扩张型心肌病IL－6及IL－1活性的初步研究

应用ＭＴＴ比色法及ＣｏｎＡ活化小鼠胸腺细胞增殖法检测了３０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者及２０例正常人（ＮＣ）的血清白细胞介素６（ＩＬ－６）、白细胞介素１（ＩＬ－１）的活性，结果发现ＤＣＭ患者ＩＬ－６及ＩＬ－１活性均明显高于ＮＣ组（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０１）。提示：ＩＬ－６及ＩＬ－１功能紊乱参与了ＤＣＭ的病理过程。     

应用RT—PCR技术检测糖尿病人外周血单个核细胞中IL—6mRNA的表…

为探索ＩＬ－６是否在ＩＤＤＭ的发病中起作用，本文报告了我们采用反转录聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对ＩＤＤＭ病人，ＮＩＤＤＭ病人，正常儿童正常成人四组受试者的外周血单个核细胞中的ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达水平初步研究。以内源性β２微球蛋白的ｍＲＮＡ作为内对照，与靶序列ＩＬ－６ｍＲＮＡ在同一管内同时反转录及扩增，以特异的ＰＣＲ产物产量之比ＩＬ－６／β２ｍ表示ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的相对水平，结果显示：在１２例     

人可溶性IL-6R基因在COS7细胞中的表达及活性分析

目的在ＣＯＳ７细胞中表达具有生物学功能的人可溶性ＩＬ－６Ｒ（ｓＩＬ－６Ｒ），作为研究ｓＩＬ－６Ｒ结构与功能关系的基础。方法首先利用ＰＣＲ技术扩增出人可溶性ＩＬ－６Ｒ（ｈｓＩＬ－６Ｒ）编码基因片段，并重组入克隆载体ｐＡＬＴＥＲ－１。通过基因序列分析确定了目的基因的核苷酸序列，并进一步构建了由ＳＶ４０晚期启动子和ＨＣＭＶ早期启动子控制的表达质粒ｐＳＶＬ６Ｒ和ｐＣＭＶ６Ｒ。用脂质体介导的方法将表达质粒转染ＣＯＳ７细胞，并分别在ｍＲＮＡ水平（斑点杂交）和蛋白水平（ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ）检测ｓＩＬ－６Ｒ基因在ＣＯＳ７细胞中的表达。在７ＴＤ１，ＬＴ１２两种ＩＬ－６反应细胞系上检测转染细胞上清（含ｓＩＬ－６Ｒ）的生物学活性。结果在ｍＲＮＡ水平和蛋白水平分别检测到ｓＩＬ－６Ｒ基因在ＣＯＳ７细胞中的表达，表达产物分子量约为５００００。表达产物在７ＴＤ１，ＬＴ１２细胞系上检测到明显的生物学活性。结论天然ｓＩＬ－６Ｒ基因在ＣＯＳ７细胞中的成功表达为进一步制备ｓＩＬ－６Ｒ突变体及其结构与功能关系的研究奠定了基础     

重型病毒性肝炎患者PBMCs中TNF—α,IL—1α和IL—4…

本实验应用半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测了８例急重肝，１３例亚急重肝和１６例慢重肝患者ＰＢＭＣｓＴＮＦ－α，ＩＬ－１α和ＩＬ－４ｍＲＮＡ的表达水平对其意义进行了探讨。结果表明，急重肝和亚急重肝患者ＰＢＭＣｓＴＮＦ－α和ＩＬ－αｍＲＮＡ的表达水平较正常人明显增高，且与内毒素血症和病情轻重相关，而慢重肝仅ＴＮＦ－αｍＲＮＡ略增高，提示ＴＮＦ－α和ＩＬ－１α在急重肝和亚急重肝的发病机理中可能起重要的作用，而在慢     

