明显的保护作用, 可能与脑缺血后神经细胞的内源性保护机制有关。     

骨髓基质细胞对脑创伤大鼠神经营养因子表达水平的影响

目的:研究骨髓基质细胞(BMSCs)治疗脑创伤大鼠后内源性的神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的影响。方法:采用大鼠骨髓中提取出来的骨髓基质细胞,进行体外扩增后,静脉移植于大鼠脑创伤模型中,在治疗后1、3、5、7、14d,ELISA法检测损伤半球NGF和BDNF的浓度,并与对照组对比,进行统计学分析。免疫组化法检测骨髓基质细胞在损伤脑组织中的表达。结果:骨髓基质细胞经股静脉移植后可在损伤的脑组织中表达。治疗组NGF和BDNF的表达于伤后1d至7d逐渐增加,于第7天达到高峰,至第14天降至较低水平。结论:骨髓基质细胞经股静脉移植后可在损伤的脑组织中表达。移植后的骨髓基质细胞可增加损伤脑组织中的NGF和BDNF的表达,与时间有相关性。体外扩增的骨髓基质细胞对于创伤性脑损伤具有治疗作用。     

注射用鼠神经生长因子对大鼠缺血脑组织神经生长因子及脑源性神经营养因子表达的影响

目的研究注射用鼠神经生长因子对大鼠缺血脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠,采用改良的Zea-Longa法建立大脑中动脉局灶缺血模型(MCAO)。实验分为模型对照组和注射用鼠神经生长因子组,每组各20只大鼠。注射用鼠神经生长因子组予以腹腔内注射鼠神经生长因子,每天1次,每次9 k U;模型对照组每天注射等量0.9%氯化钠注射液。72 h后行神经功能评分,然后处死,分别取脑梗死周围、海马区和梗死区脑组织作免疫组织化学染色检测BDNF、NGF蛋白表达变化,原位杂交检测BDNF m RNA、NGF m RNA的表达。结果治疗3 d后注射用鼠神经生长因子组神经功能缺损评分低于模型对照组(P<0.05)。注射用鼠神经生长因子治疗组BDNF和NGF蛋白、BDNF m RNA和NGF m RNA在梗死区周围和海马区表达均高于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05),在梗死区差异均无统计学意义(P>0.05)。结论注射用鼠神经生长因子可上调大鼠梗死区周围和海马区缺血脑组织中BDNF和NGF的表达,并可能通过此机制起到保护作用。     

锂对中枢神经和血液系统的作用（二）

许多学者报道抑郁使得脑内脑源性神经营养因子（BDNF）减少，锂通过增加脑内的BDNF而发挥作用。锂和丙戊酸盐选择性地激活神经元内脑源性神经营养因子促进因子Ⅳ，提高海马内BDNF的水平。锂和匹鲁卡品诱导的癫痫持续状态与大鼠脑BDNF广泛增高有关。锂也能增加大鼠海马内的神经生长因子（NGF），但丙戊酸和安非他命都不改变脑内的NGF。     

APP17肽对心肺复苏大鼠海马神经元NGF、BDNF表达的影响

目的观察心肺复苏术后大鼠海马神经元神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的变化,以及APP17肽对NGF、BDNF表达的影响。方法采用窒息法制作大鼠呼吸心跳骤停模型,然后行心肺复苏术(cardiopulmonary re-suscitation,CPR)。♂性Wistar大鼠18只,随机分3组:手术对照组(A组)、心肺复苏组(B组)、心肺复苏+APP17肽组(C组),复苏至自主循环恢复(return of spontaneous circula-tion,ROSC)时静脉注射APP17肽10μg·(300g)-1。应用免疫组化方法观察各组大鼠复苏2h后海马神经元表达NGF、BDNF情况。结果与对照组(A组)相比心肺复苏组(B组)大鼠海马神经元NGF、BDNF表达明显降低(P<0.05);心肺复苏+APP17肽组(C组)NGF、BDNF表达明显增加,高于B组和A组(P<0.01)。结论心肺复苏模型大鼠自主循环恢复2h海马神经元NGF、BDNF表达降低,APP17肽能恢复神经元NGF、BDNF的表达,对缺血、缺氧性神经元损伤有保护作用。     

