肉苁蓉颗粒剂对帕金森病大鼠模型黑质纹状体多巴胺能神经元的保护作用研究

目的:探讨肉苁蓉颗粒剂对帕金森病大鼠模型黑质纹状体多巴胺能神经元的保护作用。方法:采用6-羟基多巴胺单侧双靶点颅内定向注射法制备帕金森病大鼠模型,3周后据阿朴吗啡诱导的不自主运动,筛选造模成功大鼠,随机分为空白组,模型组,假手术组,肉苁蓉颗粒剂低剂量组(1 g·kg-1·d-1)和肉苁蓉颗粒剂高剂量组(3 g·kg-1·d-1),灌胃相应药物共4周。记录阿朴吗啡诱导的大鼠向健侧旋转的圈数;采用免疫组化研究观察黑质内酪氨酸羟化酶(TH)的表达;和免疫印迹法检测(Western-blot)观察纹状体内α-突出核蛋白(α-synuclein)、酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT)的表达;高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法检测定大鼠纹状体多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)的含量。结果:用药4周后,肉苁蓉组向健侧旋转的圈数与模型组比较明显减少(P0.05),黑质内TH阳性细胞较模型组明显增多,纹状体内α-synuclein表达下调、TH、DAT表达上调。纹状体DA、DOPAC含量明显升高(P0.05或P0.01)。高剂量组效果优于低剂量组。结论:肉苁蓉颗粒对帕金森病大鼠模型黑质和纹状体的多巴胺能神经元具有神经保护作用。     

补肾中药对帕金森病模型小鼠黑质-纹状体多巴胺的影响

目的:探讨补肾中药对帕金森病(PD)模型小鼠黑质-纹状体神经递质多巴胺(DA)的影响。方法:取PD模型小鼠45只,随机分为淫羊藿组、女贞子组、黄精组、司来吉兰组和模型对照组,每组9只,另取同周龄C57BL/6J雄性小鼠9只作为正常对照组。正常对照组和模型对照组ig蒸馏水,淫羊藿组、女贞子组、黄精组、司来吉兰组分别ig淫羊藿、女贞子、黄精、司来吉兰(剂量分别为6,6,8,2×10-3 g·kg-1)的水煎液及水溶液。0.5 mL/次,2次/d,连续给药4周后冰浴中取黑质-纹状体,免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶(TH)的含量,高效液相-电化学法检测DA及其代谢物高香草酸(HVA)的含量。结果:淫羊藿组TH的表达,DA,二羟苯乙酸(DOPAC)的含量均高于模型对照组(P<0.05),且淫羊藿组TH的表达高于司来吉兰组(P<0.05),与空白对照组无差异;女贞子组和黄精组中DA的含量较模型对照组高(P<0.05),且女贞子组中DA的含量高于司来吉兰组(P<0.05),与空白对照组无差异。结论:补肾中药可以增加PD模型小鼠黑质-纹状体中DA的含量,但其作用机制并不完全一致,有待进一步深入研究。     

电针对帕金森病大鼠中脑黑质多巴胺能神经元氧化应激损伤的影响

目的:观察电针对帕金森病(PD)大鼠的中脑黑质超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量及对中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)表达及多巴胺(DA)能神经细胞凋亡的影响,探讨电针治疗PD的可能机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组(n=10)、模型组(n=11)、电针组(n=11)和西药组(n=11)。皮下注射鱼藤酮溶液制备PD大鼠模型。电针组选"百会""三阴交""太冲"穴电针10min,每天1次,7d为1个疗程,治疗2个疗程;西药组给予美多巴混悬液灌胃(1.67mg/kg)。治疗后行酶法测定右脑中脑黑质SOD、GSH-Px活力,比色定量分析法测定GSH、MDA含量;免疫组化(SP法)染色检测左脑中脑黑质TH,TUNEL法检测DA能神经细胞凋亡。结果:模型组SOD、GSH、GSH-Px均低于正常组(P0.05),模型组MDA高于正常组(P0.05);电针组SOD、GSH、GSH-Px均高于模型组(P0.05),电针组、西药组MDA均低于模型组(P0.05);电针组SOD、GSH-Px均高于西药组(P0.05)。电针组、西药组与模型组相比中脑黑质DA能神经元细胞形态较规则,体积较正常,核仁较明显,神经纤维排列较整齐,结构较密集;西药组改善差于电针组,优于模型组。电针组、西药组与模型组相比TH改善明显,阳性神经元数目增多(P0.05),神经元胞体轮廓及突起清晰;西药组改善差于电针组(P0.05)。电针组、西药组与模型组相比,DA能神经细胞凋亡减少(P0.05)。结论:电针可通过提高PD大鼠中脑黑质SOD、GSH-Px活力和GSH含量,降低MDA含量,增加TH免疫反应阳性神经元数目,抑制DA能神经细胞凋亡来治疗PD。     

