电镜半薄切片应用于光镜研究的探讨

电镜半薄切片通常用于电镜超薄切片前的定位观察 ,我们在定位观察时发现 ,由于切片薄 ,结构显示清晰 ,可用于光镜研究 ,其观察结果优于石蜡切片。多年来 ,我们已将电镜半薄切片应用于实验研究和研究生课题实验。方法 :取材后将组织修为 1立方毫米左右 ,常规电镜样品处理 ,环氧树脂 6 18包埋 ,修块 ,L KBV型超薄切片机切片 ,切片厚度 1微米 ,脱树脂后 ,苏木精染色 ,H· E或甲苯胺兰染色 ,37℃温箱烤干 ,封片 ,观察。结果 :苏木精染色显示 ,细胞核呈紫兰色 ,胞浆淡兰色 ;H·E染色显示 ,细胞核为紫兰色 ,细胞质淡粉红色 ,但伊红染色较石蜡…     

胚胎小肠杯状细胞偶氮卡红染色

近几年的研究表明,杯状细胞的数量、分泌性质、形态和分布的改变与许多疾病的发生有关[1-3],越来越引起人们的关注.目前较多采用印迹细胞学方法研究杯状细胞的形态和数量变化[4],PAS加苏木精染色可显示杯状细胞所含的黏蛋白及所有细胞的细胞核.然而传统的H-E染色观察杯状细胞时主要是凭细胞形态似高脚杯来判断,而PAS反应加苏木精染色方法因细胞膜上广泛存在着糖蛋白和黏多糖使得在观察杯状细胞的数量及分布上有局限性.本实验采用偶氮卡红两色法染色观察人胚胎消化道组织杯状细胞的位置、分布及数量取得较好的效果,现报道如下.     

三种类型的苏木精在HE染色中的效果比较

自1863年Waldeyer倡导使用苏木精染色细胞核,伊红染色细胞质,使不同组织和细胞成分呈现不同颜色和产生不同的折射率,HE染色一直被广泛应用于病理形态学诊断、教学和研究。在实际工作中使用的苏木精通常为自然氧化或人工氧化两种,将自然氧化和人工氧化的苏木精以1∶1比例混合成混合苏木精,染色效果很好,现将这三种类型的苏木精在HE染色中的效果介绍如下。     

一种提高冷冻切片染色效率的苏木精加热组件

临床病理工作中,冷冻切片质量的优劣直接影响到术中病理诊断的快速性和准确性。冷冻切片制片速度与质量受多种因素的影响,其中苏木精染色是非常关键的环节。细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA带负电荷,呈酸性,很容易与苏木精碱性染料结合而被染色,苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色［1］,易与被伊红染成红色的细胞质区分。我们设计了一种病理冷冻切片的染色加热组件（专利证书号：ZL 201320589148.4）,对150例冷冻切片进行染色,比较该组件处理下与其他4种苏木精染色条件下,HE染色的速度与质量。     

利用媒染染料茜素蓝S显示硫酸化粘液物质

媒染染料的主要特征是当加不同媒染剂时,其染色性能亦不相同。Puchter(1974)以氯化铁作为媒染剂配制茜素蓝S溶液,细胞核染成蓝色,软骨和嗜碱性细胞亦成蓝色,他认为这个络合物和铬矾—核酸菁蓝相似,可能是与核酸的磷酸基结合。天青石蓝用铬矾或硫酸铜作媒染剂时,核染成蓝色,软骨和粘液染成紫色。用铁矾或氯化铁作媒染剂,则可代替苏木精显示细胞核。上皮细胞内酸性粘液物质的分布很广,其化学性质分硫酸化和非硫酸化(羧酸化)两种,而且在同一种上皮和粘液腺内常以混合形式存在,因此用一种染色是不易区分的。欲区分硫酸化和羧酸化粘液物质,多采用Spicer(1960)醛品红与爱先蓝结合染色法,因醛品红     

