基于LPS/TLR4信号通路探讨酒精性肝病进展的相关机制

目的 关于酒精性肝病(ALD)进展的关键靶点研究具有重要意义.文中基于脂多糖(LPS)/Toll样受体4(TLR4)信号通路,探讨ALD大鼠进展的相关机制.方法 将大鼠给予乙醇12周建立ALD大鼠模型,80只大鼠随机分为ALD组(ALD模型)、LPS阻断组(ALD模型,MP12静脉注射)、TLR4阻断组(ALD模型,N...     

LPS信号转导分子TLR4表达与小鼠肝损伤的关系

目的 :探讨脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)信号转导分子TLR4(Toll likereceptor 4 ,TLR4)与肝脏损伤的关系。方法 :小鼠腹腔注射LPS后不同时间点取肝脏组织 ,HE染色观察病理改变 ,RT PCR法检测肝组织TLR4mRNA的表达。结果 :腹腔注射LPS后 2 4h小鼠肝脏出现明显炎性浸润、坏死 ,肝组织TLR4mRNA的表达在注射LPS后 6 ,1 2h明显抑制 ,2 4h则基本恢复。结论 :LPS致肝损伤呈时间依从性 ;LPS信号转导分子TLR4在介导LPS肝损伤中起重要作用     

TLR4信号通路与炎性反应

Toll样受体(TLR)是一类天然免疫受体,最早发现其与果蝇胚胎背、腹侧的发育有关。随着研究的深入,哺乳动物体内也发现有类似同源性受体,并统一称TLR家族。TLR的分布十分广泛,可以识别某些病原体或其产物所共有的特定结构。TLR4是介导内毒素/脂多糖应答的主要受体,而TLR4/CD14信号通路是介导内毒素诱导的炎性反应的重要通路。营养性肥胖、动脉粥样硬化、心肌梗死、哮喘等所引起的非细菌性炎性反应也与TLR4相关。本文就TLR4信号通路与炎性反应的研究进展进行综述。     

Toll样受体-4与脓毒症的研究进展

Toll样受体（Toll-like receptors,TLRs）是病原微生物跨膜信号转导的重要受体，与机体抗感染的天然免疫反应密切相关。Toll样受体-4(Toll-like receptor-4 ,TLR-4)是TLRs家族的重要成员，其作用尤为显著，是识别革兰氏阴性菌内毒素（脂多糖 lipopolysaccharides,LPS）、参与信号转导、诱发感染导致脓毒症链式炎症反应的主要受体。因此，研究TLR-4在脓毒症发病机制中的作用具有重要的意义,可以为早期防治脓毒症开辟新的途径。     

升降散对脓毒症大鼠肾组织Toll样受体4表达的影响

目的:观察升降散对脓毒症大鼠肾组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型。30只SD大鼠分为对照组、模型组、治疗组,每组各10只。对照组和模型组在造模前72 h开始灌胃0.9%Na Cl溶液,治疗组灌胃升降散浓缩液;造模后24 h采集动脉血检测肌酐(SCr)水平及肾组织检测TLR4 mRNA表达的水平。结果:与对照组比较,模型组和治疗组SCr水平均明显升高(P0.01),但治疗组SCr水平明显低于模型组(P0.01);模型组和治疗组TLR4 mRNA表达水平显著升高(P0.05,P0.01),但治疗组TLR4 mRNA表达水平明显低于模型组(P0.01)。结论:升降散可以通过减少肾脏TRL4 mRNA表达,以减轻脓毒症大鼠肾损伤。     

