硒对实验性肝纤维化预防作用的研究

目的:探讨抗氧化损伤预防肝纤维化的作用.方法:用四氯化碳制造大鼠肝纤维化模型,造模之日起给予亚硒酸钠,实验结束时测定血清硒、肝细胞膜流动性、肝细胞中羟脯氨酸和丙二醛含量以及组织病理学检查.结果:亚硒酸钠抗氧化损伤可显著保护肝细胞膜的流动性免受损伤,减轻肝细胞的胶原蛋白合成,有效清除氧自由基,组织病理学检查示明显的抗肝纤维化作用.结论:亚硒酸钠抗肝氧化损伤能够预防四氯化碳造成的大鼠肝纤维化.     

硒对大鼠肝细胞DNA损伤的体内体外研究

应用单细胞凝胶电泳研究了一定剂量的亚硒酸钠对离体和在体大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤的作用。结果表明：在２．１８５、４．３７５、８．７５０、１７．５００、３５．０００μｍｏｌ／Ｌ的剂量条件和２．１８５μｍｏｌ／Ｌ的剂量外,其余剂业硒酸钠均可以引起离体大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤。５、１０、２０μｍｏｌ／ｋｇ的亚硒酸钠也可引起在体大鼠肝ＤＮＡ损伤。亚硒酸钠引起的离体和大体大鼠肝细胞ＤＮＡ损伤均存在明显的剂量－反应关系     

川芎嗪抗肝纤维化作用的实验研究

目的：研究川芎嗪抗实验性肝纤维化作用。方法：用四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导大鼠肝纤维化，分正常对照组、模型组和川芎嗪组进行对比观察。结果：川芎嗪能显著降低ＣＣｌ４损伤的大鼠血清谷丙转氨酶、丙二醛、透明质酸、Ⅲ型前胶原及肝组织中丙二醛水平，提高肝组织中超氧化物歧化酶活性，减轻肝组织胶原纤维增生程度。结论：川芎嗪具有保护肝细胞、抗脂质过氧化及抗肝纤维化作用。     

硒对大鼠肝细胞DNA损伤的体内体外研究

应用单细胞凝胶电泳研究了一定剂量的亚硒酸钠对离体和在体大鼠肝细胞 DNA损伤的作用。结果表明 :在2 .185、 4.375、 8.75 0、 17.5 0 0、 35 .0 0 0 μmol/ L 的剂量条件下 ,除 2 .185 μmol/ L 的剂量外 ,其余剂量的亚硒酸钠均可引起离体大鼠肝细胞 DNA损伤。 5、 10、 2 0 μmol/ kg的亚硒酸钠也可引起在体大鼠肝细胞 DNA损伤。亚硒酸钠引起的离体和在体大鼠肝细胞 DNA损伤均存在明显的剂量 -反应关系。研究结果提示 ,一定剂量的亚硒酸钠能引起离体和在体大鼠肝细胞 DNA损伤     

老鼠簕对大鼠中毒性肝纤维化的影响

目的：观察老鼠筋治疗中毒性肝纤维化的效果,初步探讨其作用机制。方法：四氯化碳（CCl4）皮下注射制作大鼠中毒性肝纤维化模型,在病理检查证明造模大鼠肝组织出现肝纤维化后,分为模型对照组、秋水仙碱对照组和老鼠筋高剂量（2g／kg）、低剂量（1g／kg）组。连续给药4周后,检测血清ALT、AST、TP、ALB、HA、LN、MDA、SOD水平,肝组织行HE染色,光镜下观察病理学改变,并行肝纤维化的病理学评分。结果：与模型对照组比较,老鼠箭治疗组能明显降低肝纤维化时异常升高的ALT、AST、HA、LN、MDA;提升肝纤维化时异常降低的血清TP、ALB、SOD水平;明显改善CCl4所致大鼠肝纤维化的病理学改变,肝纤维化病理学评分明显降低。结论：老鼠筋具有治疗大鼠中毒性肝纤维化作用,抗脂质过氧化损伤可能是其重要的作用机制。     

