TRAF5蛋白在乳腺癌中的表达

目的：探讨肿瘤坏死因子受体相关因子5（tumor necrosis factor receptor-associated factor 5,TRAF5）在正常乳腺组织、乳腺癌组织及不同侵袭能力乳腺癌细胞系中的表达情况,并分析其与微血管密度的关系.方法：应用免疫组化方法分别检测TRAF5和CD34在70例乳腺癌组织和14例正常乳腺组织中的表达,并计数微血管密度.应用Western blot方法检测TRAF5在乳腺癌细胞系MDA-MB-231（高侵袭）和MCF-7（低侵袭）中的表达.结果：TRAF5表达于正常乳腺导管上皮细胞和乳腺癌肿瘤细胞胞浆内.其在正常乳腺组织、非浸润性导管癌、浸润性导管癌中的阳性表达率逐渐升高,但差异无统计学意义（P＞0.05）.TRAF5在乳腺癌高侵袭细胞系中的表达量高于低侵袭细胞系,但差异无统计学意义（P＞0.05）.乳腺浸润性导管癌中,TRAF5阳性表达的微血管密度明显高于阴性表达组（P＜0.05）.结论：在浸润性导管癌中,TRAF5表达与微血管密度有关.     

TRAF1蛋白在乳腺癌中的表达及意义

目的：探讨肿瘤坏死因子受体相关因子1（tumor necrosis factor receptor-associated factor 1,TRAF1）在正常乳腺组织、乳腺癌组织及不同侵袭能力乳腺癌细胞系中的表达情况,并分析其与微血管密度的关系。方法：应用免疫组化方法分别检测TRAF1和CD34在70例乳腺癌组织和14例正常乳腺组织中的表达,并计数微血管密度。应用Western blot方法检测TRAF1在乳腺癌细胞系MDA-MA-231（高侵袭）和MCF-7（低侵袭）中的表达。结果：TRAF1在正常乳腺组织中不表达。其细胞浆阳性表达率在非浸润性导管癌（17.14%）中高于正常乳腺组织,但差异无统计学意义（P〉0.05）。在浸润性导管癌（40%）中明显高于正常乳腺组织和非浸润性导管癌（P〈0.05）。TRAF1在乳腺癌高侵袭细胞系中的表达量高于低侵袭细胞系,但差异无统计学意义（P〉0.05）。乳腺浸润性导管癌中,TRAF1阳性表达的微血管密度明显高于阴性表达组（P〈0.05）。结论：TRAF1在乳腺癌组织中表达明显升高,与乳腺癌侵袭性相关。在浸润性导管癌中,TRAF1表达与微血管密度相关。     

p16蛋白在成釉细胞瘤中的表达

目的：研究成釉细胞瘤（ameloblastoma,AB)星网状层细胞增殖与分化的特点，探讨其生物学意义。方法：应用p16蛋白单克隆抗体免疫组化S－P法检测40例AB，其中原发17例，复发16例，恶变7例，此外用口腔粘膜鳞癌4例，淋巴结转移癌2例，基底细胞癌7例作对照观察。结果：40例AB的p16蛋白的缺失率为52．5％，其中，原发AB29．4％，复发AB62．5％，恶变AB85．7％，3组间P＜0．05。p16蛋白在多已发生角化的上皮样细胞当中有弱表达，但在星网支中原始胚样细胞多表达为阴性。结论：AB的发生与p16蛋白的缺失有关。随着复发与恶变的变化，p16蛋白缺失率增加（P＜0．05）。具有显著性意义。p16蛋白的阳性表达与细胞的分化状态有关。     

NM23蛋白产物在膀胱癌组织中的表达

应用免疫组化ＳＡＢＣ法研究了ＮＭ２３／ＮＤＰＫ在正常膀胱，膀胱癌及癌旁组织中的表达。结果显示：ＮＭ２３在正常膀胱中表达阴性，而癌和癌旁组织中的阳率表达率分别为８３．３％和８７．５％。鳞癌，腺癌的ＮＭ２３表达与诸临床病理因素无关；而移行细胞癌ＮＭ２３表达强度与肿瘤病理分级和临床分期正相关。     

