骨基质明胶诱导成骨活性的实验研究

实验将同种骨基质明胶（BMG）和脱钙骨基质DBM分别植入大鼠肌肉，以评价BMG的诱导成骨活性。术后2～20天X线摄片和光镜观察的结果显示，BMG骨诱导能力明显优于DBM。作者探讨了肌内诱导成骨的发生机制，BMG骨诱导能力较强的原因和新骨形成伴随有植入物吸收的意义。     

骨形态发生蛋白成骨机理及应用研究现状

在涉及骨和软骨发生的众多生长因子中，骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Protein，BMP)是唯一能单独诱导间充质细胞向骨组织方向分化的生长因子，是骨组织形成过程中最关键的调节因子。自1971年Urist首次将脱钙骨基质(DBM)中存在的具有诱骨活性的非特异性物质命名为BMP以来，人们对BMP的研究已有三十多年的历史，陆续有十多     

骨形态发生蛋白的基础研究及临床应用

自1965年最早利用脱钙骨基质在肌肉内诱发异位成骨后,人们在纯化脱钙骨移植物活性成分的过程中发现了骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)家族。此后,随着基因工程技术的广泛应用,骨诱导和BMP的研究日趋活跃,对其理化和生物学特性做了更深入的研究,BMP已证明是正常胚胎时期骨、牙组织内部骨和成年骨修复中最重要的诱导分化因子。这组蛋白质的发现,无论对基础生物学研究,还是对于临床应用都具有重要的价值。     

重组合异种骨在颌骨囊肿摘除术中的应用

重组合异种骨(reconstituted bone xenograft,RBX)是骨形成蛋白复合物,骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)是存在于骨基质中的一种低分子质量酸性多肽,可以刺激宿主间充质细胞转化为成骨细胞形成新骨,具有骨诱导作用[1]     

带血管骨膜中央包裹与DBM联合移植修复大段骨缺损的实验研究与临床初步应用

本文首次提出带血管骨膜中央包裹与同种脱钙骨基质（DBM）联合移植修复大段骨缺损的新方法。通过X线片、骨矿物质测定及组织学观察等手段,发现术后2周,中央包裹带血管骨膜区首先出现中央骨痂,4周时骨痂充满连接骨缺损,8周时骨髓腔再通,术后4周骨矿物质（BMC）测定明显地增高（P？0．01）。组织学观察带血管骨膜与同种DBM相互促进,使膜内成骨与软骨内成骨有机配合,从而大大加快了修复骨缺损的速度,中央部分包裹带血管的骨膜后,产生"中心爆炸式"的成骨方式,克服了大段骨缺损修复过程中中间难以修复这一棘手问题。通过实验,已…     

骨形态发生蛋白的骨诱导活性及其应用研究现状

早在 1 965年Urist[1] 报道了用脱钙骨基质可以异位诱导宿主的间充质细胞分化成新骨 ,这一实验结果提示在骨基质中可能含有一种活性蛋白质 ,具有使未分化的间充质细胞定向分化为成骨细胞并具有形成骨组织的能力 ,人们后来将它命名为骨形态发生蛋白 (bonemorphogeneticproteins,BMPs)。随着分子生物学在骨形成和损伤修复方面的研究进展 ,人们逐渐认识到了多种因子参与骨再建时的细胞增生、分化以及基质合成的调节 ,而在众多的骨生长因子中 ,BMPs最受瞩目 ,与骨诱导的关系最为密切[2 ] ,同时是胚胎时期重要的诱导分化因子之一。这种蛋白质…     

胎儿脱钙骨的制作及临床应用

胎儿脱钙骨 (以下简称脱钙骨 )是指利用一定的技术处理使胎儿的躯干及四肢骨脱钙 ,并降低抗原性 ,成为可被利用的同种异体骨 ,用以替代自体骨移植。我们自 1995年起初步建立了脱钙骨骨库并在临床上应用了 15例 ,疗效满意 ,现报告如下。材料与方法一、脱钙骨的来源　全部脱钙骨取自于本院产科引产的胎儿 ,选择胎儿的标准是 :(1)胎儿必须在孕 6个月以上 ,且引产时间均在 12小时以内。 (2 )采用水囊或米索引产法。 (3)母体必须没有感染病史。 (4 )母体没有肝炎、结核、梅毒、艾滋病、肿瘤及代谢病病史。 (5 )母体没有药物中毒史。自 1995年以来…     

