鼻咽癌中p53例基因突变的研究

目的：探讨鼻咽癌中ｐ５３基因突变情况。方法：用非同闰素不对称ＰＣＲ－单链构象多态性技术（ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ），分析了鼻咽癌活检组织、细胞株和裸鼠移植瘤中Ｐ５３基因第５、６、７和８外显子（ｅｘｏｎ）的基因突变，并对其中ｅｘｏｎ８突变的ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１进行ＤＮＡ测序。结果：在２０例鼻咽癌活检组织中没有发现突变；但在鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２、ＳＵＮＥ－１和瘤株ＳＵＮＴ－１中存在第８外显子     

鼻咽癌裸鼠移植瘤及其相应体外细胞株的建立与特性研究

从新鲜鼻咽活检组织建立了一株鼻咽癌（ＮＰＣ）裸鼠移植瘤株（ＳＵＮＴ一１）及其相应的体外传代上皮细胞株（ＳＵＮＥ一１）。证实ＳＵＮＴ一１和ＳＵＮＥ一１为典型低分化鳞癌细胞，染色体分析二者均为人类肿瘤核型。以ＰＣＲ技术检测ＳＵＮＴ一１的Ｐ１～Ｐ１８和ＳＵＮＥ一１直到第６１代培养的细胞中的ＥＢＶ一ＤＮＡ均为阳性。用原位溶细胞电泳技术（Ｉｎｓｉｔｕｌｙｉｎｇｇｅｌ）ＥＢＶ探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析，亦显示相应的ＥＢＶＤＮＡ区带。ＥＢＶ基因组为线性特征，且在ＳＵＮＴ一１Ｐ１８和ＳＵＮＥ一１Ｐ５３细胞的电镜检查中均发现直径为９６一１００ｎｍ的ＥＢＶ样颗粒。用不对称ＰＣＲ一ＳＳＣＰ检测，显示有Ｐ５３第８外显子突变。带ＥＢＶ基因的ＮＰＣ瘤株及相应的上皮细胞株建立，为从分子水平、细胞水平上研究肿瘤的发生发展过程，以及治疗等方面提供了丰富的和更切合人体肿瘤的材料和模型。     

鼻咽癌中EB病毒基因组状态研究

用多聚酶链反应扩增Ｅｐｓｔｉｎ－Ｂａｒｒ病毒的Ｂａｍ ＨＩ Ｗ片段，在２０例低分化鼻咽癌活检组织中，检测出ＥＢＶ ＤＮＡ片段；裸鼠低分化ＮＰＣ移植瘤株ＳＵＮＴ－１从第３４代持续存在ＥＢＶ ＤＮＡ，其相应体外细胞株ＳＵＮＥ－１第１至６２代仍阳性。     

人鼻咽癌裸鼠移植瘤SUNT─1及其体外培养上皮细胞株SUNE─1细胞遗传学研究

对我所建成的鼻咽低分化癌的ＥＢ病毒核抗原阳性（ＥＢＮＡ）的裸鼠移植瘤ＳＵＮＴ－１及其体外培养上皮细胞株ＳＵＮＥ－１，分别于各代进行细胞遗传学分析，结果显示ＳＵＮＴ－１和ＳＵＮＥ－１癌细胞染色体的数目和结构均有相似的变化；染色体数呈非整倍体改变，并以亚四倍体为主，染色体畸变则以易位、重排、缺乏和等臂染色体为多见并形成较恒定的标记染色体Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ５和Ｍ６，涉及３号染色体改变较多。提示进一步研究克隆ＳＵＮＦ－１和ＳＵＮＴ－１亚株的细胞遗传学和ＥＢ病毒基因存在变化，将为深入探讨鼻咽癌病因提供更多启示。     

鼻咽癌细胞株裸鼠移植瘤中癌细胞的凋亡

观察鼻咽癌细胞株ＣＮＥ－１和ＣＮＥ－２裸鼠移植瘤组织中肿瘤细胞凋亡的形态学特征,并探讨ｐ５３,ｂｃｌ－２和ｂａｘ在瘤细胞凋亡中所起的作用。方法：ＣＮＥ－１和ＣＮＥ－２鼻咽癌细胞株接种于裸鼠并在裸鼠体内连续传３代。     

