SPE-UPLC-MS/MS法鉴别含龟鳖甲的中成药

目的建立固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱(SPE-UPLC-MS/MS)法鉴定含龟鳖甲的中成药。方法该药物提取液的分析采用Eclipse Plus十八烷基硅烷键合硅胶填料色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃;进样量1μL;ESI⁺离子源;MRM模式。结果 18批含鳖甲的中成药中均检出鳖甲(鳖)类成分,其中还有1批同时检出珍珠鳖甲类成分;17批含龟甲的中成药中有2批只检出龟甲(乌龟)类成分。结论含龟鳖甲的中成药质量整体上不理想,需引起有关部门关注。     

HPLC-DAD法同时检测镇静安神类中成药及保健食品中非法添加的药物

目的建立HPLC-DAD法同时检测镇静安神类中成药及保健食品中非法添加的9种安眠药物。方法样品分析采用Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为含0.1%三乙胺的0.05 mol/L磷酸二氢铵-甲醇溶液,梯度洗脱;体积流量为1.0 m L/min;柱温(35±5)℃;检测波长分别为210 nm(盐酸多塞平、苯妥英钠、司可巴比妥钠、盐酸羟嗪)、220 nm(阿普唑仑、艾司唑仑、劳拉西泮)、254 nm(氯氮卓、盐酸氯丙嗪),DAD全波长扫描(190~400 nm)。结果在147批药物(镇静安神类中成药87批、保健食品60批)中,11批检出盐酸多塞平,3批检出艾司唑仑,各有1批检出劳拉西泮、阿普唑仑和氯氮卓。结论该方法简便、快速、准确、重复性好,适用于基层药检机构检测非法添加药物。     

荧光定量PCR法鉴别蛤蚧定喘丸中醋鳖甲

目的 建立蛤蚧定喘丸中醋鳖甲的DNA分子鉴定方法。方法 根据鳖、佛罗里达鳖线粒体基因序列的差异设计特异性引物TS和AF,进行荧光定量PCR和方法学考察,然后对市售蛤蚧定喘丸中醋鳖甲进行鉴定。结果 含有鳖、佛罗里达鳖的DNA样品仅与相应引物扩增后可检测到荧光信号,有特定温度单一峰,T_m分别为77.45、79.72℃。该方法的检测限为10 copies/μL,重复性较高(CV<1%)。10批蛤蚧定喘丸中有9批仅检出鳖DNA,被鉴定为正品;1批同时检出鳖DNA和佛罗里达鳖DNA,被鉴定为掺伪品。结论 本研究所建立的方法可快速、可靠地鉴定蛤蚧定喘丸中醋鳖甲炮制品成分,有助于监管含醋鳖甲成方制剂的质量,并为成方制剂中动物药成分的专属性鉴定研究提供新途径。     

UPLC-DAD法快速检测保健食品中13种非法添加化学物质

目的建立UPLC-DAD法快速检测缓解体力疲劳类保健食品中13种添加的化学物质。方法样品乙腈提取物的分析采用Luna UPLC C_(18)柱(2.1 mm×100 mm, 1.6μm);流动相甲醇-乙腈-磷酸三乙胺溶液,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃;检测波长200～400 nm。结果 13种化学物质均达到基线分离。4批检出西地那非,1批检出他达拉非,1批检出氨基他达拉非,2批检出西地那非杂质12,2批检出对乙酰氨基酚,3批未检出。13种对照品在2.5～50.0μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999 0)。结论该方法简单便捷,准确,分离效果好,能够快速检测缓解体力疲劳类保健食品及中成药中非法添加化学物质。     

中成药和保健食品中非法添加38种激素的快速筛查

目的快速筛查中成药和保健食品中非法添加38种激素。方法样品经甲醇超声提取、滤过后,采用Hypersil Gold C18色谱柱(2. 1 mm×100 mm,3μm);流动相乙腈-乙酸铵,梯度洗脱;体积流量400μL/min;柱温45℃。质谱采用ESI离子源;正负离子同时检测。将数据文件导入Trace Finder软件,利用建好的化合物数据库及筛查方法进行快速、自动、高精度筛查。结果 38种激素在5. 0~1 000 ng/m L范围内线性关系良好(r>0. 998),准确度94. 5%~104. 7%,精密度0. 6%~6. 8%。36批中成药和22批保健食品中,有13批检出了醋酸泼尼松龙、甲泼尼龙、醋酸曲安奈德等激素。结论该方法快速准确,可靠灵敏,适用于中成药和保健食品中非法添加激素的快速筛查和定量。     

