CD99基因转染对霍奇金淋巴瘤L428细胞株表型、细胞周期与凋亡的影响

目的:观察CD99基因转染对霍奇金淋巴瘤L428细胞株表型、细胞周期与凋亡的影响.方法:L428细胞分为3组:转染CD99基因组、转染空质粒组及空白对照组.采用免疫细胞化学方法检测3组细胞CD15、CD30与CD99的表达,并用流式细胞术分别检测细胞周期和细胞凋亡.结果:与其他2组相比,转染CD99基因组L428细胞CD15、CD30表达消失,但可检测到CD99的表达.3组细胞周期分布存在差异,转染CD99基因组细胞阻滞于G2/M期(F=24.85,P＜0.001).3组细胞凋亡率相比,差异有统计学意义(F=45.30,P＜0.001),其中转染CD99基因组细胞凋亡率为(12.7±4.6)%,高于转染空质粒组的(4.0±0.9)%和空白对照组的(3.6±1.6)%(P＜0.05).结论:CD99基因可能在霍奇金淋巴瘤的发生中起重要作用.     

CD99调控经典霍奇金淋巴瘤细胞株L428向B细胞方向分化

目的分析上调CD99基因对经典霍奇金淋巴瘤(cHL)细胞株L428形态和免疫表型的影响,探究CD99基因对H/RS细胞发生发展的意义。方法鬼笔环肽染色和大细胞计数分析过表达CD99基因对L428细胞形态的影响;免疫细胞化学和流式细胞检测分析上调CD99基因对L428细胞免疫表型的改变。结果 CD99基因的过表达导致L428细胞变小、骨架发生重建,丢失了cHL的诊断标记CD30和CD15,重现B细胞表型PAX5、CD19、CD79α、BCL-6和CD10。结论 CD99基因过表达调控L428细胞向B细胞方向转化,提示cHL的B细胞表型的缺失很可能是CD99基因下调的结果。     

霍奇金淋巴瘤CD99基因表达缺失的意义

目的:探讨经典型霍奇金淋巴瘤(cHL) R-S细胞CD99蛋白表达情况. 方法:将8例cHL全部按WHO新分类标准进行确诊,采用免疫组织化学SABC法进行CD99染色,观察每一病例R-S细胞阳性表达率;流式细胞仪检测B淋巴瘤DG75细胞株,T淋巴瘤Jurkat细胞株,霍奇金淋巴瘤L428, HDLM-2细胞株CD99蛋白表达情况. 结果:8例cHL中R-S细胞CD99阴性表达率为100% (8/8); DG75细胞株CD99表达阳性(87.3±0.4)%,Jurkat细胞株CD99表达阳性(96.8±0.6)%,L428细胞株CD99表达阳性(3.8±0.4)%,HDLM-2细胞株CD99表达(66.4±0.3)%阳性. 结论:CD99基因在霍奇金淋巴瘤表达缺失可作为诊断cHL的参考依据.     

霍奇金淋巴瘤细胞SHP1表达与CD99表达的关系

目的：探究霍奇金淋巴瘤（HL）细胞SH2结构域酪氨酸磷酸化酶（SHP1）表达与CD99表达的关系。方法荧光定量PCR（RT‐PCR）、Western blot检测 HL淋巴瘤细胞株L428细胞、B淋巴母细胞株IM9细胞、浆母细胞株KM3细胞及上调CD99的稳定细胞株L428‐CD99细胞中CD99和SHP1 mRNA、蛋白水平的表达;荧光共聚焦观测L428细胞中CD99与SHP1的表达及其共定位;IM9细胞瞬时干扰CD99在基因和蛋白水平检测SHP1的表达。结果 L428和KM3细胞CD99和SHP1 mR‐NA呈现低表达,L428‐CD99细胞SHP1基因和蛋白水平较L428细胞表达增高,其蛋白表达与基因转录水平表达趋势相一致;随着CD99的上调,SHP1基因和蛋白水平表达升高;CD99为细胞膜表达,SHP1为细胞质表达;瞬时干扰CD99后,SHP1在基因和蛋白水平表达均降低。结论 SHP1在 H L中低表达可能与其CD99缺失有关,其机制仍有待于研究。     

mic2/CD99基因克隆及在霍奇金淋巴瘤L428细胞株中表达

目的克隆mic2/CD99基因并表达于L428细胞株。方法通过PCR及双酶切方法,从Jurkat细胞基因组RNA中获得mic2/CD99全长基因编码序列,克隆到pcDNA3.1（＋）质粒载体上,构建包含mic2/CD99全长基因载体;用脂质体转染法将mic2/CD99全长基因载体转染至L428细胞系;并从分子水平验证其存在。结果RT-PCR方法扩增出大小为558bp片段,序列测定其编码序列正确,酶切鉴定亚克隆序列正确。结论成功构建了mic2/CD99全长基因载体,并稳定转染于L428细胞株中。     

