荧光定量PCR检测石蜡组织中结核杆菌的临床应用

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测石蜡包埋组织结核分枝杆菌DNA（TB—DNA）在结核病诊断中的应用价值。方法33例石蜡包埋组织标本采用FQ—PCR技术检测TB—DNA,同时进行组织病理学检查,分别计算FQ—PCR和病理学检查的灵敏度和准确度。结果29例临床诊断为结核病的组织标本中,FQ—PCR检测阳性26例,病理学拟诊为结核阳性20例,4例临床诊断非结核病的标本中,FQ—PCR检测和病理学检查都为阴性,两者的灵敏度和准确度分别为89．66％、90．91％和68．97％、72．73％。结论FQ—PCR技术检测石蜡包埋组织的TB—DNA用于结核病的诊断具有较高的灵敏度和准确度,与病理学检查相结合可以大大提高结核病的检出率。     

荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌的价值

目的分析使用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测结核分支杆菌的应用价值。方法收集首都医科大学附属北京同仁医院临床各科室各类结核病或疑似结核病患者检测标本178例,使用FQ-PCR法进行结核分枝杆菌脱氧核糖核酸检测,标本同时进行抗酸染色显微镜下观察。结果 FQ-PCR法和抗酸染色涂片法对不同来源标本检测结核分枝杆菌的结果存在较好的一致性(Kappa=0.615,P<0.01)。使用FQ-PCR法检测结核分枝杆菌的阳性检出率为12.9%,抗酸染色涂片法的阳性检出率为6.2%,二者比较差别有统计学意义(χ2=4.682,P<0.05)。结论 FQ-PCR法检测标本中的结核分枝杆菌的灵敏度高于传统的抗酸染色涂片法,可作为结核病病原学诊断的优先方法。     

PCR诊断肾结核的价值

应用ＰＣＲ技术检测１９例疑为肾结核者尿结核杆菌，并与细菌学方法作比较。结果，ＰＣＲ检测检出阳性率比镜检细菌阳性率高２２％。ＰＣＲ（＋）者抗结核治疗有效。说明ＰＣＲ对确诊肾结核有价值。     

实时荧光定量PCR在结节病与不典型结核鉴别诊断中的临床应用

目的验证和评价实时荧光定量PCR（polymerase chain reaction）的方法检测结核分枝杆菌DNA在结节病与不典型结核病鉴别诊断中的实际应用价值。方法以2008年6月至2009年6月期间,经病理活检证实为肉芽肿性疾病,但无法确定为结节病或结核病的49例患者为研究对象。运用我科前期建立的实时荧光定量PCR的方法检测上述患者石蜡包埋病理组织标本中的结核分枝杆菌DNA（Tuberculosis polymerase chain reaction,TBPCR）,以1.14×10~3拷贝/ml作为鉴别结节病与不典型结核病的最佳cutoff值,结合临床、影像、病理和其他检查结果帮助临床鉴别诊断并指导用药。随访所有患者至2009年8月1日,通过临床表现、影像学、治疗效果等变化来验证和评价本方法的实际应用价值。结果 49例患者定量TB-PCR结果中,10例患者结核分枝杆菌DNA为阳性（2.01×10~3～7.98×10~4拷贝/ml）（阳性率20.41%）,39例为阴性。结合患者临床资料及TB-PCR结果确定诊断,33例为结节病,2例结核病,诊断明确率达到72%（35/49）。诊断明确患者治疗后随访（2～14个月）,33例结节病和2例结核病患者经相应治疗均达到稳定或不同程度好转,无1例出现病情恶化。结论实时定量PCR法检测石蜡包埋组织中结核菌DNA能灵敏而高效地检出不典型结核病肉芽肿中的结核杆菌DNA,可作为鉴别结节病和不典型结核病的有效方法之一。     

实时荧光定量PCR法分析结核分枝杆菌耐药性的价值观察

目的 探究实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法在结核分枝杆菌(MTB)耐药性中的应用价值.方法 选择2018年10月至2020年11月我院收治的结核病患者84例,采用FQ-PCR法分析,以罗氏药敏比例法作为检测MTB耐药性的"金标准",分析FQ-PCR法在MTB耐药性中的应用价值.结果 FQ-PCR法分析MTB耐...     

