桧木醇诱导人肾透明细胞癌786-O细胞凋亡及其机制研究*

目的:探讨桧木醇（hinokitiol ）对人肾透明细胞癌786-O细胞株的增殖抑制作用及诱导凋亡效应,初步阐明其机制。方法:采用CCK-8 法检测桧木醇对肾癌786-O细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡情况;转染EGFP-LC3 后镜下观察细胞自噬状态;采用Western blot对细胞Caspase- 3 剪切体、LC3 和P62蛋白表达量进行检测。结果:桧木醇可以显著抑制肾癌786-O细胞增殖,通过激活Caspase途径诱导细胞凋亡。桧木醇诱导肾癌786-O细胞发生自噬,LC3 蛋白表达显著上调,而P62蛋白表达下调。结论:桧木醇可显著抑制肾癌786-O细胞的增殖并通过过度激活细胞自噬促进肾癌细胞凋亡。      

桧木醇激活膀胱癌J82细胞自噬诱导细胞凋亡

背景与目的：膀胱癌是我国最常见的泌尿系统恶性肿瘤,近年来发病率逐年上升,严重威胁着人类的健康。本研究旨在探讨桧木醇对人膀胱癌J82细胞增殖、凋亡及自噬的作用,并初步阐明其作用机制。方法：采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,采用流式细胞术检测细胞的凋亡状态,采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测cleaved caspase 3、LC3及P62蛋白的表达,转染EGFP-LC3后在激光共聚焦显微镜下观察细胞自噬状态。结果：桧木醇能够显著抑制J82细胞的增殖活力,通过激活caspase途径诱导肿瘤细胞凋亡,Z-VAD-FMK能够部分抑制桧木醇的凋亡诱导作用。桧木醇能够激活J82细胞发生自噬,上调LC3蛋白的表达,下调P62蛋白的表达。3-MA抑制自噬之后能够部分逆转桧木醇的抗肿瘤作用。结论：桧木醇可以显著抑制J82细胞增殖并通过过度激活自噬促进膀胱癌细胞凋亡。     

自噬介导葫芦素E对乳腺癌细胞Bcap-37的细胞毒作用北大核心CSCD

目的研究葫芦素E(Cucurbitacin E,Cu E)或Cu E联合自噬抑制剂氯喹(Chloroquine,CQ)对乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响,并探讨其分子机制。方法 MTT法检测乳腺癌Bcap37细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测LC3-Ⅰ/Ⅱ、P62蛋白表达。透射电子显微镜检测自噬溶酶体形成。结果 Cu E通过诱导凋亡显著抑制Bcap-37增殖。经Cu E处理的Bcap-37细胞中自噬特异性标志物LC3-Ⅱ表达增高,而LC3-Ⅰ、P62表达降低。细胞内自噬溶酶体形成。结论 Cu E可诱导Bcap-37细胞凋亡及细胞保护性自噬。抑制自噬可增加Cu E对Bcap-37的细胞毒性。     

羟喜树碱通过诱导自噬抗宫颈癌的机制研究

目的探讨抗肿瘤药物羟喜树碱(HCPT)对宫颈癌HeLa细胞作用的机制。方法 CCK8检测Hela细胞增殖,Western blot检测自噬和凋亡相关蛋白的表达,GFP-LC3 shRNA转染和Hoechst染色后,荧光显微镜下观察细胞自噬特异小体量的改变以及凋亡形态学的变化。结果 HCPT抑制Hela细胞生长呈浓度依赖性(P<0.05),IC503μmol/L HCPT作用Hela细胞后,自噬相关蛋白Beclin1、p62的表达以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值发生改变,差异有显著性意义(P均<0.05);凋亡相关蛋白Bax、cleaved caspase-3、Bcl-2表达也发生明显改变(P均<0.05);荧光显微镜下观察Hela细胞带有GFP-LC3的自噬体增加,凋亡细胞也增多(P均<0.05)。结论 HCPT能够诱导HeLa细胞中自噬相关基因Beclin1、p62以及LC3的表达增强,从而激活细胞自噬发生;且HCPT能够激活宫颈癌HeLa细胞发生自噬,进而诱导细胞凋亡来达到抗肿瘤目的。     