首乌熟地饮对MPTP致帕金森病小鼠模型多巴胺能神经元的影响

为了研究首乌熟地饮对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-te-trahydropyridine,MPTP)诱致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的影响及其可能机制。该实验将小鼠分为4组:正常组、首乌熟地饮组(对照组)、MPTP组(模型组)、MPTP+首乌熟地饮组(干预组),分别给予首乌熟地饮(对照组和干预组)和去离子水(正常组和模型组)灌胃30d;随后模型组和干预组腹腔注射MPTP,正常组和对照组腹腔注射等量生理盐水,7 d后应用免疫组化检测各组黑质区酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元细胞数目,聚合酶链式反应(PCR)检测各组TH m RNA及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)m RNA的表达量。结果显示,腹腔注射MPTP的模型组和干预组的TH阳性神经元数和TH m RNA表达量均明显少于正常组和对照组(P0.05);但模型组与干预组之间黑质的TH阳性神经元数和TH m RNA表达量无明显差异。与模型组相比,首乌熟地饮使干预组黑质区4种亚型谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的m RNA表达量均有不同程度增加,但差异并无统计学意义。这表明了首乌熟地饮对MPTP诱致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元凋亡不具有预防保护作用,但其或许通过增加GPX表达从而增强小鼠的抗氧化能力。     

六味地黄丸对MPTP帕金森病小鼠多巴胺神经元的影响

目的观察六味地黄丸对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）致帕金森病（PD）模型小鼠异常行为和多巴胺能神经元的保护作用。方法将50只小鼠随机分为5组,即正常对照组（A）、模型组（B）、美多巴组（C）、六味地黄丸组（D）、美多巴加六味地黄丸组（E）。经腹腔注射MPTP建立帕金森病模型小鼠,观察各组药物对模型小鼠异常行为表现的影响,并应用免疫组化法测定各纽小鼠黑质酪氨酸羟化酶（TH）阳性细胞数量的变化。结果模型小鼠在行为学和免疫组化检测方面都有显著异常,给药4周后,C、D、E组之间比较无显著差异。结论六味地黄丸对MPTP诱导的PD模型小鼠黑质多巴胺神经元有保护作用。     

头穴透刺对帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元形态数量影响研究

目的：研究头穴透刺对帕金森病模型大鼠黑质多巴胺能神经元形态及数量的影响。方法：以6-羟基多巴胺微量注射法制备帕金森病大鼠旋转模型,采用头穴透刺疗法进行治疗,设立正常组、模型组和透刺组：以免疫组织化学方法检测大鼠黑质多巴胺能神经元酪氨酸羟化酶阳性细胞的形态及数量变化;采用透射电镜观察各组大鼠黑质神经元形态及数量变化。结果：透刺组与模型组比较大鼠黑质多巴胺能神经元形态及数量均明显改善。结论：头穴透刺疗法可以改善多巴胺能神经元形态、增加多巴胺能神经元数量。     