UPLC/Q-TOF-MS法检测2种中成药中土霉素、马来酸氯苯那敏和醋酸泼尼松

目的建立UPLC/Q-TOF-MS法检测2种止咳平喘类中成药中非法添加的土霉素,马来酸氯苯那敏和醋酸泼尼松。方法咳喘王胶囊和清肺胶囊以甲醇提取;Agilent SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相为甲醇-10 mmol/L醋酸铵溶液(含0.1%甲酸);离子源为ESI;正离子检测方式;利用保留时间、DAD紫外光谱图、一级质谱、二级质谱碎片信息等4方面信息并结合数据库进行定性、定量测定。结果 2批胶囊中均检测出以上3种非法添加成分。结论本方法专属性强、灵敏度高、操作简便,可用作止咳平喘类中成药的常规检测。     

龟甲,鳖甲的炮制研究概况

龟甲是龟科动物乌龟的背甲及腹甲,功能滋阴潜阳、益肾强骨、养血补心;鳖甲是鳖科动物鳖的背甲,功能滋阴潜阳、软坚散结、退热除蒸。传统炮制净制龟甲鳖甲生产周期长、自然腐败时臭气大,且使部分水溶性成分流失,故为全国大部分地区摈弃。本文对近年来国内有关龟甲、鳖甲炮制情况作一综述。     

减肥类保健食品中25种非法添加化学物质的UPLC-DAD快速筛查

目的建立快速检测减肥类保健食品中25种非法添加的化学物质的分析方法。方法样品甲醇提取液的分析采用Waters BEH C18柱(2. 1 mm×100 mm,1. 7μm);流动相为甲醇-乙酸铵(含0. 4%乙酸),梯度洗脱;体积流量0. 3 mL/min;柱温30℃;样品室温度10℃;检测波长200～400 nm。利用保留时间及光谱图做定性分析,对检出成分进行定量测定。结果 17批样品中1批检出比沙可啶,1批检出盐酸西布曲明、盐酸苄基西布曲明及酚酞,3批检出盐酸西布曲明,4批检出酚酞及盐酸西布曲明。25种标准品的线性范围为2. 5～50. 0μg/mL (盐酸芬氟拉明,盐酸利莫那班的线性范围为5. 0～100. 0μg/mL),相关系数均大于0. 99。结论该方法简单便捷,准确,分离效果好,能够达到快速检验减肥类保健食品中非法添加化学成分的目的。     

微量马兜铃酸A检测方法的建立及其应用

目的:建立微量马兜铃酸A的标准检测方法,并对目前合法使用的含马兜铃酸A的药材、易与含马兜铃酸药材相混淆的中药材及其中成药进行检测。方法:采用高效液相色谱法,Alltima C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水-乙酸(68∶32∶1.5)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长390 nm。结果:马兜铃酸A在0.016~0.51μg线性关系良好,r=0.999 3,最低检测限为4 ng,平均加样回收率为101.2%。采用建立的标准限量检测方法,对11批市售细辛药材和15批中成药样品中马兜铃酸A进行分析;11批细辛中马兜铃酸A的质量分数在3.1~26.6μg.g-1,其中只有3批符合《中国药典》2010年版细辛药材项下的限量规定;15批中成药样品中只有1批检出了马兜铃酸A。结论:方法灵敏度高,重复性好,适合于含痕量马兜铃酸的药材及成药中马兜铃酸A的限量检测。     

液质联用检测中成药和保健食品中非法添加的48种抗生素类成分

目的建立了液相色谱-离子阱质谱联用定性测定48种磺胺类、喹诺酮类,四环素类、氯霉素类、大环内酯类和抗真菌类的方法,并用于中成药和保健食品非法添加的检测。方法样品通过甲醇超声振荡提取,其液相色谱分离采用Agilent Eclipse Plus C18柱,流动相A为0.2%甲酸,流动相B为甲醇,梯度洗脱;使用Ion-trap LC/MS分析模式,电喷雾离子源、正离子模式检测。通过与标准谱库中保留时间和多级质谱图的数据进行比对,定性确定样品中添加的抗生素种类。结果 10批中成药中有1批检出氧氟沙星,25批保健食品中有7批检出磺胺甲噁唑。结论本方法解决了5对同分异构体的分离和质谱鉴定问题,并实现同一液质系统内分析多种结构类型的化合物,特别适合中成药和保健食品中违禁抗生素类化学药品的测定。     