姜黄素诱导激活FOXO3a促进肾透明细胞癌细胞的增殖抑制和细胞凋亡

目的:研究姜黄素(curcumin)对人肾透明细胞癌（clear-cell renal cell carcinoma,ccRCC）细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,及叉头框蛋白O3a（Forkhead box protein O3a,FOXO3a）在姜黄素抗肿瘤效应中发挥的关键作用。方法:MTT法用于检测姜黄素对ccRCC细胞活力的抑制作用;Annexin V/PI双染实验检测姜黄素对ccRCC细胞的诱导凋亡作用;免疫印迹法（Western blot,WB）检测姜黄素对FOXO3a、p-FOXO3a及下游BIM表达的影响,和凋亡蛋白caspase 3的激活情况。实时荧光定量PCR技术（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）检测FOXO3a转录水平。小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）技术用于沉默ccRCC细胞系中FOXO3a的表达。结果:通过对6种ccRCC细胞系（ACHN、786-O、769-P、A-498、Caki-1及Caki-2）FOXO3a蛋白基础表达水平进行检测,选取FOXO3a表达较高的786-O细胞系为研究对象。0~160 μmol/L姜黄素处理786-O细胞24 h和48 h后,呈时间和浓度依赖性对细胞活力具有显著抑制作用;786-O细胞在0~80 μmol/L姜黄素处理24 h后,明显促进细胞凋亡水平,且伴随着凋亡相关蛋白caspase 3的激活。786-O细胞中,姜黄素抑制p-FOXO3a,促进FOXO3a活化,并上调下游BCL-2家族促凋亡蛋白BIM表达水平。在siRNA沉默FOXO3a蛋白表达后,姜黄素对786-O细胞的生长抑制和诱导凋亡作用被抑制。结论:姜黄素通过诱导激活FOXO3a,在ccRCC细胞上发挥生长抑制和诱导凋亡的抗肿瘤作用。     

Prucalopride通过促进自噬抑制胶质瘤细胞U251增殖

目的:研究Prucalopride对胶质瘤U251细胞增殖、自噬、凋亡的影响,并探讨其相关信号通路。方法:通过CCK8检测细胞增殖的变化;Transwell检测迁移和侵袭的变化;细胞流式实验、Western blot检测细胞凋亡的变化;Western blot检测自噬相关蛋白LC3、Beclin1、p62的表达;AKT/mTOR通路相关蛋白的变化。结果:CCK8显示Prucalopride显著抑制U251细胞的增殖（P＜0.05）;Transwell侵袭实验显示Prucalopride可以抑制脑胶质瘤细胞的迁移和侵袭（P＜0.05）;细胞流式实验显示Prucalopride促进U251细胞的凋亡（P＜0.05）,Prucalopride处理后细胞凋亡相关蛋白Bax、Active Caspase3水平升高,Bcl-2表达降低;自噬相关蛋LC3、Beclin1表达上调,p62表达下调;p-AKT蛋白和p-mTOR蛋白水平显著降低。结论:Prucalopride通过抑制AKT/mTOR信号通路激活自噬抑制U251细胞增殖和迁移,促进其凋亡。     

柴胡皂苷D通过诱导自噬抑制人结直肠癌细胞SW480增殖的实验

目的:研究柴胡皂苷D（saikosaponin-D,SSD）对人结直肠癌细胞SW480自噬的影响,并探讨诱导的自噬对细胞增殖的影响。方法:Western-blot检测SSD对自噬相关蛋白LC3A/B和p62表达的影响,LC3翻转实验和GFP-RFP-LC3荧光实验验证自噬流的发生。Western-blot检测3-MA对SSD所诱导自噬的抑制作用,MTT和细胞计数实验研究3-MA抑制自噬后SSD对SW480细胞增殖的影响。结果:SSD能够诱导SW480细胞发生自噬,表现在LC3A/B II及LC3A/B II/I比值的增高、自噬经典底物蛋白p62的减少、LC3翻转试验阳性以及LC3荧光实验中黄色和红色荧光颗粒的增多（P＜0.05）。自噬抑制剂3-MA能够抑制SSD所诱导自噬的发生（P＜0.05）,且3-MA抑制自噬后,SSD对SW480的增殖抑制效应减弱（P＜0.05）,提示SSD诱导的自噬对细胞的增殖起抑制作用。结论:SSD通过诱导自噬抑制人结直肠癌细胞SW480的增殖。     

