艾灸对衰老模型鼠外周血淋巴细胞DNA损伤程度影响的实验研究

目的:探讨艾灸“足三里”延缓衰老的机理。方法:对臭氧衰老模型小鼠“足三里”穴实施艾灸治疗后,用彗星实验(Comet Assay)检测小鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤程度。结果:艾灸小鼠外周血淋巴细胞DNA的拖尾率显著下降(P<0．05),尾长显著减短(P<0．05),差异有统计学意义。结论:艾灸能够通过提高机体自身抗自由基氧化损伤的能力,减轻淋巴细胞DNA的损伤程度,从而达到延缓衰老的目的。     

膏摩法对衰老模型鼠外周血淋巴细胞DNA损伤程度影响的实验研究

探讨膏摩"足三里"延缓衰老的机理。方法:对臭氧衰老模型小鼠"足三里"穴实施膏摩法治疗后,用彗星实验(Comet Assay)检测小鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤程度。结果:膏摩小鼠外周血淋巴细胞DNA的拖尾率显著下降(P<0.05),尾长显著减短(P<0.05),差异有统计学意义。结论:膏摩法能够通过提高机体自身抗自由基氧化损伤的能力,减轻淋巴细胞DNA的损伤程度,从而达到延缓衰老的目的。     

蒙药嘎木珠尔对辐射诱发体外培养外周血淋巴细胞微核率的抑制作用

目的:通过蒙药嘎木珠尔对辐射诱发体外培养外周血淋巴细胞微核率的抑制作用,进一步弄清蒙药嘎木珠尔药理作用。方法:按常规微量血培养方法体外培养外周血淋巴细胞。实验分为7组即阴性对照组、阳性对照组、加药组等。结果:阴性对照组与阳性对照组相比,微核率有显著差异(P<0·001),同一放射剂量下,培养液中加入蒙药嘎木珠尔和不加蒙药嘎木珠尔相比,微核率显著降低(P<0·01)。治疗组优于对照组(P<0·01)。结论:紫外线照射增加微核率,蒙药嘎木珠尔抑制微核率,这可能与预防DNA损伤和DNA修复有关。     

参乌胶囊对β-淀粉样蛋白大鼠模型外周血淋巴细胞DNA的影响

目的 :观察中药新复方参乌胶囊对 β 淀粉样蛋白海马内注射大鼠模型外周血淋巴细胞DNA损伤和血清脂质过氧化物丙二醛 (MDA)水平的影响。方法 :大鼠单侧 (左侧 )海马内注射A β_25-357d后 ,利用单细胞电泳结合激光共聚焦显微技术对外周血淋巴细胞DNA图象进行分析 ,通过硫代巴比妥酸法检测血清MDA含量。结果 :参乌胶囊灌胃给药 2周能够明显降低彗星样淋巴细胞的比率、尾长和尾距 ,降低血清MDA水平 ,保护淋巴细胞DNA免受氧化损伤的影响。结论 :参乌胶囊对外周血淋巴细胞DNA具有保护作用。     

异常与正常中医体质鼻咽癌及其高危人群淋巴细胞DNA损伤特点研究

目的 探讨异常与正常中医体质鼻咽癌及鼻咽癌高危人群淋巴细胞DNA损伤特点。方法 采用单细胞凝胶电泳实验技术检测健康人群28名、鼻咽癌高危人群27例及鼻咽癌初诊患者13例外周血淋巴细胞DNA损伤情况,并检测3组人群中正常体质者及异常中医体质者各自的DNA损伤情况,以彗星尾长、尾矩、尾DNA百分比含量为DNA损伤指标。结果 鼻咽癌患者彗星尾长、尾矩、尾DNA百分比含量分别为：（35.77±4.22） μm、（8.10±1.63） μm、（57.48±4.63）%;鼻咽癌高危人群分别为（15.25±4.15） μm、（5.01±1.92） μm、（31.99±4.11）%;健康人分别为（14.31±3.64） μm、（4.37±1.80） μm、（29.89±3.15）%;鼻咽癌患者与高危人群及健康人比较此3项指标差异均有统计学意义（P<0.05）。健康人群、鼻咽癌高危人群及鼻咽癌患者3组人群,其异常中医体质者相对于正常体质者存在着更多的DNA损伤情况（P<0.05）。结论 鼻咽癌患者存在着明显遗传物质不稳定性,表现为淋巴细胞的DNA损伤严重。健康人群、鼻咽癌高危人群及鼻咽癌患者3组人群,具有异常中医体质者DNA损伤高于正常中医体质者。     