LC-MS法检验减肥类产品中非法添加的氟西汀

目的建立液相色谱-质谱联用(LC-MS)法测定减肥类产品中非法添加的氟西汀。方法质谱定性分析采用Shimadzu Shim-pack XR-ODS色谱柱(100 mm×2.0 mm,2.2μm);流动相为甲醇-0.01 mol/L乙酸铵(含0.1%乙酸),梯度洗脱;体积流量0.3 m L/min。液相色谱定量分析采用Inertsil ODS-SP C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为甲醇-乙腈-0.8%三乙胺溶液(磷酸调p H至5.8)(5∶35∶60);检测波长226 nm;体积流量1.0 m L/min。结果在72批样品中,有2批(均为平衡素)非法添加了氟西汀。结论该方法快速、准确、灵敏度高,可用于检验非法添加的氟西汀。     

乌贝颗粒质量控制研究

目的 建立乌贝颗粒的质量控制方法.方法 采用Agillent C18色谱柱(150 mm× 4.6 mm,5μm),以乙腈-水-二乙胺(70∶ 30∶ 0.03)为流动相,柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;蒸发光散射检测器,测定乌贝颗粒中浙贝母的活性成分贝母素甲与贝母素乙;TLC法对方中的浙贝母进行定性鉴别.结果 TLC色谱中可检出浙贝母;贝母素甲进样量在0.878 4～8.784 0μg范围内,贝母素乙进样量在0.832 8～8.3280μg范围内,线性关系良好,平均回收率为97.8％(RSD为0.9％,n=6).结论 此法准确,重复性好,可用于乌贝颗粒质量的控制.     

HPLC—UV检测北细辛及数种中成药中的马兜铃酸A

目的：检查北细辛药材及数种中成药中的马兜铃酸A。方法：采用高效液相色谱法,紫外检测器,以Hypersil C18柱（250mm×4．6mm,5μm）测定马兜铃酸A的含量,流动相为甲醇-水-二甲基甲酰胺-冰醋酸（25：13：1：1,v／v）,流速1．0mL·min^-1,检测波长315nm,柱温35℃。结果：在所选定的色谱条件下,细辛药材及含细辛药材的中成药未检出马兜铃酸A。结论：该检测方法测得马兜铃酸A最低检出量为1．8×10^-4μg,为马兜铃酸A的检测提供了一种灵敏、经济、可行的科学方法。北细辛药材及含细辛药材的中成药中均未检出马兜铃酸A。     

HPLC-ICP-MS联用测定小儿咳喘灵颗粒中Cr(Ⅵ)和Cr(Ⅲ)

目的:采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法(HPLC-ICP-MS)测定小儿咳喘灵颗粒中六价铬和三价铬含量。方法:参照EPA Method 3060A方法碱提六价铬,微波消解提取三价铬,使用Hamilton PRP-X100(250 mm×4.1 mm,10μm)色谱柱,流动相为0.075 mol·L~(-1)硝酸铵溶液,ICP-MS分析同位素~(52)Cr、He模式。结果:六价铬和三价铬在5～100μg·L~(-1)线性关系良好(r0.999),Cr(Ⅵ)加样回收率为82.1%～90.4%;Cr(Ⅲ)加样回收率为94.1%～95.2%。8批样品均检出Cr(Ⅵ),检出值为0.027～0.082μg·g~(-1),平均值为0.051μg·g~(-1),Cr(Ⅲ)检出值为5.775～18.743μg·g~(-1),平均值为10.366μg·g~(-1)。结论:实验所建方法准确可靠,为更客观、合理地评价中成药中铬的安全性提供参考。     

RP-HPLC法测定脑力宝丸中5种成分

目的建立定量测定脑力宝丸(远志、地黄、五味子、地骨皮、菟丝子、茯苓、石菖蒲、川芎、维生素E和维生素B1)中远志口山酮Ⅲ、3,6'二芥子酰基蔗糖和五味子中3种木脂素类成分的RP-HPLC方法。方法测定远志中成分的色谱条件为Agilent HC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.05%磷酸(18∶82)为流动相;体积流量1.0 mL/min;检测波长320 nm;柱温30℃。测定五味子中成分的色谱条件为Agilent HC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-水(75∶25)为流动相;体积流量1.0 mL/min;检测波长254 nm;柱温30℃。结果远志口山酮Ⅲ、3,6'二芥子酰基蔗糖、五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素分别在0.012 5⁰.250μg(r=0.999 4)、0.043 60.250μg(r=0.999 4)、0.043 6⁰.872μg(r=0.999)、0.3480.872μg(r=0.999)、0.348².088μg(r=0.999 4)、0.0642.088μg(r=0.999 4)、0.064⁰.384μg(r=0.999 4)和0.1120.384μg(r=0.999 4)和0.112⁰.672μg(r=0.999 3)范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为98.44%(RSD为1.30%)、98.21%(RSD为0.78%)、99.26%(RSD为0.54%)、98.82%(RSD为0.89%)和98.81%(RSD为1.01%)。结论该方法操作简便,准确度高,重复性好,可作为脑力宝丸的定量方法。     