苹果多酚通过激活AMPK/SIRT1信号通路对LPS诱导的肺上皮细胞自噬反应的影响

目的:探讨苹果多酚通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1（AMP-activated protein kinase/Sirtuin1,AMPK/SIRT1)信号通路对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的人肺泡上皮细胞（A549）自噬反应的影响。方法:使用不同浓度的苹果多酚提取物（apple polyphenol extract,APE）预处理A549细胞2 h后,LPS诱导A549细胞培养24 h,MTT法检测增殖活性,筛选APE最佳预处理浓度;将A549细胞分为对照组、LPS组（3 mg/L LPS）、LPS+APE组（3 mg/L LPS+20 μg/mL APE）、APE+Compound C组（3 mg/L LPS+20 μg/mL APE+50 μmol/L Compound C）,免疫荧光染色观察A549细胞自噬;流式细胞术检测A549细胞凋亡;Western blot法检测细胞中自噬相关蛋白及AMPK/SIRT1通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,经LPS诱导的A549细胞增殖活性、自噬水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、SIRT1、p-ULK1/ULK1、p-AMPK/AMPK蛋白表达降低,p62蛋白表达及细胞凋亡率升高（P＜0.05）;与LPS组比较,LPS+APE组细胞增殖活性、自噬水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、SIRT1、p-ULK1/ULK1、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平显著升高,p62蛋白表达及细胞凋亡率显著降低（P＜0.05）;与LPS+APE组比较,APE+Compound C组A549细胞增殖活性、自噬水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、SIRT1、p-ULK1/ULK1、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平显著降低,p62蛋白表达及细胞凋亡率显著升高（P＜0.05）。结论:苹果多酚通过激活AMPK/SIRT1 信号通路提高LPS诱导的肺上皮细胞自噬,降低细胞凋亡。     

扁柏醇体外对肾癌细胞的影响

摘 要：［目的］ 探讨扁柏醇对肾癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响及其可能作用机制。 ［方法］ 以人肾癌786-0细胞为模型,应用MTT法检测扁柏醇对786-0细胞生长抑制,应用流式细胞术检测经扁柏醇处理后786-0细胞周期变化,应用AnnexinV/PI双染法检测扁柏醇诱导肾癌细胞凋亡的发生,用western blot方法分析PARP、JNK蛋白表达和活性的变化。［结果］ 扁柏醇对786-0细胞的生长有明显抑制作用,呈浓度依赖性和时间依赖性;随着扁柏醇浓度的增加,处于S期的细胞逐渐增加,而G2/M期的细胞逐渐减少;扁柏醇作用后凋亡细胞也明显增加,并伴随着cleaved-PARP的表达增加;p-JNK蛋白含量随着扁柏醇的浓度增加而升高,而JNK蛋白含量无明显变化。［结论］ 扁柏醇能明显抑制人肾癌786-0细胞的生长,可能与扁柏醇将细胞阻滞于S期和通过激活SPAK/JNK信号通路诱导细胞凋亡有关。     

