C_4抗血清简易制备及临床初步应用

C_4是补体经典激活途径中的一个重要组分,它的测定在一些疾病的诊断、治疗和病因探讨具有一定的意义。C_4在血清中含量较低的又易受蛋白酶分解,纯化比较困难,国内外有一些报导都比较复杂,而且花时很长,不便以参照执行,为了尽快地开展此项工作,我们根据南京军区总医院和上海第三人民医院介绍,并做了一些改进,采用一种简便易行、节省血源、可在一般实验室条件下制得一批符合标准的抗C_4血清,经与上     

人补体C_4抗血清的制备与血浆C_4活化的检测

补体C_4除在正统途径活化过程中形成C_3转化酶的重要作用和有过敏毒素性质的C_4a分段外,其它方面的机理还不清楚,但其活化的可能重要意义已为人们所注意.为了探讨C_4活化的病理意义,我们也纯化了人血清C_4并成功的制备了人C_4抗血清以用来分析C_4及其活化分段。 国外自从1963年Muller-Eberhand纯化C_4以来,分离方法虽经各方不断改进,但为我们条件所限,沿用仍感困难。我们的改良方法主要是综合Muller-Eberhard,Bolotin及Lachman等人的方法而成,而且能够获得较纯和有活性的C_4。具体是从180ml多份混合血清以pH7.0,0.025mol/L Tris缓冲液     

制备抗人C_4血清的一种简易方法

用超剂量的混合人新鲜血清免疫豚鼠,制得抗C_4血清,用经DEAE—纤维素层析除去C_4成分的人血清作固相或液相吸收,可除去杂抗体。所得抗血清经免疫电泳及美国Mils公司抗C_4血清鉴定证实。8只豚鼠所得抗体单向免疫扩散效价在1:16～1:64间,可满足临床测定要求。     

测定C_3 C_4含量血清标本简易保存法

血清标本中的C_3C_4不稳定,常因被蛋白酶激活而产生裂解产物(C_3SP)。(C_3SP)分子量较小,单向(环状)扩散时,常使沉淀的直径偏大,所得结果偏高,而影响临床诊断。作者采用草酸钾盐水溶液稀释血清,可使血清标本于4℃冰箱保存一周而测定结果不受影响。     

抗C_3血清的简易制备法

临床上有些变态反应性疾病和自身免疫疾病,诸如系统性红斑狼疮、肾小球肾炎、免疫性溶血性贫血、慢性活动性肝炎、肾移植的排斥反应等等,都可见到患者血清中补体含量的改变。因此,补体组分(如C_3等)的检测对这些疾病的诊断、病情和疗效的估价有着重要的意义;同时,也可用于免疫方面的其他研究。1965年Mardiney等用酵母多糖-补体复合物制备特异的抗鼠C_3血清。由于酵母多糖的制备过程较为烦琐,我们改用菊糖取代酵母多糖制备抗人C_3血清,获得了成功。现将菊糖法的制备过程和鉴定结果报道于后。     

C_3抗血清的制备与临床应用

补体第3成分(C_3)在补体九个成分中含量最多。在补体参与的免疫反应中,不论是传统经路还是旁路系统,C_3 均起着重要作用。C_3有酶的活性,与EAC_(142)结合后,可致活C_5、C_6、C_7,使红细胞膜的化学结构发生改变,进而发     

C_3抗血清的制备和临床应用

补体是存在于正常人血清中一组具有酶活性的球蛋白,是机体体液免疫的重要的效应和扩大系统。目前己知补体主要由9种不同功能的血清蛋白组成,C_3是其中重要成分之一。其血清含量达160毫克/毫升左右,为各补体成份中的最多者。进行补体成份C_3含量的检测可以了解补体的合成和消耗,机体的调节平衡能力,以及某些先天缺陷等。C_3主要在肝脏合成,因此,     

乳酸脱氢酶C_4抗血清被动免疫大鼠的避孕作用

乳酸脱氢酶C_4(LDH-C_4)抗血清对大鼠有生殖抑制作用。精子凝集试验表明LDH-C_4抗体属凝集抗体。分别在受精前后各4d内,以每只大鼠腹腔注射0.5ml/d抗血清,被动免疫Wistar雌大鼠。受精后14d将其处死,剖腹计数各组妊娠率。结果表明:受精前组妊娠率与对照组无显著性差别;而受精后组与对照组有显著差别,可见部分着床后的胚胎死亡吸收,病理检查胚胎和胎盘均呈明显的炎症反应,提示LDH-C_4抗体能中止胚胎发育。而大鼠其他各重要脏器在形态上未见免疫病理改变。     

一种简易制备白蛋白纯品及抗血清的方法──凝胶切割制备法

利用凝胶切割纯化法得到免疫纯人血清白蛋白（ＡＬＢ），经聚丙烯酰胺凝胶（ＰＡＣ）电泳确认为单一带，经ＳＤＳ－ＰＡＣＥ确定其相对分子质量为６７４６２．８０Ｕ，与Ｓｉｇｍａ纯品ＡＬＢ及日本产羊抗人ＡＬＢ抗血清免疫双扩散融合试验验证其为纯品ＡＬＢ。利用得到的ＡＬＢ免疫绵羊制备羊抗人白蛋白抗血清，与日本产品比较，为单价特异性抗血清。     

