牛磺酸拮抗锰诱导体外培养的皮层神经细胞凋亡

目的观察牛磺酸对锰诱导体外培养的皮层神经细胞凋亡的拮抗作用。方法体外皮层神经细胞至最佳生长状态时进行实验。细胞随机分7组,即对照组、染锰组(低、中、高剂量0.2,0.6,1.0mmol/L)、干预组(染低、中、高浓度锰同时分别给予1.5mmol/L牛磺酸干预)。各组处理24h后终止培养,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)及流式细胞术(FCM)定性、定量检测神经细胞凋亡的变化。结果1.TUNEL显示染锰后神经细胞呈现典型的凋亡形态学变化,牛磺酸对中浓度锰有一定的拮抗作用;2.FCM结果表明牛磺酸能拮抗锰诱导的神经细胞凋亡。结论牛磺酸对锰所致体外培养的皮层神经细胞的凋亡有保护作用。     

镉对神经细胞内游离钙浓度的影响

以分离神经细胞为研究对象，观察镉对大脑皮质神经细胞内游离钙浓度（［Ｃａ（＋＋）］ｉ）的影响，结果表明，镉对神经细胞的瞬间作用，可使细胞内游离钙浓度降低，随作用时间的延长，５～５００μｍｏｌ／Ｌ的镉均可使神经细胞内游离钙浓度超负荷。本实验提示在镉对神经细胞功能活动的损害机制中细胞内钙超负荷起着很重要的作用。     

极低频磁场对HepG2细胞内游离钙离子浓度的影响

目的　研究极低频电磁场是否影响细胞内钙离子浓度 ( [Ca2 +]i)。方法　Fura 2负载HepG2细胞分别在 1.5 5mT(均值 )、16Hz脉冲磁场处理 6 0min ,30 0mT、2Hz旋转磁场处理 5min后 ,用荧光光度计检测 [Ca2 +]i;实时检测 0 .9mT(有效值 )、16Hz正弦磁场对 [Ca2 +]i的影响。结果　在 1.5 5mT、16Hz脉冲磁场处理后 ,对照组和处理组R值 (F34 0nm　　 F380nm　　 )分别为 2 .4 5 19± 0 .2 378、2 .5 2 6 6± 0 .2 915 ,30 0mT、2Hz旋转磁场处理后R值分别为 1.36 5 0± 0 .0 6 2 6、1.36 0 2± 0 .0 771。 0 .9mT、16Hz正弦磁场处理下R值数据点拟合趋势线斜率比 [r(50 1～ 1 0 0 0 )　　　 r(0～ 50 0 )　　 ]分别为 1.12 13± 0 .4 5 5 9、1.0 72 7± 0 .1971,截距之比 [b(50 1～ 1 0 0 0 )　　　 b(0～ 50 0 )　　 ]分别为 0 .9912± 0 .0 0 98、0 .9979± 0 .0 0 6 0 ,差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　在本实验条件以及所采用的分析方法下未发现磁场对HepG2的 [Ca2 +]i产生影响     

对氨基水杨酸钠对染锰大鼠睾丸细胞内钙离子调节酶的影响

目的　探讨锰的雄性生殖毒性及对氨基水杨酸钠 (PAS Na)的治疗作用机理。方法　亚慢性染毒法给雄性大鼠染毒 (MnCl2 ·4H2 O每天 15mg/kg ,ip) 12周 ,然后 ,用PAS Na每天 12 0mg/kg ,ip ,(用药 3d ,停 4d) 3周 ,观察锰对睾丸细胞内钙离子调节酶的影响及PAS Na对其的干预作用。结果　染锰可使睾丸细胞的质膜、线粒体、微粒体内的Ca2 Mg2 ATPase、Ca2 ATPase活性及巯基含量下降 ,其中以质膜和线粒体最为明显 (P <0 0 5 ) ,同时 ,质膜上Na K ATPase活性也显著受抑 (P <0 0 1)。PAS Na对上述三个亚细胞组分中受抑的Ca2 Mg2 ATPase、Ca2 ATPase及下降的巯基含量均有促其恢复至正常的作用 ,使质膜上的Na K ATPase活性也有所恢复。结论　PAS Na对锰所致的睾丸细胞内钙稳态失调有一定的恢复作用     