IL—1ra对佐剂性关节炎大鼠腹腔Mφ细胞因子诱生的抑制作用

研究了ＩＬ－１ｒａ对ＡＡ大鼠腹腔Ｍφ诱生细胞因子的调节机制进行了初步探讨。结果表明ＩＬ－１ｒａ能阻断ＩＬ－１刺激的亚适剂量ＰＨＡ诱导的胸腺细胞增殖，ＩＬ－１ｒａ能显著抑制正常及ＡＡ大鼠腹腔ＭφＩＬ－１，６，８，ＴＮＦ的产生，呈剂量依赖关系，ＩＬ－１ｒａ能显著下调腹腔ＭφＩＬ－８ ｍＲＮＡ表达。提示ＩＬ－１ｒａ是一种良好的抗炎制剂。     

扩张型心肌病IL—6及IL—1活性的初步研究

应用ＭＴＴ比色法及ＣｏｎＡ活化小鼠胸腺细胞增殖法检测了３０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者及２０例正常人（ＮＣ）的血清血细胞介素６（ＩＬ－６）、白细胞介素１（ＩＬ－１）的活性，结果发现ＤＣＭ患者ＩＬ－６及ＩＬ－１活性均明显高于ＮＣ组。提示：ＩＬ－６及ＩＬ－１功能紊乱参与了ＤＣＭ的病理过程。     

环核苷酸及［Ca~（2＋）］i介导β－内啡肽刺激大鼠巨噬细胞IL－1的分泌

本实验初步观察β－ＥＰ刺激ＩＬ－１分泌的第二信使，培养的大鼠腹腔巨噬细胞，分别加入β－ＥＰ（１）组、β－ＥＰ＋ＮＬＸ（２）组、β－Ｅｐ＋ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（３）组、β－ＥＰ＋亚甲兰（１）组、β－ＥＰ＋尼凡地平（５）组、β－ＥＰ＋ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ＋亚甲兰＋尼凡地平（６）组、主理盐水（７）组。２４ｈ后收集巨噬细胞及上清液检测有关指标，发现：第１组细胞内ｃＡＭＰ显著降低，ｃＧＭＰ、［Ｃａ￣（２＋）］ｉ明显升高，上清液呈强烈的ＩＬ－１活性；第２、６、７组细胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、［Ｃａ￣（２＋）］无明显变化，上清液无ＩＬ－１活性；第３、４、５组上清液们有较强的ＩＬ－１活性，而细胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ及［Ｃａ￣（２＋）］ｉ呈不同变化，提示：ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ及［Ｃａ￣（２＋）］ｉ可能是β－ＥＰ刺激巨噬细胞分泌ＩＬ－１的第二信使。     

IL-4对治疗前后亚急性重型病毒性肝炎患者PBMCs TNF-α和IL-1αmRNA表达的影响

目的　了解白介素（ＩＬ）４ 对重型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ） 中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α和ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达的影响。方法　ＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达水平采用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 进行检测。结果　ＩＬ４ 均以剂量依赖的方式抑制治疗前、后亚急性重型肝炎患者ＰＢＭＣｓ ＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达,在发病初期,ＩＬ４ 于１ ０００Ｕｍｌ 时接近最大抑制效应;而恢复期患者,ＩＬ４ 于１００Ｕｍｌ 时即接近最大抑制效应,剂量－ 反应曲线明显左移。如以１００Ｕｍｌ 的ＩＬ４ 处理ＰＢＭＣｓ,恢复期亚急性重型肝炎患者ＰＢＭＣｓ ＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ的抑制率接近５０％ 。另外还发现,在发病初期,ＩＬ４ 对内毒素血症和ＨＢｅＡｇ 阳性患者ＰＢＭＣｓＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ表达的抑制作用低于阴性的患者。结论　ＩＬ４ 对发病初期患者ＰＢＭＣＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ 表达的抑制作用明显低于恢复期患者,其原因可能与内毒素血症和病毒血症有关     