改良Hale胶体铁染色法对组织酸性黏多糖染色效果观察

人体和动物组织中广泛分布酸性黏多糖物质,利用相关染料和化学试剂等可显示其在组织中的存在和分布情况。由于各种组织的性质、含量及组成成分的多少及其特异性的不同存在一定的差异。本组实验选用Alcian blue(阿尔辛兰)乙酸法和Hale胶体铁染色法[1]对组织进行染色,染色后对比发现改良Hale胶体铁染色法染色后显示的肾嫌色细胞癌和大鼠肠上皮细胞中含有较多的酸性黏多糖物质。实践     

H-E染色制作整块脊髓切片

正制片技术已相当广泛地应用于众多的学科领域~([1])。生物医学领域在制作脊髓切片时,通常选用强还原剂(硝酸银)进行染色制片。因为神经组织是动物体内比较柔软的组织,其结构和功能较为复杂特殊~([2])。强还原剂硝酸银能很好地将神经组织脑和脊髓内的灰质和白质进行染色上的区分,也可将神经元与神经胶质细胞更好地显示清楚,这就是脊髓切片制作时常选用硝酸银染色的原因所在。制作石蜡组织切片时一般选用H-E染料,即苏木精和伊红染料。这2种染液配制简捷方便,价格低廉,染色效果佳,     

不同浓度酸对Harris苏木精染色液染色效果的影响

在病理医检常用的多种苏木精染色液中,Harris苏木精可即配即用,染色力强,核着色鲜艳,是常用的细胞核染色剂。缺点是出现氧化膜较快,易生成沉淀和过染。要减少这些缺点,就要尽量保持染色液稳定。Harris苏木精染色液的稳定,除与周围环境的温度、光、空气、试剂和染料的纯度有关外,还与其配制过程中是否加入冰醋酸或盐酸及加入酸的多少有关。     

不同染色方法对人脑垂体细胞显示效果的比较

目的改进人脑垂体的染色方法,更清晰地显示腺垂体内各种细胞的形态特点,提高实验课教学质量。方法应用苏木精-伊红染色法和改良染色液染色法显示脑垂体的组织结构。结果用传统的苏木精-伊红染色法不易区分各种细胞,而采用改良染色液显示脑垂体组织结构效果好,既能观察脑垂体的结构,又能区分嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。结论改良染色液染色法能够很好地显示脑垂体组织结构,使3种细胞的形态特点清晰可辨,可为实验教学提供优质的切片标本。     

常用苏木素几种配方与染色结果的比较

苏木素是组织切片最常用的细胞核染料 ,H.E染色中配方甚多 ,染色效果也有差异 ,影响染色的因素颇多 ,未经氧化的苏木素无染色能力 ,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝 ,还要借助媒染剂的作用 ,苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。如何优化三者的比例和判断染液的有效期 ,使苏木素染色达到最佳效果 ,为此我们进行了以下探讨。1　方法与结果1.1　Ehrlich苏木素染液　这是一种自然氧化成熟的苏木素染液 ,比较合理的配方是 :苏木素 5g,无水乙醇2 0 0 ml,硫酸铝钾 2 0 g,甘油 2 0 0 ml,蒸馏水 1…     

同时显示肾微血管和细胞构筑的实验研究

目的：在媒染微血管的同时显示肾内细胞构筑，以了解肾微血管与肾小管之间的相互关系。方法：用单宁酸一氯化铁法(TA—be)媒染肾微血管，再以苏木精、H—E法复染来观察肾小管细胞结构。结果：经复染的2组切片各级血管和细胞均染色良好，血管壁平滑肌纤维、内皮细胞界限清晰，细胞核蓝染，H—E染色的细胞质呈深浅不同的红色。因切片较厚，保证了微血管的立体感，细胞的染色效果却不及薄切片的鲜艳。结论：TA—Fe法配合苏木精或HE复染，可同时显示肾微血管和细胞构筑。     

量化管理在病理染片过程中的应用

长期以来 ,病理组织处理过程都是凭经验更换试剂、染料 ,这样就造成质量不稳定或者试剂浪费。为了保证每张切片的质量和节约试剂 ,我们提出量化管理的概念 ,供大家探讨。1　方法对每天的工作量、温度进行登计 ,统计每次更换新液体后到组织块脱水不佳时 ,这一批试剂共做了多少蜡块数 ,苏木精、伊红染多少张切片后细胞核着色开始发灰 ,细胞质颜色不鲜艳。并观察与季节、气温的关系。1.1　 观察组织脱水过程 ,采用樱花全封闭组织脱水机进行组织处理 ,每道液体 30 0 0ｍｌ,37℃恒温。1.2　观察苏木精染色过程 ,统计苏木精、伊红 (每道 80 0ｍｌ)…     