CD30在霍奇金淋巴瘤的研究进展

霍奇金淋巴瘤（Hodgkin Lymphoma,HL）从最初发现至今已有近200年历史.HL是一类源于淋巴细胞的一种恶性病变,临床上常表现为始发于颈部的淋巴结进行性肿大,随疾病的发展逐渐累及到体内如胸腔,腹腔淋巴结,晚期可累及肝脾、骨髓和消化道,并最终导致死亡.随着诊疗技术及药物开发技术的发展和提高,HL已成为一种临床缓解率较高的肿瘤,多数患者获得了较高的生存率.HL的致病机制尚未完全阐明,被认为是多种机制共同作用的复杂过程.目前细胞因子表达,信号传导通路,免疫学表型及其形态学特点的研究,是病理学者以及临床专家关注的热点问题.近年来研究发现CD30及其活化形式在HL发生发展中扮演了重要作用,相关药物研发也在不断开展.现就CD30在HL的研究进展进行综述.     

PTTG 基因对非霍奇金淋巴瘤细胞增殖能力的影响

目的：观察垂体瘤转化基因（pituitary tumor-transforming gene ,PTTG）对非霍奇金淋巴瘤细胞SUDHL-4增殖能力的影响。方法通过shRNA的方法在高表达PTTG的SUDHL-4细胞中敲降PTTG基因,通过MTT实验、细胞周期分析检测SUDHL-4生物学行为的变化。结果 PTTG被敲降后SUDHL-4细胞的生长速度明显下降,细胞G0／G1比例、S期比例下降;G2／M期比例升高,细胞阻滞于G2／M期,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 PTTG基因可能在非霍奇金淋巴瘤的发生发展中起重要作用,可能成为判断非霍奇金淋巴瘤预后的分子标志物及临床治疗的靶点。     

经典型霍奇金淋巴瘤的病理诊断

目的 探讨霍奇金淋巴瘤(HL)的临床病理学及免疫组化特点.方法 分析诊断为HL的26例患者的临床病理资料,其中17例重新切片,做HE染色和免疫组化染色,光镜观察.结果 排除2例非霍奇金淋巴瘤,1例坏死性淋巴结炎,最终确定23例HL,且均为经典型,以混合细胞型为主.结论 霍奇金淋巴瘤的诊断完全依赖于病理活检.典型的R-S细胞对该病具有诊断价值;陷窝细胞的存在对结节硬化型霍奇金淋巴瘤亦具有诊断意义.     

非霍奇金淋巴瘤p27kipl的表达及意义

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)中p27kipl的表达情况及其临床病理意义.方法采用免疫组化SP法检测42例NHLp27kipl蛋白的表达,并结合临床病理资料进行分析.结果p27kipl蛋白阳性表达率为57%,p27kipl蛋白阳性表达与组织恶性程度和临床分期明显相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、免疫分型、临床症状及部位(结内或结外)无明显相关(P>0.05),p27kipl阳性病例治疗有效率明显高于p27kipl阴性病例的有效率.结论p27kipl蛋白表达下降可作为NHL恶性程度的指标和预后指标,并用于指导临床治疗.     

增殖细胞核抗原在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义

研究非霍奇金淋巴瘤 (NHL)中 ,增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达水平 ,探讨其与非霍奇金淋巴瘤恶性度的关系。方法 :常规HE染色进行组织学分类 ,利用免疫组织化学 (LSAB法 ) ,确定肿瘤的免疫表型 ,检测淋巴瘤中PCNA的表达。结果 :62例非霍奇金淋巴瘤中 ,低度恶性 3 9例 ,高度恶性 2 3例 ;48例为B细胞淋巴瘤 ,14例为T细胞淋巴瘤。该组病例中 ,PCNA阳性 62例 ,阳性细胞数均 10 %以上 ,PCNA的阳性程度与NHL的恶性度有关 ,在低度恶性组多表现为 ～ , 占 2 5 6% ,而高度恶性组只有 1例为 , 占 5 2 2 %。 10例淋巴结反应性增生组织中 ,滤泡中心可见少数 (阳性细胞数 <10 % )散在分布的PCNA阳性细胞。结论 :PCNA表达的阳性程度与NHL的恶性度有关 ;PC NA在NHL高度恶性组的高表达提示我们在组织学水平判断NHL的恶生程度PCNA将是很重要的参考标记物     

