膀胱癌组织miR-451表达及其与E-cadherin和Vimentin表达相关性

目的 侵袭与转移是影响膀胱癌患者疗效及导致死亡的主要因素,其具体机制尚不明确;研究表明miR-451与多种肿瘤的发生、发展密切相关.本研究分析miR-451在膀胱癌中的表达及其临床意义,观察miR-451表达改变对上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)和间质型骨架蛋白(Vimentin)表达的影响.方法 收集2012-01-01-2015-12-31江西省人民医院收治的47例膀胱癌患者的癌组织及10例正常膀胱组织标本,运用实时荧光定量PCR (quantitative Real-time PCR,qPCR)检测miR-451的表达及运用免疫组织化学技术检测E-cadherin和Vimentin的表达,分析miR-451表达与膀胱癌临床病理因素,以及E-cadherin和Vimentin表达的关系.利用脂质体将miR-451拟似物(miR-451 mimics)转染入膀胱癌5637细胞,采用蛋白质印迹法检测E-cadherin和Vimentin的表达.结果 miR-451在膀胱癌组织中的表达为0.14±0.017,明显低于正常膀胱组织(1.0),其表达和膀胱癌临床分期及病理分级密切相关,P＜0.01;E-cadherin在膀胱癌组织较正常组织中低表达,分别为36.17％和84.50％;Vimentin在膀胱癌组织及正常膀胱黏膜层中表达不明显.癌组织中miR-451表达与E-cadherin表达正相关,r=0.67,P=0.023;miR-451过表达后,E-cadherin蛋白表达上调(P＜0.001),Vimentin蛋白表达无明显改变,P＞0.05.结论 MiR-451是膀胱癌潜在的调控子,可能是通过调控E-cadherin蛋白表达进而影响膀胱癌发生及进展.     

miRNA-20a在膀胱癌中的表达及其机制研究

  目的  探讨miRNA-20a在膀胱癌组织中的表达及其机制。  方法  收集2014年1月至2015年1月昆明医科大学第二附属医院96例患者的组织标本,运用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）方法检测miRNA-20a在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达;生物信息学方法预测miRNA-20a的靶基因并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证;qRT-PCR、Western blot以及细胞免疫荧光分别检测人膀胱癌细胞系T24和J82细胞转染miRNA-20a模拟物或阴性对照后对靶基因mRNA和蛋白表达的影响;CCK-8、Transwell侵袭小室和划痕实验检测过表达miRNA-20a后T24细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的改变。  结果  miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且与肿瘤的病理分级、临床分期、转移以及复发密切相关（P＜0.001）;双荧光素酶报告基因实验证实miRNA-20a与人源性长寿保障基因2（Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2）的3'-UTR直接靶向结合;转染miRNA-20a模拟物可显著下调膀胱癌细胞中LASS2 mRNA和蛋白的表达（P＜0.01）,增强膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力（P＜0.01）。  结论  miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且miRNA-20a可通过靶向抑制LASS2促进膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移,与膀胱癌的发生发展相关。      

miRNA-451和钙结合蛋白39在非小细胞肺癌患者中的表达及临床意义

目的 探讨微小RNA(miRNA)-451和钙结合蛋白39(CAB39)在非小细胞肺癌（NSCLC）患者中的表达及临床意义。方法 收集180例NSCLC患者的NSCLC组织和对应的癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miRNA-451相对表达量,采用免疫组织化学染色法检测CAB39表达情况。采用多因素Logistic回归模型分析NSCLC患者NSCLC组织中miRNA-451和CAB39表达情况的影响因素。比较不同miRNA-451、CAB39表达情况NSCLC患者的预后。结果 NSCLC组织中miRNA-451相对表达量和CAB39阳性表达率均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义（P<0.01）。肿瘤直径>3 cm、有淋巴结转移、临床分期为Ⅲ～Ⅳ的NSCLC患者NSCLC组织中miRNA-451高表达率和CAB39阳性表达率均低于肿瘤直径≤3 cm、无淋巴结转移、临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示,淋巴结转移情况、临床分期均是NSCLC患者NSCLC组织中miRNA-451和CAB39表达情况的...     