实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌在结核性脑膜炎诊断中的价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测结核分枝杆菌在结核性脑膜炎诊断中的价值。方法对181例临床确诊的结核性脑膜炎患者、可疑结核性脑膜炎患者和非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本采用涂片、实时荧光定量PCR 2种方法进行检测,对其结果进行对比分析。结果 181例脑脊液标本中,脑脊液涂片检测阳性率为2.21%(4/181),PCR检测阳性率为12.15%(22/181);脑脊液涂片、PCR法检测51例临床确诊的结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为5.88%(3/51)和25.49%(13/51);检测80例临床可疑结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为1.25%(1/80)和11.25%(9/80),2种方法的阳性检测率比较差异有统计学意义(χ2=10.654,P<0.05)。50例非结核性脑膜炎患者脑脊液标本涂片及PCR检测均为阴性。结论实时荧光定量PCR法检测结核分枝杆菌具有较高的临床价值,可作为临床结核病检测诊断的有效方法之一。     

荧光定量聚合酶链反应检测脑脊液中结核分枝杆菌DNA对鉴别诊断结核性脑膜炎的应用价值分析

目的 探究荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）检测脑脊液中结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）DNA对鉴别诊断结核性脑膜炎（tuberculous meningitis,TBM）的应用价值。方法 选择2019年7月—2021年6月于安陆市普爱医院就诊的存在脑膜刺激征的80例患者作为研究对象,所有患者均经MTB培养后明确诊断,将确诊为TBM的37例患者分入脑膜炎组,疑似TBM的18例患者分入疑似组,非TBM的25例患者分入非TBM组,对3组患者行腰椎穿刺,留取5 m L脑脊液及时送检,分别行MTB培养法、抗酸染色涂片法、荧光定量PCR检测。对比3种检测方法在MTB中的阳性检出率,对比脑膜炎组与疑似组患者MTB的DNA检测数值。结果 脑膜炎组应用荧光定量PCR检测MTB的阳性检出率高于疑似组,差异有统计学意义（P<0.05）;脑膜炎组与疑似组采用MTB培养法、抗酸染色涂片法的MTB阳性检出率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。脑膜炎组患者MTB的DNA检测数值为（4.71±0.97）,疑似...     

荧光定量PCR检测HBV-DNA的临床价值

目的:检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA拷贝数,以探讨乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)与血清免疫标志物的关系。方法:荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清样本中HBV-DNA含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV血清标志物(HBVM)。结果:在HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)组(大三阳组)患者血清HBV-DNA阳性率为97.63%(371/380),平均拷贝数为1.86×107/ml;HBsAg(+)HBeAg(+)组HBV-DNA阳性率为95.65%(22/23),平均拷贝数为1.75×107/ml;HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)组(小三阳组)患者血清HBV-DNA阳性率为43.68%(83/190),平均拷贝数为4.85×105/ml;HBsAg(+)HBcAb(+)组血清HBV-DNA阳性率为82.22%(37/45),平均拷贝数为2.17×105/m1;小三阳及HBsAg(+)HBcAb(+)组HBV-DNA阳性检出率及拷贝数均低于大三阳及HBsAg(+)HBeAg(+)组,与之比较均具有显著性差异(P<0.05);HBVM全阴性组HBV-DNA检出率为1.78%(2/112),平均拷贝数为1.48×105/ml。结论:荧光定量PCR在乙肝的诊断、判断传染性强弱及评价抗病毒治疗效果方面具有较大的临床应用价值。     

荧光定量PCR法在结核杆菌检测中的价值

目的探讨荧光定量PCR法检测技术在结核病诊断中的价值。方法采用荧光定量PCR法和抗酸染色法同时检测231例结核患者体液标本(121例痰标本、67例胸腹水及43例尿液标本),对检测结果进行比较。结果荧光定量PCR法的检测灵敏度为102Copy/ml,是抗酸染色法方法检测灵敏度100倍,且对除结核杆菌外的其他呼吸道病原体检测结果均为阴性。本研究痰标本、胸腹水标本及尿液标本的荧光定量PCR法阳性率均要高于抗酸染色法阳性率,比较差异均有显著性(﹤0.01)。结论荧光定量PCR方法检测结核杆菌具有特异性强、灵敏度高、简便、快速的特点,明显优于抗酸染色法,可作为结核病诊断的常规方法。     