B细胞性非霍奇金淋巴瘤的CD44V6表达及其临床意义

目的：研究B细胞性非霍奇金淋巴瘤（NHLK）组织中的CD44变异体CD44V6的表达及其临床意义。方法：采用免疫组织化方法，检测49例B淋巴细胞性NHL，6例淋巴结反应性增生的CD44V6表达情况。结果：B细胞性NHLCD44V6基因蛋白表达阳性率明显高于淋巴结反应性增生，CD44V6阳性表达与病理分期，恶性有一定关系。结论：CD44V6与B细胞性NHL的发生，发展相关，可作为判断肿瘤预后的指标。     

非霍奇金淋巴瘤中p53基因mRNA的表达

目的　探索研究非霍奇金淋巴瘤中 p5 3mRNA的表达与突变型p5 3蛋白和临床病理的相关性。 方法　采用原位杂交和ABC法。结果　在 4 8例各型非霍奇金淋巴瘤中 p5 3mRNA有不同程度的表达 ,检出率为5 8.3 % ,突变型 p5 3蛋白染色阳性率 4 1.7% ;在突变型p5 3蛋白阳性组中 p5 3mRNA的检出率为 80 .0 % ,显著高于突变型 p5 3蛋白阴性组 ( 4 2 .8% ) (P <0 .0 5 )。 结论　在非霍奇金淋巴瘤中存在 p5 3基因突变 ,产生了突变型p5 3mRNA ,提示后者的表达增强可能是导致突变型 p5 3蛋白表达增强的主要原因之一。     

B细胞淋巴瘤/白血病-2基因、CD10和细胞周期蛋白D1在B细胞性非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义

目的 探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、CD10和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中的表达及临床意义.方法 选择2017年6月至2019年8月新乡医学院第一附属医院收治的78例B-NHL患者(B-NHL组)和50例淋巴组织反应性增生患者(对照组)为研究对象....     

B 细胞非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织CD22抗原表达检测及临床意义

 【目的】 检测CD22抗原在非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织中的表达,初步探讨CD22抗原在非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织的表达和临床病理特征的关系.【方法】 采用免疫组化方法检测B细胞非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织CD22抗原的表达,分析肿瘤组织CD22抗原表达和临床病理特征等的关系.结果】 CD22抗原在B细胞非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织阳性表达主要见于细胞浆和细胞膜?全组21例,阳性率100.00%(21/21),强阳性(+++)率14.29%(3/21),中等阳性(++)率33.33%(7/21),弱阳性率(+)52.38%(11/21),CD22表达与病理亚型,性别,年龄以及其它临床病理特征等无明显相关性.【结论】 CD22抗原在B细胞非霍奇金淋巴瘤中广泛表达,可以采用免疫组化的方法检测出,该方法简单易行,有一定临床应用前景;B细胞非霍奇金淋巴瘤组织CD22表达和临床病理特征的关系需进一步研究.     

fascin蛋白在经典型霍奇金淋巴瘤R-S细胞中的表达及其意义

目的 探讨经典型霍奇金淋巴瘤(CHL)R-S细胞中fascin蛋白的表达和意义.方法 收集27例CHL,采用免疫组化SP法标记fascin抗体,观察fascin蛋白在CHL中R-S细胞的表达,并比较其与CD30、CD15表达的差异性.结果 R-S细胞fascin的表达强度明显高于CD30和CD15.fascin蛋白在全部27例CHL R-S细胞胞浆中弥漫强阳性表达,阳性率为100%(27/27);CD30、CD15的表达强弱不等,阳性率分别为96.3%(26/27)、74.1%(20/27).结论 fascin蛋白是经典型霍奇金淋巴瘤R-S细胞高度敏感的标记物,它有助于诊断CHL,它的阴性表达具有排除CHL的意义.     