应用基因缺失小鼠研究TLR4在LPS诱导的急性肾衰竭中的作用

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)在脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肾衰竭(ARF)肾脏中的作用机制。方法:以TLR4基因缺失的C3H/HeJ小鼠和其野生正常对照的C3H/HeN小鼠为实验对象。实验分TLR4+(C3H/HeN)组、TLR4-(C3H/HeJ)组,单次性腹腔注射LPS(15 mg/kg)诱导小鼠ARF模型。24 h后检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)值来评估肾功能;Nomura评分法对肾组织病理改变进行半定量评分;免疫组织化学SABC法检测TLR4在两组小鼠肾组织中的表达、RT-PCR法检测肾组织总TLR4 mRNA的表达变化、免疫蛋白印迹检测肾组织总TLR4蛋白水平;TUNEL法检测肾脏组织的凋亡情况。结果:TLR4+(C3H/HeN)组的Cr、BUN分别为(202.26±11.08)μmol/L(、20.36±1.52)mmol/L,TLR4-(C3H/HeJ)组的Cr、BUN分别为(109.67±13.32)μmol/L(、6.42±0.41)mmol/L,差异有显著性(P<0.01);TLR4-(C3H/HeJ)组的肾组织结构正常,无明显的病理改变,而TLR4+(C3H/HeN)组小鼠肾小管呈轻中度的病理改变,主要表现为近端肾小管管腔扩大、空泡形成等;与TLR4-(C3H/HeJ)组相比,TLR4+(C3H/HeN)组的TLR4蛋白及mRNA表达明显上调;TUNEL法显示凋亡小体主要出现在TLR4+(C3H/HeN)组小鼠肾脏的近端小管及管周围,肾小球无明显凋亡小体出现,TLR4-(C3H/HeJ)组小鼠肾组织中未检测到凋亡小体,二者平均吸光度值分别为(0.117±0.008)和(0.038±0.003),差异有显著性(P<0.001)。结论:TLR4在LPS诱导的小鼠急性肾功能衰竭的发病中起一定作用。LPS可能通过激活TLR4信号转导途径引起肾组织中肾小管上皮细胞凋亡过度,肾小管上皮细胞数量减少,从而导致急性肾功能衰竭的发生。     

脓毒症合并急性肾损伤患者TLR4信号通路相关因子的表达及其预后因素分析

目的 探讨影响脓毒症合并急性肾损伤（AKI）预后的危险因素。方法 回顾性分析萍乡矿业集团有限责任公司总医院2020年7月—2021年7月收治的脓毒症合并AKI患者90例的临床资料,根据患者自入院治疗日起1月内的存活情况分为存活组（40例）和死亡组（50例）。收集两组患者的基本资料[性别、年龄、体质量指数（BMI）、糖尿病史、高血压史、心血管病史、使用血制品、使用激素、机械通气、多器官衰竭]和实验室指标[Toll样受体4(TLR4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、血肌酐（Scr）、平均动脉压（MAP）]。多因素Logistic逐步回归分析影响脓毒症合并AKI患者预后不良的危险因素。绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析TLR4、HMGB1、Scr预测脓毒症合并AKI患者预后不良的价值。结果 死亡组机械通气、多器官衰竭占比均高于存活组（P <0.05）,TLR4、HMGB1、Scr水平均高于存活组（P <0.05）。多因素Logistic逐步回归分析结果显示,机械通气[■=4.219(95%CI:2.851,6.313)]、多器官衰竭[■=3.110(95%CI:2.181,...     

脓毒症相关急性肾损伤早期生物标记物的研究进展

脓毒症常引起多器官功能障碍,肾脏是最常累及的器官之一,合并脓毒症相关急性肾损伤(SAKI)患者的发病率和死亡率均较高,预后较差.脓毒症患者的AKI早期诊断尤为关键,而目前依赖于血清肌酐和尿量的AKI诊断标准存在一定的临床局限性,新型生物标记物将弥补早期诊断的缺陷.文章主要就SAKI的早期生物标记物研究进展进行综述.     