结核分枝杆菌的荧光定量PCR快速诊断

目的传统的结核分枝杆菌鉴定方法敏感性差、鉴定时间长,影响诊断和治疗,本研究为克服传统方法的缺点,建立特异、敏感、快速的结核分枝杆菌检测方法。方法应用荧光定量PCR技术检测疑似结核病病人痰液中的特异性DNA片段,以达到对结核病病人的快速诊断。结果 PCR结果显示7例疑似结核病病人的痰液标本中检出目的基因片段,证明7例病人均为结核病病人。结论所建立方法可用于结核分枝杆菌的快速诊断。     

荧光定量PCR在结核分枝杆菌耐药性检测中的应用价值

目的 探究和分析荧光定量PCR检测技术在结核分枝杆菌耐药性检测方面的价值。方法 随机选取苏州市第五人民医院门诊或者住院病人的痰培养阳性标本菌株,并提取核酸。应用荧光定量PCR扩增试剂盒对菌株标本的链霉素、利福平、异烟肼、乙胺丁醇、阿米卡星以及莫西沙星的耐药情况进行检测分析,并将检测结果与传统的罗氏药敏比例法进行比对分析。结果 与罗氏药敏比例法相比较,荧光定量PCR检测法对链霉素、利福平、异烟肼、乙胺丁醇、阿米卡星以及莫西沙星的耐药检测符合率分别为90.48%、82.14%、83.33%、88.09%、89.29%、89.28%。Kappa检验结果显示,两种方法对链霉素的检测结果一致性较高,Kappa值为0.815;对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、莫西沙星的检测结果一致性一般,Kappa值分别为0.637、0.631、0.623、0.578;对阿米卡星的检测结果一致性较差,Kappa值为0.279。结论 荧光定量PCR检测技术对于结核分枝杆菌耐药性的快速检测均有很好的应用价值,对于临床上的精准用药具有一定的指导意义。     

荧光定量PCR技术测定HBV—DNA中的临床应用

2007年1月～2008年12月门诊与住院病人及外单位送来的血清4384份。其中门诊病人血清2255份，住院病人血清1968份，外单位送来的血清161份。     

HCV-RNA实时荧光定量的临床价值

目的评价实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-RT-PCR)检测丙型肝炎病毒(HCV-RNA)在临床中的应用价值。方法用RFQ-RT-PCR检测325例肝炎病人标本,并同时采用ELISA检测抗-HCV,了解样本中HCV-RNA含量与抗-HCV的相关性。结果325份标本中有15例HCV-RNA含量高于1000拷贝/ml,18例抗-HCV阳性。经统计分析,两者有明显的相关性。结论RFQ-RT-PCR技术检测HCV-RNA特异性强,灵敏度高,具有良好的应用价值。     

荧光定量PCR检测脊柱结核伴截瘫患者手术前后外周血结核杆菌DNA含量及临床意义

目的探讨脊柱结核并截瘫患者提早手术的安全性。方法应用荧光定量聚合酶链反应技术,对22例一般情况稳定,术前抗痨治疗小于2周,红细胞沉降率(ESR)未降至正常且伴有截瘫或截瘫呈进行性加重的脊柱结核患者,分别在手术前1 d及术后第2天采集外周血标本。通过提取DNA、PCR扩增,进行结核分支杆菌的DNA荧光定量检测。结果该组脊柱结核手术患者术前的外周血中结核分支杆菌DNA阳性率为9/22(40.9%),术后患者的外周血中结核分支杆菌DNA阳性率分别为10/22(45.4%)。对该组手术患者手术前、后外周血结核分支杆菌DNA含量进行统计学分析,t=0.702,P=0.494,按α=0.05水准,结果无统计学意义,提示该组手术患者手术前、后外周血结核分支杆菌DNA含量无差别(P>0.05)。结论手术对这类脊柱结核患者结核杆菌在体内播散的程度没有明显影响;对于这类脊柱结核患者,尽管术前ESR未降至正常,且抗痨时间小于2周,在完善相关术前准备、无其他手术禁忌的情况下,提早手术治疗,是安全、可行的。     