补肾益气化瘀解毒法对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡及凋亡相关基因的影响

目的 观察补肾益气化瘀解毒作用的中药复方肝力克对肝纤维化大鼠肝细胞的凋亡及其相关基因的影响,探讨中药治疗肝纤维化的作用机制.方法 以四氯化碳诱导建立大鼠肝纤维化模型,以不同剂量的中药肝力克进行治疗;光镜观察肝组织的病理学变化,采用TUNEL法检测肝细胞的凋亡情况,免疫组化法检测凋亡相关蛋白的表达.结果 中药肝力克能显著改变肝纤维化的病理状态,能减轻肝细胞的凋亡情况,并能调节凋亡相关基因的表达.结论 肝力克抗纤维化作用的机制可能是通过调节肝纤维化大鼠肝细胞的凋亡水平;抑制肝纤维化大鼠肝细胞Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达来实现的.     

三参提取物抗大鼠肝纤维化作用的研究

目的：研究三参提取物灌胃给药对大鼠肝纤维化的预防和治疗作用。方法：采用皮下注射四氯化碳（CCl4）和腹腔注射二甲基亚硝胺（DMN）诱导的2种大鼠肝纤维化模型,观察三参提取物对大鼠肝纤维化的影响。结果：三参提取物对2种肝纤维化大鼠有升高血清和肝脏中白蛋白（ALB）含量,降低血清中Ⅳ型胶原、总胆红素（TBiL）和肝脏中Hyp、丙二醛（MDA）含量,改善肝细胞损伤程度及肝纤维化、降低肝门静脉血压等作用。结论：三参提取物具有抗COL和DMN大鼠肝纤维化的作用,提示临床上可用于防治肝纤维化。     

二氢杨梅素对肝纤维化大鼠脂质过氧化损伤的保护作用

目的：观察二氢杨梅素对四氯化碳（CCl4）所致大鼠肝纤维化的保护作用,并探讨与抗脂质过氧化有关的作用机制。方法：84只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、复方鳖甲阳性对照组和二氢杨梅素低、中、高剂量组。采用40％CCl4皮下注射制备大鼠肝纤维化模型,造模的同时,二氢杨梅素低、中、高剂量组分别用25mg／100g、50mg／100g和100mg／100g3种不同浓度的二氢杨梅素进行干预,持续13周,检测肝组织匀浆丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性变化,光镜下观察肝组织病理学变化。结果：二氢杨梅素可明显降低肝纤维化时升高的MDA含量（P〈0．05）;升高肝纤维化时降低的SOD水平（P〈0．05）;光镜下观察模型组大鼠肝细胞严重变性、坏死,胶原纤维明显增加,二氢杨梅素各剂量组大鼠肝细胞病理损伤得到明显改善。结论：二氢杨梅素对CCl4所致的大鼠肝纤维化有明显的保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化损伤有关。     

苦参素穴位注射对肝纤维化防治及对肝组织金属蛋白酶组织抑制因子2表达影响

目的：观察苦参素足三里（OMZSL）注射预防及治疗大鼠肝纤维化的疗效及对肝组织中TIMP-2表达的影响。方法：采用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型，SD大鼠35只，随机分为5组：正常对照组、模型对照组、苦参素腹腔注射（OMip）对照组、OMZSL注射治疗组、OMZSL注射预防组。实验至10周末，测定血清ALT、AST、TBA、白蛋白（ALB）及肝组织中总蛋白（TP）水平。光镜、电镜观察肝细胞结构和肝纤维化程度；RT-PCR法检测肝组织中基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）mRNA的表达。结果：OMZSL注射预防与治疗给药均能明显降低四氯化碳诱导肝纤维化大鼠ALT、AST、TBA含量，增加ALB及TP水平，（P〈0．05，P〈0．01）。病理学观察，OMZSL注射防、治组大鼠肝组织病理改变明显减轻，假小叶结构明显减少；且OMZSL预防组肝纤维化程度轻于治疗组。OMZSL防、治组肝组织中TIMP-2mRNA的表达显著低于模型对照组（P〈0．05，P〈0．01）。结论：OMZSL注射对四氯化碳诱导的肝纤维化有较好的预防及治疗作用，其部分机制是通过保护肝细胞，减少TIMP-2mRNA的表达，促进细胞外基质的降解，抑制细胞外基质沉积，从而减轻或逆转肝纤维化。     