腺病毒介导hBMP-2转染BMSCs复合DBM修复兔缺血性股骨头坏死的实验研究

摘要： 目的 评价人骨形态发生蛋白（hBMP） -2/骨髓间充质干细胞（BMSCs）/脱钙松质骨（DBM）对兔股骨头坏 死的修复作用, 探索临床治疗股骨头坏死的新途径。方法 髓芯减压联合液氮冰冻法制备兔股骨头坏死模型。将 造模成功兔随机分为 A、 B、 C、 D 4 组(n=12), A 组不植入材料, 为对照组, B、 C、 D 分别植入 DBM、 DBM/BMSCs、 hBMP- 2/BMSCs/DBM。术后 4、 8 及 12 周各组分别处死 4 只, 运用 X 线技术、 大体标本观察、 HE 染色技术评判股骨头坏死 修复情况。结果 X 线示 A 组股骨头塌陷, 无明显成骨; B、 C、 D 组股骨头缺损区有骨再生现象, 但 D 组再生情况明 显优于 B、 C 组。Lane-Sandhu X 线评分 A 组B、 C 组>D 组 （P < 0.05), B 和 C 组差异无统计学意义。结论 hBMP-2/BMSCs/DBM 植入体内后能 够诱导 BMSCs 向成骨方向分化, 对兔股骨头坏死具有较好的修复效果。     

同种异体半脱钙骨修复骨缺损27例报告

为评价同种异体半脱钙骨修复骨缺损的效果，对27例骨肿瘤或瘤样病变手术后骨缺损用同种异体半脱钙骨修复进行1～13年随访观察，其中5例缺损长度超过5cm。结果证实其骨诱导能力较强，充填后支架作用好，无排异现象。本文认为半脱钙骨是一种较理想的骨缺损充填修复生物材料。     

微波-EDTA脱钙技术在免疫组织化学染色中的应用研究

目的探讨微波(MW)-乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响.方法根据实验条件将待脱钙组织分为4组,即MW-EDTA(15℃),Jenkins脱钙-固定液(20℃),10%EDTA(20℃)和10%硝酸(20℃),其中MW-EDTA方法中EDTA的浓度分别是4%、7%、10%、13%和16%.应用免疫组织化学LSAB染色,光镜观察免疫组织化学染色结果.结果MW-EDTA脱钙的免疫组织化学染色阳性细胞显著高于Jenkins脱钙-固定液(20℃)、10%ED-TA(20℃)及10%硝酸脱钙(20℃)3种脱钙方法,其时间明显缩短.其中用10%和13%浓度的EDTA脱钙的组织,其免疫组织化学染色阳性细胞又明显多于EDTA浓度为4%、7%和16%者.结论以MW-10%EDTA技术进行组织脱钙,其脱钙时间短、免疫组织化学染色效果好.     

异种异体骨基质明胶的实验研究及应用

骨基质明胶(Bone Matrix Gelatin,BMG)是在脱钙骨的基础上,用连续化学处理的方法制备而成。它不仅在活体组织内具有较强的诱导成骨能力,而且用于体外培养时,也能诱导培养的肌肉组织生成软骨组织~[1]。目前,有关异种异体BMG的报道甚少,现将我们的实验研究和临床应用报告如下:1动物实验方法及结果1.1牛骨基质明胶(bBMG)的制备:取新鲜牛的胫骨和股骨干,除去干骺端、骨髓和附着的软组织,用蒸馏水洗净,液氮浸泡10分钟,即用粉碎机粉碎成lmm~(3)。大小的颗粒,然后经过以下处理t①室温下用1:1氯仿甲醇浸泡48小时;②水洗;③沉淀物在2℃下,0.6mol/L HCI24小时;④水洗pH中性;⑤2℃下,0.6mol/L CaCl 12小时;⑥水洗;⑦2℃下,0.5mol/L EDTAl2小时;⑨水洗;⑨2℃下,8mol/L IACll2小时;⑩水洗;⑨其沉淀物室温下自然干燥,用环氧乙烷气体消毒24小时后,放入2-10℃冰箱内贮存备用。上述水洗均用无菌蒸馏水。     