重组白细胞介素1对系膜细胞产生与表达白细胞介素6的影响

采用ＩＬ－６依赖型细胞株ＫＤ８与Ｎｏｒｔｈｅｍｂｌｏｔ方法观察了重组ＩＬ－１对人胎肾小球系膜细胞产生与表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ的影响，结果表明，重组ＩＬ－１加入系膜细胞培养体系中，ＩＬ－６活性与ｍＲＮＡ表达均明显高于对照组，提示重组ＩＬ－１可促进系膜细胞产生与表达ＩＬ－６。     

白细胞介素—1和阿片肽促进大鼠大脑皮层神经细…

对白细胞介素－１（ＩＬ－１）、脑啡肽、β－内啡肽及即刻早期基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ与癫痫发病机理的研究。结果显示ＩＬ－１、ＩＬ－１受体拮抗剂、β－内啡肽、抗β－内啡肽抗血清、亮－脑啡肽（ＬＥ）均能促进大脑皮层神经细胞ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ ｍＲＮＡ表达，但ＩＬ－１受体拮抗剂、抗β－内啡肽抗血清促ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ ｍＲＮＡ表达量明显低于ＩＬ－１、ＬＥ及β－内啡肽的作用，并能部分抑制后者的作用     

TLSF_（JM）对PMA诱导Jurkat细胞IL－2Rα链基因表达的抑制作用

本文应用原位杂交和双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ方法，探讨了来自ＪＭＴ细胞白血病细胞系产生的抑制因子（ＴＬＳＦ_（ＪＭ））对ＰＭＡ诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞ＩＬ－２Ｒα链基因表达的影响。结果表明：ＴＬＳＦ_（ＪＭ）可明显抑制ＰＭＡ诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞ＩＬ－２Ｒα链ｍＲＮＡ转录，并降低膜表面ＩＬ－２Ｒα链的表达和细胞培养上清中可溶性ＩＬ－２Ｒ（ｓＩＬ－２Ｒ）水平。     

白细胞介素－1和阿片肽促进大鼠大脑皮层神经细胞c－fos及c－jun mRNA表达

对白细胞介素－１（ＩＬ－１）、脑啡肽、β－内啡肽及即刻早期基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ与癫痫发病机理的研究。结果显示ＩＬ－１、ＩＬ－１受体拮抗剂、β－内啡肽、抗β－内啡肽抗血清、亮－脑啡肽（ＬＥ）均能促进大脑皮层神经细胞ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ表达，但ＩＬ－１受体拮抗剂、抗β－内啡肽抗血清促ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ表达量明显低于ＩＬ－１、ＬＥ及β－内啡肽的作用，并能部分抑制后者的作用；ＩＬ－１、β－内啡肽、ＬＥ促ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达在一定范围呈现量效关系；ＩＬ－１诱导ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ表达呈现时间效应关系，均为短暂表达。由于具有不同生物学效应的因子均能诱导不同程度ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ表达，提示它们对靶基因的调控具有正性及负性双向性，对神经细胞兴奋性产生不同作用。     

TLSFJM对PMA诱导Jurkat细胞IL—2Ra链基因表达的抑制作用

本文应用原位杂交和双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ方法，探讨了来自ＪＭＴ细胞白血病细胞系产生的抑制因子（ＴＬＳＦＪＭ）对ＰＭＡ诱导的Ｊｕｒｋａｔ细胞ＩＬ－２Ｒａ链基因表达的影响。结果表明：ＴＬＳＦＪＭ可明显抑制ＰＭＡ诱导的ｊｕｒｋａｔ细胞ＩＬ－２Ｒａ链ｍＲＮＡ转录，并降低膜表面ＩＬ－２Ｒａ链ｍＲＮＡ转录，并降低膜表面ＩＬ－２Ｒａ链的表达和细胞培养上清中可溶性ＩＬ－２Ｒ（ｓＩＬ－２Ｒ）水平。     