miRNA-137在膀胱癌中的表达情况及对膀胱癌细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨miRNA-137在膀胱癌中的相对表达量及其对膀胱癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法选取30例膀胱癌患者的膀胱癌组织和癌旁组织标本。实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测膀胱癌组织和癌旁组织中的miRNA-137的相对表达量,检测不同病理分级膀胱癌患者膀胱癌组织中miRNA-137的表达量及其与膀胱癌病理分级的相关性。将mimic-NC、miRNA-137 mimic、miRNA-137 inhibitor质粒转染至膀胱癌T24细胞,并分别作为空白组、过表达组和低表达组,RT-PCR法检测3组细胞miRNA-137的相对表达量,Transwell小室检测3组细胞的迁移和侵袭能力。结果浸润性膀胱癌组织中miRNA-137的相对表达量明显高于非浸润性膀胱癌组织和癌旁组织(P﹤0.01);病理分级为Ⅳ级的膀胱癌患者膀胱癌组织中miRNA-137的相对表达量明显高于病理分级为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的患者(P﹤0.01)。过表达组迁移和侵袭细胞数目均高于空白组细胞(P﹤0.05);低表达组迁移和侵袭细胞数目均低于空白组细胞(P﹤0.05)。结论浸润性膀胱癌组织和病理分级为Ⅳ级的膀胱癌组织中miRNA-137的相对表达量较高,上调miRNA-137的表达可以促进膀胱癌细胞侵袭和迁移,抑制其表达可以抑制膀胱癌细胞的迁移和侵袭。     

miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的 探讨miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义。方法 收集经病理证实的脑胶质瘤患者的脑脊液标本63例为病例组,同期非颅内肿瘤患者脑脊液标本20例为对照组。采用PCR检测miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335在纳入群体脑脊液中的表达;采用Spearman秩相关分析miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达与在不同级别胶质瘤中的相关性。结果 病例组患者脑脊液中miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达水平显著低于对照组(P<0.05)。高级别胶质瘤患者脑脊液中miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达水平显著低于低级别胶质瘤患者(P<0.05);Spearman秩相关分析显示miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达与肿瘤级别呈显著负相关性(P<0.001)。结论 人脑脊液中miRNA-34a、miRNA-145以及miRNA-335的表达,可能可以作为诊断脑胶质瘤及术前判断病理分级的辅助方法。     

CK-20在膀胱癌组织中表达的临床意义

目的:探讨CK蛳20在膀胱正常黏膜和膀胱癌组织中表达情况及其临床意义。方法:采用RT蛳PCR方法检测膀胱正常黏膜和膀胱癌组织中CK蛳20 mRNA的表达情况,分析其与肿瘤分期、分级及复发的关系。结果:CK蛳20 mRNA表达在膀胱癌中阳性率为71.43 %(30/42),在浸润性肿瘤中阳性率相对较高,但无统计学意义(P>0.05);在复发病例中阳性率(90 %)比初发者(54.55 %)明显要高(P<0.05)。但在所有正常对照膀胱黏膜中均无表达。结论:CK蛳20可以作为膀胱癌的一个较敏感、极特异的生物瘤标,且在复发的肿瘤中它的表达阳性率较高。     

miRNA-451在宫颈癌中的表达及对宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡影响的作用机制研究

目的 探讨miRNA-451在宫颈癌中的表达及对宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡影响的作用机制.方法 取60例宫颈癌患者的宫颈癌组织和相应的癌旁正常组织,定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-451的相对表达量,分析其与宫颈癌患者临床特征的关系.将宫颈癌Hela细胞随机分为miRNA-451-mimics...     

miRNA-221和miRNA-222在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的:研究miRNA-221、miRNA-222在人肝癌细胞株及肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达,探讨二者与患者临床病理特征间的关系.方法:从体外培养的人肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97和46例手术切除的HCC组织及毗邻癌旁组织中提取总的RNA,用微小RNA的引物反转录后,用miRNA-221、miRNA-222特异性引物做荧光定量聚合酶链反应,并分析miRNA-221、miRNA-222表达水平与各临床病理参数间的关系.结果:肝癌细胞株MHCC-97中miRNA-221、miRNA-222的表达较肝癌细胞株HepG2、Huh7显著升高;HCC组织中miRNA-221、miRNA-222的平均表达水平较癌旁组织分别上调1.72±1.17,1.76±1.14倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).miRNA-221、miRNA-222表达水平与HCC肿瘤TNM分期和包膜浸润有关,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:miRNA-221、miRNA-222显著高表达可能在HCC发生、发展中发挥重要作用,尤其与肝癌细胞的侵袭、转移有关.     

