基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在幽门螺杆菌检测中的应用

目的 建立并评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对幽门螺杆菌(Hp)的鉴定能力及Hp耐药性菌株对检测结果的影响.方法 MALDI-TOF MS自建库中的Hp来源于样本库中经传统方法鉴定和药物敏感试验并已进行全基因测序确认的菌株,随机取其中对药物全敏感的Hp菌株10株,用MALDI-TOF M...     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物检验的应用进展

<正>基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)是一种新型的质谱技术,具有灵敏度高,样品用量少,分析速度快的特点。目前,MALDI-TOF已开始应用于多项微生物的检测,为临床疾病的诊疗提供有效的指导。1 MALDI-TOF鉴定微生物的特点及优势MALDI-TOF系统由基质辅助激光解吸电离离子源(MALDI)、飞行时间质量分析器(TOF)和检测器组成,属于一种软电离技术,适用于混合物及生物大分子的测定〔1〕。其原理是利用激光照射待测物与基质形成的共结晶薄膜,通过基质吸收能量并将能量转移至待测物分子,使分子解离成离子,利用离子在     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在直接鉴定血流感染病原菌中的应用

目的探讨利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立血流感染病原菌快速、准确的鉴定方法。方法收集郑州大学附属儿童医院检验科2017-07～2017-12血培养仪阳性报警血培养瓶524个,抽吸血培养瓶中血液至血清分离胶管,采用差速离心法富集细菌,利用MALDI-TOF MS对富集后的菌液进行快速鉴定,并与传统培养24～48 h后形成的菌落最终鉴定结果进行比较。结果阳性报警血培养瓶524个,496个为单菌株血流感染,16个为混合菌感染,12例血培养报警假阳性结果。在496个单菌株所致血流感染样本中,菌株的属、种鉴定符合率分别为98.6%(489/496)和95.8%(475/496)。其中,120株革兰阴性菌属、种鉴定符合率分别为99.2%(119/120)和98.3%(118/120); 376株革兰阳性菌属、种鉴定符合率分别为98.4%(370/376)和94.9%(357/376)。16个混合菌感染样本及12个血培养报警假阳性样本均未得到鉴定结果。结论该研究利用MALDI-TOF MS对差速离心富集后的菌液进行直接鉴定,与传统的培养鉴定方法相比,对血流感染中主要病原菌的鉴定符合率较高,且方法快速、简便,成本低廉,有效缩短了检测时间,而且鉴定准确率高,适合在临床微生物实验室中推广应用。     

MALDI-TOF-MS技术应用于消化道肿瘤蛋白组学的研究进展

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)技术作为一种生物质谱技术，可广泛应用于基因突变检测、基因多态性研究、微生物鉴定、肿瘤生物学标志物检测等方面，其对于早期疾病的发现、治疗以及评估预后有着重要指导意义，已成为精准医学领域不可缺少的分子诊断技术。本文对MALDI-TOF-MS技术在消化道肿瘤蛋白质组学的应用方面进行综述。     

MALDI-TOF-MS技术应用于非肝癌肝病蛋白质组学的研究进展

蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象的一门新兴学科,其研究技术主要包括双向凝胶电泳、质谱（主要包括MALDI-TOF-MS和SELDI-TOF-MS技术）和生物信息学技术。目前我国慢性肝病主要是以乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染所导致的慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化以及肝癌等为主,蛋白质组学技术在肝癌中的研究较多,而对非肝癌肝病文献较少也比较零散。因此,本文从MALDI-TOF-MS技术在该领域研究应用方面对肝病蛋白质组学研究作一综述。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对分枝杆菌液体培养系统菌种鉴定的临床研究