重型病毒性肝炎患者PBMCs中TNF-α、IL-1α和IL-4mRNA表达水平及其意义探讨

本实验应用半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测了８例急重肝、１３例亚急重肝和１６例慢重肝患者ＰＢＭＣｓＴＮＦ－α、ＩＬ－１α和ＩＬ－４ｍＲＮＡ的表达水平并对其意义进行了探讨。结果表明，急重肝和亚急重肝患者ＰＢＭＣｓＴＮＦ－α和ＩＬ－１αｍＲＮＡ的表达水平较正常人明显增高，且与内毒素血症和病情轻重相关，而慢重肝仅ＴＮＦ－αｍＲＮＡ略增高，提示ＴＮＦ－α和ＩＬ－１α在急重肝和亚急重肝的发病机理中可能起重要的作用，而在慢重肝的作用可能不是主要的。虽然三型重型肝炎患者ＩＬ－４ｍＲＮＡ的表达水平与正常人比较无显著差异，但急重肝和亚急重肝患者ＩＬ－４ｍＲＮＡ／ＴＮＦ－αｍＲＮＡ和ＩＬ－４ｍＲＮＡ／ＩＬ－１αｍＲＮＡ的比值均明显低于正常人，表明急重肝和亚急重肝患者炎症细胞因子和抗炎症细胞因子调节网络严重失调，ＩＬ－４水平相对低下可能是急重肝和亚急重肝患者ＴＮＦ－α和ＩＬ－１α异常增高的原因之一。     

IL—2对神经元NMDAR1m RNA表达和细胞内钙浓度的影响

Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体和细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的变化与神经元的兴奋性关系密切。本文报道以大鼠大脑皮层神经元为研究对象，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交并以Ｆｕｒａ－２作为Ｃａ２＋荧光指示剂，观察了外源性白细胞介素－２（ＩＬ－２）对ＮＭＤＡ受体１型亚单位（ＮＭＤＡＲ１）ｍＲＮＡ表达量及［Ｃａ２＋］ｉ的影响。结果显示：不同浓度的ＩＬ－２（１～２００Ｕ／ｍｌ）作用于原代培养的胚胎大鼠大脑皮层神经元６小时后其ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ表达量明显增加，并与ＩＬ－２浓度呈正相关关系。当其浓度为２５～２００Ｕ／ｍｌ时，ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ表达量增加４４．３％～２１９．７％（Ｐ＜０．０５）。ＩＬ－２（１～２００Ｕ／ｍｌ）与新生大鼠大脑皮层神经元共同孵育５～１０分钟后，［Ｃａ２＋］ｉ增加２７．１％～９４．２％（Ｐ＜０．０５）。钙通道阻断剂ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ可完全阻断ＩＬ－２引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，而ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＭＫ－８０１无此作用。本文结果提示：外源性ＩＬ－２具有兴奋性神经调质样作用，可能参与或介导了神经兴奋毒性作用和惊厥性疾病的发生与发展过程。     

IL－10mRNA在SLE患者外周血单个核细胞上的表达

采用随机引物标记法将ＩＬ－１０ｃＤＮＡ标记地高辛甙元（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）作为探针，用点杂交检测正常人和ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ表达ＩＬ－１０ｍＲＮＡ量，经图象分析和计算机处理发现ＳＬＥ患者ＩＬ－１０ｍＲＮＡ表达量明显高于正常对照组（０．３３５５±０．０９２／０．１３６２±０．０５３５；Ｐ＜０．００１）。同时我们用ＰＨＡ和ＬＰＳ体外激活正常人ＰＢＭＣ，发现激活的ＰＢＭＣ表达ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的量显著高于未经激活的对照组（０．４３８２±０．０７０７／０．１３６２±０．０５３５；Ｐ＜０．００１）。由此推论ＳＬＥ患者体内单个核细胞在体内已被激活，且通过产生ＩＬ－１０来调节患者免疫应答，这一作用可能与ＳＬＥ患者病情的发展有一定的关系。     