番茄红素通过SIRT1/NF-κB轴抑制肾癌786-O细胞增殖且促进其凋亡

目的：探讨番茄红素通过沉默信息调节因子1（SIRT1）/核因子-κB（NF-κB）轴对肾癌786-O 细胞增殖、凋亡的影响。方法：常规培养人正常肾细胞HK-2和人肾癌细胞786-O ，实验分为对照组（0.1% DMSO）、顺铂组（40 μg/mL）、番茄红素低质量浓度（2.5 μg/mL）组、番茄红素高质量浓度（5 μg/mL）组、番茄红素（5 μg/mL）+EX527（SIRT1抑制剂）（3 μmol/L）组。CCK-8法、克隆形成实验检测各组HK-2、786-O 细胞的增殖能力，流式细胞术检测各组786-O 细胞的凋亡，RH123、DCFH-DA 染色分别检测各组786-O 细胞的线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）水平，WB法检测各组786-O细胞中凋亡相关蛋白 BAX、Bcl-2、C-casp3和SIRT1/NF-κB轴相关蛋白 SIRT1、p-NF- κB 蛋白的表达。786-O 细胞移植瘤实验检测番茄红素低（5 mg/kg）、高质量浓度（20 mg/Kg）、顺铂（2 mg/kg）、番茄红素（20 mg/kg）+EX527（10 mg/kg）对移植瘤生长的影响，TUNEL法检测各组移植瘤组织中的细胞凋亡。结果：番茄红素呈剂量依赖性地抑制786-O细胞的增殖活性，番茄红素、顺铂均明显抑制786-O细胞的克隆形成能力且促进其凋亡，细胞中MMP损伤率升高而ROS 水平降低，凋亡相关蛋白BAX、C-casp3 表达均显著升高（均P<0.05）而Bcl-2表达下调（P<0.05），SIRT1表达显著升高（P<0.05）而p-NF-κB的表达显著降低（P<0.05），上述作用均可被EX527 逆转；番茄红素、顺铂抑制786-O细胞移植瘤的生长且促进其细胞凋亡，其作用也能被EX527 逆转。结论：番茄红素通过上调SIRT1、抑制NF-κB通路的激活进而抑制786-O细胞增殖且诱导其凋亡。     

miR-222通过下调DDIT4抑制肾癌细胞自噬

背景与目的：微小RNA(microRNA,miRNA,miR)在肿瘤的发生、发展中具有重要的作用。miR-222在多种肿瘤组织中表达上调,而其在肾癌(renal cell carcinoma,RCC)中的表达及其作用机制尚不清楚。本研究拟通过检测RCC组织及相应癌旁组织中miR-222的表达情况,探讨miR-222在RCC中的作用。并在体外条件下,通过检测miR-222的下游作用靶点,探讨miR-222的抗RCC作用机制。方法：采用实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测RCC组织和癌旁组织中miR-222的表达;采用CCK-8法检测细胞的增殖活力;采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测DDIT4蛋白及LC3-Ⅱ的表达;采用荧光素酶实验验证miR-222的作用靶点;转染EGFP-LC3后在激光共聚焦显微镜下观察细胞自噬状态。结果：qRTPCR检测结果显示,miR-222在RCC组织中表达明显上调。在人肾透明细胞癌786-O细胞株中敲低miR-222表达后显著抑制细胞的增殖活力,而过表达miR-222可增强786-O细胞的增殖活力(P<0.01)。在786-O细胞中敲低miR-222后,其靶基因DDIT4蛋白的表达显著上调,过表达miR-222后,DDIT4表达明显下调。荧光素酶实验结果表明,DDIT4为miR-222的直接作用靶点。RCC组织的DDIT4表达下调。在786-O细胞中抑制miR-222表达后,LC3-Ⅱ的表达水平显著上调,自噬体数目显著增加。结论：miR-222在RCC中高表达,并可能通过靶向抑制DDIT4的表达参与调控RCC细胞自噬。     

β-Elemene induces apoptosis in human renal-cell carcinoma 786-0 cells through inhibition of MAPK/ERK and PI3K/Akt/ mTOR signalling pathways

Background: Renal-cell carcinoma (RCC) is resistant to almost all chemotherapeutics and radiation therapy.β-Elemene, a promising anticancer drug extracted from a traditional Chinese medicine, has been shown tobe effective against various tumors. In the present study, anti-tumor effects on RCC cells and the involvedmechanisms were investigated. Methods: Human RCC 786-0 cells were treated with different concentrationsof β-elemene, and cell viability and apoptosis were measured by 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and flow cytometry, respectively. Protein expression was assayed by westernblotting. Autophagy was evaluated by transmission electron microscopy. Results: β-Elemene inhibited the viabilityof 786-0 cells in a dose- and time-dependent manner. The anti-tumor effect was associated with induction ofapoptosis. Further study showed that β-elemene inhibited the MAPK/ERK as well as PI3K/Akt/mTOR signallingpathways. Moreover, robust autophagy was observed in cells treated with β-elemene. Combined treatment ofβ-elemene with autophagy inhibitors 3-methyladenine or chlorochine significantly enhanced the anti-tumoreffects. Conclusions: Our data provide first evidence that β-elemene can inhibit the proliferation of RCC 786-0 cells by inducing apoptosis as well as protective autophagy. The anti-tumor effect was associated with theinhibition of MAPK/ERK and PI3K/Akt/mTOR signalling pathway. Inhibition of autophagy might be a usefulway to enhance the anti-tumor effect of β-elemene on 786-0 cells.     