硒及中药抗肝纤维化实验研究

目的 探讨硒及中药的抗肝纤维化作用。方法 用CCl4等复合因素制备大鼠肝纤维化的动物模型，对病理形态学、常规生化指标ALT、A／G及血清肝纤维化指标HA、PC Ⅲ的变化进行观察。结果 模型组与预防组各组之间均有显著性差异，而中药＋硒预防组与中药预防组之间亦有显著性差异。病理结果显示，模型组正常肝小叶结构被破坏，有假小叶形成，肝细胞肿胀，呈水样变性，部分细胞脂肪变性可见肝细胞的点状坏死；而预防给药各组肝细胞的脂肪变性和水样变性明显减轻，未见明显的假小叶形成，其中以中药＋硒组肝细胞脂肪性和水样变性程度最轻。结论 硒及中药单独应用均可提高A／G值、降低血清ALT及HA、PCⅢ的水平，减轻肝组织纤维化的形态；如果在中药中适量加硒，则会进一步增强抗肝纤维化的作用。     

硒对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的:观察不同剂量补硒对大鼠血清硒含量及实验性肝纤维化的影响。方法:将Wistar大鼠50只分为正常对照组、四氯化碳(CCl4)模型组、高糖组、补硒高剂量组和低剂量组,后4组动物每只给CCl4油溶液0.15ml腹腔内注射2次/周,共注射6周;后3组大鼠分别给予高糖、葡萄糖酸硒,观察每一种情况对大鼠血清硒含量、肝功能和肝纤维化形成过程产生的影响。结果:实验3周和6周时,补硒组和模型组及高糖组血清ALT均增高,各组间差异不明显,但补硒组AST均明显降低,与模型组及高糖组比较有较明显差异(P<0.05或P<0.01),补硒组大鼠血清硒含量在6周时均较模型组明显增高(P<0.01),维持在正常水平,并对大鼠肝纤维化有一定的抑制作用,但两个剂量组间未见明显差异,高糖使大鼠的体重明显增加,未见大鼠肝纤维化的改善。结论:补硒对肝损伤动物血清硒及肝纤维化的影响表现在后期,采用低剂量较长期的补硒方法可能有效安全。     

红景天甙对肝纤维化大鼠Samds基因表达的影响

目的: 观察红景天甙对肝纤维化大鼠TGFβ-Smad通路的影响.方法: CCl4诱导大鼠肝纤维化,以红景天甙水溶液干预性治疗,Masson染色观察肝组织胶原沉积;ELISA法检测大鼠血清TGFβ1水平;原位杂交(in situ hybridization,ISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IH)检测大鼠肝组织Smads表达情况.结果: 红景天甙干预性治疗使肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平明显下降[(53.4±19.5) vs (88.7±22.8) mg/L, P<0.05],肝脏胶原占肝组织面积比例减少为(0.041±0.011)[模型组(0.167±0.052),P<0.05];治疗组肝脏Smad 4蛋白表达阳性率降低为(0.023±0.008)[模型组(0.137±0.090),P<0.01],Smad 4 mRNA阳性率降低为(0.233±0.018)[模型组(0.741±0.091),P<0.01];Smad 7蛋白阳性率增加为(0.067±0.010)[模型组(0.019±0.002),P<0.05],Smad 7 mRNA阳性率增加为(0.198±0.011)[模型组(0.074±0.012),P<0.01];肝组织Smads蛋白表达与Smads mRNA水平变化一致.结论: 红景天甙防治可显著降低肝纤维化大鼠血清TGFβ1水平,减少肝脏胶原沉积,抑制肝脏Smad 4表达及促进Smad 7 mRNA表达,从而减弱了由TGFβ1介导的肝纤维化信号,可能是其发挥抗肝纤维化作用的分子机制之一.     

