细胞周期蛋白在精子发生过程中的作用

精子发生是一个复杂而又精确的生殖细胞分化的过程,它经历了精原细胞有丝分裂、精母细胞减数分裂和精子形成3个阶段。这一过程受许多因素的调控,其中细胞周期蛋白的调节起着决定性作用。细胞周期蛋白通过与相应的细胞周期蛋白依赖激酶结合形成具有蛋白激酶活性的异源二聚体复合物,磷酸化多种蛋白,推动细胞周期各时相的有序进行。近年来研究发现,细胞周期蛋白A、B、D、E在精子发生的调控中扮演着重要角色,本文综述了这4种细胞周期蛋白在调控精子发生中的作用。     

细胞周期素E及细胞周期素依赖性激酶2在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨胃癌组织中细胞周期素E(cyclinE)及细胞周期素依赖性激酶2(CDK     

胃癌组织中细胞周期蛋白D1和细胞周期蛋白质依赖激酶6的表达与预后的关系

目的检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白质依赖激酶6(CDK6)在胃癌组织中的表达情况,分析其表达与胃癌的临床病理因素和预后之间的关系。方法用Western blot 法测定48例胃癌组织及其邻近的正常胃黏膜中cyclinD1和CDK6的表达量。结果 Cyclin D1在 58％的胃癌组织中呈异常高表达,且其表达与胃癌的浸润深度、淋巴转移和TNM分期相关。CDK6 的表达水平在69％的胃癌组织中异常升高,并与组织学分类、淋巴转移和TNM分期相关。未发现 cyclin D1和CDK6在胃癌组织中的表达存在线性相关关系。包括cyclin D1和CDK6过表达在内的多个因素与胃癌患者的5年生存率相关,但只有TNM分期和CDK6是患者预后的独立影响因素。结论 Cyclin D1和CDK6的异常高表达有可能在胃癌的发生、发展过程中发挥重要作用。     

去除雄激素对前列腺癌细胞周期调节蛋白表达的影响

目的研究去除雄激素对前列腺癌细胞周期调节蛋白表达的影响。方法在人前列腺癌细胞株LNCaP和PC-3中，先加1×10     

细胞周期蛋白依赖激酶4/6抑制剂在膀胱癌治疗中的应用潜能

细胞周期进展异常是膀胱癌的重要特征之一。高选择性的细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)4/6抑制剂在膀胱癌中有潜在的应用前景,因为89%的膀胱癌患者存在细胞周期进程中关键基因的突变,预临床数据证实了它们作为单一或联合治疗策略的有效性。在这篇文章中,我们讨论了在膀胱癌中靶向CDK4/6的生物学原理,回顾了现有的临床证据,并进一步讨论了优化其临床应用所面临的挑战。     

鞘内注射Roscovitine对小鼠骨癌痛行为学的影响

目的 探讨鞘内给予细胞周期依赖性激酶5(cyclin-dependent kinases,Cdk5)特异性拮抗剂Roscovitine对小鼠骨癌痛行为学的影响.方法 24只C3H/Hej 小鼠采用随机数字表法随机分为3组,S组(假手术后14 d+溶媒)、C组(接种后14d+溶媒)、R组(接种后14 d+Roscovitine),每组8只.C组和R组将含2×105个纤维肉瘤NCTC 2472细胞的最小必需培养基(α-MEM)20μl注射到小鼠右侧股骨远端骨髓腔内,制作骨癌痛模型.S组只注入不含肿瘤细胞的α-MEM.术后14 d,R组小鼠鞘内注射含有20μg Roscovitine的二甲基亚砜(DMSO)5μl,C组及S组小鼠鞘内注DMSO 5 μl.观察给药前及给药后1、6、24、48、72 h检测小鼠痛行为学的变化:机械缩足阈值(paw uithdrawal mechanical threshold,PMWT)和热缩足潜伏期(Paw withdrawal thermal latency,PWTL).结果 各组术前基础机械缩足阈值及热缩足潜伏期比较差异无统计学意义(P＞0.05).接种后7 d,C组PMWT(1.08±0.24)g,与S组(1.85±0.28)g相比明显降低(P＜0.05);接种后10 d,C组PTWL(12.7±1.4)s较S组(18.6±2.1)s明显缩短(P＜0.05),C组小鼠的痛行为学随时间逐渐加重,与S组小鼠比较差异有统计学意义(P＜0.05);与C组及给药前基础值相比,鞘内注射Roscovitine 20μg后6 h PMWT(0.70±0.19)g显著增加(P＜0.05),PTWL(14.16±1.07)s显著延长(P＜0.05),并随时间逐渐增加,12 h达最大值,后逐渐降低,72 h降低到C组水平.结论 鞘内注射Roscovitine可有效缓解小鼠骨癌痛.     