骨髓活检塑料半薄切片的染色

半薄切片的操作过程及方法简单 ,尤其适用于骨髓活体检查 ,切片中的各系统细胞形态接近于涂片形态。因ＨＥ染色不能完全显示骨髓中的一些特殊成分 ,故导致分辨率不够理想。作者针对这一问题建立一种适用于作骨髓半薄切片的染色方法。1　配制方法1 1　染色液的配制　 (1)苏木精、姬姆萨　根据Ｈａｒｒｉｓ苏木精和Ｇｉｅｍｓａ染液的配制方法。 (2 )酸性品红溶液　 1 2 %浓度。1 2　染色方法及步骤　 (1)将骨髓塑料半薄切片 (2 μｍ)附贴于载玻片上在加热板上使充分干燥。 (2 )Ｈａｒｒｉｓ苏木精染色 5ｍｉｎ ,自来水或蒸馏水冲洗。 (3)Ｇｉ…     

脑死亡供体肺病理改变及临床移植应用的可行性

背景：有学者认为在脑死亡过程中很多因素可导致肺组织的改变。 目的：观察脑死亡供体肺病理改变,探讨其临床移植应用的可行性。 方法：对23例脑死亡供体肺进行了病理活检,苏木精-伊红染色、银染及PAS染色观察肺脏组织变化,电镜观察肺脏超微结构变化。 结果与结论：苏木精-伊红、银染及PAS染色光镜下见支气管及肺泡结构尚完整,局部病灶见肺泡内皮细胞水肿、坏死、脱落,肺泡间隔未见明显增宽,但充血易见,血管周围有少量出血,有散在淋巴细胞;电镜下脑死亡的肺泡细胞轻微水肿,部分细胞胞核染色质沿皱缩的核膜下凝聚,有的细胞核出现变型,细胞线粒体肿胀,但未见明显坏死。说明脑死亡供肺可以实施临床移植。     

采用紫BL与蓝B2R对组织切片染色的观察

目的寻找制备简单、效果良好、来源丰富的组织切片染色剂。方法应用27种直接服装染料对小鼠肝脏组织切片进行染色效果观察,发现其中的紫BL和蓝B2R染色能够清晰显示中央静脉和肝细胞核等结构,再用紫BL和蓝B2R对心脏、肾脏和睾丸组织切片进行染色效果观察。结果紫BL和蓝B2R用蒸馏水溶解后即可使用,配制简单,在5 min内完成。它们对心脏、肾脏和睾丸组织切片染色后,心肌横纹、肾小囊腔、生精细胞等结构清晰可辨,与HE染色结果类似。结论紫BL与蓝B2R比苏木素制备简单,同时它们的组织切片染色效果良好,来源丰富。因此,可能部分替代苏木素。     

三色染色法和免疫细胞化学法显示培养的神经轴索及雪旺细胞

本研究目的在于用三色染色法和免疫细胞化学反应显示培养的周围神经中的轴索及雪旺细胞。将大鼠背根神经节体外培养于聚吡咯膜上 2周 ;用苏木精、固绿 FCF、变色素 2 R及磷钨酸等配制的染色液染色 ;或用抗 S-10 0蛋白和抗神经微丝蛋白抗体进行免疫细胞化学法反应。结果证明 ,在三色染色法中神经节神经元发出的长突起呈蓝绿色 ,细胞核呈红色或紫红色 ,胞质呈浅灰色。免疫细胞化学反应证明神经节发出的长突起为轴索 ,紫红色核和浅灰色胞质的细胞为雪旺细胞。本文结果提示 ,三色染色法能区别显示培养的周围神经组织中的轴索及雪旺细胞。     