TRAF6在UUO肾间质纤维化大鼠模型中的表达

目的研究TRAF6在肾间质纤维化中的表达。方法采用单侧输尿管梗阻(UUO)致肾间质纤维化模型,造模后分别于3、7、14 d时各处死8只大鼠。病理组织标本采用HE及Masson染色观察肾脏病理改变,反转录酶—聚合酶链锁反应法、蛋白免疫印迹检测肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)m RNA的定量表达,免疫组化法检测TRAF6和α-SMA蛋白的定位表达。结果与正常组比较,模型组TRAF6的表达在UUO术后7 d显著增加,于14 d表达最高(P<0.01),且主要表达于UUO术后14 d时的肾小管上皮细胞。结论 TRAF6在UUO大鼠肾间质纤维化发展过程中具有重要的作用,其活化可能参与了病变过程中炎症以及肾小管上皮细胞—肌成纤维细胞的转分化。     

TRAF 6在肿瘤恶病质骨骼肌炎症反应中的作用研究

目的 研究肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在肿瘤恶病质骨骼肌炎症反应中的作用.方法 小鼠结肠腺癌细胞接种BALB/c小鼠诱导肿瘤恶病质模型,每天监测各组小鼠体质量,于第7、13和19天检测左侧腓肠肌组织的质量、纤维横切面积,PCR和Western blotting检测TNF-α、IL-6、TRAF6 mRNA和蛋白表达水平.结果 与对照组比较,随着接种细胞时间的延长,荷瘤小鼠体质量和去瘤体质量减轻(P＜0.05);腓肠肌组织的质量减轻(P＜0.05),纤维横切面积减小(P＜0.05),TNF-α、IL-6和TRAF6的mRNA和蛋白水平均显著升高(P＜0.05),且TRAF6的水平与腓肠肌的消耗呈正相关(P＜0.05),与TNF-α和IL-6的水平正相关(P＜0.05).结论 TRAF6可能在肿瘤恶病质骨骼肌组织的炎症反应过程中起到重要的作用.     

大鼠野生型TRAF6基因和TRAF6 shRNA表达质粒的构建及鉴定

目的:构建大鼠野生型肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)基因及其特异性短发卡状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达和沉默TRAF6基因的情况?方法:用DNA重组技术将针对大鼠TRAF6基因的CDS区序列(加HA标签)和针对其不同位点所设计的3种shRNA序列分别克隆到pcDNA3.1及pGenesil-1/GFP真核表达质粒中?在酶切鉴定及序列测定正确后,用NeonTM电转仪,将上述质粒分别转染入培养的大鼠GMC中,然后用Western blot检查HA-TRAF6融合蛋白的表达情况,同时筛选最有效的TRAF6 shRNA?结果:限制性酶切及核酸序列分析确证,上述TRAF6基因过表达和shRNA表达质粒均构建成功?Western blot显示,构建的pcDNA3.1-HA-TRAF6质粒能在大鼠GMC中表达,且TRAF6 shRNA-1具有最佳的沉默效率?结论:本实验成功构建了大鼠野生型TRAF6真核表达质粒及其特异性的shRNA表达载体,这为今后进一步研究TRAF6基因的生物学功能提供了实验基础?     

nm23-H1蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的研究nm23-H1蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法对87例乳腺癌患者标本中nm23-H1蛋白的表达进行检测。结果nm23-H1蛋白阳性表达率为51.72%,nm23-H1表达与淋巴结状态、组织学分级、临床分期及术后生存期有关(P<0.05),nm23-H1蛋白的表达与年龄、肿瘤大小、ER的表达无明显关系(P>0.05)。结论nm23-H1的表达可能与乳腺癌的发展及预后有关;nm23-H1蛋白的表达对判断乳腺癌进展及预后有一定的参考价值。     

P53蛋白在胃癌组织中的表达

①目的 探讨Ｐ５３蛋白在胃癌组织中表达的意义。②方法 应用免疫组织化学技术和原位杂交技术，检测４５例胃癌及２１例胃溃疡组织中Ｐ５３蛋白的表达。③结果 Ｐ５３蛋白在胃溃疡组织中无表达，在胃癌组织中表达阳性率为３３．３％，两者比较差异有极显著性（Ｘ＾２＝８．０３，Ｐ〈０．０１）。④结论 Ｐ５３蛋白在胃癌发生中可能起重要作用。     

nm23—H1,p16蛋白在大肠癌组织中的表达及其意义

目的：探讨大肠良恶笥病变中ｎｍ２３－Ｈ１，ｐ１６的表达及大肠癌浸润转移的关系。方法：应用ＡＢＣ免疫组化法检测６０例大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１与Ｐ１６的表达情况。结果：大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１与Ｐ１６阳性率为６６．７％、４０．０％；二者大肠癌中的表达存在相关关系，并与癌组织的分化程度、有无淋巴结转移及患者的生存时间等方面的均 差异。结论：抑癌基因Ｐ１６的失活、ｎｍ２３－Ｎ１display structure     

