胶质瘤干细胞表面标志物的研究进展

正胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)的存在使得胶质瘤,尤其是恶性胶质瘤,临床治疗变得困难,手术、放疗及化疗等一系列传统治疗正在面临挑战。因此,寻求优于现有疗法的有效安全的分子靶向治疗是必要的。GSCs表面标志物相对于其它类型标志物更有优势是由于前者暴露在细胞表面而更容易与抗胶质瘤分子结合,从而获得特异疗效,因此表面标志物最适于作为治疗靶点,为GSCs的鉴定、治疗提供便利。     

脑胶质瘤干细胞的研究进展及应用前景

脑胶质瘤干细胞（BGSCs）是脑胶质瘤的“种子”细胞，具有自我更新、增殖和多向分化潜能等干细胞属性。BGSCs很可能为神经干细胞（NSCs）转化形成，或者是初步分化的神经祖细胞重新获得了干细胞特性转化而来。BGSCs的发现和成功分离是近来干细胞和胶质瘤起源研究的重大进展之一，对正确认识和理解脑胶质瘤的发生、发展，指导制定更有针对性的治疗措施等具有十分重要的意义。本文就BGSCs的研究进展及应用前景进行综述。     

TMZ对胶质瘤U251细胞及其干细胞TNF-α影响的体内研究

目的利用胶质瘤细胞及其干细胞制作裸鼠脑内种植瘤模型,动物水平研究替莫唑胺对胶质瘤细胞及其干细胞裸鼠脑内种植瘤肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法免疫磁珠法分选CDl33+干细胞,脑立体定向制作裸鼠脑内种植瘤模型,不同浓度替莫唑胺干预,观察裸鼠生长行为学变化、肿瘤的病理学特征,荧光实时定量逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测TNF-α表达。结果肿瘤组织的病理学观察发现干细胞较U251细胞具有更高的侵袭性。RT-PCR检测发现,干细胞中TNF-αmRNA表达量显著高于U251细胞(P0.01)。替莫唑胺(TMZ)对U251细胞及其干细胞TNF-αmRNA的表达产生抑制作用。60μmol/L TMZ干预时,干细胞TNF-αmRNA表达量显著低于U251细胞(P0.01)。结论胶质瘤干细胞较U251细胞具有更强的化疗耐药性,这可能是胶质瘤化疗耐药的机制。     

干细胞对脑胶质瘤定向迁移的研究进展

基因疗法是治疗胶质瘤最有希望的疗法之一,但递送问题一直妨碍着新基因治疗策略的发展.干细胞因具有增殖及向胶质瘤迁移的性质,尤其适合作为基因治疗的递送载体细胞,干细胞的"病灶定向迁移一增殖"特性组合,展现出干细胞在替代治疗之外的又一诱人应用前景.至今为止,已经就神经干细胞、骨髓基质干细胞以及来源于胚胎干细胞的分化细胞等对脑胶质瘤的定向迁移进行了广泛的研究.干细胞定向迁移、追踪侵润肿瘤细胞的机制与趋化因子介导有关.     

脑胶质瘤干细胞与神经干细胞相关性的研究进展

脑胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSC)具有与神经干细胞(neural stem cells,NSC)相似的自我更新和多向分化的能力,但两者之间也存在许多差异。本文就NSC和GSC在生物特性、基因表达及信号通路之间的联系和区别进行探讨,为进一步了解GSC的生物学特性提供新的方向,并为靶向治疗脑胶质瘤打开新的局面。     

脑胶质瘤的瘤内化疗

为提高恶性胶质瘤病人的生存率,人们尝试进行肿瘤内化疗,使大剂量抗肿瘤药物直接进入肿瘤组织内。从理论上讲,这种方式避开了血脑屏障,并能使化疗药物在脑内维持较高的浓度。各种化疗药物都曾试用于不同的给药途径,包括肿瘤内直接注射到计算机控制的植入化疗泵及可降解的生物多聚载体。本文从实验和临床方面对脑胶质瘤内化学药物治疗的方式及效果进行综述。     

恶性脑胶质瘤个体化化疗的研究进展

化疗是胶质瘤综合治疗的重要手段之一,但传统的化疗方案疗效不甚理想,原因主要是胶质瘤本身存在耐药性且有较强的个体化疗敏感性差异,故恶性脑胶质瘤需要个体化化疗。随着神经分子病理研究的发展,各种基因和蛋白水平上的个体化化疗成为研究的热点。本文对各种作用机制比较明确和以及仍处于研究阶段的恶性脑胶质瘤个体化疗作一综述。     