藤黄酸对人肾癌786－O细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察藤黄酸（Gambogic acid）对人肾癌786－O细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法：MTT法检测藤黄酸对786－O细胞的增殖抑制作用。流式细胞术检测藤黄酸对786－O细胞凋亡的影响。Western blotting检测藤黄酸对786－O细胞内凋亡相关蛋白Bcl－2、Bax及NF－κB通路相关蛋白p65、IκB表达的影响。荧光显微镜观察藤黄酸对NF－κB活性的影响。结果：藤黄酸对786－O细胞的增殖抑制率具有显著的剂量依赖性,在作用48h后其 IC50值为（3．4±0．3）μmol／L。细胞凋亡实验发现,藤黄酸能有效的诱导786－O细胞凋亡,随药物浓度增加细胞凋亡比例逐渐增大,当药物浓度达到4．0μmol／L时凋亡率为（68．1±3．6）％。Western blotting发现藤黄酸能引起Bax蛋白的上调和Bcl－2蛋白的降解,与此同时能抵抗TNF－α诱导导致的IκB降解;荧光显微成像则进一步发现藤黄酸能阻止NF－κB入核。结论：实验表明,藤黄酸能诱导786－O细胞凋亡,主要机制可能是通过其对NF－κB的信号通路的抑制实现的。     

siRNA干扰FLOT2基因表达对肾细胞癌细胞增殖的影响

目的:探讨FLOT2在肾细胞癌细胞株中的表达,并观察小干扰RNA沉默FLOT2基因对肾细胞癌786-O细胞增殖能力的影响。方法:将化学合成的FLOT2的小干扰siRNA用脂质体 Lipofectamine2000转染至肾细胞癌786-O细胞;分别用RT-PCR、Western blot方法检测细胞转染前后FLOT2以及细胞增殖相关因子CCND1的表达。CCK-8与克隆形成实验检测其增殖情况。结果:转染FLOT2-siRNA的肾细胞癌786-O细胞,RT-PCR、Western blot检测显示FLOT2在基因及蛋白水平明显下调（P<0.05）;与对照组比较786-O细胞增殖能力明显下降（P<0.05）,细胞增殖相关因子CCND1明显下调（P<0.05）。结论:FLOT2在肾细胞癌细胞系中高表达,采用特异性FLOT2-siRNA 能够显著降低FLOT2和CCND1表达。干扰FLOT2表达能显著抑制786-O细胞的增殖,FLOT2基因可能参与了肾细胞癌的生物学行为。     

干扰组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET8对肾透明细胞癌786-O细胞增殖的影响

目的 细胞增殖是影响肾细胞癌进展的重要因素,本研究旨在探讨组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET8在调节肾透明细胞癌786-O细胞增殖中的作用.方法 将体外培养肾透明细胞癌786-O细胞随机分为空白对照组、空质粒组和SET8-shRNA组3组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测3组细胞的增殖能力;RT-PCR和蛋白质印迹法检测3组细胞Survivin和Caspase-3的表达水平,分析干扰SET8对肾透明细胞癌786-O细胞增殖及相关基因和蛋白表达的影响.结果 shRNA-SET8可成功抑制786-O细胞中SET8蛋白的表达.MTT检测结果显示,0、12、24、36和48 h SET8-shRNA组增殖抑制率分别为(10.97±2.68)%、(20.38±7.12)%、(25.03±7.60)%、(30.35±1.97)%和(31.33±1.04)%,SET8-shRNA组786-O细胞的增殖能力较空白对照组和空质粒组明显降低,P<0.05.RT-PCR和蛋白质印迹法结果显示,SET8-shRNA组Survivin mRNA相对表达量为0.257±0.024,较空白对照组(1.046±0.041)和空质粒组(0.994±0.018)明显下降(P<0.05),其蛋白的相对表达量为0.834±0.072,较空白对照组(0.951±0.047)和空质粒组(1.203±0.092)明显下降,P<0.05;而Caspase-3 mRNA的相对表达量为0.921±0.072,较空白对照组(0.421±0.022)和空质粒组(0.439±0.007)明显上升(P<0.05),蛋白的相对表达量为1.188±0.022,较空白对照组(0.541±0.060)和空质粒组(0.617±0.028)明显上升,P<0.05.结论 干扰SET8可以有效抑制肾透明细胞癌786-O细胞SET8蛋白表达,从而抑制Survivin和上调Caspase-3的表达而抑制肾透明细胞癌786-O细胞增殖能力.     