尿液sTREM-1对脓毒症相关急性肾损伤的诊断价值

目的初步评价尿sTREM-1水平对于脓毒症相关AKI患者的早期诊断价值。方法收集广州医科大学附属深圳沙井医院ICU的脓毒症患者共56例,根据是否合并AKI和28 d时的生存情况进行分组。记录患者的性别、年龄和脓毒症情况,测量患者入住重症监护病房时的SCr、尿sTREM-1水平和24 h尿量,并每24 h留取1次标本。绘制ROC曲线分析相关指标对疾病的诊断价值,Logistic回归分析AKI发生的相关危险因素。结果 27例脓毒症患者在入住ICU后48 h时内发生AKI,Sepsis+AKI组患者在脓毒症严重程度、确诊前一天和确诊当天的SCr、尿量及尿sTREM-1水平与Sepsis组的差异有统计学意义(P<0.05)。此外Sepsis+AKI组患者死亡率高于Sepsis组(55.6%VS 17.2%)。在早期诊断脓毒症相关AKI时尿sTREM-1要优于SCr和尿量(0.750 VS 0.732,0.263)。单因素Logistic回归分析显示,脓毒症严重程度、预后、SCr、尿量及尿sTREM-1水平是发生AKI的危险因素,多因素Logistic回归分析显示,只有尿sTREM-1水平是发生AKI的独立危险因素。结论在早期诊断脓毒症相关AKI时尿液sTREM-1水平要优于SCr和尿量;脓毒症严重程度、SCr、尿量及尿sTREM-1水平是AKI发生的危险因素,但是只有尿sTREM-1水平为独立危险因素。     

SIGIRR对LPS诱导的H292细胞TLR4表达的影响

目的通过上调SIGIRR（single Ig IL-1R-related molecule）在人气道上皮细胞株H292中的表达,研究SI-GIRR对LPS诱导的H292细胞TLR4表达的影响。方法构建SIGIRR-EGFP融和蛋白的真核表达载体,运用脂质体转染的方法转染人气道上皮细胞株H292,经LPS刺激后,ELISA检测转染前后上皮细胞TNF-α分泌水平的差异,Westernblot（WB）检测TLR4表达的变化。结果构建的融和蛋白表达载体SIGIRR-EGFP经EcoRI和BamHI双酶切后,电泳显示其条带大小为4．7kb和1．23kb左右,经测序证实SIGIRR的序列与GenBank公布的人cDNA序列完全一致。SIGIRR-EGFP转染细胞与pEGFP-N1转染细胞和对照组细胞相比,TNF-α产生明显下降,而TLR4表达无明显变化。结论SIGIRR上调表达可抑制LPS诱导的H292细胞TNF-α的产生,对TLR4表达无影响,提示SIGIRR在该信号通路中起“刹车”作用可能是通过抑制其下游通路中某个或某些调节蛋白的表达完成的。     

连翘对LPS作用的巨噬细胞TLR4蛋白表达的影响

目的观察连翘对LPS诱导巨噬细胞（RAW264．7）16h后TLR4蛋白表达的影响,探讨连翘对抗内毒素作用及其可能机制。方法体外实验共分6组,分别为control组,LPS组,连翘高、中、低剂量组及多黏菌素B组;连翘高、中、低剂量组及多黏菌素B组分别加入连翘水煎液50mg／ml、25mg／ml、12．5mg／ml及多黏菌素B10ug／ml培养0．5h后,再加入10ng／ml LPS,培养16h;Western blot法测各组细胞TLR4蛋白表达变化。结果control组RAW264．7细胞只表达少量TLR4,给予LPS刺激16h,TLR4表达明显升高（P〈0．01）,连翘高、中、低剂量组预处理均可明显降低TLR4的表达（P〈0．01）,并呈剂量依赖关系;连翘高剂量组与多黏菌素B组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论连翘预处理能抑制LPS诱导的巨噬细胞TLR4的表达可能是其抗内毒素作用的重要机制。     

蜂毒致急性肾损伤的研究进展

蜂毒成分复杂多样,群蜂蛰伤由于大量毒液的注入,将导致人体多系统脏器功能的损伤,肾脏损伤最常见.蜂毒致急性肾损伤的主要临床表现为血红蛋白尿、少尿甚至无尿及肾功能异常,同时也可出现水、电解质及酸碱平衡的紊乱.目前蜂毒中毒尚无特异的治疗方案,除了积极的对症支持治疗外,及时的血液净化联合肾上腺素和大剂量糖皮质激素冲击治疗对于缩短患者住院时间,改善预后非常重要.免疫治疗对蜂毒过敏的患者亦是有效的治疗方案.     