全反式维甲酸诱导经典型霍奇金淋巴瘤B细胞表型

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对经典型霍奇金淋巴瘤B细胞表型的诱导作用。方法构建含有G418抗性的B细胞特异性启动子(CD19,CD79a和CD79b)表达载体,转染霍奇金淋巴瘤细胞并筛选稳定克隆。PCR扩增启动子和荧光素酶序列验证其稳定整合,敲除ABF1后检测外源B细胞启动子活性的改变以验证其功能。检测不同浓度的ATRA在不同时间点对外源B细胞启动子活性的诱导作用,通过实时定量PCR进一步证实ATRA对B细胞特异性基因转录水平的影响;检测ATRA与去甲基化药物5-Aza联合处理对B细胞标记物表达的影响;通过流式细胞染色技术仪检测ATRA对霍奇金淋巴瘤细胞表面标记物CD30表达的影响。结果 ATRA能够诱导人经典型霍奇金淋巴瘤B细胞特异性标记物CD19、CD20、CD79a和CD79b的表达,与5-Aza具有协同诱导作用,并下调细胞表面霍奇金特异性抗原CD30的表达。结论 ATRA能够诱导B细胞表型缺失的经典型霍奇金淋巴瘤向B细胞型淋巴瘤转化。     

B细胞非霍奇金淋巴瘤重要相关基因的研究进展

B细胞非霍奇金淋巴瘤（NHL）是常见肿瘤之一，其发生、发展、恶性程度及预后与基因的异常表达有密切关系。本文选择与B细胞NHL相关的基因，就其对B细胞增殖、分化、凋亡影响的研究进展做一综述。     

B细胞特异性激活蛋白在经典型霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义

目的：探讨经典型霍奇金淋巴瘤（cHL)中H／RS细胞和背景淋巴细胞B细胞特异性湃活蛋白（BSAP）的表达及其意义。方法：用免疫组化方法对33例cHL和29例对照病例（9例反应性增生的淋巴结、10例B细胞性淋巴瘤、10例T细胞性淋巴瘤）进行BSAP检测,同时对cHL病例进行CD20、CD15、CD30常规对比检测。结果：cHL中H／RS细胞BSAP的表达率为90．91％,背景B淋巴细胞表达率为100％;对照病例中反应性增生淋巴结的B淋巴细胞和B细胞性淋巴瘤肿瘤细胞的BSAP表达均为100％,T细胞性淋巴瘤的肿瘤细胞不表达BSAP;CD20表达率为30.30%,BSAP和CD20的表达率差异有显著意义（P＝0．000）;CD30表达率为93．94％,CD15表达率为75．75％,两者的表达率差异无显著意义（P＝0．082）。结论：BSAP在H／RS细胞上表达为H／RS细胞来源于B细胞提供了进一步证据,并有助于H／RS细胞的辨别和鉴别。     

CD40基因特异性沉默对脑胶质瘤细胞株U87增殖和迁移的影响

目的探讨CD40基因特异性沉默对脑胶质瘤细胞增殖和迁移等恶性生物学行为的影响。方法构建特异性沉默CD40基因的重组表达载体（pSilencer3.1/shRNA-CD40）和随机对照载体（pSilencer3.1/shRNA-control）,转染脑胶质瘤细胞株U87。采用RT-PCR和流式细胞术分别在mRNA和蛋白水平的检测CD40基因沉默效率,进而采用细胞计数法和Transwell法观察下调CD40分子表达后的U87细胞在sCD40L作用下增殖能力和迁移能力的改变。结果成功构建了特异性沉默CD40基因的稳定细胞株U87/shRNA-CD40,可显著下调U87细胞CD40 mRNA和蛋白质表达水平（P〈0.05）。采用sCD40L激发CD40信号,结果显示,与野生型U87和对照组U87/shRNA-control相比,U87/shRNA-CD40细胞株增殖速率和迁移能力明显下降（均P〈0.01）。结论特异性沉默脑胶质瘤细胞CD40分子表达,可以有效削弱肿瘤微环境中CD40信号导致的脑胶质瘤细胞增殖和迁移能力,这为临床治疗脑胶质瘤提供了新的线索。     

经典型霍奇金淋巴瘤肿瘤细胞和背景淋巴细胞相关标记的表达

目的:探讨经典型霍奇金淋巴瘤中的肿瘤细胞和非肿瘤背景淋巴细胞蛋白表达的特征及差异性.方法:收集经典型霍奇金淋巴瘤68例,对诊断切片和免疫标记片重新复查,采用Envision法补做相关免疫组织化学标记,观察CD30、CD15及T/B表型等的表达.结果:肿瘤细胞和背景淋巴细胞CD30的表达率分别为86.76%(59/68)...