冰片配伍三七对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用

目的:研究冰片配伍三七对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、冰片组、三七组、冰片配伍三七组和尼莫地平组6组，连续灌胃给药7 d后复制大脑中动脉脑缺血(MCAO)模型，术后24 h进行神经功能缺损测定，检测血清中的超氧化物歧化酶(SOD)活性及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量，观察脑组织病理形态，检测脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达及血管内皮生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的mRNA表达。结果:冰片配伍三七组能降低MCAO大鼠的神经功能评分(P<0.01),改善脑组织病理形态，升高血清中SOD活性并降低NO、MDA含量(P<0.05),降低脑组织中Bax蛋白表达和MMP-2的mRNA表达(P<0.01),升高Bcl-2蛋白表达，以及BDNF、VEGF的mRNA表达(P<0.01)。结论:冰片配伍三七对局灶性脑缺血大鼠具有神经保护作用，其机制可能是提高了MCAO大鼠血清中SOD活性并降低了MDA、NO含量，降低脑组织中Ba...     

神经生长因子对大鼠脑血肿周围细胞凋亡的影响

目的：观察脑出血后血肿周围神经细胞凋亡和Caspase-3的表达,以及NGF（神经生长因子）对上述情况的影响。方法：自体血注入法制备大鼠脑出血模型,经TUNEL染色和Caspase-3免疫组化染色,照片观察并计数阳性细胞数,结果用SPSS 11．5软件统计分析。结果：假手术组无TUNEL细胞表达,Caspase-3少量表达;脑出血组6h血肿周边组织出现TUNEL阳性细胞,72h达高峰,Caspase-3在脑出血后6h表达开始增高,24h达到高峰,脑出血后血肿周围TUNEL阳性细胞与Caspase-3的表达呈正相关（r=0．371,P〈0．05）;应用NGF干预后,自12h起各时间点TUNEL细胞和Caspase-3表达均较脑出血组减少（P〈0．05）,以各自高峰时间最为显著（p〈0．05）,但未能改变TUNEL细胞和Caspase-3表达的高峰时间。结论：（1）脑出血后血肿周围细胞凋亡与Caspase-3表达有关。（2）NGF能够有效地抑制脑出血后的神经细胞凋亡。     

大鼠脑出血模型出血灶周围神经细胞凋亡的研究

目的 研究大鼠自体动脉血脑出血模型出血灶周围神经细胞的凋亡.方法 应用立体定向技术,用大鼠自体尾动脉不抗凝动脉血建立自体动脉血脑出血动物模型,动态观察其行为学改变以及出血灶周神经细胞形态结构,并用免疫组化的方法检测出血灶周神经细胞内Bcl-2和细胞色素C的表达.结果 大鼠脑出血后不同观察时间点肢体对称试验评分、Longa评分和Berder son评分与对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).脑出血周围神经细胞的形态结构较对照组有显著差别;出血灶周神经细胞内细胞色素C的表达明显高于对照组,Bcl-2的表达明显低于假手术组.结论 大鼠自体动脉血脑出血动物模型是比较理想的实验性脑出血模型,在出血灶周围存在大量神经细胞的凋亡.     

大麻素对脑出血大鼠皮质内PKAC-β、c-fos及BDNF表达量的影响

目的探讨大麻素(WIN55,212-2)对大鼠局灶性脑出血后同侧大脑皮质内PKAC-β、c-fos和BDNF mRNA及蛋白质表达量的影响。方法采用Ⅶ型胶原酶制作大鼠脑出血模型,术后0.5h后腹腔注射药物,均在24h后取脑组织;采用免疫组化方法定位PKAC-β、c-fos和BDNF蛋白;采用RT-PCR检测各组大脑皮质内PKAC-β、c-fos和BDNF mRNA的表达;采用Western blot检测各组大脑皮质内PKAC-β和BD-NF蛋白质的表达。结果WIN55,212-2上调同侧大脑皮质内BDNF mRNA和蛋白质的表达,同时也上调c-fos mRNA表达量,但抑制PKAC-β mRNA和蛋白质的表达;免疫组化结果显示PKAC-β,c-fos和BDNF蛋白分别位于神经元胞膜、细胞核或胶质细胞的胞质中。结论WIN55,212-2促进大脑皮质内BDNF蛋白的合成,为其临床上治疗脑血管病提供理论依据。     