细胞外信号调节激酶对肝纤维化逆转的影响及其机制

目的:探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase, ERK)活化对肝纤维化自发逆转的影响及其作用机制.方法:CCl4注射SD大鼠8周,随后停药6周,建立肝纤维化自发逆转的动物模型.采用Northern杂交、免疫组化染色等检测ERK在纤维化消退过程中的活化状况、表达时序及在肝组织中的定位,并以cDNA微阵列杂交、RT-PCR等检测多种ERK底物在RNA、蛋白质水平的表达变化.结果:肝纤维化自发逆转过程中ERK表达水平显著提高,且由肝星状细胞( HSC)核表达为主转变为肝细胞胞质表达为主,多定位于小叶内、窦周间隙及纤维条索周围.核糖体S6蛋白激酶(RSK1)、c-fos、磷脂酶A2(PLA2)、离子通道及水通道、胃肠激素受体等ERK的下游基因转录也明显上调.结论:ERK与肝纤维化的自发逆转密切相关,可能通过多途径发挥保护肝细胞功能、促进肝细胞增殖、加速HSC凋亡等作用.     

田基黄对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的:观察田基黄对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法:采用化学毒物四氯化碳(CCl_4)致小鼠肝脏损伤,测定其生化指标并观察病理组织学改变。结果:田基黄能降低CCl_4肝损伤所致的小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)升高(P<0.05)。病理组织学检查提示田基黄能减轻肝细胞变性、坏死。结论:田基黄对小鼠实验性肝损伤具有明显的保护作用。     

四氯化碳/乙醇诱导乙型肝炎病毒转基因小鼠发生肝纤维化与肝癌的实验观察

目的 观察四氯化碳/乙醇诱导乙型肝炎病毒转基因小鼠实验性肝纤维化和肝癌的过程.方法 采用四氯化碳/乙醇分别诱导野生型小鼠、乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)转基因小鼠、HBsAg转基因小鼠20周,观察每组小鼠发生肝纤维化和肝癌的情况,并采用RT-PCR方法检测HBx及HBsAg基因的表达.结果 转基因小鼠肝脏有HBx或HBsAg基因表达,而野生型小鼠则没有.3组小鼠之间及雌、雄性之间发生肝纤维化的程度差异无统计学意义.四氯化碳/乙醇诱导显著加快了HBx和HBsAg转基因小鼠发生实验性肝癌的进程,雄性小鼠肝癌发生率显著高于雌性小鼠.结论 HBx和HBsAg基因整合进小鼠肝脏细胞内并不能增加肝纤维化程度,但能促进肝癌的发生发展;雄性小鼠较雌性更易发生肝癌;四氯化碳/乙醇诱导能显著促进乙型肝炎病毒转基因小鼠发生肝癌.四氯化碳/乙醇诱导乙型肝炎病毒转基因小鼠形成肝癌是一个较好的肝癌动物模型.     

柔肝抑纤饮对实验性肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响

目的:观察柔肝抑纤饮对实验性肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响,探讨其抗肝纤维化机制。方法:用CCl4制备实验性肝纤维化大鼠模型,采用DNA片断琼脂糖凝胶电泳结合透射电镜观察检测肝细胞凋亡情况,并检测血清纤维化指标水平和半定量肝组织胶原增生情况。结果:柔肝抑纤饮可明显抑制肝细胞凋亡,降低血清纤维化指标水平和肝组织胶原增生程度。结论:柔肝抑纤饮抗肝纤维化的作用途径之一是抑制肝细胞的凋亡。     