对GiII′s半氧化苏木精溶液的探讨

在组织学和病理学诊断中,为显示细胞核的结构常用Harris或Ehrlich铝-苏木精溶液,两液均有其不足。Harris液表面有一层金属膜,溶液中沉淀较多,故使用前需过滤;有时出现氢氧化铝凝胶现象;在加氧化剂时,因能产生大量气体,易使溶液从容器内喷出;除细胞核着色外,其它组织成分的复染较重,故必须用酸酒精分化;溶液中的苏木精氧化等级高,因此溶液的使用期较短等缺点。Ehrlich液因不加氧化剂,故不能立即使用,于空气中自然氧化,一般需四周以上因此对其氧化程度难以做到严格控制,其着色能力因配制时间的长短而异,陈液较新液的着色力强,从而不易掌握染色时间,需用盐酸酒精来调节。Gill(1974)按Baker(1953,1960,1962)提出半氧化概念和铝媒染值的建议,配制半氧化苏木精并将haematal-16降为haematal-8的溶液,取     

大黄酸及大黄素诱导高糖大鼠肾小球系膜细胞的凋亡

背景：课题组前期实验证实中药复方消可宁能有效防治早期糖尿病肾病。 目的：比较大黄酸与大黄素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响程度。 方法：分别用不同浓度20,40,80 µmol/L的大黄酸和大黄素刺激高糖培养的肾小球系膜细胞,苏木精-伊红染色观察凋亡细胞形态,DAPI荧光染色观察细胞核凋亡情况,流式细胞仪观察细胞凋亡率。 结果与结论：苏木精-伊红染色及DAPI染色结果显示大黄酸对髙糖培养的肾小球系膜细胞凋亡的影响程度强于大黄素的影响程度。细胞凋亡率的对比显示大黄酸对髙糖培养的肾小球系膜细胞的早期凋亡率与晚期凋亡率均强于大黄素。说明低中高浓度的大黄酸、大黄素均可诱导肾小球系膜细胞凋亡,但大黄酸的药效强于大黄素。     

线粒体Luxol快兰—焰红快染技术

线粒体染色传统的方法较多,如Altmann酸性复红法,Benda结晶紫法、Baker酸性氧化苏木素法及Heidenhain铁苏木精法等,这些都是较好的方法,但过程比较复杂,铁苏木精染色时间长,分色不易掌握。作者试用LuxoL快兰染线粒体效果特好,这是由于线粒体中蛋白质磷脂含量很高,有大量羟基、磷酸基负电子基团、与LuxoL快兰极易结合、故显示线粒体形态清晰、色泽分明,颜色经久不退,能较长期保存,整个技术过程简便。     

硬膜外注入亚甲蓝对腰椎脊髓及脊神经节结构的影响

背景:亚甲蓝可阻碍感觉神经的异常疼痛传导,其机制是阻断缓激肽诱导的痛觉过敏,消除局部组织炎症引起的痛觉过敏反应。目的:观察亚甲蓝溶液对大鼠腰椎脊髓及脊神经节功能的影响,明确亚甲蓝治疗椎间盘源性腰痛的安全性。方法:将120只Wistar大鼠随机分为5组,每组24只。暴露大鼠腰节段硬膜,亚甲蓝0.2 mL组、亚甲蓝1 mL组、亚甲蓝2 mL组分别于大鼠硬膜外注入相应量的亚甲蓝;生理盐水组大鼠硬膜外注入1 mL生理盐水;空白对照组不进行此步操作。分别在注入后30 min,2 h,24 h,72 h每组分别随机对6只大鼠进行灌流固定,并切除相应节段脊髓及神经节,行苏木精-伊红染色,在光镜下观察对比组织结构改变。结果与结论:亚甲蓝各组大鼠注入后30 min,2 h,24 h,72 h时间脊髓及神经根苏木精-伊红染色,显示脊髓背侧面结构完整,白质与灰质分界清晰,白质中神经纤维致密,纤维间有圆形或卵圆形的神经胶质细胞核;灰质后角神经纤维致密;神经元细胞,胞核圆形染色浅,核仁明显;细胞群间有成束的神经纤维。亚甲蓝各组大鼠腰椎脊髓及脊神经节与生理盐水组及空白对照组比较均无明显的组织结构变化。结果表明硬膜外注入1%亚甲蓝对脊髓及脊神经结构无明显影响。