高血压性大鼠脑出血血肿量对NF-κB表达的影响

目的观察高血压性大鼠脑出血后血肿周围组织核因子-kB（necular factor kappa B,NF—kB）的表达,分析其表达与血肿量及出血时间的关系。方法成年sD大鼠100只,体重250～300g。随机分为对照组、脑出血A组、脑出血B组。大鼠高血压性脑出血模型采用双侧肾动脉前支部分热凝．立体定位仪下自体血脑内注入法建立。3组在相应时间点用免疫组化方法观察NF-kB在细胞内的表达情况。结果大鼠高血压性脑出血后1h后NF-kB即开始表达,24h达到高峰,持续至72h开始下降,并且血肿量大的脑出血组（脑出血B组）相应时间点NF-kB的表达较血肿量小的脑出血组（脑出血A组）明显增高（P〈0．05）。结论高血压性脑出血后早期即有NF-kB的表达,并且随血肿量的增加表达也增加,从而加重了脑出血后周围脑组织的继发性损伤。     

胆囊收缩素-8对高血压大鼠脑出血后核因子-κB活性的影响

目的：探讨胆囊收缩素-8（cholecystokinin-8,CCK-8）对高血压性大鼠脑出血后血肿周围组织核因子-κB （ Necular Factor Kappa B ,NF-κB）活性的影响。方法取成年SD大鼠72只,体重250～300 g,随机分假手术组（ n ＝12）、脑出血组（ n ＝24）和CCK-8治疗组（ n ＝24）。采用电泳迁移率改变分析方法（electrophoretic mobility shift assay , EMSA）检测核内NF-κB的活性,用免疫组化方法观察NF-κB在细胞内的表达情况,并用干湿重法测量出血侧脑组织含水量。结果脑出血组各时间点NF-κB的活性以及脑含水量较假手术组和CCK-8治疗均有明显增高（ P ＜0妹．05）。结论脑出血后,脑组织NF-κB的表达明显增加,CCK-8可以有效的抑制NF-κB的活性,这对于减轻NF-κB在脑出血后介导的继发性炎性损害起到了积极的作用。     

脑出血大鼠脑组织缺氧诱导因子的动态变化及促红细胞生成素对其的影响

目的探讨实验性脑出血大鼠脑组织中缺氧诱导因子（HIF-1α）在脑出血后不同时间点的动态演变过程及促红细胞生成素（EPO）对其影响。方法应用自体血脑内注射法建立脑出血大鼠模型并随机分为假手术组、脑出血非干预组及脑出血EPO干预组,应用免疫组化方法检测脑出血后不同时间及组别血肿周边脑组织中HIF-1α蛋白表达情况。结果大鼠脑出血后HIF-1α蛋白阳性表达率在72 h内随时间进行性增加,并于出血后72 h达到高峰,此后HIF-1α蛋白表达的阳性率逐渐下降,脑出血EPO干预组较脑出血组各时间点HIF-1α蛋白阳性率明显减少,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论脑出血后HIF-1α表达存在一定变化规律,EPO能显著减少HIF-1α表达。     