miRNA-214在乳腺癌组织中的表达及其意义

[目的]探讨miRNA-214在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征及预后的关系.[方法]应用实时定量qPCR检测45例乳腺癌及癌旁正常组织中miRNA-214的含量,分析其与临床病理特征、预后的关系.[结果]乳腺癌组织中miRNA-214的含量明显低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P＜0.01);miRNA-214在Ki-67阴性组的表达量明显高于Ki-67阳性组,差异具有统计学意义(P=0.01);miRNA-214水平与患者的年龄、月经状况、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移、ER、PR、Her-2及p53的表达均无关(P＞0.05).[结论]miRNA-214在乳腺癌组织中呈低表达,并与Ki-67表达相关,提示其可能与乳腺癌的发生、发展及预后有关.     

miRNA-93在膀胱癌中的表达及其对T24细胞生物学特性的影响

目的：探讨miRNA-93在膀胱癌中的表达及对人膀胱癌细胞株T24细胞生物学特性的影响及其作用机制。方法：选取郑州大学附属南阳市中心医院泌尿外科2010年5月至2016年5月收治的79例膀胱癌患者病理组织标本及配对癌旁正常组织,通过qRT-PCR检测miRNA-93的表达水平。沉默miRNA-93后,采用CCK-8法、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞增殖和迁移能力的变化及细胞的凋亡情况;Western blotting检测AKT/p-AKT、GSK3β/p-GSK3β蛋白表达水平的变化。结果：miRNA-93在膀胱癌组织及癌细胞中高表达,且表达水平与癌灶大小、淋巴结转移、病理分级及T分期有关（均P<005）。沉默miRNA-93后,T24细胞的增殖能力显著降低（P<0.05）,沉默miRNA-93促进T24细胞的凋亡并抑制其迁移;同时,沉默miRNA-93后p-AKT和p-GSK3β的蛋白表达水平均显著下降（P<0.05）。结论： miRNA-93能够促进人膀胱癌细胞株T24细胞的增殖和迁移,并抑制凋亡,其作用机制可能与下调p-AKT、p-GSK3β蛋白表达有关,提示miRNA-93可以作为诊断和靶向治疗膀胱癌的潜在作用位点。     

膀胱癌患者尿液中 BLCA-4表达的临床意义

目的：探讨膀胱癌患者尿液特异性核基质蛋白-4（ BLCA-4）的表达及临床意义。方法以80例初诊膀胱癌患者为研究对象,选择50例膀胱炎患者及50例健康体检者为对照。比较三组患者尿液中BLCA-4表达的差异及其与膀胱癌患者临床病理指标的关系。结果膀胱癌患者尿液中BLCA-4水平显著高于膀胱炎患者及健康体检者,差异具有统计学意义（P＜0．05）,膀胱炎及健康体检者之间未见统计学差异（P＞0．05）;BLCA-4对膀胱癌的诊断灵敏度为93．8％,特异度为100．0％;BLCA-4与膀胱癌患者年龄、性别、病理分级、肿瘤大小及临床分期等因素均无相关性（ P＞0．05）;复发患者与未复发患者术前及术后6个月尿液中BLCA-4水平比较均无显著差别（P＞0．05）,两组患者术后6个月BLCA-4水平均显著下降（P＜0．05）,但术后1年6例复发患者尿液BLCA-4水平均显著高于术后6个月水平（P＜0．05）,且与未复发患者相比差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论 BLCA-4对膀胱癌诊断敏感度高,加强对膀胱癌患者术后BLCA-4水平的监测有助于预测复发情况。     

