携带人护骨素基因的腺相关病毒在关节炎大鼠膝关节转导的初步研究

护骨素(OPG)是一种分泌型糖蛋白和缺乏跨膜结构域的肿瘤坏死因子受体超家族成员,主要通过与NF-кB受体活化因子配体(RANKL)结合而发挥骨保护作用.OPG不仅抑制破骨细胞生成,还抑制破骨细胞的骨吸收功能.各种上游因子如甲状旁腺激素、前列腺素、TNF、IL等最终均通过改变RANKL/OPG的比率而发挥作用,血清RANKL/OPG对早期类风湿关节炎的骨破坏具有预测作用[1].     

强直性脊柱炎外周血破骨细胞前体细胞活性的研究

目的 研究强直性脊柱炎(AS)患者外周血破骨细胞前体细胞(OCP)的数量及其与血清核因子(NF)-κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)浓度以及与病情活动性的相关性.方法 采用RANKL和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)体外诱导8例As患者和5名健康对照的外周血培养破骨细胞(OC).应用组织化学染色法对OC中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色.计数染色阳性胞核≥3个的细胞.骨吸收实验考察OC的功能.运用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测23例As患者和17名健康对照血清RANKL和OPG水平.对AS疾病活动性进行评估包括Bath强直性脊柱炎疾病活动指数(BASDAI)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP).对AS患者OCP数量与血清RANKUOPG比值及与病情活动性进行相关分析.统计分析采用t检验t'检验、Spearman相关分析.结果 ①As组外周血生成OC数量显著高于健康对照组(10.9±3.4与6.2±1.3,P<0.05);②AS组血清RANKL浓度、OPG浓度、RANKL/OPG比值显著高于健康对照组[(5.4±3.8)pg/ml与(1.6±0.8)pg/ml,(157±49)pg,ml与(105±20)pg/ml,0.037±0.026与0.016±0.008,P均<0.01)];③外周血生成OC数量与RANKL、RANKL/OPG比值呈正相关(r=0.692, P=0.009;r=0.813,P=0.001);④AS患者血清OPG浓度与BASDAI呈负相关(r=-0.444,P=0.044),血清RANKL浓度与BASDAI呈正相关(r=0.543,P=0.011),RANKL/OPG比值与BASI)AI呈正相关(r=0.672,R=0.001).结论 ①As患者外周血OCP数量显著增高,与关节骨质破坏程度密切相关可能是造成关节骨质破坏的机制;②AS患者OC活性增高的机制可能是炎症引起RANKL产量增多,RANKUOPG比值升高所致.     

OPG/RANKL/RANK系统在风湿性疾病中的研究进展

OPG/RANKL/RANK系统是近年来发现的在破骨细胞(osteoclast,OC)分化过程中的一个重要信号传导通路,包括:RANKL(ligand of receptor-activator of NF-KB),或称为破骨细胞分化因子(osteoclast differentiatioc factor, ODF);其受体是位于破骨细胞细胞膜上的RANK(receptor activator of NF-KB);骨保护素(osteoprotegerin,OPG)是RANKL的假性受体.     

仙灵骨葆含药血清对小鼠成骨-破骨细胞共培养系统的影响

目的 观察不同浓度仙灵骨葆含药血清在成骨细胞(OB)破骨细胞(OC)共同培养体系中对小鼠OB、OC功能的影响.方法 取小鼠OB系MC3T3-E1与小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7诱导成的破骨样细胞,建立细胞上清相通但细胞间不相互混杂的OB-OC共育体系,实验分为不同浓度(高、低)的仙灵骨葆含药血清组和空白对照组,光镜观察OB矿化结节及OC骨吸收陷窝数并计数,收集共育体系中1、3 d培养上清液,采用ELISA法测定OPG、RANKL的含量.结果 从形态和功能活性证实培养细胞为OB和破骨样细胞;三组细胞培养7 d后,可见仙灵骨葆高浓度组矿化结节计数值明显高于其余两组(P<0.01),低浓度组高于空白对照组(P<0.05).三组细胞培养7 d后,空白对照组骨吸收陷窝数明显多于其余两组(P<0.01),而仙灵骨葆高浓度组与低浓度组无显著性差异.三组培养液上清中OPG/RANKL比较,1 d后仙灵骨葆高浓度组与低浓度组比值显著高于空白对照组(P<0.05、P<0.01),3 d后仙灵骨葆高浓度组明显高于其余两组(P<0.05、P<0.01),且低浓度组明显高于空白对照组(P<0.05).结论 仙灵骨葆含药血清可促进共育系统中OB形成矿化结节的能力;减少破骨样细胞在骨磨片上形成吸收陷窝的能力;可影响体外培养OB-OC的功能调控信号系统,提高OPG/RANKL的比例,并呈现时间和剂量依赖性.     