地塞米松和TLR4在淡水淹溺型大鼠急性肺损伤中的作用

目的:探讨地塞米松和TLR4在大鼠淡水淹溺型肺损伤中的作用?方法:72只大鼠随机分为对照组?淹溺组和地塞米松组,通过淡水气道内吸入方法建立大鼠淡水淹溺型急性肺损伤模型,观察各时间点血气分析,检测0.5?2.0?4.0和8.0 h血清TNF-α?IL-6的含量以及肺组织湿/干重比值(W/D值)?MPO和TLR4 mRNA相对含量?结果:大鼠淡水淹溺型急性肺损伤模型建立成功;与对照组比较,淹溺组PaO2灌入淡水后急剧下降,随后逐渐回升,但仍维持较低水平?血清炎症因子TNF-α ?IL-6 分别在0.5?2.0 h开始表达,肺组织W/D值?MPO和TLR4 mRNA 含量分别在淹溺后0.5?2.0和8.0 h升高?地塞米松可抑制炎症因子和TLR4 mRNA表达,减轻肺损伤?结论:TLR4参与淡水淹溺型大鼠肺损伤,地塞米松通过抑制其表达可减轻肺损伤?     

FK506预处理对内毒素诱导急性肝损伤的保护作用

目的:探讨FK506预处理对内毒素急性肝损伤小鼠的保护研究作用及其可能机制.方法:LPS ip诱导小鼠急性肝损伤模型,实验小鼠随机分为LPS、LPS FK组,绘制生存曲线,行两组间生存率动态分析;测定LPS注射后0,0.5,2,4,6,8 h血清TNF-α,IL-1β,ALT,AST含量,光镜下观察肝组织病理改变.结果:LPS FK组小鼠72 h存活率为 46.67%,而LPS组小鼠仅10.00%(P<0.01).两组小鼠血清TNF-α、IL-1β含量变化均呈先升后降趋势,TNF-α于2 h达峰值,IL-1β于4 h达峰值,相同时间LPS FK组TNF-α、IL-1β含量低于LPS组(P均< 0.01).LPS FK组小鼠8 h血清ALT、AST含量分别为(1.06±0.15)、(1.21±0.13) μkat/L,低于LPS组(2.51±0.47)、(3.97±0.36) μkat/L(P均< 0.01).肝组织病理示LPS FK组小鼠肝细胞肿胀坏死、胞质嗜酸性变及肝小叶炎细胞浸润均较LPS组减轻.结论:FK506预处理可减轻内毒素所致的急性肝损伤;FK506可能通过降低血清TNF-α、IL-1β含量,下调炎症反应而发挥抗炎作用.     

急性肺损伤小鼠核转录因子-kB表达意义

研究ＮＦ－ｋＢ在肺多糖诱发的急性肺损伤中的动态表达，证实ＮＦ－ｋＢ参予炎症反应中的信号转导过程，方法纯种雄性昆明小鼠３６只随机分６组，正常对照及不才病组，致病组腹腔注射脂多糖形成急性肺损伤模，采用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法检测正常鼠及致病发鼠肺组织中ＮＦ－ｋＢ的总蛋白含量，进行统计学处理。     

TLR4在内毒素导致组织损伤过程中的信号转导作用

已知内毒素（1ipopolysaccharide，LPS）诱导炎症反应时，脂多糖结合蛋白（LPS binding protein，LBP）可将LPS传递给CD14分子，由CD14介导LPS细胞内传导而使NF-κB激活，诱导促炎细胞因子TNF、白介素和粘附分子等的表达。但CD14分子是一种GPI膜锚定蛋白，缺乏跨膜区和胞内结构，不能直接向细胞内传导LPS信号，尚需其它分子起信号传导作用。研究发现TOLL样受体是LPS信号向细胞内传导的门户蛋白。