Humanised antihuman IL-6R antibody with interferon inhibits renal cell carcinoma cell growth in vitro and in vivo through suppressed SOCS3 expression

Interleukin-6 (IL-6), one of the proinflammatory cytokines, is considered to be one of the factors associated with poor prognosis of patients with renal cell carcinoma (RCC). Suppressor of cytokine signalling-3 (SOCS3) is rapidly up-regulated by IL-6 and a negative regulator of cytokine signalling. SOCS3 not only suppresses cytokine-mediated JAK/STAT signalling, but also sustains MAPK pathways. In our study, among the RCC cell lines, IL-6 mRNA expression was the highest in the 786-O cells, which also showed the highest level of SOCS3 mRNA expression under the condition of interferon stimulation. In contrast, ACHN cells had the lowest expression of both IL-6 and SOCS3 mRNA under the same condition. Our study is undertaken to evaluate the effect of humanised antihuman IL-6 receptor (IL-6R) antibody, which completely neutralises IL-6 activity, in RCC cell proliferation and its effect on signalling pathways. IL-6R antibody, tocilizumab, significantly suppressed cell proliferation in 786-O cells with interferon stimulation. Western blot analysis revealed that the tocilizumab enhanced the interferon-induced phosphorylation of STAT1 and inhibited SOCS3 expression and the phosphorylation of both STAT3 and ERK. In contrast, the IL-6 inhibited STAT1 phosphorylation, enhanced STAT3 phosphorylation and accelerated cell proliferation in ACHN cells. The in vivo effects of combination therapy with tocilizumab and interferon showed significant suppression of 786-O tumour growth in a xenograft model. Morphological observation of the tumours revealed the apoptosis, invasion of inflammatory cells and fibrosis. These findings suggest that combination therapy using an antihuman IL-6R antibody with interferon may represent a novel therapeutic approach for the treatment of RCC.     

miR-19a-3p 靶向细胞黏附分子2 阻断AKT通路抑制肾癌细胞786-O 的增殖和迁移

[摘要] 目的：探讨肾癌组织高表达的miR-19a-3p 靶向调控细胞黏附分子2（cell adhesion molecule 2,CADM2）并通过AKT信号通路影响肾癌细胞增殖和迁移的机制。方法：收集2012 年4 月至2017 年11 月苏州大学附属第一医院肾内科收治的42 例资料完整的肾癌患者手术切除的肾癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR检测肾癌组织和786-O等4 种肾癌细胞系中miR-19a-3p 的表达水平,CCK-8、Transwell 和免疫荧光法检测miR-19a-3p 敲减对肾癌786-O 细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的影响,双荧光素酶报告基因验证miR-19a-3p 与CADM2 的靶向关系。采用Wb 检测miR-19a-3p 通过CADM2 对AKT信号通路的调控作用。结果：miR-19a-3p 在肾癌组织及细胞系中均高表达（均P<0.01）。敲减miR-19a-3p 可显著抑制786-O 细胞增殖、迁移和上皮间质转化,且miR-19a-3p 靶向作用CADM2 并下调其表达水平（P<0.05 或P<0.01）。敲减miR-19a-3p 通过靶向上调CADM2 并阻断AKT信号通路进而显著抑制786-O细胞增殖、迁移和上皮间质转化（均P<0.05 或P<0.01）,从而缓解肾癌发生发展。结论：肾癌组织中miR-19a-3p 高表达,敲减miR-19a-3p 可显著抑制肾癌细胞的增殖、迁移和上皮间质转化,其机制可能是通过miR-19a-3p/CADM2/AKT分子轴起作用。