生血丸对小鼠低剂量辐射损伤的预防与修复作用及机制

目的 探讨生血丸对低剂量辐射致小鼠肝、脾、骨髓细胞、外周血淋巴细胞损伤的预防与修复作用及机制.方法 将小鼠随机分为5组:对照组、生血丸预防给药组(预防给药组)、生血丸治疗给药组(治疗给药组)、模型1组(对应治疗给药组)、模型2组(对应预防给药组).ELISA法检测肝、脾细胞中羟自由基、超氧阴离子自由基、鸟氨酸脱羧酶(ODC)的活性.高倍镜下观察骨髓细胞及外周血淋巴细胞的微核率.结果 与对照组相比,2个模型组小鼠肝细胞内羟自由基、超氧阴离子自由基的量显著增加;与各自模型组相比,治疗给药组、预防给药组上述指标显著减小.与对照组相比,2个模型组小鼠肝细胞内ODC活性显著增强,外周血淋巴细胞与骨髓细胞的微核率显著增加;与各自模型组相比,预防给药组和治疗给药组ODC活性显著减弱,外周血淋巴细胞与骨髓细胞的微核率显著降低.各组小鼠脾细胞中各指标间未见明显差异.结论 生血丸能有效预防和改善小鼠肝细胞、外周血淋巴细胞和骨髓细胞由于低剂量辐射所造成的损伤.     

基于彗星实验的大黄素型单蒽酮体内外毒性研究

目的：采用人肝细胞HepaRG构建的2D、3D细胞培养模型和大鼠体内重复给药体系开展彗星实验,探讨不同模型对大黄素型单蒽酮毒性评价结果的影响。方法：2D和3D HepaRG细胞培养模型给予不同浓度的单蒽酮处理24、48、144 h后,采用彗星实验检测DNA损伤程度。25只雄性SD大鼠,按体质量随机分为0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）对照组、阳性对照甲磺酸乙酯（EMS）200 mg·kg-1组及单蒽酮6.5、65、650 mg·kg-1组,每组5只。对照组和单蒽酮各剂量组大鼠连续14 d灌胃给药,给药体积为15 mL·kg-1,阳性对照组大鼠连续3d灌胃给予EMS。末次给药3 h后麻醉取血及肝组织用于彗星实验。结果：单蒽酮质量浓度为10 μg·mL-1及以下时对2D培养的HepaRG细胞无明显损伤作用。而当单蒽酮质量浓度为10 μg·mL-1时,在3D模型中培养的肝细胞尾DNA含量及Olive尾矩（OTM）与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,且存在一定剂量相关性。体内彗星实验结果表明,单蒽酮650 mg·kg1组大鼠肝细胞尾DNA含量及OTM均显著高于对照组（P<0.01）,且各剂量组间存在一定剂量效应趋势;而各组大鼠的外周血有核细胞的尾DNA含量及OTM与对照组比较差异无统计学意义。结论：单蒽酮经3D培养模型代谢后存在肝细胞毒性,对大鼠肝细胞DNA损伤程度强于外周血细胞,推断其毒性与单蒽酮在肝脏中的代谢产物有关。     

蒙药珍珠丸对外周血淋巴细胞微核率的抑制作用研究

目的通过蒙药珍珠丸对电离辐射诱发体外培养外周血淋巴细胞微核率的抑制作用,进一步研究蒙药珍珠丸的药效机理。方法按常规微量血培养方法体外培养外周血淋巴细胞以及微核细胞。实验分为对照组、照射组以及加药组三大部分。结果经电离辐射和没有电离辐射组相比,微核率有显著差异(P<0.001),同一放射剂量下,培养液中加入蒙药珍珠丸和不加蒙药珍珠丸相比,微核率显著降低(P<0.001)。结论电离辐射明显导致微核率升高,蒙药珍珠丸降低微核率。     