枳椇子对CCl4大鼠肝纤维化预防肝组织病理变化的影响

目的 :研究枳子提取物对四氯化碳 (CCl4)诱导的实验性肝纤维化的预防作用。方法 :用CCl4制备大鼠肝纤维化模型 ,分别取组织于光镜电镜下观察。结果 :模型组肝细胞大量坏死 ,汇管区炎性细胞浸润 ,假小叶形成。线粒体肿胀 ,膜不清晰 ,嵴消失 ,内质网扩张明显 ,溶酶体减少。预防组能减轻纤维化时 ,肝细胞的变性坏死及炎性细胞浸润 ,使线粒体膜及嵴恢复 ,减少内质网扩张 ,促进细胞再生 ,阻滞纤维化的发生发展。结论 :枳子具有明确抗纤维化作用 ,4 2 9g生药 /kg预防效果佳。其机理可能与减轻有毒物质对肝细胞的损伤 ,拮抗细胞脂质过氧化 ,稳定细胞膜有关。     

枳椇子提取物对肝纤维化保护作用的形态学研究

目的:研究枳椇子提取物对四氯化碳(CCl4)诱导的实验性肝纤维化的保护作用。方法:用CCl4制备大鼠肝纤维化模型,分别取组织于光镜电镜下观察。结果:模型组肝细胞大量坏死,汇管区炎性细胞浸润,假小叶形成,线粒体肿胀,膜不清晰,嵴消失,内质网扩张明显,溶酶体减少。预防组能减轻纤维化、肝细胞的变性坏死及炎性细胞浸润,使线粒体膜及嵴恢复,减少内质网扩张,促进细胞再生,阻滞纤维化的发生发展。结论:枳椇子具有明确抗纤维化作用,其机理可能与减轻有毒物质对肝细胞的损伤,拮抗细胞脂质过氧化,稳定细胞膜有关。     

红花提取物对肝纤维化大鼠肝线粒体的作用

目的 探讨红花提取物对肝纤维化大鼠肝细胞线粒体的保护作用。方法 二乙基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,实验组口服红花提取物,分离各组肝组织细胞线粒体,观察肝细胞线粒体形态学改变,检测MDA和SOD在肝细胞线粒体中的水平。观察线粒体膜势能和线粒体ATP的水平改变,并观察线粒体的呼吸功能变化,以研究红花提取物对肝纤维化大鼠肝细胞线粒体是否具有保护作用。结果 正常组大鼠肝线粒体排列整齐、形态正常,对照组的大鼠线粒体肿胀且形态不规则,边界不清晰,且大小不一致,而实验组线粒体的肿胀、结构不清晰、大小不一等情况有明显改善;肝纤维化大鼠肝细胞线粒体中MDA的水平明显升高,而SOD的含量明显下降,红花提取物处理则能明显降低线粒体MDA的水平,并提高SOD的含量;与正常组相比,肝纤维化大鼠的线粒体膜势能明显降低,而红花提取物处理能够提高线粒体膜势能;大鼠由于肝纤维化可加重消耗肝细胞线粒体中的ATP,而红花提取物能明显减少大鼠线粒体中的ATP消耗。与之一致的是,实验组大鼠线粒体中的磷氧比明显高于对照组。结论 红花提取物能明显降低大鼠肝纤维化诱导的肝细胞线粒体氧化应激。能维持肝细胞线粒体ATP水平、呼吸控制率及磷氧比来保护线粒体的功能。     

前列腺素E_2(PGE_2)对CCI_4诱导急性肝损害细胞保护作用的实验研究

PGE_2对CCI_4诱导的大鼠急性肝损害具有确切的细胞保护作用,能明显降低血清ASW、AST(-m)、ALT。减轻肝脏郁血水肿,降低肝细胞坏死、脂肪变性和炎症浸润等指标评分,并肯定了FGE_2的膜稳定效应,这可能是PGE_2对肝细胞保护效应的主要机制之一,还提出CCl_4对肝细胞膜性结构的损害呈均一性,FGE_2对肝细胞膜和线粒体都具有保护效应。