目的 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^TM MGIT^TM 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为临床早期、精准治疗提供病原学依据。方法 选取我院Bactec^TM MGIT^TM 960分枝杆菌快速液体培养的阳性培养物为研究对象,通过不同的孵育时间、不同大小的研磨珠处理、不同的破壁方式摸索出MALDI-TOF MS对Bactec^TM MGIT^TM 960阳性培养物鉴定的“最优处理方法”,并将所有结果与基因芯片法菌种鉴定做参照进行比对,鉴定不一致的结果通过基因测序确认。结果 Bactec^TM MGIT^TM 960液体培养报阳性后增加孵育时间可提高检出率及鉴定分值,同时使用0.5 mm的氧化锆珠研磨,使用超声震荡混匀处理,鉴定效果最佳。鉴定结果方面,液体系统报阳的420份阳性标本,基因芯片法鉴定结果为结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核菌占28.81% (121/420),9例未鉴定出,未鉴定占2.14%(9/420),错误鉴定占0.95%(4/420),总鉴定率为97.86%(411/420);采用MALDI-TOF MS质谱鉴定420份阳性标本中鉴定出419例,其中结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核占30.00%(126/420),星型奴卡菌0.48%(2/420),巴西奴卡菌占0.24%(1/420),1例未鉴定出,总鉴定率为99.76%。质谱鉴定分值≥2.0的400例占95.24%,分值在1.7~2.0的19例占4.52%,分值<1.7的1例占0.24%。结论 本实验实现了Bactec^TM MGIT^TM 960液体培养阳性培养物的直接质谱鉴定,缩短了培养鉴定的时间,将分枝杆菌鉴定到种水平,能区分出结核菌与非结核菌,同时也能将与分枝杆菌相似的奴卡菌鉴定出来,对临床疾病的鉴别诊断起到了积极的作用。     

MALDI-TOF-MS技术应用于肝细胞癌蛋白质组学的研究进展

蛋白质组学（proteomics）是从整体水平对蛋白质进行研究的一门重要学科。蛋白质组学技术为开展HCC研究建立了新的技术平台并已经做了大量工作，筛选出有潜在价值的用于HCC诊断和预后的蛋白及发现新的治疗药物靶点，为HCC的诊断和治疗带来新的机遇。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱是蛋白质组学研究的核心技术之一。作者拟从MALDI—TOF-MS技术在肝细胞癌蛋白质组学研究中的应用方面作一综述。     

日本血吸虫感染兔血清蛋白质质谱分析

目的通过对感染日本血吸虫兔血清进行蛋白质质谱分析,确定有潜在诊断意义的标志蛋白,为日本血吸虫病血清学诊断提供理论依据。方法取不同感染时期的兔血清,利用WCX磁珠纯化试剂盒富集血清蛋白,应用基质辅助激光解吸电离飞行时同质谱（MAIDI—TOF-MS）技术进行分析。结果与正常兔血清蛋白指纹图谱比较,在Mr1000-12000区段,不同感染时期实验兔血清分析共有63个蛋白峰,其中7种蛋白有显著差异,利用BrukerClinProTools软件分析,在感染后第6天,Mr1787蛋白有显著上调（P〈O．05）;感染后第9天,Mr2834蛋白有极显著上调（P〈0．01）,另外Mr3483蛋白有显著上调（P〈0.05）,Mr4018蛋白有显著下调（P〈0.05）;在感染后第12天,Mr3151蛋白有显著下调（P〈0.05）,而Mr4018蛋白在感染后第12天,则出现极显著下调（P〈0.01）,两者趋势一直持续至感染后第30天。家兔感染后第9～12天,血清中Mr3530蛋白有显著上调（P〈0.05）,Mr1716蛋白显著下调（P〈0.05）;第12~30天血清中Mr3151、3530蛋白有显著下调（P均〈0.05）。结论MALDI-TOF-MS结合磁珠富集技术可发现及检测日本血吸虫病具有潜能的早期生物标志物,为从蛋白质水平研究日本血吸虫病免疫诊断及寻找新的治疗靶位奠定了基础。     

SELDI-TOF-MS技术及其在糖尿病研究中的应用

表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）技术是蛋白质组学的重要检测技术之一，不同性质的芯片能捕获各种不同性质的蛋白质。该技术具有高通量、高灵敏度、自动化等特点，可直接应用于临床，在基础研究和临床应用方面发展迅速。但是，在糖尿病及其并发症的研究中应用不多。本文就其技术原理和目前在糖尿病研究中应用的现状作一介绍。SELDI-TOF-MS技术将为糖尿病及其并发症的研究和防治提供新的平台。     