骨保护素对骨代谢的调控作用

骨保护素（OPG）是近年来骨代谢研究领域新发现的一种可溶性肿瘤坏死因子（TNF）受体。近年来。OPG已被证实可调控破骨细胞（OC）和骨吸收，在骨吸收与重建中起关键作用，在代谢性骨病的发病和治疗中起重要作用。现结合文献对OPG的结构特征及其对骨代谢、代谢性骨病的影响综述如下。     

强直性脊柱炎继发骨质疏松及相关因素分析

目的 测定强直性脊柱炎(AS)患者骨密度(BMD)、血清骨保护素(OPG)、可溶性核因子κB受体活化因子配体(sRANKL)等骨代谢指标及外周血T细胞表面RANKL表达情况,研究RANKI/RANK/OPG系统在AS骨代谢中的作用.方法 双能X线吸收法(DEXA)测定AS患者BMD;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清OPG、sRANKL、抗酒石酸酸性磷酸酶异构体5b(TRACP-5b)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平;分析BMD、上述骨代谢指标及临床指标间相关性;流式细胞术(FC)检测外周血CD4+/RANKL+及CD8+/RANKL+细胞表达率;分析它们与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)相关性.计量资料采用成组设计的t检验,计数资料采用x2检验,相关性采用直线相关分析.结果 ①AS患者骨量减少、骨质疏松(OP)发生率分别为47%、37%.②AS组血清sRANKL、TRACP-5b水平及sRANKL/OPG比值均高于对照组(P<0.05);2组血清OPG、BALP水平差异无统计学意义.③AS组血清sRANKL水平与OPG呈正相关,两者均与TRACP-5b呈正相关(P<0.01.④AS组外周血CD4+/RANKL+细胞表达率高于对照组(P<0.05).结论 AS存在较高的骨量丢失率,其骨代谢特点以骨吸收增强为主,RANKL/RANK/OPG系统在其中起着重要作用,该系统失衡可能是AS骨量丢失机制之一;CD4+T细胞可能通过上调RANKL表达参与AS破骨细胞分化成熟及骨吸收机制.     

2型糖尿病患者护骨素基因多态性与大血管病变的关系

动脉粥样硬化所致的冠心病、脑梗死、外周动脉硬化等多种大血管并发症是糖尿病致死、致残的主要原因,确切的发病机制尚不完全清楚.护骨素(OPG)为TNF受体超家族新成员,是骨代谢的一个重要调节因子[1].近年研究发现,OPG亦是一重要的血管调节因子,与冠心病、糖尿病血管并发症等血管疾病相关联[2].本研究旨在探讨2型糖尿病患者血清OPG水平及OPG基因启动子950TC单核苷酸多态性与大血管并发症的关系.     

2型糖尿病并发周围血管病变患者血清骨代谢相关因子水平变化及其意义

目的 观察2型糖尿病（T2DM）并发糖尿病周围血管病（DPV）患者血清骨代谢相关因子[血清骨桥蛋白（OPN）、骨保护素（OPG）、骨钙素（OC）、维生素D(VD)]水平变化,并评估其对T2DM并发DPV的预测效能,为T2DM并发DPV的早期诊断提供新的生物标志物。方法 纳入111例T2DM患者,根据是否并发DPV(DPV)分为单纯T2DM组49例,DPV组62例。采用EILSA法检测血清骨桥蛋白（OPN）、骨保护素（OPG）,电化学发光法检测血清骨钙素（OC）,化学发光法检测血清维生素D(VD)。采用单因素及多因素Logistic回归分析T2DM并发DPV的影响因素,Spearman相关性分析血清OPN、OPG、OC水平与T2DM并发DPV患者糖尿病相关危险因素（年龄、病程、血压、血糖、血脂）的关系,受试者工作特征曲线（ROC）评估血清OPN、OPG、OC、VD水平对T2DM并发DPV的预测效能。结果 与单纯T2DM组对比,DPV组血清OPN、OPG水平高（P<0.05）,血清OC、VD水平低（P<0.05）。血清OPN、OPG、OC、VD是T2DM并发DPV的影响因素（P...     