儿童脑胶质瘤的化疗进展

胶质瘤是儿童中枢神经系统最常见的肿瘤,侵袭性强,治疗难度大,预后差,复发率高.传统的手术治疗不仅并发症较多,且可能给病儿造成心理和认知障碍,放疗对小儿正在发育的神经系统及骨髓造血系统等有难以预测的影响.因此,化疗逐渐成为治疗儿童胶质瘤的重要手段.本文就儿童胶质瘤的特点和化疗方案进行论述,总结不同类型儿童胶质瘤的推荐化疗方案,并对所采纳研究的循证医学证据级别作了说明;安全性是儿童化疗中需着重解决的问题,延迟放疗、低剂量多次化疗和复发重复化疗等方案均证明对儿童是安全、有效的;化疗耐药机制方面的探索将进一步提高疗效,最终达到儿童胶质瘤的治愈.     

胶质瘤干细胞对替莫唑胺敏感性的研究

目的 探讨胶质瘤干细胞(GSC)对替莫唑胺(TMZ)的敏感性及耐药机制.方法 新鲜多形性胶质母细胞瘤(GBM)标本培养后获得GSC.免疫荧光技术榆测未分化GSC的CD133及分化生长GSC的GFAP的表达,MTS法检测对替莫唑胺的敏感性,流式细胞技术对CD133阳性细胞的比例进行定量,荧光标记的甲基化特异性PCR分析MGMT启动子区域的甲基化状态,Western blot检测抑癌基因PTEN的表达.结果 (1)5例GBM标本中成功获得GSC,符合肿瘤下细胞定义.(2)5个GSC细胞株多数对TMZ不敏感.其中,T509的半数抑制浓度(IC50)为22.3 μmol/L(敏感),T411的IC50为286.3 μmol/L(中度敏感),其余3个细胞株T402,T405及T509的IC50皆大于1000μmol/L(不敏感).(3)CD133阳性细胞比例大于10%的GSC细胞株对TMZ不敏感.(4)MGMT启动子区域呈去甲基化状态的GSC对TMZ不敏感或仅为中度敏感.(5)5个GSC细胞株中,PTEN表达水平差异大,与GSC对TMZ的敏感性无明显关联.结论 GSC对TMZ普遍耐药,与MGMT启动子区域甲基化状态及CD133阳性细胞有关,而与PTEN蛋白表达水平无明显关联.     

不同化疗药物及方案对于胶质瘤治疗的影响

胶质瘤是颅内最常见的神经上皮肿瘤,也是颅内最常见的恶性肿瘤,严格意义上来说,经过治疗的胶质瘤仍有复发或者再发的可能,目前在没有对胶质瘤的发生、发展机制完全阐述清楚的情况下,还不能对胶质瘤达到根治的程度。而目前对于胶质瘤最常用的治疗方法是手术切除辅以放疗、化疗及其他综合治疗,目前手术原则是在最大保留功能的基础上最大程度切除肿瘤,并且有些患者的胶质瘤呈弥漫性或者极大范围生长,做不到手术切除,仅能为进一步治疗明确病理情况,近些年越来越热门的分子病理也给后续治疗带来了极大的便利,让我们能够针对不同的胶质瘤患者选择不同的治疗方案,而在手术、放射治疗等方案外的化学药物治疗能够明显的延长患者接受治疗后的生存期。本文就胶质瘤患者化疗方案进行探讨,阐述化疗对于胶质瘤患者的影响。     

胶质瘤干细胞化疗耐受性的研究进展

近年的研究业已证实胶质瘤干细胞(gliomastemcells,GSCs)的存在,并对其生物学特性进行了较为深入的研究,化疗耐受性是其重要牛物学特性之一.     