溴氰菊酯对大鼠神经细胞胞内游离钙浓度及凋亡的影响

目的　观察溴氰菊酯 (DM )对神经细胞游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)及凋亡的影响。方法　Wistar大鼠随机分为对照组与 3个染毒组 ,染毒组腹腔注射 1 2 .5mg/kg的DM ;以Fura 2 /AM为荧光指示剂 ,RF 530 1PC荧光分光光度计测定染毒后 5、2 4、48h后大鼠神经细胞 [Ca2 + ]i浓度的变化 ;FACS42 0型流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果　PM染毒 5、2 4、48h组大鼠海马及皮层细胞 [Ca2 + ]i分别为 :5h组海马 :(389.94± 43 .64)nmol/L、皮层 :(449.33± 2 3 .2 3)nmol/L ;2 4h组海马 :(340 .47±32 .36)nmol/L、皮层 :(31 1 .62± 2 5 .48)nmol/L ;48h组海马 (2 87.1 3± 2 4 .2 9)nmol/L、皮层 :(346 .55±36 .87)nmol/L ,均高于对照组 [海马 :(2 0 3 .2 4± 1 8.53)nmol/L、皮层 :(2 2 6 .85± 1 4 .81 )nmol/L] ,差异有显著性 (P <0 .0 1 )。染毒 48h组大鼠此二项指标值较 5h组明显下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。染毒 2 4、48h组大鼠神经细胞凋亡率 [海马 :(8.45± 1 .0 2 ) %、(9.44± 1 .1 4 ) % ,皮层 :(7.90± 0 .49) %、(8.0 1± 0 .87) % ]均明显高于对照组 [海马 :(2 .97± 0 .36) %、皮层 :(3 .50± 0 .48) % ] ,差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ,且有时间 反应关系 (r=0 .940、0 .893)。结论　DM可影响大鼠神     

牛磺酸对锰致海马神经元损伤影响

目的 探讨牛磺酸对锰致海马神经元损伤的影响。方法 新生Wistar大鼠海马神经元细胞原代培养后随机分为空白组、牛磺酸组、低、中、高剂量锰组、牛磺酸+低、中、高剂量锰组,检测乳酸脱氢酶(LDH)活力、流式细胞仪定量凋亡率和观察神经元超微结构变化。结果 LDH活力低、中、高剂量锰组分别为(1 048.063 0±55.459 8)、(1 004.123 3±65.339 4)、(1 405.303 3±163.311 5)U/L,明显高于空白组(895.203 3±53.228 6)U/L(F=31.802,P<0.001),牛磺酸+低剂量锰组(834.595 0±173.445 5)U/L明显低于低剂量锰组(1 048.063±55.459 8)U/L(t=2.871,P=0.017);神经元凋亡率中、高剂量锰组分别为(44.6±4.0)%和(57.7±6.2)%,均明显高于空白组(17.5±2.5)%(F=159.05,P<0.001),牛磺酸+中剂量锰组(34.6±6.4)%明显低于中剂量锰组(44.6±4.0)%(t=3.813,P=0.019),牛磺酸+高剂量锰组(28.9±13.2)%明显低于高剂量锰组(57.7±6.2)%(t=3.709,P=0.021);电镜下观察,锰组神经元呈凋亡和坏死的形态学改变,牛磺酸+锰组与其比较有所改善。结论 锰在体外可剂量依赖性引起海马神经元死亡,牛磺酸可在一定程度上拮抗锰的神经毒性。     

饮食补锰对人体发锰及血锰的影响

采用ＩＣＰ法对服用茶叶提取物１年的人群及其对照组进行发锰与血锰的检测。结果显示,虽然服茶组每人每天锰摄入量比对照组高２７％,但２组人群血锰与发锰并无显著性差异,表明该种方式补锰效果较差。提示在进行锰与人群健康关系研究时,不仅要重视总摄入量,而且要重视其摄入方式及其吸收率。     