20～75岁妇女血清护骨素、核因子-κB受体活化子配体的变化与年龄、停经、骨生化指标和骨密度的关系

目的　研究血清护骨素 (OPG)和核因子 κB受体活化子配体 (RANKL)与年龄、停经、骨生化指标和骨密度的关系 ,了解影响血清OPG和RANKL的因素。方法　在 5 0 4例 2 0～ 75岁的绝经前和绝经后妇女中 ,以双能X线吸收仪测定腰椎和股骨各处骨密度。按WHO标准 ,将绝经后妇女分为骨量正常、骨量减少和骨质疏松 3组。测定血清骨钙素 (BGP)、尿Ⅰ型胶原交联N端肽 (NTx)、血清OPG和RANKL ,计算RANKL/OPG比值。结果　年龄与血清OPG正相关 (r =0 4 4 2 ,P <0 0 0 1) ,与血清RANKL负相关 (r=- 0 2 6 3,P <0 0 0 1)。绝经后妇女的血清OPG(10 7 6± 3 0 )ng/L明显高于绝经前妇女 (72 0± 1 8)ng/L ,而血清RANKL(4 7± 0 4 )ng/L显著低于绝经前妇女 (5 8± 0 3)ng/L。校正年龄、停经年限和体重指数后 ,血清OPG、RANKL与腰椎和股骨各处骨密度无相关性。血清OPG与尿NTx/肌酐正相关 ;血清RANKL与血清BGP负相关。血清OPG和RANKL在绝经后骨质疏松组、骨量减少组和正常骨量组间差异无显著性。多元逐步回归分析显示 ,年龄、停经年限和骨转换指标是决定血清OPG RANKL系统的独立因素。结论　随年龄而升高的血清OPG可能是人体对抗绝经后骨吸收加快的一个代偿性反应 ,随年龄而下降的血清RANKL可能有益于恢复绝经后妇女的骨     

OPG/RANK/RANKL系统与骨折和类风湿性关节炎

骨保护素(OPG)、细胞核因子-κB受体活化因子(RANK)和RANK配体(RANKL)是偶联成骨细胞、基质细胞和破骨细胞分化、活化及生物活性的3种主要细胞因子,其形成的局部调节体系在骨代谢中起十分重要的作用。本文简要介绍了OPG/RANK/RANKL系统及该系统在骨质疏松性骨折发生中的作用,RANKL/OPG比值与骨折的关系,OPG和RANKL对骨折愈合的作用,血清OPG或RAN-KL水平与骨折的联系,OPG基因多态性与骨折关系的研究结果。另外还介绍其在类风湿性关节炎发病机制中的作用,OPG/RANK/RANKL与滑膜组织的联系,OPG治疗的相关实验进展。     

维吾尔族、汉族老年男性干部血骨保护素浓度与骨量异常的相关性

目的探讨新疆地区维吾尔族、汉族老年男性干部血骨保护素(OPG)浓度与骨量异常的相关性。方法选择维吾尔族、汉族老年男性干部,采用双能X线吸收法测量其左侧髋关节、左侧股骨颈、左侧大转子、左侧粗隆间部位的骨密度(BMD)。将入选对象分为骨量正常组及骨量异常组(骨量减少+骨质疏松)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血OPG浓度,分析OPG与骨量异常间的关系。结果 (1)骨量异常组血OPG平均浓度[1.522(1.375)ng/ml]明显低于骨量正常组[2.049(1.531)ng/ml],差异有统计学意义(P0.05),但按民族分层后此差异无统计学意义(P0.05)。(2)骨量异常组平均年龄[(74.800±7.581)岁]明显高于骨量正常组[(70.960±7.922)岁],差异有统计学意义(P0.05);按民族分层后汉族人群骨量异常组平均年龄[(76.63±7.232)岁]明显大于骨量正常组[(72.080±8.071)岁],差异有统计学意义,但维吾尔族年龄在两组间差异无统计学意义(P=0.05)。Spearman相关性分析提示:维吾尔族血OPG浓度与粗隆间BMD、髋关节BMD呈正相关(均P0.05),但控制年龄因素后二者无相关性(P0.05)。经多因素Logistic回归分析:年龄OR=1.081(95%CI 1.038～1.125)为独立于血OPG、体重指数、腰围、血钙、民族、吸烟、饮酒、高血压、冠心病、血脂异常的危险因素(P0.05)。结论生活在新疆地区的维吾尔族、汉族老年男性干部血OPG浓度与骨量异常无明显相关性,年龄为骨量异常的独立危险因素。     