乳康片对大鼠淋巴细胞微核出现率的研究

本实验以乳康片对大鼠外周血淋巴细胞微核出现率进行检测。结果表明,乳康片对大鼠外周血淋巴细胞微核出现率无显著影响,不导致染色体畸变。提示乳康片在一定剂量范围内用药不影响细胞遗传学方面的改变。     

补中益气汤对实体癌病人外周血淋巴细胞微核率的影响

本文通过对补中益气汤对实体癌病人外周血淋巴细胞微核率影响的实验观察,结果表明:实体癌患者淋巴细胞微核率明显高于正常人(P<0.01);而且补中益气汤在一定程度上可降低微核率(P<0.02)。证明补中益气汤在抗染色体损伤细胞突变方面的作用是不可忽视的。     

微核试验和彗星试验检测朱砂的遗传毒性

目的:研究朱砂对大小鼠染色体的损伤作用,比较短期给药与长期给药对遗传毒性检出的影响,探讨结合生殖毒性Ⅰ段试验进行遗传毒性研究的可行性。方法:18只小鼠分3组灌胃给药10,5.02,.5 g.kg-1(分别相当于人临床最高等效剂量约100,50,25倍)朱砂悬浊液,2 d后处死;结合生殖毒性Ⅰ段大鼠(每组6只)连续灌胃给药1.0,0.3,0.1 g.kg-1(分别相当于人临床最高等效剂量的20,6.4,2.0倍),雄性42 d以上,交配成功后处死;雌性20 d以上,妊娠第15天处死,取骨髓细胞做微核试验和彗星试验。结果:小鼠各剂量组灌胃给药的微核率分别为0.175%,0.108%,0.092%,与阴性对照组比较差异有显著意义,但彗星试验结果阴性。结合生殖毒性Ⅰ段试验的微核试验中雄性和雌性大鼠的微核率与阴性对照组比较,差异无显著意义,但有随剂量增高而增高的趋势;而彗星试验结果显示雄性的中、高剂量和雌性的高剂量的拖尾阳性率为27.6%,42.8%,22.3%,与阴性对照组比较,差异有显著和极显著意义。结论:①朱砂短期内大剂量灌胃给药或长期小剂量给药可能引起染色体损伤;②利用生殖毒性Ⅰ段试验多次给药后取材做微核试验和彗星试验在方法上是可行的,在剂量设计上更符合中药长期低剂量给药方式;③微核试验和彗星试验的组合在评价药物的体内遗传毒性中具有互补性。     

中药单体黄芩苷对乙醇所致淋巴细胞DNA损伤的保护作用研究

目的:探讨中药单体黄芩苷对乙醇所致淋巴细胞DNA损伤的保护作用。方法:提取10名健康志愿者外周血中的淋巴细胞,与乙醇、黄芩苷孵育,考察中药单体黄芩苷对乙醇所致淋巴细胞DNA损伤的保护作用。结果:30 Mm乙醇作用淋巴细胞1 h导致尾距由0.20升高至0.78;黄芩苷单体不能抑制淋巴细胞增殖(P0.05);黄芩苷组(20 ng·L-1)尾距阵显著低于空白组(纯乙醇)(P0.05),且对乙醇所致淋巴细胞DNA损伤的保护作用呈浓度依赖性。结论:黄芩苷对乙醇所致的人体外周淋巴细胞DNA损伤具有一定的保护作用,这为黄芩苷等天然产物在抗DNA氧化损伤,治疗自由基等疾病方面提供药理学依据,具有进一步研究价值。     