CD44V6蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的：探讨胃癌中CD44V6蛋白的表达情况及其临床意义。方法：彩SP免疫组织化学法对40例胃癌标本进行检测。结果：40例胃癌标本中有17例标本的CD44V6蛋白阳性表达，其余23例均为阴性表达，并且CD44V6蛋白在伴淋巴结转移的患者中的阳性率显著高于无淋巴结转移组（P＜0．01）。结论：胃癌中CD44V6蛋白表达与癌组织淋巴结转移密切相关，该蛋白高度表达可能是患者预后不良的危险因素。     

核心结合因子α1在成牙本质细胞样细胞MDPC-23中的表达

目的：观察核心结合因子α1（cbfα1）在成牙本质细胞样细胞MDPC-23中的表达情况，为进一步研究cbfα1在牙胚发育，尤其是成牙本质细胞分化过程中的作用奠定基础。方法：通过瞬时转染、免疫荧光染色、Western blot等方法，研究转染或BMP-2刺激时，cbfα1在MDPC-23细胞中的表达情况。结果：在普通MDPC-23细胞中未发现cbfα1的表达；转染pcDNA3．cbfα148h后，cbfα1表达量最高；加入骨形态发生蛋白-2（BMP-2）刺激，可诱导内源性cbfα1的表达，但表达量小于pcDNA3-cbfα1组；而pcDNA3-cbfα1组和BMP-2＋pcDNA3-cbfα1组的cbfα1表达量差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：转染pcDNA3-cbfα148h后，cbfα1表达量最高，可作为今后研究的观测点。     

nm23蛋白在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的：观察ｎｍ２３基因在膀胱癌中的表达并探讨其临床意义。方法：对４７例膀胱癌标本进行Ｓ－Ｐ免疫组化染色,分析ｎｍ２３蛋白表达与膀胱癌多种指标和预后的关系。结果：ｎｍ２３蛋白在膀胱癌组织及非癌粘膜中均有表达,定位于细胞浆。７２．３４％的膀胱癌组织ｎｍ２３蛋白染色阳性,阳性率显著高于非癌粘膜（Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３蛋白高度表达与膀胱癌细胞的低度分化及局部浸润有关,与肿瘤复发及肿瘤大小无关。结论：在膀胱癌中ｎｍ２３基因可能不是转移抑制基因,相反却促进膀胱癌的发生和发展,ｎｍ２３蛋白对于判断膀胱癌细胞的恶性程度、肿瘤进展以及预后有价值。     

TRAF6在NF-κB信号通路中的修饰与降解

目的：研究肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在调节NF-κB通路中的作用机制。方法：利用转导了并稳定表达。TRAF6基因的293RZC细胞株，用荧光素酶报告基因系统测定CoA1对293RZC细胞NF-κB通路的激活，Westem Blot分析在NF-κB通路激活过程中TRAF6和IκBα的降解。结果：CoA1可诱导293RZC细胞NF-κB通路的激活，在这一过程中，TRAF6被修饰并降解，IκBα也发生降解，二者的降解被蛋白酶抑制剂MG132抑制。结论：TRAF6介导NF-κB通路的激活需要蛋白酶复合体的作用。     

肿瘤坏死因子受体及其信号转导蛋白TRAF2在喉癌中的表达

目的：探讨肿瘤坏死因子受体(TNFR)和其转导蛋白TRAF2的表达及其与喉鳞状细胞癌生物学行为的关系。方法：利用免疫组织化学及原位末端标记法,对33例喉鳞状细胞癌组织TNFR1、TNFR2和TRAF2的表达及其凋亡指数进行检测。结果：①33例喉鳞状细胞癌中,21例TNFR1表达阳性（63.6%）,2例TNFR2表达阳性（6.1%）,两者表达染色阳性部位主要集中在细胞膜上,表达程度与喉鳞癌的生物学行为无关（P＞0.05）;②33例喉鳞状细胞癌中,23例TRAF2表达阳性（69.7%）,其表达部位主要位于细胞浆中。TRAF2的表达程度与喉鳞癌的病理分级有关（P<0.05）,与其他的生物学行为无关（P＞0.05）;③TRAF2的表达与TNFR1的表达具有明显的正相关（r=0.637,P<0.01）; ④TNFR1、TRAF2表达阳性组织的细胞凋亡指数（3.12±1.47及2.85±1.19）显著低于TNFR1、TRAF2表达阴性组织（4.28±1.34及5.12±0.81）（P<0.05及P<0.01）。结论：TNFR1信号转导过程中募集TRAF2增强肿瘤细胞抗凋亡能力,与肿瘤的分化和恶性程度有一定关系,缺乏表达TNFR2可能对喉癌的发生发展有一定作用。     