一种简易制备白蛋白纯品及抗血清的方法——凝胶切割制备法

利用凝胶切割纯化法得到免疫纯人血清白蛋白（ＡＬＢ），经聚丙烯酰胺凝胶（ＰＡＣ）电泳确认为单一带，经ＳＤＳ－ＰＡＣＥ确定其相对分子质量为６７４６２．８０Ｕ，与Ｓｉｇｍａ纯品ＡＬＢ及日本产羊抗人ＡＬＢ抗血清免疫双扩散融合试验验证其为纯品ＡＬＢ。利用得到的ＡＬＢ免疫绵羊制备羊抗人白蛋白抗血清与日本产品比较，为单价特异性抗血清。     

人阳离子胰蛋白酶提纯和抗血清制备

胰蛋白酶(Trypsin,EC_(3.4.21.4)为胰腺所独有的肽链内切酶(丝氨酸酶),对研究胰腺的生理活动和病理改变有重要价值。为建立胰白酶放射免疫测定法,我们进行了人阳离子胰蛋白酶提纯和抗血清制备。 材料和方法 一、试剂 抑肽酶(Trasylol)、盐酸苯甲酰精氨酸乙酯(BAEE)、盐酸苯甲酰酪氨酸乙酯(BTEE)均为上海中科院东风生化试剂厂产品;溴化氰为西德E Merek公司产     

兔抗人ERA抗血清的制备

目的　在大肠杆菌中表达人 ERA蛋白 (h- ERA)和 h- ERA C端结构域蛋白 ,并制备兔抗 h- ERA抗血清 .方法　以 PCR扩增人 era基因 (h- era)全长 c DNA和 h- ERA C端的结构域基因 ,并分别克隆到 (His) 6 融合表达载体 p RSET- C和非融合表达载体p DH中 ,诱导表达 (His) 6 - h- ERA融合蛋白和 h- ERA C端结构域蛋白 .用 h- ERA C端结构域蛋白免疫兔 ,制备兔抗 h- ERA抗血清 ,并以 Western- blot对兔抗 h- ERA抗血清进行鉴定 .结果　大肠杆菌中表达的 h- ERA C端结构域蛋白和 (His) 6 - h- ERA融合蛋白 ,分别占菌体总蛋…     

制备小鼠IgG抗血清的简易方法──IgG－SPA菌体免疫法

制备小鼠ＩｇＧ抗血清的简易方法──ＩｇＧ－ＳＰＡ菌体免疫法肖柳英，张丹，冯昭明，潘竞锵，林培英广州市医药卫生研究所药物研究室（５１０１８０）我们实验室以前分别用离子交换柱层法、改良批式法和双向免疫扩散法制备兔抗小鼠ＩｇＧ抗血清［１］。柱层法提取ＩｇＧ...     

抗人球蛋白血清的简易快速制备法

本文介绍了一种抗人球蛋白血清的简易快速制备法,对本法的机理也作了探讨。     

短程免疫法制备抗血清效果比较

目的探讨快速制备抗血清的方法和效果,以适应其在实验教学中的需要。方法采用短程免疫法,对家兔分组,用大肠杆菌抗原菌液、绵羊红细胞(SRBC)抗原和鸡蛋黄抗原小剂量连续多次接种后,收集抗血清,对其效价进行测定,并与传统抗血清制备方法进行比较。结果经大肠杆菌抗原、绵羊红细胞(SRBC)抗原和鸡蛋黄抗原免疫后的抗血清最终分别达到1∶10240、1∶1200和1∶10240的高效价。结论此方案制备抗血清所用时间短,效价高,亲和力强,适用于实验教学。     

兔抗人β血小板球蛋白抗血清制备

在提纯β血小板球蛋白(βThromboglobulin,简称βTG)的基础上,我们制备出高特异性、高滴度的兔抗人βTG 抗血清。用中纯βTG 为抗原制备的抗血清含βTG 抗体和少量白蛋白抗体,用白蛋白吸附后成为单价βTG 抗血清。用纯βTG 制备的抗血清不需再作处理即为单价抗血清。放射免疫测定提示此抗血清和进口βTG 放射免疫药盒中的标准βTG 在免疫学上是一致的。已经证明此抗血清以1∶32,000倍稀释能用于βTG 放射免疫测定并已成功地用于在国内建立βTG 放射免疫测定体系。     

人胎肝GGT纯化及其抗血清制备

以生化方法从人肥肝组织中提取及纯化人胎肝ＧＧＴ。用此酶作抗原免疫新西兰兔，满意地制备了兔抗人胎肝ＧＧＴ抗血清。应用火箭免疫电泳酶呈色法。显示此抗血清与人胎肝ＧＧＴ抗原及原发性肝癌病人血清均具有很好的特异性免疫反应。     

短程免疫法制备高效价抗血清研究

目的:探索快速制备免疫血清的方法和效果。方法:采用短程免疫法,分别以伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原分组小剂量连续多次免疫家兔后,收集抗血清,用ELISA间接法测定抗体效价。结果:ELISA结果显示伤寒沙门菌O抗原和卵黄抗原抗血清最终分别达到1∶20 480和1∶10 240的高效价。结论:短程免疫法所制备抗血清效价高,亲和力强。