肿瘤干细胞致敏的树突状细胞对脑胶质瘤细胞免疫的影响

目的 研究肿瘤干细胞(BTSCs)致敏的树突状细胞(DCs)疫苗对颅内荷瘤小鼠的治疗作用.方法 无血清培养基中加入表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子,将C6胶质瘤细胞诱导成胶质瘤干细胞,以此致敏大鼠骨髓来源的树突状细胞制备疫苗;立体定向建立大鼠颅内C6胶质瘤模型,分为A、B、C、D四组.每组分别经尾静脉注射1×107BTSCs致敏的DCs(DCs-BTSCs)、1×107 C6胶质瘤细胞致敏的DCs(DCs-C6)、1×107DCs及PBS,Kaplan-Meier法对大鼠生存情况进行分析,大鼠脑组织标本行HE染色及免疫组化分析.结果 胶质瘤干细胞CD133+及nestin染色阳性;DCs具有典型的树突状结构,特异性标志OX62+表达阳性;生存时间A组较其他组明显延长,Log-rank检验差异有统计学意义(P＜0.05);A组HE染色炎性细胞浸润最多,免疫组化可见较多的CD8+T淋巴细胞.结论 肿瘤干细胞致敏的树突状细胞疫苗能明显提高机体对胶质瘤的免疫力,其作用优于胶质瘤细胞致敏的树突状细胞疫苗,为树突状细胞疫苗的临床应用提供了新的依据.

Abstract：

Objective To investigate the effect of dendritic cells pulsed with brain tumor stem cells which are used to treat on intracranial glioma.MethodWe obtained murine brain tumor stem cells by growing C6 cells in epidermal growth factor/basic fibroblast growth factor without serum.Dendritic cells isolated from rat bone marrow were pulsed with BTSCs.Rat brain glioma models were established by stereotactic technique.107 DCs pulsed with BTSCs and C6 were injected through tail vein in group A and group B respectively.The same number of DCs and the same volume PBS were applied to group C and group D.The survival time of rats was analyzed by Log- rank survival analysis.Tumor samples were examinedwithHE staining and immunohistochemistry.Methods BTSCs expressedCD133 + and nestin.DCs appeared typical long dentrite in morphology and expressed OX62+ markers.The survival analysis showed group A was statistically significant in constrast to the other goups (P<0.05).The tumors in group A have the most inflammation and CD8 + T lymphocytes.Concluion DCs loading with BTSCs lysates can provide a higher level of immunity protect against gliomas than those loading with C6 cells,which provide a new method in the immuntherapy of brain glioma.     

miR-155在胶质瘤干细胞样细胞的表达及临床意义

目的研究miR-155在人胶质瘤干细胞样细胞(glioblastoma stem-like cells,GSCs)与正常神经干细胞(neural stem cells,NSCs),及不同病理级别脑胶质瘤组织的表达差异,其表达水平与胶质瘤恶性程度及预后的关系。方法采用神经球(neurosphere)培养法体外分离扩增人GSCs与NSCs,并进行免疫荧光及移植瘤实验鉴定。用q RT-PCR的方法检测miR-155在GSCs、NSCs及不同级别胶质瘤和正常脑组织的表达水平。结合患者的预后,进行Kaplan-Meier生存曲线分析。结果GSCs的miR-155表达水平明显高于NSCs(P 0. 05);随着胶质瘤级别的增高,miR-155的表达水平也明显增高,WHOⅢ级、Ⅳ级恶性胶质瘤的miR-155表达水平明显高于正常脑组织(均P 0. 05)。miR-155高表达与恶性胶质瘤的不良预后密切相关。结论 miR-155在GSCs及高级别胶质瘤组织中的表达水平增高,其表达水平可作为判定胶质瘤预后的标志物。     

RMP-7对提高脑胶质瘤化疗疗效的研究

九十年代以来,国外许多学者认为高渗性开放血脑屏障(BBB)辅助化疗的方法,使得非肿瘤脑组织内化疗药物浓度显著提高,造成了神经毒性及加重脑水肿,对治疗产生负面影响;于是着力开发并研制出了能选择性开放血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB),而保持血脑屏障完整性的药物RMP-7。本文就近年来国外对RMP-7的研究及应用作一综述。     

白藜芦醇对脑胶质瘤U87细胞及干细胞凋亡诱导作用

目的比较研究白黎芦醇(Res)对人脑胶质瘤U87细胞及其胶质瘤干细胞(GSC)的作用。方法膜联蛋白Ⅴ(AnnexinⅤ)和碘化丙啶(PI)染色法测定细胞凋亡;CD133标记、CD133与AnnexinⅤ/PI共标记检测GSC相对含量及GSC的凋亡;实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测mdr1基因mRNA表达,流式细胞术(FCM)测定P-糖蛋白(P-gp)的表达;集落形成法(CFU)检测细胞的自我更新和增殖能力。结果不同浓度的Res显著诱导U87细胞凋亡,抑制U87细胞集落的形成。40～160μmol/L Res作用后U87细胞群体中CD133+GSC相对含量显著增高、GSC凋亡细胞数量增加,但GSC对Res的敏感性低于U87群体细胞。Res诱导后U87细胞群体中高表达mdr1/P-gp的细胞显著增高,并与GSC含量的增高基本相一致。结论白黎芦醇可诱导脑恶性胶质瘤U87群体细胞及其干细胞凋亡。     