补肾活血方对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用及机制

目的:观察补肾活血方对6-羟基多巴胺(6-OHDA)所致帕金森病大鼠黑质多巴胺(DA)能神经元的保护作用。方法:每只雄性SD大鼠黑质内1次性注射6-OHDA 4μL(含9.0μg 6-OHDA和8.8μg抗坏血酸)制作帕金森病(PD)大鼠模型。分别以不同药物灌胃15 d的方式进行治疗。分为正常对照组(生理盐水90 mg·kg-1),模型组(生理盐水90 mg·kg-1)、西药美多巴治疗组(美多巴20 mg·kg-1)、补肾活血方高、中、低(15,10,5 g·kg-1)6组,通过行为学检测、免疫组化法测定黑质酪氨酸羟化酶(TH)、黑质中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),观察补肾活血方对DA能神经元的保护作用。结果:1模型组引起典型的右侧旋转,补肾活血方高剂量组和美多巴组与模型组相比旋转圈数减少有显著性差异(P<0.05)。2美多巴组及补肾活血方高剂量组与模型组比较,黑质SOD活性增高(P<0.05),GSH-Px活性也增高(P<0.01),而MDA含量降低(P<0.01)。3TH免疫组化结果表明,与正常组比较PD模型组神经元数量明显减少(P<0.01),甚至消失,神经元胞体萎缩,突起不清晰。补肾活血方高剂量组及美多巴组大鼠黑质TH阳性神经元数量较多,胞体较大,突起明显。结论:补肾活血方对6-OHDA所致帕金森病大鼠黑质DA能神经元损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过抗氧化应激及提高黑质酪氨酸羟化酶水平实现的。     

银杏叶提取物对帕金森病大鼠多巴胺神经元的保护作用

目的:研究银杏叶提取物对帕金森病模型大鼠多巴胺神经元的保护作用。方法:大鼠10只设为正常对照组,16只帕金森病模型为模型对照试组,26只帕金森病模型大鼠给予银杏叶提取物,应用银杏叶提取物前后的黑质酪氨酸羟化酶阳性细胞数、丙二醛、黑质区谷胱甘肽过氧化物酶水平进行比较。结果:试验组大鼠腹侧被盖区、损毁侧黑质致密部的黑质酪氨酸羟化酶阳性细胞数明显低于对照组,黑质内丙二醛明显高于对照组,黑质区谷胱甘肽过氧化物酶明显低于对照组;且试验组大鼠应用银杏叶提取物后腹侧被盖区、损毁侧黑质致密部的黑质酪氨酸羟化酶阳性细胞数明显升高,黑质内丙二醛明显降低,黑质区谷胱甘肽过氧化物酶明显升高。结论:银杏叶提取物能抑制脑黑质多巴胺能神经元数量减少,对帕金森病大鼠多巴胺能神经元具有保护作用。     

帕病2号方对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的 研究帕病2号方对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠模型多巴胺能神经元的保护作用.方法 采用6-羟多巴胺纹状体左侧两点注射法制作单侧PD损毁模型,将造模成功大鼠随机分为5组,即为帕病2号方高、中、低剂量组(32.0,16.0,8.0g生药·kg-1)、美多巴组(0.075 g· kg-1)、模型组.另设空白对照组,每组8只,各实验组ig给药,连续给药4周,空白对照组和模型组予等容积蒸馏水,应用TUNEL观察多巴胺能神经元凋亡的变化,TH染色检测大鼠黑质TH阳性神经元数目.结果 与空白对照组比较,模型组多巴胺能神经元显著减少,凋亡细胞数明显增多(P＜0.01).与模型组比较,帕病2号方高、中剂量组多巴胺能神经元明显增加(P＜0.05),凋亡细胞数明显减少(P＜0.05),其中高剂量组改变尤为明显(P＜0.01).结论 帕病2号方对帕金森病大鼠模型黑质多巴胺能神经元有保护作用,能抑制神经细胞的凋亡,增加黑质内TH的表达.     

苁蓉总苷对小鼠学习记忆障碍的影响

目的观察苁蓉总苷对东莨菪碱所致的小鼠学习记忆获得障碍及亚硝酸钠所致小鼠学习记忆巩固障碍的影响.方法使用跳台法观察小鼠的学习记忆功能.连续灌胃给予苁蓉总苷30d,于实验的第29天训练,第30天测试,记录各动物的首次跳台潜伏期及5 min内的错误次数.东莨菪碱模型于训练前15 min腹腔注射东莨菪碱,而亚硝酸钠模型于训练后立即皮下注射亚硝酸钠.结果与东莨菪碱模型组比较,苁蓉总苷400、200 mg/kg组及脑复康组潜伏期均明显延长,错误次数明显减少;苁蓉总苷100 mg/kg组潜伏期亦明显延长,但错误次数只有一定程度的减少.与亚硝酸钠模型组比较,苁蓉总苷400、200 mg/kg组潜伏期均明显延长,错误次数有一定程度的减少,但无统计学意义;苁蓉总苷 100 mg/kg组潜伏期及错误次数只有一定程度的改善;脑复康组潜伏期明显延长,错误次数显著减少.结论苁蓉总苷对东莨菪碱所致的小鼠学习记忆获得障碍及亚硝酸钠所致小鼠学习记忆巩固障碍均有明显的改善作用.     