微波-EDTA脱钙技术在免疫组织化学染色中的应用研究

目的探讨微波(MW)—乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法根据实验条件将待脱钙组织分为4组，即MW—EDTA(15℃)，Jenkins脱钙-固定液(20℃)，10％EDTA(20℃)和10％硝酸(20℃)，其中Mw—EDTA方法中EDTA的浓度分别是4％、7％、10％、13％和16％。应用免疫组织化学路AB染色，光镜观察免疫组织化学染色结果。结果MW—EDTA脱钙的免疫组织化学染色阳性细胞显著高于Jenkins脱钙—固定液(20℃)、10％ED—TA(20℃)及10％硝酸脱钙(20℃)3种脱钙方法，其时间明显缩短。其中用10％和13％浓度的EDTA脱钙的组织，其免疫组织化学染色阳性细胞又明显多于EDTA浓度为4％、7％和16％者。结论以Mw—10％EDTA技术进行组织脱钙，其脱钙时间短、免疫组织化学染色效果好。     

自身骨髓注射治疗胫骨骨折不愈合20例的护理

胫骨骨折不愈合患者较多,以往通常采用自体髂骨植骨或脱钙骨基质植入处理,虽有一定疗效,但需二次手术及破坏局部血液循环,尤其是骨不连部位软组织条件差,不具备植骨条件时,治疗将更加困难。我们从2000年元月至2003年元月采用自身骨髓注射来代替传统的治疗方式,不仅避免了二次手术,而且操作简便有效,取得了较好的临床效果,报告如下     

补订、续订启事

胫骨骨折不愈合患者较多，以往通常采用自体髂骨植骨或脱钙骨基质植入处理，虽有一定疗效，但需二次手术及破坏局部血液循环，尤其是骨不连部位软组织条件差，不具备植骨条件时，治疗将更加困难。我们从2000年元月至2003年元月采用自身骨髓注射来代替传统的治疗方式，不仅避免了二次手术，而且操作简便有效，取得了较好的临床效果，报告如下。     

丹蛭降糖胶囊通过LncRNA TUG1/β-catenin信号通路保护线粒体功能减轻血管钙化的机制

目的 血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)成骨样分化是血管钙化(vascular calcification, VC)细胞学基础。线粒体功能障碍在VSMCs成骨样转化中起重要作用。本研究旨在探讨丹蛭降糖胶囊(Danzhi Jiangtang capsules, DJC)通过调节LncRNA TUG1/β-catenin信号通路保护VSMCs线粒体功能减轻血管钙化的机制。方法 使用β-甘油磷酸盐来诱导血管平滑肌细胞的钙化模型,并采用维生素D₃+高脂饲料来诱导糖尿病大鼠的血管钙化模型。Von Kossa染色检测细胞和血管组织钙化;用邻甲酚酞络合物比色法测定钙含量;采用对硝基苯磷酸盐比色法测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性;采用RT-qPCR分析VSMCs成骨样转化相关基因骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein2,BMP2)、平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin alpha,ɑ-SMA)及长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(long n...     

卡托普利抗小鼠维甲酸性骨质疏松的作用探讨

目的　观察不同剂量卡托普利对抗小鼠维甲酸性骨质疏松的量效关系 ,探讨卡托普利抗骨质疏松的骨代谢作用特点及骨药理学作用机制。方法　用维甲酸 (10 5mg·kg-1)造成小鼠骨丢失为主的骨质疏松模型 4组 ,同时其中 3组再用 3种剂量卡托普利分别给药 ,实验过程监测体重 ,2wk后处死取肝、脾、胸腺称重 ,并取股骨进行骨干重、骨钙、磷、镁、锌、锰、硫及骨羟脯氨酸 (B HOP)的测定和比较。结果　维甲酸可造成小鼠骨丢失为主的骨质疏松 ,卡托普利可对抗维甲酸所致的小鼠骨横短径、骨基质的主要成分骨羟脯氨酸及骨矿物质的减少。结论　卡托普利可对抗维甲酸引起小鼠以骨钙、磷、镁和骨羟脯氨酸丢失为主的骨质疏松 ,其中尤以低剂量卡托普利 (6 2 5mg·kg-1)作用最显著     

