乙肝表面抗原阳性反应血清的乙肝病毒核酸检测分析

[目的]探讨HBsAg血清学阳性反应标本的HBV核酸检测状况. [方法]留取血站6个月志愿者标本6 000例,酶联免疫检测(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)HBsAg阳性标本70例,将阳性标本分组:国产进口两种酶免试剂检测同时强阳性反应标本30例(S/CO≥5);国产进口两种酶免试剂检测同时弱阳性反应标本22例(S/CO<5);单一进口酶免试剂检测阳性反应标本17例;单一国产酶免试剂检测阳性反应标本1例.采用核酸检测技术(Nucleic Acid Test,NAT)对70例酶联免疫检测阳性反应标本进行HBV核酸检测. [结果]两种酶免试剂检测同时强阳性标本(S/CO≥5)组NAT检测结果30例均为阳性;两种酶免试剂检测同时弱阳性标本(S/CO<5)组NAT检测结果20例阳性,2例阴性;单一进口试剂检测阳性标本NAT检测结果10例阳性,7例阴性;单一国产试剂检测阳性标本,1例NAT检测结果为阴性. [结论]HBsAg阳性反应血清的HBV核酸检出率与S/CO值的高低和两种酶联免疫试剂检测结果符合度有一定关联,核酸扩增技术对现行血筛试剂有一定补充作用.     

抗-HCV阳性反应血清中HCV核酸检测结果分析

目的 探讨和研究抗-HCV阳性反应血清进行HCV核酸指标检测的效果.方法 收集2011年6月-2013年5月76例抗-HCV呈阳性反应的受检者血清,使用HCV核酸扩增酶免检测HCV核酸指标.结果 通过本次试验中收集的50份通过2种ELISA试剂来检测抗-HCV呈阳性反应血清.其中,共有7份抗-HCA呈阳性受检者,运用2种试剂进行检测都显示出强阳性（S/CO大于10）,其HCV核酸检测也全部显示为阳性（比例为100％）,其它43份抗-HCA阳性受检者,经检测均显示为较弱的阳性,其中经HCV核酸检测呈现阳性的占46.5％.另外,经过运用单种试剂来检测的抗-HCV阳性血清,都呈现较弱的阳性,且该HCV核酸检测的阳性率也比较低,同时运用双种试剂检测抗-HCV阳性的特异性,均比运用单种试剂而进行检测的抗HCV阳性要高,二者对比其差异具有统计学意义（P＜0.05）.结论 若抗HCV呈阳性且HCV核酸检测也呈阳性的可以确定为HCV感染;若抗HCV阳性而HCV核酸检测呈阴性,则可能和HCV核酸检测的灵敏度、抗-HCV检测试剂的特异性或者病毒基因变异等很多因素相关.     

119例疑似非输血感染者抗-HCV与HCVRNA检测结果比较与分析

目的对119例疑似医源性非输血感染丙肝患者的血液进行HCV检测。方法采用2种第3代酶免抗-HCV试剂检测,并同时进行单人份核酸HCV RNA检测。结果 119例疑似HCV血液用万泰酶免试剂检出抗-HCV(+)68例,阳性率为57.14%;丽珠酶免试剂检出抗-HCV(+)61例,阳性率为51.26%。酶免双试剂检出抗-HCV(+)61例,反应符合率为89.70%。万泰酶免抗-HCV(+)最小S/CO值是0.79,最大S/CO值是21.43,平均S/CO值是7.95,中位数是6.23;丽珠酶免抗-HCV(+)最小S/CO值是0.66,最大S/CO值是17.65,平均S/CO值是4.23,中位数是2.87。浩源核酸试剂检出HCV RNA(+)98例,阳性率为82.35%。万泰酶免抗-HCV(+)和浩源核酸HCV RNA(+)63例,丽珠酶免抗-HCV(+)和浩源核酸HCV RNA(+)56例。万泰和丽珠酶免试剂检出灰区的样本,浩源核酸试剂检测全部是阳性。5例酶免双试剂抗-HCV(+),核酸是HCV RNA(-)。结论酶免和核酸方法检测HCV结果存在差异,联合应用酶免和核酸方法筛查血液传染性疾病更能保证输血安全。     

猪链球菌核酸检测量值溯源研究及方法评估

针对病原微生物检测中急需解决的计量标准和量值溯源问题,建立猪链球菌核酸量值荧光定量PCR方法,研制猪链核酸检测标准物质,探索等效一致的核酸测量技术。方法根据已报告的DNA序列设计并合成种特异性16S rRNA引物,建立荧光定量PCR方法,摸索最佳上、下游引物配比浓度,利用已知核酸浓度的标准品作标准曲线并获得Ct值与样本...     