三氧化二砷对肝癌细胞系BEL—7402的影响

目的 观察不同浓度的三氧化二砷作用不同时间对肝癌细胞BEL－7402的影响及其作用机理。方法 应用不同浓度的三氧化二砷作用于肝癌细胞后，观察肝癌细胞的存活、形态学改变，并通过流式细胞仪和DNA梯状电泳观察细胞凋亡的情况。结果 不同浓度的三氧化二砷作用于肝癌细胞有明显的时间和剂量依赖性，发生作用后细胞生长明显受抑制；有明显的凋亡特征性改变：细胞膜完整、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成；流式细胞仪分析显示，肝癌细胞存在G2／M期阻滞，在G1峰前出现明显的凋亡峰；琼脂糖凝胶电泳出现明显的凋亡特征性梯状条带。结论 三氧化二砷可明显抑制肝癌细胞的生长，其机理主要是诱导肝癌细胞凋亡。     

不同营养支持途径对烧伤大鼠肠粘膜上皮细胞周期的影响

目的：探讨肠道喂养及静脉营养对烧伤早期肠粘膜上皮细胞周期的影响。方法：66只烧伤大鼠随机分为肠道喂养组（EF组）及静脉营养组（PN组），分别采用灌喂和颈外静脉输入方法给予等氮、等热卡的营养液。每组设伤后6、12、24、48、72h5个观察时相点，每时相点6只大鼠，并设正常对照（6只）。采用流式细胞技术进行空、回肠粘膜上皮细胞周期分析，以Western blot法检测肠粘膜细胞周期蛋白D1、E及细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）2、4的表达。结果：（1）肠粘膜上皮GO／G1期细胞百分比的变化：在空肠粘膜，伤后72h时EF组明显低于PN组（P＜0．05）；在回肠粘膜，6、12、48、72h时EF组与PN组比较，差异有显性意义（P＜0．05）；（2）伤后48．72h时EF组S期细胞百分比均显高于PN组（P＜0．05－0．01）；（3）肠粘膜细胞周期蛋白D1表达的变化：与对照值比较，EF组在伤后24h及PN组在伤后48h明显增高（P＜0．05），72h时EF组显高于PN组（P＜0．05）；（4）EF组肠粘膜细胞周期蛋白E的表达在伤后72h显高于对照值和PN组（P＜0．05）；（5）PN、EF组肠粘膜CDK2的表达与对照值比较以及PN、EF两组间比较，差异均无显性意义（P＞0．05），EF组CDK4的表达在72h明显增高（P＜0．05）。结论：烧伤后早期肠道喂养能加速肠粘膜上皮细胞周期的进程以及受损肠粘膜的修复与更新。细胞周期蛋白及CDK在其中起重要作用。     

鞘内注射细胞周期素依赖性激酶-5抑制剂Roscovitine对慢性背根节压迫大鼠痛行为学的影响

目的 探讨鞘内注射细胞周期素依赖性激酶-5(Cdk5)抑制剂Roscovitine对慢性背根节压迫(CCD)大鼠痛行为学的影响.方法 雄性SD大鼠24只随机分为4组,每组6只:假手术组+50%二甲基亚砜(S组);CCD+50%二甲基哑砜(C组):CCD+Roscovitine 50μg(R组);CCD0组(C0组)C0组不注入任何药物,只作为对照.各组大鼠在CCD或假手术后第7天分别鞘内注射容积为10μl的50%DMSO或Roscovitine 50μg,分别观察给药后的1、4、8 h大鼠机械缩爪阂值(paw withdrawal mechani-cal threshold,PWMT)和热缩爪潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL).结果 与基础值相比,除S组外,各组大鼠从术后开始PWMT和PWTL均明显降低(P＜0.05),R组给药后与C组相比PWMT在各时间点无明显改变,PWTL相比明显增加,且保持在较高水平(P＜0.05).结论 脊髓背角Cdk5参与神经病理性疼痛的信号转导过程.     