中药龟甲HPLC指纹图谱研究

目的:建立中药龟甲的HPLC指纹图谱,以达到鉴别龟甲与其混伪品的目的。方法:收集不同产地的龟甲及其混伪品21批,按上下甲进行分类,共42个样品。通过盐酸水解、脱磷、脱钙等前处理,以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)进行衍生化反应,采用C18色谱柱(3. 9 mm×150 mm,3μm),柱温37℃,以乙腈,水,缓冲盐为流动相进行梯度洗脱,流速1. 00 m L/min,检测波长248 nm。采用"中药指纹图谱相似度评价系统"(《中华人民共和国药典》2012版)对正品龟甲上甲与下甲、正品与常见混伪品进行相似度分析。结果:所建立的指纹图谱具有较好的精密度、重现性和稳定性。正品龟甲的上下甲相似度为0. 932～0. 995。正品与混伪品的相似度在0. 90以下者占90. 91%。结论:正品上、下甲的HPLC图谱差异较小,正品与混伪品差异较明显。所建立的HPLC指纹图谱可用于龟甲的质量评价。     

HPLC同时检测参芪五味子片中5种木脂素类成分含量

目的:研究HPLC法同时测定参芪五味子片中五味子醇甲素、五味子醇乙素、五味子酯甲、五味子甲素、五味子丙素(以下简称五味子醇甲、乙素,五味子酯甲,五味子甲、丙素)5种木脂素类成分的方法。方法:采用Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;波长:217 nm;进样量:20μL。测定4批参芪五味子片中五味子醇甲、乙素,五味子酯甲,五味子甲、丙素的含量。结果:方法的精密度、稳定性、重复性和加样回收率较好。4批参芪五味子片中五味子醇甲、乙素,五味子酯甲,五味子甲、丙素的含量分别为8.31～8.63、2.65～3.24、0.49～0.54、0.78～0.92和0.56～0.67 mg/片。结论:该方法可为参芪五味子片的质量控制提供参考。     

HPLC-ELSD法同时测定黄芪及金芪降糖片中5种皂苷类成分的含量

目的:建立HPLC-ELSD法同时测定黄芪及金芪降糖片中黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、异黄芪皂苷Ⅱ5种成分的含量。方法:色谱柱为Grace Apollo C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱;体积流量:1.0 m L/min。结果:5种皂苷类成分线性关系良好,加样回收率在95%~105%。运用该方法测定了12批黄芪药材和10批金芪降糖片中5种皂苷类成分的含量。结论:该实验建立的方法专属性强,灵敏度高,简便易行,可用于同时测定黄芪及金芪降糖片中5种皂苷类成分的含量。     

UHPLC-QTRAP-MS结合化学计量学分析半枝莲中多指标成分

该文拟建立超高效液相色谱-三重四极杆-线性离子阱质谱(UHPLC-QTRAP-MS)方法同时测定半枝莲多指标成分的含量,为寻找半枝莲差异性质量控制成分提供参考.采用Thermo AcclaimTM RSLC 120 C18色谱柱(3.0 mm× 100 mm,2.2μm),柱温40℃,进样量2μL,流动相A为0.1％甲...     

金雀花中黄酮苷类组分鉴定及2种成分测定

目的鉴定金雀花中黄酮苷类组分,并测定芦丁和山柰酚-3-O-芸香糖苷的含有量。方法金雀花75%乙醇提取物的HPLC-ESI-MS鉴定采用Waters C18色谱柱(250 mm×3.0 mm,5μm);流动相乙腈-水(含0.2%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 m L/min;柱温25℃。2种成分含有量的HPLC测定采用Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-水(含0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长254 nm;柱温25℃。结果金雀花中有9种主要黄酮苷类组分,其中芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷分别在8.83~176.60、4.86~97.20μg/m L范围内线性关系良好(r=0.999 0),平均加样回收率分别为102.35%、100.79%,RSD分别为2.52%、1.27%。结论该方法稳定可靠,可为金雀花的开发利用提供重要科学依据。