基于Web的门诊实时查询系统的设计与实现

本文根据网络数据库原理,运用ASP.NET Ajax技术,开发了基于B/S模式的门诊实时查询系统。医院管理人员可以通过该系统实时了解门诊挂号、患者候诊、就诊和门诊收费等情况。     

河南省丙型肝炎流行病学分析

目的了解河南省普通人群丙型肝炎流行状况,探讨联合运用多种实验室检测方法对丙型肝炎诊断的意义。方法采用多阶段随机抽样方法,于2012年4—7月,在河南全省18个省辖市对1~75岁的普通人群进行问卷调查,并采集静脉血标本,采用多种试剂对样本进行丙型肝炎病毒(HCV)检测。结果共调查32 203人,河南省1~75岁人群的HCV抗体、HCV RNA标化阳性率分别为0.64%、0.35%;HCV抗体筛查试验1≤S/CO3.8和3.8≤S/CO10的两组样本蛋白印迹补充试验阳性率差异有统计学意义(χ2=11.23,P0.01);筛查试验1≤S/CO10和10≤S/CO18.3的2组样本的HCV RNA核酸阳性率差异有统计学意义(χ2=71.84,P0.001)。结论河南省属丙型肝炎低流行区,HCV抗体筛查后,须进行补充试验,特别是核酸检测,多种试剂联合检测有助于明确丙型肝炎诊断。     

鼻咽癌病人外周血EBV DNA最低检出限与不同核酸抽提试剂关系的分析

目的 探讨两种核酸提取方法与鼻咽癌患者外周血EBV DNA最低检出限的关系。 方法 收集40例EB病毒感染鼻咽癌患者全血,分别采用核酸释放剂法与柱提法抽提DNA,检测EBV DNA载量,比较两种核酸提取方法检测的检出率,并确认其对应最低检出限。 结果 40例携带EBV鼻咽癌患者全血,使用核酸释放剂法检测EBV DNA其检出率为90.0%明显高于柱提法的检出率62.6%,差异有统计学意义(χ²=8.352,P=0.008)。按国家行业标准验证的核酸释放剂法检测最低检出限为400 copies/ml;采用柱提法最低检出限为900 copies/ml。 结论 选用核酸抽提试剂检测鼻咽癌病人外周血EBV DNA时,所选择试剂应该满足或优于EBV DNA试剂盒最低检测限的性能要求。选用合适的核酸抽提试剂与EBV DNA检测试剂能够客观的反映鼻咽癌患者体内EB病毒的变化,为临床的诊断及治疗提供准确可靠的数据。     

新型冠状病毒肺炎抗体及核酸检测和影像学诊断价值

目的探究免疫球蛋白M/免疫球蛋白G(IgM/IgG)抗体检测、咽拭子和痰液核酸检测以及CT影像学在2019新型冠状病毒(2019-nCoV)诊断中的价值。方法选取2020年2月8日-2020年3月5日56例确诊2019-nCoV感染的住院患者和同期留观患者61例作为研究对象。对所有纳入研究患者行IgM/IgG总抗体和IgM抗体检测,记录患者CT影像学资料、实验室数据和临床一般资料;选取19例确诊患者同时采集痰液和咽拭子标本,行核酸检测。统计学分析各检测方法的诊断性能。结果两组患者一般资料和实验室数据间差异无统计学意义,确诊组CT异常率高于留观组(P0.05)。确诊患者IgM/IgG总抗体检出率为98.21%,IgM为83.93%,初次咽拭子核酸检出率为55.36%。2例患者经3次咽拭子核酸确诊。复核抗体检测诊断敏感性、特异度、阳性预测值和阴性预测值均处于较高水平,优于IgM、CT和咽拭子初次核酸检测,且有助于无症状感染者的发现。结论 2019-nCoV IgM/IgG总抗体检测具有较高的诊断性能,可作为核酸检测阴性疑似病例的补充检测、在疑似病例确诊时与核酸检测协同应用或用于快速鉴别CT异常患者,此外由于其检测简便易行且快速,或可适用于基层医院对密接人群核酸检测筛查的协同检测手段。     

LAMP扩增技术在真假肉鉴别中的应用

目的运用恒温核酸扩增(LAMP)技术,对茂名地区肉类及制品中掺假情况进行检测。方法从茂名地区市场和超市中购买牛肉和羊肉制品,提取核酸后,运用LAMP技术进行检测。结果 LAMP技术对常见的牛肉、猪肉、鸡肉、鸭肉、羊肉、驴肉的检测都有比较好的特异性,检出限为0. 23μg/ml～0. 53μg/ml(DNA),检测时间≤40 min。通过检测发现牛肉制品中主要掺假肉类是猪肉和鸡肉,羊肉制品中主要掺假肉类是猪肉和鸭肉。结论 LAMP方法具有检出限低、前处理简单、特异性好、耐用性强、检测速度快等优点,能较好地满足肉类及制品中掺假检测的要求。     