Bruker Biotyper和Vitek MS系统质谱分析鉴定革兰阴性菌临床分离株的比较研究

目的比较并评价两种基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)系统——Bruker MALDI Biotyper系统(以下简称Bruker Biotyper系统)和MALDITOF Vitek MS系统(以下简称Vitek MS系统)在革兰阴性菌临床分离株鉴定中的应用。方法收集沈阳军区总医院2012年3月—2013年1月分离自血液、尿液、脑脊液、分泌物、伤口拭子和痰液临床标本的革兰阴性菌共120株。应用Vitek 2 Compact生化鉴定系统将每株细菌鉴定到种,而后采用Bruker Biotyper和Vitek MS系统对其进行鉴定,三者鉴定结果存在差异的菌株经16S rDNA测序最终确认菌种。结果对于120株革兰阴性菌临床分离株,Bruker Biotyper和Vitek MS系统在属的水平上正确鉴定率分别为95.0%和92.5%,在种的水平上正确鉴定率分别为89.2%和86.7%,差异均无统计学意义。结论 Bruker Biotyper和Vitek MS系统对革兰阴性菌临床分离株的正确鉴定率不存在差异,两种系统的鉴定结果与各自的图谱数据库有密切关系。     

表面增强的激光解析电离飞行时间质谱技术在肝细胞癌血清学诊断中的应用

目的:检测HBV感染携带者与肝细胞癌(HCC)患者血清蛋白质的差异性表达,以发现HCC的肿瘤诊断标志物.方法:用表面增强的激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测27例HCC患者,27例HBV感染携带者,25例健康对照血清中的蛋白质谱,并用Biomarker Patterns System 5．0软件分析,建立诊断模型．结果:检测HCC患者与HBV感染携带者。正常对照与HCC患者,正常对照与HBV感染携带者的差异性蛋白分子,据此构建分类模型,得到的灵敏度和特异度分别为93％,85％; 96％,96％;84％,89％．其中相对分子质量为8141 Da的蛋白峰在HCC组明显高于HBV感染组(p<10-5);相对分子质量为3448 Da的蛋白峰在HCC及HBV感染携带组表达均较正常组显著增高(P<10-5),而在HCC-HBV组无明显差异(P>0．05),提示其可能为HBV感染的一种标志蛋白;相对分子质量为777) Da的蛋白峰在3组中均有差异性表达．结论:SELDI蛋白芯片技术检测血清蛋白质谱法诊断HCC具有较高的灵敏度和特异度,操作简单快捷,临床应用前景广阔,为HCC诊断提供了新的血清学方法．     

基因芯片技术在呼吸系统疾病中的应用研究

基因芯片技术是建立在杂交序列基本理论上的分子生物学技术,具有高度平行性、多样性、微型性和自动化的特点.由于其克服了传统核酸印迹杂交技术操作复杂、自动化程度低、效率低的缺点,在疾病研究中发挥着越来越重要的作用,其在呼吸系统疾病研究中的应用也越来越深入.本文综述了基因芯片技术在部分呼吸系统疾病研究中的应用,并简述了其在本系统疾病研究中的应用前景.     

基因芯片技术在疟疾研究中的应用

20世纪80年代末发展起来的基因芯片技术在生命科学众多研究领域中已显示出强大优势。恶性疟原虫和冈比亚按蚊全基因组测序完成后，该技术开始逐步应用于疟原虫、传疟按蚊以及疟疾动物模型的研究。该文概述了基因芯片的基本原理及其在疟疾研究中的应用。     

基因芯片技术在胰腺癌中的应用进展

基因芯片技术是近几年发展起来的一项生物技术,可同时对大量基因的表达、突变和多态性进行快速、准确的检测。基因芯片技术为研究肿瘤发生、发展中基因功能分析,提供了强有力的工具。胰腺癌在我国的发病率逐年增长,利用基因芯片技术,为胰腺癌的分子病理诊断、临床预后判断及治疗方案的选择提供理论指导。这必将加速对胰腺癌发生、发展机制的了解,为进一步诊断和治疗提供理论基础。     

基因芯片技术及其在寄生虫学研究中的应用

随着人类基因组计划(human genome project,HGP)和一些模式生物基因组计划的完成,基因序列数据正以前所未有的速度迅速增长,对基因组学的研究已从结构基因组学逐步转向了功能基因组学.由于基因芯片技术操作简便,获得的信息高度特异、稳定,在寄生虫学研究领域已得到广泛应用.随着寄生虫分子遗传学研究的进展和寄生...     