Cyclin-CDKs-CKIs调控系统与大肠癌关系的研究进展

越来越多的研究表明，恶性肿瘤是一类细胞周期性疾病，细胞分裂周期是在精确的调控机制下进行的，包含于这一过程中的相关蛋白和基因的改变都会导致肿瘤的发生。细胞周期素（Cyclin）-细胞周期素依赖激酶（CDKs）-细胞周期素依赖激酶抑制蛋白（CKIs）为细胞分裂周期的主要调节系统。近年来的研究表明它们和大肠癌的发生发展有密切联系。     

细胞分裂周期蛋白42mRNA和蛋白在食管鳞癌中的表达及其病理生物学意义

目的 探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理参数间的关系.方法 应用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹和免疫组织化学方法,从mRNA和蛋白两个水平检测ESCC中Cdc42的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果 22对新鲜ESCC与癌旁正常组织中,Cdc42 mRNA在ESCC中的表达量(0.21±0.14)显著高于其在癌旁正常组织中(0.16±0.12)的表达(P＜0.05);Cdc42蛋白在ESCC中的表达量(0.83±0.35)高于其在癌旁正常组织中(0.75±0.24)的表达;在175对ESCC中,Cdc42蛋白的阳性表达率为73.7%(129/175),高于其在配对的癌旁正常组织中的表达62.9%(110/175,P＜0.05).此外,Cdc42的表达与ESCC患者的年龄、淋巴结转移及分化程度明显相关(P＜0.05).结论 Cdc42可能参与ESCC发生及转移的过程.

Abstract：

Objective To explore the expression of cell division cycle 42 (Cdc42) in human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) and investigate the association between Cdc42 and clinicopathological parameters. Methods The expression levels of Cdc42 mRNA and protein in ESCC and corresponding adjacent normal tissues were detected by real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction ( qRT-PCR), Western blotting and immunohistochemistry, respectively. The correlations between Cdc42 expression and clinicopathological parameters were analyzed. Results The expression of Cdc42 mRNA was significantly higher in ESCC tissues (0. 21 ± 0. 14 ) than that in corresponding controls (0. 16 ±0. 12) (t test,P ＜0. 05). The protein expression of Cdc42 was significantly higher in ESCC tissues (0. 83 ± 0. 35 ) than that in corresponding controls ( 0. 75 ± 0. 24). Immunohistochemistry revealed that 73.7% (129/175) of the ESCC samples had higher expression of Cdc42 protein than the corresponding controls[62. 9% (110/175) (χ2 test, P ＜ 0. 05 )]. Cdc42 expression level was correlated with age,lymphoid node metastasis and differentiation ( P all ＜ 0. 05 ), but not with the clinicopathological features,such as gender, ethnicity and macroscopical types (P ＞ 0. 05 ). Conclusion The higher expression of Cdc42 played a certain role in the carcinogenesis and metastasis of ESCC.     

抗药性人肝癌细胞株的建立

以人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１为母细胞株．在体外通过逐渐增加抗癌药丝裂霉素（ＭＭＣ）浓度以共培养方式建立具有ＭＤＲ特性的人肝癌细胞株。与母细胞株相比较．该株对ＭＭＣ的抗药性增加了４．５倍。另外．通过对细胞培养各个阶段的ＭＤＲＩ基因表达情况的观察及用抗Ｐ－糖蛋白抗体ＭＲＫ１６证实．所建立的人肝癌细胞抗药株具有稳定性、较高的ＭＤＲ１基因表达特点。因此．该细胞株的建立．对肝癌化疗的研究提供了一个有用的模型。     

Association between polymorphisms in cell cycle genes and advanced prostate carcinoma

BACKGROUND: Single nucleotide polymorphisms (SNPs) have been associated with a variety of malignancies including prostate carcinoma (PCa). Since a high percentage of PCa patients have low risk disease, of particular interest is not whether SNPs are associated with localized PCa, but whether they are associated with aggressive, potentially lethal disease. Herein, we explored the role of SNPs in cell cycle genes to determine if they were associated with advanced PCa. METHODS: Nine previously implicated SNPs in six cell cycle genes were evaluated in a European-American cohort of 186 patients with advanced PCa and 222 cancer-free controls. All patients received hormone ablation and had either a PSA>50 ng/ml or documented metastatic disease. Controls were all 75 years of age or older, had a negative DRE and had a PSA<4.0 ng/ml. All genotypes were determined using Pyrosequencing assays. RESULTS: One of nine (CDKN1A c10791t) was statistically different (P<0.05) and an additional two of nine (CCND1 a870g and MDM2 tSNP309g) approached significance (P<0.1). Analysis of genotypes revealed that presence of at least one copy of the t allele of MDM2 tSNP309g was associated with an increased risk of advanced PCa (OR 2.26: 95% CI=1.15-4.46) which was particularly strong in androgen-independent disease (OR 2.28: 95% CI=1.01-5.12) and younger age of diagnosis (OR 2.61: 95% CI=1.05-6.46). CONCLUSION: These results suggest that in a European-American population, SNPs within cell cycle genes are promising markers for aggressive PCa. Larger studies will be needed to confirm these findings.     