荧光探针定量PCR在检测HBV-DNA的应用

目的　用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)方法准确地定量检测血清中的HBV DNA数量和免疫指标 ,以指导临床。方法　用FQ PCR方法和酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法分别检测 184份临床血清标本的HBVDNA和免疫指标。结果　用 (ELISA)作对照 ,经FQ PCR检测 ,HBeAg(+)组 (82份 )的阳性率为 10 0 % ,HBV DNA阳性拷贝数范围在 10 5～ 10 10 /ml;HBeAb(+)组 (5 2份 )的阳性率为 5 5 8% ,HBV DNA阳性拷贝数范围在 10 4～ 10 7/ml;HBsAb(+)组 (2 0份 )的阳性率为 15 % ,HBV DNA阳性拷贝数范围在 10 4～ 10 5/ml;对照组 (30份 )的阳性率为 0。HBeAg(+)组血清中HBV DNA含量 (10 7 2± 1 13 )显著高于HBeAb(+)组 (10 5 8± 1 4)和HBsAb(+)组 (10 4 67± 0 58)。结论　FQ PCR检测HBV DNA具有较高的灵敏度和特异性 ,且能准确定量 ,FQ PCR可以检测HBV的真实感染和复制情况 ,对乙型肝炎临床诊断 ,治疗及疗后观察有重要意义。     

FQ-PCR检查痰中结核杆菌对肺结核诊断的临床价值

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测痰中结核分枝杆菌对诊断肺结核的临床价值。方法选择2007年4月～2010年1月在我院感染科治疗的100例确诊肺结核患者和100例非结核性呼吸道疾病患者,所有患者均分别用FQ-PCR、痰涂片和Bactec MGIT 960结核杆菌快速培养法进行痰结核杆菌检测,比较分析检测结果。结果检测100例确诊肺结核患者的痰标本,FQ-PCR检出率最高(55%),高于快速培养法(43%)(P<0.05)和痰涂片法(29%)(P<0.01)。以痰培养为标准,FQ-PCR对痰菌检测的敏感性、特异性、阳性预期值、阴性预期值分别为97.8%、93.5%、80.0%和99.3%;FQ-PCR与痰培养法的一致性为94.0%(188/200)。结论FQ-PCR是检查痰中结核杆菌快速、敏感、特异、可定量、简便的方法,值得临床推广用于肺结核诊断,可作为结核杆菌培养法的有效补充。     

荧光定量PCR在丙型肝炎病毒感染检测中的应用

目的　观察荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)在丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus ,HCV )感染检测中的临床应用情况。方法　用FQ PCR检测 3 15份怀疑HCV感染的临床血清标本 ,并同时采用酶联免疫吸附测定法 (ELISA)检测抗HCV ,用生化仪测定血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)水平 ,了解样本中HCV RNA含量与抗HCV及ALT的相关性。结果　 3 15份标本中有 2 2 5份HCV RNA含量高于 80拷贝·ml-1,2 5 0份抗HCV阳性 ,14 5例ALT异常 ,HCV RNA含量与抗HCV阳性率间有显著的相关性 (r =0 .682 ,P =0 .0 0 2 ) ;HCV RNA含量与ALT异常率间也有显著的相关性 (r =0 .92 3 ,P =0 .0 3 2 )。结论　FQ PCR技术检测HCV RNA特异性强 ,灵敏度高 ,具有良好的临床应用价值。     

荧光定量PCR分析法在结核病诊断中的应用

目的 探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测结核分枝杆菌的临床应用。方法 采用FQ-PCR技术检测145例标本，并与培养法、抗酸染色法和PCR-电泳法进行比较。结果 在115例来自结核病人的高度怀疑有结核分枝杆菌的标本中，FQ-PCR法检出阳性为53例，其检出率高于PCR-电泳法检出率(48／115)、培养法检出率(43／115)和抗酸染色法检出率(31／115)，30例非结核病病人标本，四种方法均未检出结核分枝杆菌。FQ-PCR法的阳性检出最低值为10^3拷贝／ml，PCR-电泳法为10^4拷贝／mL。结论 FQ-PCR技术是高度灵敏、高度特异的快速定量检测结核分枝杆菌方法。     

荧光定量PCR检测痰结核分枝杆菌DNA的应用价值

目的:评价荧光定量PCR技术在痰结核分枝杆菌DNA检测中的应用价值,为临床检测提供依据。方法:对2011年7月-2013年8月在我院住院治疗的78例结核病患者,采取荧光定量PCR、抗酸菌涂片染色和改良罗氏培养三种方法对患者的同一份痰标本进行检测,比较分析检测差异。结果:荧光定量PCR检测痰结核分枝杆菌的效果明显优于抗酸菌涂片染色和改良罗氏培养检测,荧光定量PCR检测的阳性率最高,为73.1%。结论:应用荧光定量PCR技术检测痰结核分枝杆菌DNA操作简单、诊断快捷、灵敏度较高,可作为结核病的常规诊断方法,值得在临床推广应用。