miRNA-29在正常乳腺、原发性乳腺癌及转移性乳腺癌组织中的表达意义

目的 探讨微小RNA-29 (miRNA-29)在正常乳腺、原发性乳腺癌以及转移性乳腺癌组织中的表达,并分析miRNA-29、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在疾病发生与进展中的作用.方法 选取286例乳腺癌患者,其中原发性乳腺癌205例,转移性乳腺癌81例,同期选取150例无乳腺疾病的健康妇女为对照组.采用RT-PCR检测miRNA-29与MMP-2表达水平.结果 三组乳腺标本中miRNA-29与MMP-2水平比较差异均具有统计学意义(P＜0.05),其miRNA-29与MMP-2表达呈负相关性,而肿瘤大小、病理分期、HER-2及ki-67均与miRNA-29表达具有密切相关性(P＜0.05).结论 miRNA-29与乳腺癌的发生、发展与转移等过程均具相关性,明确其表达水平有助于病情评估及临床治疗.     

Expression and Clinical Significance of miRNA-34a in Colorectal Cancer

Background: The aim of this study was to investigate differences of miRNA-34a expression in benign andmalignant colorectal lesions. Materials and Methods: Samples of cancer, paraneoplastic tissues and polypswere selected and total RNA was extracted by conventional methods for real-time PCR to detect the miRNA-34a expression. In addition, the LOVO colorectal cancer cell line was cultured, treated with the demethylatingagent 5-azacytidine and screened for differentially expressed miRNA-34a. Results: After the drug treatment,the miRNA-34a expression of colorectal cancer cell line LOVO was increased and real-time PCR showed thatlevels of expression in both cell line and colorectal cancer tissues were low, as compared to paraneoplastic tissue(p<0.05). Polyps tissues had significantly higher expression than paraneoplastic and colorectal cancer samples(p<0.05). Conclusions: miRNA-34a-5p may play a role as a tumor suppressor gene in colorectal cancer, withinvolvement of DNA methylation.     

膀胱癌细胞凋亡及p53基因表达的意义

目的探讨膀胱癌细胞凋亡及p53基因表达的意义。方法采用免疫组织化学方法及TUNEL法,检测11例正常膀胱黏膜和83例膀胱移行细胞癌中p53基因的表达及细胞凋亡指数。结果83例膀胱移行细胞癌中p53阳性50.6%,凋亡指数(AI)=1.4335±0.3863。p53阳性表达与膀胱癌病理分级及临床分期呈正相关(γ=0.492,P<0.01;γ=0.341,P<0.01);凋亡指数(AI)与膀胱癌病理分级及临床分期呈正相关(γ=0.642,P=0.000<0.01;γ=0.455,P=0.000<0.01);AI与p53表达无相关性。AI、p53表达与患者5年生存率有关。结论临床联合运用临床分期及病理分级并检测p53可用于判断膀胱移行细胞癌的预后。     

STAT-1 在膀胱癌组织中的表达及其临床意义

 目的 检测信号转导和转录激活因子-1(STAT-1)在膀胱癌组织中的表达，并探讨其在膀胱癌发病机制中作用及其临床意义。方法 应用免疫组织化学方法检测STAT-1在88例膀胱癌和12例正常膀胱组织中的表达。结果 膀胱癌中STAT-1表达阳性率为78．4％，显著高于正常膀胱组织的41．7％。STAT-1表达水平与膀胱癌病理分级、分期及复发之间密切相关。结论 STAT-1异常表达与膀胱癌的发生、发展关系密切，而且是肿瘤生物学行为较有价值的标记物。     

miRNA-451通过MRP靶向调控胃癌细胞对5-Fu耐药性的机制研究

目的 探讨miR-451通过下调耐药基因MRP表达,调控胃癌对5-Fu耐药的相关机制。方法 采用实时荧光定量PCR检测20对人胃癌组织及癌旁组织和胃癌细胞系中miR-451的相对表达量,根据患者对药物的反应进行分组并检测耐药组以及非耐药组miR-451的表达水平。构建plent-miR-451稳定过表达胃癌细胞系,通过荧光实时定量PCR检测胃癌细胞系miR-451过表达效率,CCK8法检测不同浓度5-Fu对细胞增殖活力的影响。生物信息学方法分析miR-451的靶基因,并通过荧光素酶实验验证。实时定量PCR以及Western blot检测miR-451对靶基因MRP mRNA和蛋白水平的影响。结果 miR-451在正常组织中表达量高于胃癌组织,在非耐药胃癌组织中高于耐药胃癌组织。过表达miR-451降低了胃癌细胞对5-Fu的耐受能力（P=0.0006）。生物信息学分析显示MRP为miR-451的靶基因,荧光素酶实验同时也证实MRP为miR-451的潜在靶基因。过表达miR-451可导致耐药基因MRP mRNA以及蛋白水平均显著降低（P=0.00069）。结论 过表达miR-451可下调耐药基因MRP表达,使肿瘤细胞对5-Fu耐药性降低。     