ICAM-1抗体诱导小鼠胸腺上皮细胞分泌IL-6

目的研究胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体对胸腺上皮细胞分泌ＩＬ－６的作用。方法用促ＩＬ－６依赖株增殖法检测ＩＬ－６活性，用原位杂交法检测ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达。结果不同的胸腺细胞亚群均能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，而且作用无明显差异。ＩＣＡＭ－１抗体能够促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其促进作用呈剂量依赖关系。放线菌酮预处理ＭＴＥＣ１以后，ＩＣＡＭ－１抗体和胸腺细胞均不再能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６。原位杂交证实，经胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体活化后，ＭＴＥＣ１表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ明显增多，并且表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ的ＭＴＥＣ１数量也增多。提示胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体能促进ＭＴＥＣ１合成新的蛋白和ｍＲ－ＮＡ。结论胸腺微环境内，胸腺细胞可以通过粘附分子与胸腺上皮细胞相互作用，并可促进胸腺上皮细胞分泌ＩＬ－６。     

大鼠脑缺血-再灌注损伤诱导IL-1β的表达

目的：研究脑缺血－再灌注损伤早期大鼠脑组织中ＩＬ－１β的表达及其与中性粒细胞浸润的关系。方法：应用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＩＬ－１βｍＲＮＡ,并用图象处理系统对正常、缺血及再灌注后不同时间的ＩＬ－１βｍＲＮＡ进行相对定量分析;采用ＭＴＴ和ＭＰＯ方法分别对大鼠脑组ＩＬ－１β的多肽活性及浸润的中性粒细胞进行检测。结果：单纯脑缺血ＩＬ－１β表达不增加;再灌注２ｈ,ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达量明     

乙型肝炎患者血清IL—6和IL—8的动态变化及意义

作者用ＥＬＩＳＡ检测１０８例肝炎患者发现：急性黄疸型，慢性活动型，重症型患者儿ＩＬ－６，ＩＬ－８均明显高于对照组，三型间的ＩＬ－６有明显差异，ＩＬ－８水平重症型明显高于急，慢性；ＩＬ－６，ＩＬ－８与ＡＬＴ呈明显正相关，ＨＢｅＡｇ（＋）组，ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）组较阴性组ＩＬ－６水平明显高，阳性转阴性者ＩＬ－６，ＩＬ－８水平明显下降，ＩＬ－６与ＩＬ－８呈明显正相关，表明：ＩＬ－６，ＩＬ－８参与乙型肝炎     

IFN—γ调节HHV—6诱导单核细胞产生IL—10和IL—12

为探讨人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）感染对单核／巨噬细胞功能的影响，用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＩＬ－１０及ＩＬ－１２的产生。ＨＨＶ－６诱导单核细胞、ＴＨＰ－１细胞表达及产生ＩＬ－１０和ＩＬ－１２。细胞因子ｍＲＮＡ动力学观察显示ＩＬ－１２随ＩＬ－１０ｍＲＮＡ积累而减少，用抗人ＩＬ－１０的单克隆抗体阻断ＨＨＶ－６诱导的内源性ＩＬ－１０，ＩＬ－１２ｍＲＮＡ表达和因子产生明显增加，提示内源性ＩＬ－１０抑制ＩＬ－１２产生。在ＨＨＶ－６感染培养中加入ＩＦＮ－γ，ＩＬ－１２基因表达随ＩＦＮ－γ浓度而增加，ＩＬ－１０ｍＲＮＡ测减少，ＩＬ－１２和ＩＬ－１０因子测定结果亦明显增加或降低，表明ＩＦＮ－γ在转录水平调节ＨＨＶ－６诱导的ＩＬ－１２和ＩＬ－１０产生，其机理可能主要与ＩＦＮ－γ抑制内源性ＩＬ－１０有关。