胃痛消痞方对肝郁脾虚型功能性消化不良大鼠胃及下丘脑BDNF影响的实验研究

目的观察胃痛消痞方对肝郁脾虚型功能性消化不良(FD)大鼠脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法选用改良郭氏夹尾刺激法联合张氏不规则喂食法复制FD大鼠模型,以西药莫沙必利片为阳性对照,中药干预以胃痛消痞方灌胃治疗。实验结束后,观察各组大鼠的一般状态,免疫组化法(IHC)观察胃窦及下丘脑组织BDNF蛋白表达,实时荧光定量PCR法(Quantitative Real-time,RT-PCR)观察胃窦及下丘脑组织中BDNF mRNA的变化,蛋白印记(Western blot,WB)法检测各组大鼠胃窦及下丘脑组织中BDNF蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠胃窦及下丘脑组织中BDNF表达(IHC)、BDNF mRNA相对表达量(RT-PCR)、BDNF蛋白表达(WB)均降低(P<0.05);与模型组比较,中药组和西药组大鼠胃窦及下丘脑组织中BDNF表达(IHC)、BDNF相对表达量(RT-PCR)、BDNF蛋白表达(WB)均增高(P<0.05);与西药组比较,中药组BDNF表达效果(IHC)更好(P>0.05),BDNF mRNA相对表达量(RT-PCR)效果更好(P<0.05),BDNF蛋白表达量(WB)增加明显,效果更好(P<0.05)。结论胃痛消痞方对FD大鼠的胃窦、下丘脑组织BDNF表达有明显改善,并可有效调节胃窦、下丘脑组织中BDNF基因及蛋白表达,胃痛消痞方对肝郁脾虚型FD的治疗作用可能是通过改善BDNF水平实现的。     

山茱萸多糖对青霉素致痫幼鼠学习记忆能力及海马组织脑源性神经因子、神经生长因子表达的影响

目的:探讨山茱萸多糖对青霉素致痫幼鼠学习记忆能力及海马组织脑源性神经因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)表达的影响。方法:将30只日龄21 d龄幼鼠随机分为生理盐水对照组、青霉素点燃模型组、山茱萸多糖处理组各10只。生理盐水对照组只接受生理盐水灌胃,不造模;山茱萸多糖处理组在造模成功后灌胃0.05 g/mL山茱萸多糖;青霉素点燃模型组造模成功后灌胃等量生理盐水;连续灌胃28 d。采用Morris水迷宫检测各组幼鼠学习记忆能力;RT-PCR法检测海马组织BDNF mRNA、NGF mRNA表达;Western-blot法检测海马组织BDNF与NGF蛋白含量。结果:与生理盐水对照组比较,青霉素点燃模型组幼鼠学习记忆能力明显降低(P<0.01);与模型组比较,山茱萸多糖处理组学习记忆能力明显升高(P<0.01)。与生理盐水对照组比较,青霉素点燃模型组幼鼠BDNF、NGF mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,山茱萸多糖处理组BDNF、NGF mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论:山茱萸多糖具有提高青霉素点燃幼鼠学习记忆能力的作用,其机制可能是通过上调BDNF和NGF基因表达。     

RhEPO对脑出血大鼠缺氧诱导因子和细胞凋亡影响的实验研究

目的研究重组人促红细胞生成素（RhEPo） 对大鼠实验性脑出血后凋亡细胞及缺氧诱导因子（ hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α） 的影响。方法随机分为脑出血组、脑出血 RhEPO 干预组、假手术组,动物模型采用自体血脑内注射的方法,其中脑出血 RhEPO 干预组为大鼠造模后给予 5 000 U/kgRhEPO腹腔注射,取组织后应用免疫组化方法检测脑出血后不同时间血肿周边脑组织中 HIF-1α蛋白表达情况,应用 TUNEL 法检测凋亡细胞。结果出血后,HIF-1α蛋白阳性表达率随时间进行性增加,并于出血后 72 h 达到高峰,此后 HIF-1α蛋白表达的阳性率逐渐下降,脑出血后不同时间点阳性率比较差异有统计学意义（P 〈0. 05） ; 脑出血 RhEPO 干预组较脑出血组及假手术组各时间点细胞凋亡数低及 HIF-1α蛋白阳性率低（P 〈0. 05） 。结论 EPO 能显著降低 HIF-1α表达,并对脑出血后脑组织有良好的保护作用。