核酸探针长度对量子点微生物传感器的影响

目的探讨并明确量子点核酸传感器检测微生物核酸样本时探针长度对杂交效率和检测结果的影响。方法首先合成金黄色葡萄球菌16S rDNA探针,然后在其5′端添加不同长度的重复碱基序列,分别合成5条长度不同的以胸腺嘧啶结尾的探针;采用巯基法固定金黄色葡萄球菌16S rDNA探针于石英晶体微阵列上,并用石英晶体微天平(QCM)检测样品频率漂移量以判断不同核酸长度时的杂交效率,并用荧光显微镜观察形成不同双链复合物的荧光强度和荧光效率,以此判断不同碱基序列长度探针对荧光效率和杂交效率的影响,并运用SPSS软件对数据进行统计分析。结果对于普通的短链核酸杂交反应,随着探针长度增加,杂交效率呈现依次递增的趋势,当离子强度为40mmol/L时,杂交效率和荧光强度增加最快,其后再增加探针长度,杂交效率增加速度变缓。结论探针长度是影响杂交效率的主要原因之一,通过增加探针长度可以提高杂交效率和荧光强度,但同时也会增加二聚体产生概率,故应根据实际需要设计长度适合的探针。     

医疗设备采购系统的设计

依据医院医疗设备采购流程,应用网络数据动态交换技术,设计医疗设备采购系统。系统采用基于.net技术设计的B/S结构,实现了医院医疗设备采购项目网络申报审核,厂商资质审核,合同图文查询等信息的动态管理。     

169例HIV抗体筛查有反应样本的补充试验分析

目的对北京市丰台区2017年艾滋病筛查有反应样本的吸光度/临界值(S/CO)与确证试验和核酸检测结果进行比较分析,探讨艾滋病检测结果的意义和合理化解释。方法对丰台区2017年艾滋病筛查有反应样本进行确证试验,同时,用RT-PCR扩增HIV-1 pol基因区进行核酸检测。描述分析艾滋病筛查有反应样本的确证和核酸检测阳性符合率。结果 169例筛查有反应样本经确证试验后,阳性率为72.2%(122/169),不确定率为13.0%(22/169),阴性率占14.8%(25/169)。122份确证试验阳性样本的核酸检测结果均为阳性,22例确证试验结果不确定的样本中有11例(50.0%)核酸检测阳性,25例确证试验阴性样本中有5例(20.0%)核酸检测阳性。结论确证试验结果受受检个体多种因素影响,结合流行病学资料,对同一样本采用多种的实验室检测手段进行综合分析,才能得到更加准确的结果。     

质谱技术在核酸检测分析中的研究进展

质谱技术是一种基于质谱仪设备检测物质分子量的谱学技术方法。质谱类型众多、功能各异, 在各个学科领域中广泛用于科学研究与应用技术开发。近年来, 质谱技术在核酸检测分析中显现出巨大的潜力, 尤其是基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱的核酸检测分析技术, 因其快速、高通量、准确等特性而成为研究热点。采用质谱技术进行核酸研究, 突出表现在对单核苷酸多态性、基因突变、DNA甲基化及DNA拷贝数变异的检测分析。本文对质谱技术在核酸检测中的研究与应用进行阐述, 以期为基于质谱的新型核酸检测技术的开发与应用提供参考。     

定西市无偿献血者乙型肝炎病毒酶免检测和核酸检测的结果研究

目的:探究乙型肝炎病毒酶免检测和核酸检测在定西市无偿献血者筛查中的应用价值。方法:选取2019年1月~2019年12月于定西市无偿献血并接受乙型肝炎病毒初筛的1286份血液样本为研究对象,每例献血者均采集2管血液,分别采用乙型肝炎病毒酶免检测及核酸检测,比较检测结果。结果:1286份血液标本乙型肝炎病毒检测结果显示:酶免与核酸检验均阳性的39份,酶免与核酸检验均阴性的1194份;将S/CO值以5为分界点,划分检测结果发现,酶免与核酸检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论:无偿献血者血液筛查中采用酶免检测联合核酸检测,有助于降低漏检率,提高检测准确性,单独采用任一种检测方法,均有一定漏检风险。     

环介导等温扩增结合核酸级联侵入反应和纳米金探针显色技术快速检测脑膜炎奈瑟菌

目的建立一种适合现场使用、灵敏、特异的脑膜炎奈瑟菌(N.men)检测方法。方法针对N.men的ctrA基因设计环介导等温扩增(LAMP)特异性引物和核酸侵入反应探针,对LAMP扩增产物进行核酸级联侵入反应和纳米金颗粒探针杂交检测。优化反应体系和反应条件后进行敏感性和特异性实验,并与Real-Time PCR检测方法进行比较。结果以核酸级联侵入反应和纳米金颗粒探针显色技术检测LAMP扩增产物和毛细管电泳法具有相同的敏感性和特异性;LAMP结合核酸级联侵入反应和纳米金探针显色技术的检测敏感性为10copies DNA分子/反应,且与其他病原体之间无交叉反应。在临床样本检测方面,LAMP结合核酸级联侵入反应和纳米金探针显色技术与Real-Time PCR检测效果相当。结论结合LAMP、核酸级联侵入反应和纳米金探针显色技术建立的N.men检测方法灵敏、特异,无需特殊仪器,适用于基层检测和现场快速检测。     