OPG/RANKL/RANK信号通路在非酒精性脂肪性肝病进展中的作用

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)已成为全球范围内最常见的肝脏疾病,在现有基础上更好诊断、治疗NAFLD也愈发迫切。骨保护素(OPG)/NF-κB受体活化因子(RANKL)/NF-κB受体活化因子受体(RANK)信号通路是参与骨代谢平衡的重要信号通路。分别介绍了OPG、RANKL、RANK及OPG/RANKL/RANK系统,简述了OPG/RANKL/RANK信号通路通过激活NF-κB调节炎症因子生成,促使NAFLD发展的研究现状。指出OPG/RANKL/RANK系统可作为NAFLD治疗的潜在新靶点。     

胰高血糖素样肽-1及其类似物的降糖机制

破骨细胞生成抑制因子 (OCIF) /骨保护素 (osteoprotegerin ,OPG)是一种新发现的以可溶性蛋白质形式存在的破骨细胞负性调节因子 ,属于肿瘤坏死因子受体超家族成员 ,其配基ODF/OPGL被证明是破骨细胞分化因子 ,OCIF/OPG可与其配基结合阻断其配基的信号下传而抑制破骨细胞生成、活化 ,其它骨吸收调节因子可能部分或全部通过调节OCIF/OPG生成而发挥作用。该因子的发现 ,为探讨骨质疏松的发病机制及其预防和治疗提出了新方向。     

护骨素在强直性脊柱炎外周关节骨质破坏病理机制中的作用

目的检测护骨素(OPG)在强直性脊柱炎(AS)外周关节滑膜组织中的表达,并以类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)患者和健康志愿者外周关节滑膜组织为对照,了解OPG表达与AS患者外周关节骨质破坏病理改变的相关性。方法应用单克隆抗体,通过免疫组织化学方法检测13例AS、16例RA、17例OA及6名健康对照关节滑膜组织中OPG的表达及分布状况,并通过计算机辅助图像分析系统和半定量分析方法确定OPG在各滑膜组织中表达水平之间的差异,分析OPG表达与炎性指标及关节X线分期之间的相关性。结果OPG蛋白在所有13例AS滑膜组织中均有阳性表达,阳性细胞主要分布于滑膜衬里层、衬里下层区域,滑膜软骨交界区OPG表达明显低于滑膜衬里层和衬里下层;2名健康对照滑膜组织中有阳性表达,但明显低于AS患者组。RA及OA患者组未见OPG阳性表达。结论譹AS组滑膜组织中OPG表达水平明显高于健康对照组(P<0.01),而RA、OA滑膜组织中未见OPG表达,说明OPG的高水平表达是滑膜组织对炎症反应/关节破坏所特有的表现,OPG的局部表达是维持AS关节骨代谢稳定的重要因素,这可能是大多数AS患者外周关节受累预后好于RA的原因之一。譺AS患者组滑膜软骨交界区中OPG表达量显著减少可能是导致关节骨质破坏的重要原因,提示关节局部应用OPG治疗有可能改善受累关节的骨     

破骨细胞相关的分化因子与风湿性疾病的骨代谢

骨是一种动态的组织，骨的代谢是骨吸收和与之相伴随的骨形成过程。这一过程维持着骨的平衡，该平衡的破坏，将导致骨量的减少——骨质疏松(osteoporosis)或骨量的增多——骨质硬化(osteopetrosis)。破骨细胞(osteoclasts，OC)来源于骨髓中的单核巨噬细胞集落形成单位(granulocyte     

OCIF/OPG的研究进展

破骨细胞生成抑制因子(OCIF)/骨保护素(osteoprotegerin,OPG)是一种新发现的以可溶性蛋白质形式存在的破骨细胞负性调节因子,属于肿瘤坏死因子受体超家族成员,其配基ODF/OPGL被证明是破骨细胞分化因子,OCIF/OPG可与其配基结合阻断其配基的信号下传而抑制破骨细胞生成、活化,其它骨吸收调节因子可能部分或全部通过调节OCIF/OPG生成而发挥作用.该因子的发现,为探讨骨质疏松的发病机制及其预防和治疗提出了新方向.     