nm23—H1蛋白在原发性胆囊癌中的表达及临床价值探讨

目的：探讨转移抑制基因nm23-H1在原发性胆囊癌中的表达及其与临床病理参数的关系。方法：本研究包括45例胆囊癌和15例胆囊息肉样病变，相关临床病理资料如组织学类型，分化程度，临床分期，浸润[深度，局度淋巴结转移及肝脏浸润等一并记录。用免疫组化SABC法检测上述病变的nm23-H1表达。结果：胆囊癌的nm23－H1阳性表达率为46．7％，胆囊息肉样病变的阳性表达率为13．3％，两者比较有显著性差异（P＜0．05）；且其表达与胆囊癌分化程度，Nevin分期，浸润深度及有无淋巴结转移均密切相关。结论：nm23-H1蛋白表达可能有助于区分胆囊良恶性病变，对胆囊癌的临床分期，浸润转移的估计和病人预后的判断有重要的意义。     

CD44V9和nm23基因蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨胃癌组织中CD44V9和nm23的表达,相互关系及其临床意义。方法：应用免疫组化SABC法对60例胃癌中CD44V9和nm23表达进行检测。结果：胃癌组织中CD44V9和nm23的阳性表达率分别为75％和55％;CD44V9阳性胃癌中nm23阳性表达率（42．2％）明显低于CD44V9阴性胃癌（93．3％）（P＜0．01）,CD44V9阳性表达与胃癌Lauren分型,浸润深度及淋巴结转移有关（P＜0．05）,nm23表达与胃部淋巴结转移有关（P＜0．05）。结论：CD44V9和nm23在胃癌中表达呈明显负相关,二者有可能作为临床上预测胃癌侵袭转移潜能的指标。     

CD44V9和nm23基因蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨胃癌组织中CD44V9和nm23的表达、相互关系及其临床意义.方法应用免疫组化SABC法对60例胃癌中CD44V9和nm23表达进行检测.结果胃癌组织中CD44V9和nm23的阳性表达率分别为75%和55%;CD44V9阳性胃癌中nm23阳性表达率(42.2%)明显低于CD44V9阴性胃癌(93.3%)(P＜0.01).CD44V9阳性表达与胃癌Lauren分型、浸润深度及淋巴结转移有关(P＜0.05),nm23表达与胃癌淋巴结转移有关(P＜0.05).结论CD44V9和nm23在胃癌中表达呈明显负相关,二者有可能作为临床上预测胃癌侵袭转移潜能的指标.     

钠钙交换体1型通道蛋白在人牙髓成牙本质细胞和神经纤维组织中的表达

目的:探讨钠钙交换体1(NCX1)型通道蛋白在人牙髓成牙本质细胞和神经纤维组织中的表达,进一步解释牙髓组织的修复和传感功能。方法:选取就诊患者因正畸减数或阻生拔出的新鲜健康第三磨牙24颗。取牙髓行牙本质涎磷蛋白抗体染色、改良Bielschowsky银染色以分别定位成牙本质细胞层、神经组织;用特异性抗体染色分析NCX1在人牙髓组织成牙本质细胞层、神经组织中的表达情况。结果:免疫组化染色显示,人牙髓成牙本质细胞胞体和神经组织的NCX1型通道蛋白均为阳性表达。Image-Pro Plus 6.0半定量分析显示,牙冠部和牙根部上段成牙本质细胞中的NCX1型通道蛋白表达水平分别为0.152±0.023、0.135±0.020,两者差异无统计学意义(t=1.425,P=0.352)。结论:人牙髓组织成牙本质细胞层及神经组织中均存在明显的NCX1型通道蛋白表达,其在牙冠部及牙根部上段牙本质细胞中的表达差异不明显。