微流控芯片技术在心血管疾病研究中的应用

心血管疾病是威胁人类健康的重要疾病，具有很高的致死率和致残率，已成为现代医学研究的热点话题。将传统实验技术用于心血管疾病发生机制、诊断及治疗等方面的研究具有一定局限性。微流控芯片技术是一项新型实验研究手段，具有微型化、集成化、高通量、低消耗、高灵敏、分析速度快等特点，其在体外生物模型构建、生物分子检测、药物疗效评价及筛选等方面较传统技术具有优势，现已逐渐应用于医学生物学研究的多个领域。本文谨对微流控芯片技术在心血管疾病研究领域的应用进行简要综述。     

SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断和介入治疗评价中的价值

目的:建立肝癌血清学诊断模型,探讨评估SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断和介入治疗评价中的价值.方法:用弱阳离子交换芯片(CM10芯片)和表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪(surface-enhanced laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术,测定60例肝癌患者和60例正常对照者的血清蛋白质指纹图谱,应用BiomarkerWizard统计软件比较肝癌组和正常对照组血清蛋白质表达的差异性,采用Biomarker Pattern软件分析数据建立肝癌诊断模型,比较介入治疗前后血清蛋白质指纹图谱的差异性.结果:在质荷比(M/Z)为2000-10000范围内,和正常血清比较,肝癌的差异峰有3个(M/Z为4182Da、5710Da、6992Da;P<0.01),4182Da和5710Da下调,6992Da上调.用这3个差异蛋白峰建立肝癌诊断模型,诊断肝癌的灵敏度为93.3%(28/30),特异度为90.0%(27/30),正确率为91.7%(55/60),约登指数为0.833.差异蛋白峰(M/Z4182Da)在介入术后1mo明显上调(P<0.05).结论:应用SELDI-TOF-MS技术进行肝癌血清蛋白质指纹图谱分析,建立肝癌诊断树模型,对肝癌的诊断有一定的价值;筛选出的差异蛋白峰对肝癌的介入治疗评估有一定的应用价值.     

多项肿瘤标志物蛋白芯片在原发性肝癌诊断上的应用

目的探讨多项肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对原发性肝癌的诊断价值.方法采用蛋白芯片检测技术,对93例原发性肝癌、71例非癌性肝病、49例健康献血员血清中的12种肿瘤标志物进行定量分析.结果对原发性肝癌诊断的敏感性为88.1%,特异性为87.3%.原发性肝癌组与非癌性肝病组比较差异显著(P＜0.01).结论多项肿瘤标志物蛋白芯片检测系统可用于对肝癌高危人群的筛查,联合多因素分析亦有助于原发性肝癌的早期诊断.     

多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统对胰腺癌的诊断价值

目的 探讨多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统对胰腺癌的诊断价值。方法 用多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统测定30例胰腺癌患者和30例健康人群血清12项肿瘤标志物(CA19-9、CA242、CEA、CA15-3 CA125、AFP、PSA、F-PSA、NSE、β-HCG、HGH、Fer)的含量。结果 30例胰腺癌患者中有27例上述血清肿瘤标志物阳性，阳性率为90％，健康人血清有3例肿瘤标志物阳性，阳性率为10％。从12项肿瘤标志物中筛选出有诊断意义的标志物是CA19-9、CA242和CEA。其中CA19-9敏感度和特异度最好，分别达80％和90％，联合检测可提高敏感度，达93．3％。结论 多肿瘤标志物蛋白芯片诊断系统对胰腺癌的诊断有一定的价值。