咖啡酸苯乙酯对大肠癌SW480细胞生长和周期的影响

目的　探讨咖啡酸苯乙酯 (CAPE)对体外培养的大肠癌细胞SW 4 80增殖和细胞周期的影响。方法　不同浓度CAPE处理体外培养的大肠癌SW 4 80细胞后 ,采用MTT法检测细胞的增殖活性 ;流式细胞仪检测细胞周期分布。结果　CAPE处理SW 4 80细胞后 ,SW 4 80细胞的生长抑制率明显升高 ,抑制作用表现为剂量依赖性和时间依赖性。流式细胞仪细胞周期分析表明CAPE作用 2 4h后 ,细胞G0 /G1期比例上升 ,S期比例下降。同时发现CAPE作用后 ,细胞出现胞浆混浊 ,胞体缩小、变圆、皱缩 ,核固缩粹裂等凋亡形态学特征。结论　CAPE对大肠癌SW 4 80细胞株具有明显的生长抑制作用 ,其作用机制与阻滞细胞周期G1期和诱导细胞凋亡有关。     

Effect of norcantharidin on the proliferation,apoptosis, and cell cycle of human mesangial cells

Aims: Norcantharidin (NCTD) regulates immune system function and reduces proteinuria. We sought to investigate the effect of NCTD on proliferation, apoptosis and cell cycle of cultured human mesangial cells (HMC) in vitro.

Methods: HMC cells were divided into a normal control group, and various concentrations of NCTD group (2.5, 5, 10, 20, or 40?μg/mL). Cell proliferation was determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, apoptosis was detected by Annexin V/propidium iodide (PI) assays, and morphological analysis was performed by Hoechest 33258 staining. Finally, cell cycle was analyzed by flow cytometry.

Results: NCTD dose and time dependently inhibits HMC proliferation significantly (p?Conclusion: NCTD inhibits HMC cell proliferation, induces apoptosis, and affects the cell cycle.     

大鼠正常周期子宫内膜核分裂率与增殖细胞核抗原

为了解大鼠正常周期内子宫内膜的核分裂率与增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）指数的变化,本实验以正常ＳＤ雌性大鼠作为动物模型,通过阴道涂片确定大鼠的动情周期后,测定核分裂率与ＰＣＮＡ指数水平。结果显示,两项指标在大鼠动情周期内随周期而改变,皆能反映子宫内膜的周期性变化。认为,可为进一步进行相关的动物实验研究提供一正常参考值。     

生长激素受体在胰腺癌细胞的表达及生长激素对胰腺癌细胞周期的影响

目的　观察生长激素受体 (GHR)在胰腺癌细胞的表达及生长激素 (GH)对胰腺癌细胞周期的影响。方法　用免疫组织化学方法检测胰腺癌细胞SW 1990中的GHR ;SW 1990中加入GH(5 0、10 0 μg/L)培养 2 4、48、72h后计数细胞 ,2 4h后以流式细胞仪测定细胞周期 ;裸鼠成瘤后分为实验组 (GH组 ,按剂量及时间分为 4mg 2周、2mg 2周、2mg3周 3个亚组 )及对照组 (NS组 ) ,用药期间测体重及瘤大小。结果　GHR在SW 1990上有低度表达 ;加入GH培养 2 4、48、72h后细胞数增加 ,2 4h后细胞S %及增殖指数 (PI)提高 [5 0 μg/L组的S % (5 2 .0 0± 14 .83 )及PI(0 .72±0 .0 9)、10 0 μg/L组的S % (5 3 .2 1± 15 .49)及PI(0 .70± 0 .0 9)均分别高于对照组 (S % :3 0 .15± 6.2 2 ;PI :0 .5 2± 0 .13 )(P <0 .0 5 ) ] ;GH不加速种植瘤生长。结论　少量GHR存在于SW 1990细胞 ,GH在体外能促进SW 1990细胞增殖 ,但在体内不刺激肿瘤生长。