前列腺素E_2对人成骨样细胞白介素-6,骨保护素配体/骨保护素mRNA表达的影响

目的研究前列腺素E2(PGE2)对人成骨瘤细胞MG-63分泌的细胞因子白介素-6(IL-6)、骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)、骨保护素配体(L igand of receptor activator ofNF-κB,RANKL)表达的调节,探讨PGE引发骨吸收的机制。方法体外培养成骨瘤细胞株(MG-63),分别给予不同剂量的PGE2进行干预试验,用钙估法显示成骨细胞碱性磷酸酶的表达;用MTT法测定PGE2对MG-63细胞刺激增殖作用;提取总RNA进行半定量逆转录PCR分析,检测IL-6,OPG,RANKL基因表达水平的改变。结果PGE2减少碱性磷酸酶的表达,抑制MG-63细胞的增殖,并呈剂量依赖性的上调IL-6mRNA,RANKL/OPG mRNA水平。结论PGE2可以通过IL-6,RANKL/OPG mRNA基因水平的上调,促进骨吸收,此可能为PGE2导致溶骨性病变的重要发病机制。     

破骨细胞在类风湿关节炎骨破坏中的作用研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性疾病,可引起关节疼痛、肿胀、僵硬,永久性关节破坏,严重损害时可导致残疾和畸形,其主要特征是关节滑膜的炎症和软骨、骨进行性破坏[1].骨质破坏及由此产生的功能障碍是RA致残的主要原因,多种细胞参与该过程[2],其中破骨细胞在RA骨破坏中发挥关键性的作用[3],其作用过程主要包括:破骨前体细胞的迁移、分化和破骨细胞的骨吸收.研究发现,RA病程中破骨细胞受到一系列调控因素作用,了解这些调控机制,有助于我们寻找到干预RA骨破坏的作用靶点.现就破骨细胞在RA骨破坏中的作用研究进展综述如下.     

WISP1与骨质疏松症关系的研究进展

骨质疏松症(osteoporosis,OP)的病因主要为由成骨细胞(osteoblast,OB)介导的骨形成与由破骨细胞(osteoclast,OC)介导的骨吸收之间的平衡失调,骨形成/骨吸收比例降低,导致进行性骨丢失。Wnt1诱导信号通路蛋白1(Wnt1-inducible signaling pathway pro...     

丹蓝仙硼疗氟胶囊对氟中毒大鼠骨保护素/核因子κβ受体活化因子配体/核因子κβ受体活化因子系统表达水平的影响

目的 观察慢性氟中毒大鼠骨组织中骨保护素(OPG)、核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)、核因子κβ受体活化因子(RANK)蛋白表达水平,探讨OPG/RAN KL/RANK系统与慢性氟中毒大鼠骨骼损伤的关系及丹蓝仙硼疗氟胶囊的拮抗作用.方法 将SD大鼠按体质量随机分为6组(组内雌雄各半):氟中毒组、高剂量药物组、中剂量药物组、低剂量药物组、对照组、硼砂(阳性药物对照)组,每组12只.对照组饮用自来水,其余5个实验组饮用含氟水(50 mg/L),而高、中、低剂量药物组另摄入丹蓝仙硼疗氟胶囊,剂量分别为0.8、O.4、O.2 g/kg,硼砂组另摄入硼砂,剂量为0.8 g/kg.6个月时用免疫组织化学方法检测OPG、RANKL、RANK蛋白在大鼠股骨干骺端的表达.结果 与对照组(173.79±5.23、174.17±5.O1、155.63±7.11)比较,氟中毒组大鼠股骨干骺端OPG、RANKL(156.83±5.80、157.74±6.70)表达增高,RANK(173.92±4.37)表达降低,差异有统计学意义(P均＜0.05).与氟中毒组比较,高、中剂量药物组OPG、RANKL(169.67±5.07、168.08±5.05,170.78±5.01、168.41±7.19)表达降低,RANK(162.12±4.24、166.69±5.78)表达增高,差异有统计学意义(P均＜O.05).与硼砂组(167.27±4.08、167.85±5.O1、166.14±3.95)比较,低剂量药物组OPG、RANKL(163.40±4.11、159.49±5.78)表达增高,RANK(171.54±8.06)表达降低,而高剂量药物组RANK(162.12±4.24)表达增高,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 慢性氟中毒可引起成骨与破骨活动均增强的骨转换增高状态,并可通过改变OPG/RANKL/RANK系统表达影响骨吸收的程度.丹蓝仙硼疗氟胶囊能通过OPG/RANKL/RANK系统影响骨重建,对氟致骨损伤有拮抗作用.