复合型生物衍生组织工程骨的制备及其理化特性

目的 我们用物理化学方法处理自制的天然生物衍生骨支架材料一犬脱抗原松质骨(AECB)，并复合具有成骨活性的骨形态发生蛋白(BMP)和具有成血管作用的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)，制成复合型生物衍生组织工程骨。测其理化性质及力学强度，为组织工程研究提供可供选择的植骨材料。方法 将犬松质骨进行一系列理化处理，制成脱抗原松质骨，用化学方法分析其组成成分，用扫描电镜观察其形貌特征，用X线能谱仪测定其钙／磷比值，并对材料的力学性能进行分析测定，然后用物理方法在材料上复合BMP和bFGF，再用扫描电镜观察其复合情况。结果 犬脱抗原松质骨脱钙及有机质洗脱行之有效，保持原骨天然网状孔隙系统及一定力学强度，并且BMP和hFGF能与其有效结合。结论 犬脱抗原松质骨／BMP／bFGF有望为骨缺损、骨坏死的治疗开辟一条新途径，尚需要检测其免疫原性及成骨、成血管能力。     

牛骨形态发生蛋白的提取及诱骨活性的研究

骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein, BMP)存在于各类动物骨基质中,为一种低分子量酸性糖基化多肽,分子量20kDa左右。可诱导未分化的间质细胞分化成软骨细胞,继而形成骨细胞。它能跨种属诱导成骨,且无排异反应,这为从动物骨中提取BMP应用于临床治疗骨缺损及骨不连等疾病提供了一条重要途径。本研究的目的是寻找较简便的提取方法,并能纯化出具有较高诱骨活性的bBMP。     

光波-微波-硝酸快速脱钙技术对骨组织免疫组织化学染色的影响

目的:探讨光波微波硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法:用8%硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波微波组合Ⅰ和光波微波组合Ⅱ条件下脱钙,同时以室温脱钙作为对照;应用标记的链霉菌素卵白素生物素(LSAB)免疫组织化学(免疫组化)染色技术检测不同脱钙条件下心钠素(ANP)、5羟色胺(5HT)、S100、神经微丝蛋白(NF)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理。结果:8%硝酸室温脱钙时间最长,光波微波组合脱钙时间最短;微波组、光波组、光波微波组合Ⅰ组、Ⅱ组的免疫组化染色均明显比对照组好(P<0.01);光波微波组合Ⅰ组、Ⅱ组均明显好于单纯微波组(P<0.01)或单纯光波组(P<0.01);光波微波组合Ⅰ组与Ⅱ组,单纯光波组与单纯微波组之间的免疫组化染色无显著差异(P>0.05)。结论:光波微波硝酸脱钙所用时间比室温常规脱钙、单纯光波、微波脱钙时间明显缩短,免疫组化染色效果最好。     

维甲酸致小鼠骨质疏松模型的量效关系及骨药理作用探讨

目的　观察不同剂量维甲酸致小鼠骨质疏松的量效关系 ,探讨维甲酸性骨质疏松的的骨代谢作用特点及骨药理学作用机制。方法　用 3种剂量维甲酸造成小鼠骨丢失为主的骨质疏松模型 ,监测体重 ,2wk后处死小鼠 ,取肝、脾、胸腺称重 ,并取股骨进行骨干重、骨钙、磷、镁、锌、锰、硫及骨羟脯氨酸 (B HOP)的测定和比较。结果　不同剂量维甲酸均分别致小鼠骨干重减少 ,骨横短径减少 ,骨基质的主要成分骨羟脯氨酸 (HOP)减少 ,骨矿物质也有不同程度的减少 ;骨HOP及骨钙的减少与骨干重的比值密切相关 ,但骨磷、镁、锌的减少呈非等比例性减少 ,尤以骨锌明显。结论　维甲酸 3种剂量均可引起小鼠以骨量丢失为主的骨质疏松 ,并呈量效关系 ,其特征是骨钙及骨羟脯氨酸等比例性丢失 ,早期以骨磷、镁、锌的明显丢失为主 ,骨锌在维甲酸致骨质疏松模型中可能发挥重要作用