nm23基因在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义

目的 :探讨nm2 3基因产物与膀胱移行细胞癌生物学行为之间的关系。方法 :应用免疫组织化学方法检测 4 5例膀胱移行细胞癌组织nm2 3基因表达。结果 :nm2 3蛋白弥散于胞浆及胞膜 ,nm2 3蛋白表达与膀胱癌分级呈正相关 ,但与分期无关 ,有转移性癌组织nm2 3表达明显高于无转移癌组织 (P<0 .0 0 1)。结论 :nm2 3基因表达是一个判断膀胱移行细胞癌恶性程度有价值的指标     

膀胱癌组织中EGFr和p21蛋白的表达评价

应用ｐ２１和表皮生长因子受体（ＥＧＦｒ）单克隆抗体，通过免疫组织化学方法检测正常膀胱组织和膀胱癌组织中ｒａｓ癌基因产物ｐ２１和ＥＧＦｒ的表达状况。结果显示：５例正常膀胱组织中未发现ＥＧＦｒ和ｐ２１阳性表达，阳性表达的ＥＧＦｒ和ｐ２１均定位于肿瘤的细胞膜上。５８例膀胱癌中ＥＧＦｒ和ｐ２１阳性表达率分别为５８．６％（３４／５８）和６２．１％（３６／５８）．并且ＥＧＦｒ和ｐ２１阳性表达率与膀胱癌的病理分级、临床分期和患者术后生存期有关。提示ＥＧＦｒ和ｐ２１阳性表达在膀胱癌发生和发展中起着重要作用，可判别膀胱癌恶性程度和预测膀胱癌的预后。     

多型别人乳头瘤病毒在膀胱癌中的表达

目的：探讨人乳头瘤病毒与泌尿系肿瘤关系。方法：用ＰＣＲ检测５０例膀胱癌组织中人乳头瘤病毒的感染情况。结果：ＨＰＶ１６、１８型检测阳性率１０％，ＨＰＶ通用型（即６、１１、１６、１８、３１、３３）检测阳性率６０％。其感染与病理分级无关。结论：多型别混合感染是膀胱癌的病因之一     

CIP2A在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,探讨其成为膀胱尿路上皮癌预后指标的可行性.方法 应用RT-PCR和Western blot检测CIP2A mRNA和蛋白在25例膀胱尿路上皮癌和对应癌旁组织中的表达情况;应用组织芯片技术和免疫组织化学方法,检测CIP2A在117例膀胱尿路上皮癌和30例癌旁组织中的表达情况,分析CIP2A与膀胱尿路上皮癌患者临床病理特征及预后之间的关系.结果 CIP2A mRNA和蛋白在25例配对膀胱尿路上皮癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织.免疫组织化学检测发现,膀胱尿路上皮癌组织中CIP2A蛋白的阳性表达率为76.9％(90/117),明显高于癌旁组织的6.7％ (2/30),差异有统计学意义(P＜0.001).CIP2A表达与肿瘤病理分级(P＜0.001)、临床分期(P＜0.001)、肿瘤大小(P=0.002)和淋巴结转移(P=0.046)有关,但与年龄、性别及肿瘤数目无关(P＞0.05).KaplanMeier单因素分析显示,CIP2A蛋白高表达是总体生存率和无复发生存率的影响因素(P＜0.001).Cox多因素风险比例模型显示,与总生存率相关的独立预后因素为临床分期、肿瘤病理分级和CIP2A表达,与无复发生存率相关的独立预后因素亦为临床分期、肿瘤病理分级和CIP2A表达.结论 CIP2A蛋白在膀胱尿路上皮癌组织中高表达,可能与膀胱尿路上皮癌的进展有关,其表达状态是膀胱尿路上皮癌患者独立预后因素.