肉苁蓉总苷对SAMP8小鼠学习记忆能力及突触可塑性的影响

目的明确不同剂量肉苁蓉总苷(glycosides of cistanche, GCs)灌胃对SAMP8小鼠学习认知功能和突触可塑性的影响。方法 SAMP8小鼠给予不同剂量肉苁蓉总苷[5、10、25、50、100 mg/(kg·d)]连续灌胃30 d。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;尼氏染色观察海马CA1区细胞形态及完整锥体细胞数目;免疫组化、Western Blot检测小鼠海马突触素(synaptophysin, SYN)、突触后致密物蛋白(post-synaptic density protein 95, PSD-95)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)表达情况。ELISA检测血清睾酮(testosterone, T)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)含量。结果水迷宫实验结果显示,相较模型组,50 mg/(kg·d)组逃避潜伏期显著缩短(P<0.05);50 mg/(kg·d)组10...     

电针对震颤麻痹大鼠行为学和细胞凋亡的影响

目的:研究电针对帕金森病模型大鼠黑质神经细胞凋亡和行为学的影响。方法:利用大鼠PD模型,观察行为学和采用末端标记法检测电针治疗前后PD模型大鼠黑质细胞凋亡的影响。结果:电针治疗能明显抑制PD模型大鼠旋转次数和黑质神经细胞凋亡,其作用和美多巴近似。结论:电针治疗PD可通过抑制中脑黑质神经细胞凋亡而减少旋转次数。     

何首乌提取物对百草枯致多巴胺神经元损伤的保护作用及其机制的研究

 目的 研究何首乌提取物（PME）对百草枯引起的多巴胺神经元损伤的保护作用并探讨其机制。方法 噻唑蓝（MTT）法测定细胞的存活率,尼氏染色观察小鼠多巴胺神经元,紫外吸收测定丙二醛（MDA）和超氧化歧化酶（SOD）含量,HPLC分析主要成分。 结果 何首乌明显改善百草枯引起的PC12细胞、小鼠多巴胺神经元的损伤、降低脑内MDA含量并增强SOD的活力。结论 本研究表明何首乌提取物对百草枯引起的多巴胺神经元的损害有显著的保护作用,其作用机制可能与其抗氧化作用有关。     

雷公藤内酯醇对脂多糖诱导黑质多巴胺能神经元变性的保护作用

目的观察雷公藤内酯醇（triptolide,Tri）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导黑质多巴胺能（dopamine,DA）神经元变性的保护作用。方法40只大鼠随机分为4组,每组10只,即：假手术对照组,LPS模型组,LPS加Tri组,LPS加生理盐水组。14天后观察LPS和雷公藤内酯醇对阿朴吗啡诱发的旋转行为、大鼠毁损侧纹状体DA及其代谢产物的含量和DA合成限速酶酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）阳性细胞数及小胶质细胞激活情况的影响。结果黑质注射LPS后可以模拟脑部免疫炎症反应异常现象,导致DA能神经元变性;黑质注射LPS后引起大鼠向注射侧出现旋转,雷公藤内酯醇能抑制这一作用;并能明显保护纹状体DA及其代谢产物的含量的降低及TH阳性细胞数的减少,抑制小胶质细胞的激活（P〈0．01）。结论雷公藤内酯醇可以通过抑制小胶质细胞激活,保护炎性介导的DA能神经元变性。     