生血丸对低剂量敌百虫暴露小鼠肝、脾、骨髓细胞及外周血淋巴细胞的影响

目的 探讨生血丸对长期接触低剂量敌百虫水溶液小鼠细胞损伤的影响.方法 将150只BalB/C小鼠随机分空白组(生理盐水灌胃40天)、模型1组(敌百虫灌胃20天+生理盐水灌胃20天)、治疗组(敌百虫灌胃20天+生血丸灌胃20天)、模型2组(生理盐水灌胃20天+敌百虫灌胃20天)、预防组(生血丸灌胃20天+敌百虫灌胃20天).敌百虫溶液剂量为2 mg/kg,生血丸剂量为2.5g/kg,每日1次.检测各组小鼠肝、脾细胞中羟自由基、超氧阴离子活性、鸟氨酸脱羧酶(ODC)表达的OD值,计算外周血淋巴细胞、骨髓细胞微核率.结果 模型1组、模型2组小鼠肝细胞内羟自由基、超氧阴离子活性、ODC表达、外周血淋巴细胞微核率与空白组相比差异有统计学意义(P＜0.05),治疗组与模型1组、预防组与模型2组比较,肝细胞内羟自由基、超氧阴离子活性、ODC表达、外周血淋巴细胞微核率差异有统计学意义(P＜0.05).各组小鼠脾细胞内羟自由基、超氧阴离子活性、ODC表达、骨髓细胞微核率未见明显差异(P＞0.05).结论 生血丸能有效预防和改善低剂量敌百虫暴露小鼠肝细胞氧化损伤,降低外周血淋巴细胞的微核率.     

半夏对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核及人体外周血培养淋巴细胞SCE频率的影响

半夏的妊娠禁忌作用在妊娠大白鼠、小白鼠和家兔试验中得到证实,半夏汤剂在对母体无害的情况下,具有显著的胚胎毒性。本实验观察了半夏诱发的小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核出现率,结果表明半夏汤剂不引起微核率升高;人体外周血培养淋巴细胞姐妹染色单体交换(SCE)试验表明,半夏汤剂除相当于临床用量的150倍直接加入培养液,引起 SCE 频率显著增高外,其他中低剂量组均不能肯定升高,表明半夏汤剂对 DNA的损伤和修复过程影响不大。提示半夏汤剂不大可能出现遗传毒性。     

野罂粟提取物对人淋巴细胞的毒理效应

目的 :探讨野罂粟提取物对人淋巴细胞的毒理效应。方法 :采用细胞培养技术 ,检测提取物对人淋巴细胞微核率和姐妹染色单体互换 (SCE)率的影响。结果 :除 1mg组微核率与空白对照组无差异 (P >0 0 5)外 ,其余各浓度组均能导致人淋巴细胞微核率、SCE率升高。结论 :提取物各浓度组与微核率、SCE率之间存在着明显的剂量效应     

五子衍宗方对环磷酰胺致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响

目的:探讨五子衍宗方对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)致成年雄性小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤及P53通路的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及五子衍宗方低、高剂量组,五子衍宗方低、高剂量组分别提前灌胃给予五子衍宗方140、280 mg/kg,其余各组灌胃给予生理盐水。从第3天开始,除正常对照组腹腔注射生理盐水外,其余各组注射CTX 50 mg/kg,隔2 d注射1次,连续10次。参照精液分析方法检测小鼠精子浓度、精子形态正常率、精子活率;单细胞凝胶电泳观察小鼠睾丸细胞DNA损伤的变化;免疫组化检测小鼠睾丸DNA损伤蛋白γ-H2AX的定位与表达变化;Western blot检测小鼠睾丸生殖细胞内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21核内表达水平。结果:与模型组比较,五子衍宗方低、高剂量均可显著升高模型组小鼠精子浓度、精子形态正常率及精子活率,显著降低彗星尾长、尾距、Olive尾矩和尾部DNA百分率及睾丸组织中γ-H2AX的阳性点数。Western blot结果表明,与模型组比较,五子衍宗方可显著降低睾丸生殖细胞核内DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Ku70及DNA损伤修复相关蛋白p-P53、P21的表达。结论:五子衍宗方能显著减轻CTX致小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,其机制可能与调控P53信号通路有关。     