应用表面等离子体共振生物传感器快速检测厌氧菌的研究

目的建立基于表面等离子体共振(SPR)生物传感器的核酸检测技术,为实时、在线检测微生物奠定技术基础。方法应用SPR生物传感器实时在线分析系统,在传感器表面固定探针分子,对溶液中的靶序列进行杂交检测,研究该检测方法的灵敏度、特异性及可重复性等。结果试验中建立的核酸检测方法能够实现对靶序列的实时检测,检测下限达4×102CFU/ml。结论该试验建立的核酸检测方法,具有灵敏度高、特异性强、可重复性好等优点,SPR传感器技术在核酸杂交检测工作中有着广阔的应用前景。     

表面等离子体共振生物传感器对病原菌快速检测研究

目的 建立基于表面等离子体共振(SPR)生物传感器的核酸检测技术,为实时、在线检测病原菌奠定技术基础.方法 应用SPR生物传感器实时在线分析系统,在传感器表面固定探针分子,对溶液中的靶序列进行杂交检测,研究该检测方法的灵敏度、特异性及可重复性等.结果 实验中建立的核酸检测方法能够实现对靶序列的实时检测,检测下限达4×102CFU/ml.结论 该实验建立的核酸检测方法,具有灵敏度高、特异性强、可重复性好等优点,SPR传感器技术在核酸杂交检测工作中有着广阔的应用前景.     

血清学检测与核酸检测在献血者血液筛查中的相关性研究

目的评价血清学检测与核酸检测在降低输血相关风险中的相关性。方法对大连市血液中心2012年12月1日-2013年5月31日共计33 708份献血者标本同时进行血清学检测(HBsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体、谷丙转氨酶)和HBV/HCV/HIV三联核酸定性检测。单纯核酸检测反应性的标本需进行鉴别试验,对鉴别阴性的献血者进行跟踪检测。将HBsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体三项酶联免疫检测与核酸检测结果对比分析。结果酶联免疫检测单试剂不合格率为1.38%。酶联免疫检测双试剂反应性而核酸检测无反应性的不合格标本有40份,其中HBsAg反应性12份,HCV抗体反应性28份。单纯核酸检测反应性标本有46份,经鉴别和追踪确认HBV感染献血者15例,HIV窗口期感染1例,无HCV RNA的检出。结论核酸检测对于血清学阴性的HBV感染检出效果明显;但对于感染了HBV但病毒载量极低的献血者,核酸检测存在漏检的可能;血液筛查中核酸检测不能代替血清学检测;慎重对待核酸检测的假阳性结果,制定合理的献血者评估策略以减少献血者流失。     

基于Web的体检信息系统设计与应用

运用ASP技术和网络数据库原理,基于B/S模式而开发的体检信息管理系统。该系统的开发和应用,可以使查体者足不出户,就可上网查询个人的体检信息和获得健康咨询服务,既方便快捷,又能很好地保护个人隐私。     

2019—2022年泸州市HIV-1抗体阴性和不确定确证结果与核酸定量检测结果一致性分析

目的 分析HIV-1抗体阴性和不确定确证结果与HIV-1核酸定量检测结果的一致性，探讨抗体确证为HIV-1阴性和不确定血清标本进行核酸检测的必要性。方法 收集2019年1月至2022年6月抗体确证为HIV-1阴性和不确定的血清标本，进行HIV-1核酸定量检测，采用Excel 2013、SPSS 25.0软件进行描述性统计学分析，率的比较采用χ²检验，检验水准(双侧检验)为0.05。结果 875份血清标本中有228份核酸定量检测大于5 000 Cps/ml，其年龄均值为56.39，男女比例为2.26∶1,46.93%(107/228)为大于50岁的男性血清标本；医院、疾控、妇幼机构的血清标本分别有35.64%(129/362)、24.01%(97/404)和1.83%(2/109)核酸定量检测大于5 000 Cps/ml；无论筛查S/CO数值高低及抗体确证检测情况，各组均有HIV-1核酸定量检测值大于5 000 Cps/ml的血清标本。结论 筛查S/CO值比较或抗体确证检测结果均不能完全有效区分是否感染HIV，使用灵敏度更高的筛查试剂进行初步的抗体筛查，再使...