镇肝熄风汤对帕金森病模型小鼠神经行为学及黑质14-3-3、酪氢酸羟化酶表达的影响

目的: 观察镇肝熄风汤对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine MPTP)诱导的C57BL/6小鼠帕金森病模型自主活动的影响及其可能机制。 方法: 连续灌胃14 d给予不同剂量的镇肝熄风汤(12.5, 25,50 g·kg^-1)和司来吉兰(10 mg·kg^-1)预处理,于给药第11天开始连续4 d C57BL/6小鼠皮下注射MPTP(30 mg·kg^-1)制备帕金森病小鼠模型。通过自主活动实验 观察动物行为学表现,采用实时定量RT-PCR法检测多功能蛋白14-3-3和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH) mRNA表达,Western blot方法检测多功能蛋白14-3-3,TH蛋白表达。 结果: 与模型组比较,镇肝熄风汤可显著增强帕金森病小鼠自主活动能力(均P<0.05),上调多功能蛋白14-3-3和TH mRNA和蛋白表达(均P<0.05)。 结论: 镇肝熄风汤具有抗实验性帕金森病的作用,其机制可能与上调多功能蛋白14-3-3和TH的mRNA和蛋白表达有关。     

知母总皂苷对阿尔茨海默病细胞模型的保护作用

[目的]探讨知母总皂苷对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的保护作用。[方法]用10～40μMAβ25-35分别刺激PC12细胞48h,MTT法测定细胞活力改变。分组:正常组,模型组,知母保护组。用0.5～40mg/L知母总皂苷和20μMAβ25-35共同作用PC12细胞48h,倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化,MTT测其活力改变。[结果]MTT法显示不同浓度Aβ25-35可引起不同程度凋亡,成剂量依赖关系。不同浓度知母总皂苷保护PC12细胞,可抑制这种凋亡,5～20mg/L效果显著(P<0.01)。[结论]Aβ25-35能诱导PC12细胞凋亡,知母总皂苷对其诱导的细胞凋亡有明显保护作用。     

鱼藤酮帕金森病模型的建立与评价

目的通过在颈背部皮下注射鱼藤酮试剂进行造模,建立帕金森病模型。方法将45只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组,模型组给予颈背部皮下注射鱼藤酮试剂进行造模,假手术组仅注射等量葵花油乳化液(不含鱼藤酮),正常组不处理。观察其外观形态学改变,进行行为学测试、旷场实验、悬挂实验、滚轴实验并进行评分。免疫组织化学法检测大鼠黑质内α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)与酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)阳性表达。结果(1)模型组大鼠出现弓背姿势,毛色变黄,背毛变硬呈扇形等改变。模型组大鼠行为学测试评分明显提高(P<0.01);旷场实验、悬挂实验、滚轴实验结果均显示模型组大鼠与正常组和假手术组相比行为异常(P<0.01)。(2)免疫组化检测结果显示模型组大鼠黑质内α-syn平均光密度值显著增高(P<0.01),TH平均光密度值显著降低(P<0.01)。结论用颈背部皮下注射鱼藤酮试剂的方法可建立与人类帕金森病行为和病理高度相似的大鼠模型,为PD实验的模型建立提供理论基础。     

补肾止颤方对6-OHDA诱导的帕金森病模型大鼠神经保护作用的研究＊

目的 探讨补肾止颤方对帕金森病（Parkinson??s disease， PD）模型大鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法 将100只Sprague-Dawley大鼠随机分为5组：正常组、模型组、补肾止颤方低剂量组、中剂量组、高剂量组，补肾止颤方按照不同剂量溶于生理盐水中，每天中午灌胃1次，正常组和模型组予以相同体积的生理盐水灌胃。分别在处理10天和20天后检测各组大鼠的行为学，免疫组织化学法检测脑内多巴胺能神经元标志物酶酪氨酸羟化酶（Tyrosine hydroxylase，TH）和多巴胺递质转运子（Dopamine transmitter transporter， DAT），酶联免疫吸附测定（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测脑内多巴胺及其代谢产物的变化。结果 和模型组比不同剂量的补肾止颤方均能够改善PD大鼠的行为学，提高TH、DAT、3，4二羟基苯乙酸（3，4 dihydroxyphenylacetic acid， DOPAC）、5羟色胺（Serotonin，5-HT）、高香草酸（High vanilla acid，HVA）的表达（P < 0.05或P < 0.01），同时下调单胺氧化酶B（Monoamine oxidase B，MAO-B）的表达（P < 0.01）。结论 补肾止颤方能够改善6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine， 6-OHDA）损伤早期大鼠的行为学改变，增加帕金森病大鼠多巴胺能神经元的数量，并能维持多巴胺能神经元功能，降低神经损伤，有较好的神经保护作用。