脑胶质瘤化疗敏感性的体外实验研究

目的 探讨体外培养的脑胶质瘤细胞对化疗药物的敏感性,为临床有效治疗胶质瘤提供实验依据.方法 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测26例原代培养胶质瘤细胞在体外对顺铂(DDP)、环磷酰胺(CTX)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)化疗药物的敏感性.结果 19例胶质瘤细胞对单一化疗药物的敏感性从高到低依次为DDP>CFX>5-FU>VCR.患者年龄与药物敏感性均无明显相关性;除DDP外,病理分级与其他药物敏感性无明显相关性.结论 比色法是一种快速、有效检测体外药物敏感性的方法.体外药敏试验对排除无效药物、筛选敏感药物进行个体化的化疗,提高临床化疗效果,具有重要意义.     

Bcl-2在人脑胶质瘤干细胞样细胞中的表达及病理相关性

目的 检测B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)基因在胶质瘤干细胞样细胞(GSLCs)中的表达水平,并分析Bcl-2与来源胶质瘤恶性程度的相关性.方法 从8例临床标本中培养出GSLCs并鉴定后,检测Bcl-2在GSLCs以及相应原代胶质瘤细胞中的mRNA和蛋白水平并比较分析;此外对GSLCs中Bcl-2水平及来源胶质瘤恶性程度之间的关系进行分析.结果 从8例胶质瘤标本中培养出GSLCs并通过鉴定.实时逆转录酶-聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验检测显示Bcl-2在GSLCs中的mRNA和蛋白水平均显著高于对应的原代胶质瘤细胞,配对t检验结果分别为P＜0.001和P＜0.005,有统计学意义.此外,Bcl-2的在Ⅳ级脑胶质瘤来源的GSCLs中的表达水平明显高于Ⅲ级脑胶质瘤来源的GSCLs.结论 首次检测并发现GSCLs中Bcl-2的表达水平高于相应的原代胶质瘤细胞,此结果与胶质瘤干细胞(GSCs)特点相符,这可能是GSCs产生治疗耐受性并逃避凋亡的原因之一.以Bcl-2为靶点的抗肿瘤治疗须能诱导GSCs凋亡,才有望治愈胶质瘤.     

PIGN表达水平对脑胶质瘤治疗的临床意义

目的 探究PIGN在脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法 运用生物信息学方法分析中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)中693例脑胶质瘤患者的相关基因信息及临床资料,运用Kaplan-Meier分析PIGN表达对脑胶质瘤患者生存期的影响;采用多因素Cox风险比例回归模型分析PIGN表达对脑胶质瘤患者的预后影响。结果 CGGA数据库中,PIGN广泛存在于各级别与各病理分型的脑胶质瘤中,且其表达趋势与WHO分级及病理分型无关; PIGN低表达组的脑胶质瘤患者总生存期长于高表达组(P=0.003 7);多因素Cox回归分析表明,PIGN的表达水平,年龄,IDH突变以及1p19q的联合缺失是评估脑胶质瘤患者生存的独立影响因素(HR分别为1.337,1.332,2.225,1.761; P值分别为0.003,0.008,<0.001,<0.001); PIGN低表达组的化疗生存期显著优于高表达组(P=0.034 9),而PIGN表达对放疗患者的生存期无影响(P=0.084 4)。PIGN表达与MAD1表达呈显著负相关(相关系数=0.775,P <0.001)。结论 PIGN表达水平可...     

骨髓基质干细胞及其在脑胶质瘤基因治疗中的应用

骨髓基质干细胞(BMSCs)是近来神经科学领域研究的热点之一。BMSCs来源丰富,转染外源基因后能在体内、外稳定表达,可分泌多种神经营养因子,具有很低的免疫排斥反应,是基因治疗的良好载体,但仍存在一些亟待明确的问题。现主要综述BMSCs部分生物学特性及其作为基因载体治疗胶质瘤的研究现状。