铝致神经细胞Ca^2＋浓度升高的可能机制

本文就Ａｌ＾３＋引起神经细胞内Ｃａ６２＋浓度升高的实验依据提出了几种可能性机制，着重介绍了Ａｌ＾３＋通过信号传导系统，谷氨酸，β－淀粉样蛋白聚保，钙调蛋白以及其它机制引起胞内Ｃａ＾２＋浓度升高的过程，指出了某些尚待深入研究之处，并揭示了目前和今后的研究动向。     

MK-801对锰中毒大鼠脑纹状体NMDA受体亚单位表达的影响

目的 研究MK-801对锰中毒大鼠脑纹状体NMDA受体亚单位mRNA和蛋白表达的影响.方法 Wistar大鼠40只,按体重随机分成5组,每组8只.第1组为对照组,皮下注射0.9%氯化钠;第2～4组为锰染毒组,分别皮下注射8、40、200 μmol/kg的氯化锰溶液;第5组为MK-801预处理组,隔日腹腔注射0.3 μmol/kg MK-801,2 h后皮下注射200μmol/kg的氯化锰溶液;注射容量均为5 ml/kg,染锰4周,每周5次.通过电镜观察神经细胞损伤情况,同时测定脑纹状体锰和谷氨酸(Glu)含量,NR1、NR2A、NR2B mRNA和蛋白表达.结果 染锰4周后,随着染锰剂量的增加,纹状体Mn和Glu含量均逐渐升高;NR1、NR2A、NR2B的mRNA和蛋白表达均有不同程度的下降,其中NR2A灰度值下降最明显.电镜观察发现染锰后神经细胞出现不同程度的空泡变性和染色质边集.MK-801预处理组与高剂量染锰组比较,NR2A的mRNA和蛋白表达均有所增加(P<0.05).结论 锰能够破坏纹状体Glu平衡,并且抑制NMDA受体亚单位的表达产生神经毒性,促使细胞凋亡.MK-801可以影响NR2A的mRNA和蛋白表达.     

不同浓度牛磺酸对原代培养皮层神经元的影响

目的研究不同浓度牛磺酸对原代培养的皮层神经元生长及存活的影响。方法建立新生大鼠皮层神经元原代培养技术，加载不同浓度牛磺酸对培养皮层神经元进行干预，观察神经细胞的生长和存活情况。结果适当浓度的牛磺酸能够促进培养的皮层神经元存活，突起生长，促进神经元间网络的形成。结论牛磺酸能够促进原代培养皮层神经元生长。     

砷中毒对小鼠脑细胞内钙离子浓度影响的研究

目的:探讨砷中毒导致脑细胞损伤的机制。方法:采用尾静脉注射亚砷酸钠建立中毒动物模型,以Fluo-3/AM为细胞内游离钙离子的荧光指示剂,用激光扫描共聚焦显微镜测定脑细胞内[Ca2+]i的含量变化,同时采用原子吸收分光光度计测定脑组织中砷(As)、用生化试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的活性水平。结果:实验组小鼠脑细胞内的平均荧光强度明显高于对照组,实验组为116.10±33.75,对照组为42.78±22.66(P<0.001);实验组小鼠脑组织中As含量、MDA水平明显高于对照组,而SOD水平则低于对照组,两组差异有显著性意义(P<0.05)。结论:砷可增加小鼠脑细胞内的游离钙离子浓度,提示脑细胞内钙超载可能是其致脑细胞损伤的分子机制之一。     

甲基汞对大脑皮层神经细胞内游离钙的影响

目的　研究甲基汞对急性分离的大脑皮层神经细胞内游离Ca2 水平的影响。方法　采用钙离子指示剂Fura 2双波长荧光检测技术。结果　 (0 10～ 5 0 0 )× 10 -6mol/L甲基汞可使大脑皮层神经细胞内游离Ca2 水平显著升高 ,且有剂量 效应关系。甲基汞升高神经细胞内游离Ca2 的作用与胞外Ca2 大量内流和胞内储Ca2 释放有关 ,且以胞外Ca2 内流为主。胞外Ca2 内流与N 甲基 D 天冬氨酸受体门控Ca2 通道以及电压门控Ca2 通道有关 ,而与电压依赖性Na 通道无关。结论　甲基汞可使神经细胞内游离Ca2 浓度异常升高 ,且与Ca2 通道有密切关系。     