生血丸对甲醛致小鼠细胞损伤的影响

目的 探讨生血丸对甲醛致小鼠肺、肝、脾、骨髓细胞及外周血淋巴细胞损伤的预防与修复作用及机制。方法 将小鼠随机分5组：对照组、生血丸预防给药组（预防组）、生血丸治疗给药组（治疗组）、模型1组（对应治疗组）、模型2组（对应预防组）。ELISA法检测肺、肝、脾组织中羟自由基、超氧阴离子自由基、鸟氨酸脱羧酶（ODC）的活性。高倍镜下观察骨髓细胞及外周血淋巴细胞的微核率。结果 2个模型组小鼠肺、肝、脾组织内羟自由基、超氧阴离子自由基、ODC活性比对照组显著增加,骨髓细胞及外周血淋巴细胞的微核率显著增加（P<0.05）;生血丸预防组及治疗组小鼠的肺、肝、脾组织中羟自由基、超氧阴离子及ODC的活性与对应模型组比较显著降低（P<0.05）,外周血淋巴细胞的微核率显著降低（P<0.05）。结论 生血丸能有效预防和改善小鼠肺、肝、脾、骨髓细胞及外周血淋巴细胞由于甲醛造成的损伤。     

60Co γ射线照射联合三氧化二砷对人脑胶质瘤SHG44细胞DNA损伤的研究

目的研究60Coγ射线照射联合As2O3对SHG44细胞的生长抑制作用。方法以SHG44细胞为实验对象,3H-TdR掺入法研究As2O3和照射对SHG44细胞DNA合成率的影响;用单细胞凝胶电泳法,以DNA彗星尾长及尾部DNA百分含量来比较As2O3、照射分别单独作用及它们联合作用对细胞DNA的损伤。结果联合组SHG44细胞存活率低于As2O3(P<0.01);3组均诱导DNA损伤,联合作用组对细胞DNA的损伤程度明显高于照射及As2O3单独作用组。结论电离辐射和As2O3联合应用对SHG44细胞的杀灭作用均强于电离辐射和As2O3单独作用。     

黄酮类成分黄芩素、槲皮素、丹参素钠对吸烟致细胞毒性和DNA损伤的保护作用

目的评价吸烟致细胞毒性和DNA损伤以及黄酮类成分黄芩素、槲皮素、丹参素钠的保护作用。方法以自动吸烟机按照FTC协议吸烟产生的主流烟雾在线染毒B-16细胞和人颊黏膜细胞两种真核细胞,通过MTT比色法和单细胞凝胶电泳法检测吸烟所致的细胞毒性和DNA损伤,并考察黄芩素、槲皮素、丹参素钠的保护作用。结果吸烟可致体外培养的B-16细胞活力明显下降,两种细胞的DNA明显损伤。随着烟气作用时间的延长,表征细胞内DNA损伤程度的彗星尾矩、Olive尾矩都有增加;1mmol／L槲皮素、黄芩素和丹参素均可明显缓解吸烟引起的细胞毒性和DNA损伤,对B-16细胞的活力提升50％左右,对人颊黏膜细胞的DNA保护效果超过60％。结论吸烟可致细胞毒性和细胞DNA损伤,但是黄酮类成分黄芩素、槲皮素、丹参素钠均对细胞和DNA具有保护作用。     

~（60）Coγ射线照射联合三氧化二砷对人脑胶质瘤SHG44细胞DNA损伤的研究

目的研究60Coγ射线照射联合As2O3对SHG44细胞的生长抑制作用。方法以SHG44细胞为实验对象,3H-TdR掺入法研究As2O3和照射对SHG44细胞DNA合成率的影响;用单细胞凝胶电泳法,以DNA彗星尾长及尾部DNA百分含量来比较As2O3、照射分别单独作用及它们联合作用对细胞DNA的损伤。结果联合组SHG44细胞存活率低于As2O3（P〈0.01）;3组均诱导DNA损伤,联合作用组对细胞DNA的损伤程度明显高于照射及As2O3单独作用组。结论电离辐射和As2O3联合应用对SHG44细胞的杀灭作用均强于电离辐射和As2O3单独作用。