中华眼镜蛇毒对人鼻咽癌等抑瘤作用的实验研究

目的：为了探讨中华眼镜蛇毒（ＮＮＡＶ）对鼻咽癌（ＮＰＣ）等抑瘤作用。方法：用ＭＴＴ法检测ＮＮＡＶ对人高、低分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ－１，ＣＮＥ－２）、慢性红白细胞血病（Ｋ５６２）和鼠肝癌（Ｈｅｐ－２）细胞株的体外细胞毒作用；同时在裸鼠异体移植性人ＣＮＥ－２肿瘤模型观察ＮＮＡＶ对ＮＰＣ的抑瘤作用。结果：ＮＮＡＶ对４种登攀上培养的肿瘤细胞均有明显细胞毒效应，ＮＮＡＶ对述细胞的作用２４ｈＩＣ５０分别为７     

原发性肝细胞癌组织中乙肝病毒整合与p53基因突变关系研究

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交方法检测１５例原发性肝细胞癌及癌旁组织乙肝病毒（ＨＢＶ）存在状态，采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（Ｐｏｌｙ－ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）银染技术研究其ｐ５３基因突变。结果癌组织中１３例（８６．７％）有ＨＢＶＤＮＡ整合，同时３例伴游离ＨＢＶＤＮＡ；癌旁４例（２６．７％）有ＨＢＶＤＮＡ整合，而游离的ＨＢＶＤＮＡ却有６例。癌组织中ｐ５３基因变异８例（５３．３％），１例位于第５外显子，各有２例位于第６、第７外显子，３例位于第８外显子，癌旁组织未见ｐ５３基因异常，ｐ５３基因异常的癌组织中均有ＨＢＶＤＮＡ整合。研究结果表明，ＨＢＶＤＮＡ整合与ｐ５３基因突变密切相关，ＨＢＶＤＮＡ可能通过整合基因组后导致抑癌基因突变失去抑癌作用而引发肝癌。     

人乳头瘤病毒感染和p53基因突变与宫颈癌的关系

目的：探讨人乳头瘤病毒１６ 和１８ 型及抑癌基因ｐ５３ 突变对宫颈的致癌作用以及 Ｈ Ｐ Ｖ 感染与ｐ５３ 基因突变的相关性。方法：采用聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 技术和限制性酶切片段多态性分析（ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ） 技术对３４ 例原发性宫颈癌组织及３０ 例正常宫颈组织 Ｈ Ｐ Ｖ１６ ,１８ 型 Ｄ Ｎ Ａ 及抑癌基因ｐ５３ 的突变进行了检测。结果： Ｈ Ｐ Ｖ１６ ,１８ Ｄ Ｎ Ａ 在宫颈癌的总阳性率为６４７ ％ （２２／３４） ,正常宫颈组织只有６７ ％ 阳性,８例宫颈癌组织出现ｐ５３ 基因第６ 外显子突变,其中２ 例为 Ｈ Ｐ Ｖ１６ Ｄ Ｎ Ａ 阳性、１ 例 Ｈ Ｐ Ｖ１８ Ｄ Ｎ Ａ 阳性。结论：宫颈癌的发病与 Ｈ Ｐ Ｖ 感染及ｐ５３ 基因突变有关,宫颈癌组织中ｐ５３ 基因突变与 Ｈ Ｐ Ｖ 感染无关。     

大肠癌p53抑癌基因突变与组织类型,Dukes‘分期的关系

用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３０例大肠癌组织ｐ５３基因突变状况进行了检测。结果表明：３０例大肠癌ｐ５３基因的突变率为２０％（６／３０），其中１例在第４外显子，５例在第５外显子，第２、３外显子未检出突变。高分化和中等分化肠癌ｐ５３基因突变率均为１／８（１２．５％），低分化为３／１０（３０．０％），未分化为１／４（２５．０％）；在Ｄｕｋｅｓ分期中的突变率分别为：Ｂ２期为１／１０（１０．０％），Ｃ１期为２／１２（１６．７％），Ｄ期为３／８（３７．５％）。结果提示ｐ５３基因突变与Ｄｕｃｋｅｓ分期有关，且肠癌的ｐ５３基因突变很少发生在第２、３外显子     

乳腺癌p53基因突变规律及其预后意义

目的 探讨ｐ５３基因突变在乳腺癌发生发展中的演变规律及其与预后的关系。方法 应用ＰＣＲ－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析方法检测５５例原发性乳腺癌患者ｐ５３基因５～８外显子的突变情况。结果 ｐ５３基因突变发生的频率为３６．４％（２０／５５）,Ｉ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌中ｐ５３基因突变阳性率分别为４７．２％（１７／３６）和１５．８％（３／１９）,而且突变多发生在５～６外显子。突变阳性患者其无病生