左旋氨氯地平对缺氧心肌细胞钙超负荷的作用

目的观察左旋氨氯地平对缺氧心肌细胞钙离子超负荷的保护性作用。方法体外增养心肌细胞并建立心肌细胞缺氧模型,采用Fura2/am荧光探针在荧光分光光度计下直接测定各组心肌细胞内的游离钙离子浓度,通过RT-PCR方法分析细胞质膜上钙离子ATP酶的表达,并同时用WesternBlot方法测定肌浆网上钙泵的量。结果在左旋氨氯地平干预下缺氧心肌细胞的游离钙离子浓度显著降低(359.06±75.00nmol/L),同时增强了缺氧条件下的细胞质膜钙离子ATP酶的表达及肌浆网上钙泵的含量。结论左旋氨氯地平可以通过提高钙泵的表达来增强心肌细胞在缺氧条件下对钙超负荷的抵抗能力。     

混配农药对家兔诱发电位及脑组织ATP酶的影响

目的研究混配农药对家兔中枢神经系统功能的影响及其机制。方法将家兔随机分为混配农药染毒A组（丙溴磷与氰戊菊酯混配染毒组）、混配农药染毒B组（丙溴磷与灭多威？昆配染毒组）和1个对照组，每组6只。3个染毒组分别给予3种染毒剂量进行染毒，于染毒前后进行家兔体感染诱发电位（SEP）及染毒后大脑组织三磷酸腺苷（ATP）酶活力的测定。结果与对照组比较，2个混配农药染毒组的高剂量组染毒后SEP的N1、P1、N2波潜伏时均显著延长（P〈0．01），2个混配农药染毒组的高中剂量组染毒后的Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的活力明显下降（P〈0．05。P〈0．01）。结论一定剂量的混配农药可导致家兔中枢神经系统功能的的改变，这种改变可能与大脑组织中N^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2^＋-ATP酶活力的下降有关．     

镉对大鼠Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase影响的实验研究

目的 研究不同剂量镉对大鼠钠钾ATP酶(Na^ -K^ -ATPase)和钙ATP酶(Ca^ -ATPase)的影响,以探讨镉中毒的细胞分子学机制。方法 大鼠按体重随机分成4组,第1组为对照组,皮下注射0．9％氯化钠,第2～4组为镉染毒组,分别皮下注射3,5,7μmol／kg的氯化镉溶液,注射容量均为2ml／kg。染毒6周后,测定尿中乳酸脱氢酶(LDH)、尿蛋白、尿镉和肝、肾组织中Na^ -K^ -ATPase及Ca^2 -ATPase的活力。结果 随着镉染毒剂量的增加,各组大鼠尿LDH、尿蛋白和尿镉含量均逐渐递增,呈现明显的剂量-效应关系;同时,肝、肾组织中的：Na^ -K^ -ATPase和Ca^2 -ATPase活力也随之增加。结论 随着镉染毒剂量的增加,大鼠肝、肾组织损伤逐渐加重,同时伴随着细胞膜上Na^ -K^ -ATPase和Ca^2 -ATPase的变化,这可能与细胞内钙稳态的破坏有关。     

吸烟与温石棉单独及联合作用对人胚肺细胞内[Ca2+]i的影响

目的　研究香烟烟雾溶液 (CSS)与温石棉混悬液 (CH)单独及联合作用对人胚肺 (HEL)细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 ]i)的影响。方法　体外培养的HEL细胞用Fluo 3/AM标记细胞内Ca2 ,用不同浓度CSS和CH作用 1h ,荧光分光光度计测定细胞内 [Ca2 ]i。结果　 1.2 5× 10 -4 、2 .5 0× 10 -4 、5 .0 0× 10 -4 支 /mlCSS单独作用于HEL细胞 1h ,可使 [Ca2 ]i分别升高 5 0 .4%、75 .4%和10 9.3% ;2 0、40、80 μg/mlCH单独作用于HEL细胞 1h ,可使[Ca2 ]i分别升高 3 .0 %、5 3.1%和 116 .7%。CSS及CH单独作用均具有明显的剂量 -效应关系 (前者r =0 .96 3 ,P =0 .0 37;后者r =0 .976 ,P =0 .0 2 4) ;当 1.2 5× 10 -4 支 /mlCSS与 40 μg/mlCH联合作用、2 .5 0× 10 -4 支 /mlCSS与 2 0 μg/mlCH联合作用时均可协同增加 [Ca2 ]i。结论　CSS与CH可在诱导细胞信号转导方面发挥协同作用     

SERCA抑制剂抑制人结肠癌SW480细胞生长的作用机制研究

目的探讨SERCA抑制剂抑制结肠癌细胞株SW480生长的作用机制,为结肠癌治疗提供实验依据。方法（1）应用Ca^2＋荧光指示剂Fura-2检测细胞内Ca^2＋的浓度。（2）MTT法检测细胞抑制率。结果毒胡萝卜素（Tg）可使SW480细胞内Ca^2＋水平由（133．26±5．17,197．46±4．62）明显升高到（436．63±5．21,766．41±3．12）,差异有统计学意义（P〈0．05）;毒胡萝卜素（Tg）对人结肠癌细胞株SW480的抑制率随浓度（10～50μmol／L）的提高而增高,由（10．67±5．28）％至（31．46±7．21）％,抑制率差异有统计学意义（P〈0．05）;毒胡萝卜素（Tg）与W7合用时,这种效应则受到抑制。结论随着毒胡萝卜紊（Tg）浓度的增大,细胞内钙浓度同步上升;同时毒胡萝卜素（Tg）对该细胞株的抑制率增高。但其所诱导的细胞抑制具体钙信号途径还有待进一步研究。     

慢性染铝对大鼠海马长时程增强及Ca2+浓度影响

目的 探讨慢性铝暴露对断乳后大鼠海马CA1区长时程增强及细胞内Ca²⁺浓度的影响.方法 54只大鼠随机分为3组,对照组(蒸馏水)和实验组(0.2%,0.6%AlCl3溶液).采用自由饮水方式染毒,连续80~90 d.测定血铝和脑铝含量、大鼠海马CA1区群体锋电位和大鼠海马细胞内Ca²⁺浓度.结果 各铝暴露组血铝和脑铝均明显高于对照组(P<0.01);高频刺激后,0.2%AlCl3组海马CA1区群体锋电位幅值增强率为117.70%;0.6%AlCl3组为109.77%,均明显低于对照组(P<0.01);且有随铝暴露浓度增加,群体锋电位幅值增强率逐渐降低的趋势;0.2%与0.6%AlCl3组海马细胞内Ca²⁺浓度分别为(228.38±51.74)和(195.43±36.95)nmol/L,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 铝所致海马细胞内Ca²⁺浓度的降低可能是其影响长时程增强的机制之一.     

锰的接触—反应／效应关系研究

本文对60名接触高浓度和低浓度锰作业工人以及40名非锰作业者(对照组)进行了体格检查,尿锰和尿香草扁桃酸(VMA)测定,发现随着吸入锰烟尘浓度的增高,受检者的神经系统症状和体征以及尿锰和尿VMA 相应增高,经统计学检验有显著性差异。研究结果显示,尿锰和尿VMA 的增高对锰中毒的早期诊断有一定参考价值。     

Fura-2 measurement of cytosolic free calcium in rat brain cortical synaptosomes and the influence of ethanol

The effects of ethanol on resting and KCl-depolarized cytosolic calcium concentrations ([Ca2+]i) were measured in purified rat cortical synaptosomes using the calcium indicator fura-2. Ethanol (500-700 mM) significantly elevated the resting [Ca2+]i by 13-25% in the presence of 100 microM external calcium. In the absence of external Ca2+, ethanol (50-200 mM) significantly increased [Ca2+]i by 17-23%. Ethanol (200-700 mM) also significantly decreased KCl-induced rise in [Ca2+]i (delta K) by 40-82% in fura-2 loaded preparations incubated in the absence or presence of external calcium. Ethanol did not produce a significant change in delta K at 50 and 100 mM concentrations. These results suggest that ethanol may cause an elevation in [Ca2+]i via mobilization of intracellular calcium stores which may be linked to a calcium-dependent inactivation of voltage-sensitive calcium channels.