环磷酰胺诱导建立少精／无精症大鼠模型所致睾丸、附睾IGF—Ⅰ和bFGF的变化

目的 探讨环磷酰胺（CP）对大鼠附睾的组织中胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）和碱性成纤维细胞因子（bFGF）表达的影响。方法 96只8周龄成年雄性SD大鼠，分为6组，每组16只。第1～5组分别给予CP10、20、40、80、100mg／kg·d，第6组为对照组，给予生理盐水2ml。胃管给药2周和4周后，处死大鼠，采用ELISA法对附睾组织洗脱液IGF-Ⅰ和bFGF进行定量检测；同时采用SP免疫组化法检测睾丸组织IGF-Ⅰ和bFGF的表达。结果 随着CP处理时间的延长和剂量的增加，IGF-Ⅰ和bFGF在大鼠附睾中的浓度逐渐下降，大鼠睾组织睾中IGF-Ⅰ和bFGF的表达也降低。结论 CP在引起大鼠少精子／无精子症的同时，可以显著降低大鼠附睾、睾丸IGF-Ⅰ和bFGF的含量和表达水平。IGF-Ⅰ和bFGF的降低与CP降低大鼠生精功能明显相关。     

环磷酰胺和白消安构建Wistar大鼠非梗阻性无精子症模型的比较

目的 探讨环磷酰胺和白消安制作Wistar大鼠非梗阻性无精子症模型的方法.方法 160只SPF级成年雄性Wistar大鼠随机分为10组,每组16只,第A-C组分别予以白消安20 mg/kg,15 mg/kg,10 mg/kg单次腹腔注射,第D-F组分别予以环磷酰胺200 mg/kg,100 mg/kg,75 mg/kg单次腹腔注射,第G-I组分别以白消安40mg/kg,20 mg/kg,环磷酰胺200 mg/kg单次灌胃给药,第J组予以生理盐水2.0 mL行单次腹腔注射.用药至大鼠的一个生殖周期后睾丸、附睾组织切片找不到精子和精子细胞即为无精症模型成功.结合用药方式、模型成功率等得出实用的成模方式.结果 用药后38d,存活大鼠睾丸及附睾组织切片结果提示第A,B,G,H组达到无精症模型的标准,即睾丸、附睾组织切片找不到精子和精子细胞,其大鼠存活率分别为18.75％、50.00％、6.25％、12.5％,其余各组大鼠无精症模型效果欠佳.各组成模方式的比较,白消安15 mg/kg单次腹腔注射其造模成功率较高且死亡率较低,是实用的Wistar大鼠无精子症模型制作方式.结论 白消安15 mg/kg单次腹腔注射可获得Wistar大鼠非梗阻性无精子症模型,模型成功率为50％.     

加味聚精食疗方对少、弱精子症大鼠EGF、EGFR睾丸内表达的影响

目的观察加味聚精食疗方对少、弱精子症大鼠表皮生长因子（EGF）、表皮生长因子受体（EGFR）睾丸内表达的影响。方法 60只3月龄雄性SD大鼠采取随机化法分为六组：G1组、G2组、G3组、G4组、G5组、G6组,每组10只。G1组蒸馏水灌胃52 d;其余五组予雷公藤多苷（GTW）灌胃26 d造模。造模结束后,G6组立即脱颈处死,以了解造模质量;G2组加味聚精食疗方灌胃;G3组枸橼酸他莫昔芬片灌胃;G4组五子衍宗片灌胃;G5组蒸馏水灌胃,以上均每天1次,连续26 d。治疗结束后CASA技术检测大鼠附睾精子质量;Envision两步法检测睾丸组织EGF、EGFR的表达。结果G6组附睾精子质量的各项指标均较G1组明显减低（P〈0.05）,显示造模成功。G2组附睾精子质量所有指标均明显优于G5、G6组（P〈0.05）。G2组附睾精子密度明显优于G3、G4组（P〈0.05）。G1、G2组附睾精子质量所有指标组间比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。G1、G2组大鼠睾丸组织EGF、EGFR表达水平明显优于G5、G6组（P〈0.05）。结论加味聚精食疗方能显著上调大鼠睾丸间质细胞EGF、EGFR的表达水平,改善精子质量。     

营养性肥胖对大鼠精子的影响

目的:观察营养性肥胖对雄性大鼠睾丸生精功能的影响。方法:健康青春期SD雄性大鼠20只,按随机化原则分为两组,每组10只,正常对照组给予普通饲料喂养,高脂饮食组用高脂、高热量饲料喂养12周,取附睾精子观察精子密度、活力,光镜下观察睾丸组织显微结构的变化。结果:高脂饮食组精子密度、活动率、前向运动精子、快速前向运动精子百分比均有不同程度的降低(P<0.01),睾丸组织的显微结构改变。结论:营养性肥胖影响了大鼠睾丸的发育,精子密度、活力都下降。     

左归丸对少弱精子症模型大鼠睾丸组织干细胞因子及其mRNA表达的影响研究

目的　观察左归丸对雷公藤多苷（GTW）诱导的少弱精子症模型大鼠睾丸干细胞因子（SCF）及其mRNA表达的影响,初步探讨其改善模型大鼠生殖功能的机制。方法　2014年3—4月选取36只SPF级SD大鼠,随机分为正常组、雷公藤多苷模型组、左归丸治疗组,每组12只。正常组全程给予去离子水灌胃干预;实验前4周,雷公藤多苷模型组、左归丸治疗组均给予雷公藤多苷40 mg?kg-1?d-1造模;实验第5~8周,雷公藤多苷模型组给予去离子水灌胃干预,左归丸治疗组给予左归丸6 g?kg-1?d-1。8周后处死所有大鼠,无菌留取睾丸组织,并进行固定、包埋、切片。采用免疫组化法检测各组大鼠睾丸组织SCF表达水平,采用Real-time PCR法检测各组大鼠睾丸组织SCF mRNA表达水平。结果　左归丸治疗组大鼠睾丸组织SCF及其mRNA表达水平高于雷公藤多苷模型组（P<0.05）。结论　左归丸可通过上调SCF及其mRNA表达水平,促进精原干细胞的分裂和增殖,抑制生精细胞凋亡。     

何首乌饮对衰老雄性大鼠睾丸生殖功能的影响

目的:探讨何首乌饮对衰老雄性大鼠生殖功能的影响.方法:32只雄性SD大鼠随机分为正常组、衰老模型组、何首乌饮组和何首乌丸组,每组8只.采用D-半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老大鼠模型,何首乌饮组和何首乌丸组大鼠分别给予何首乌饮(38.4g/kg/d)和何首乌丸(8.24g/kg/d)灌胃60d.光镜下观察大鼠睾丸附睾头精子数量、存活率和活动度,放射免疫法检测血清睾酮浓度,原位杂交法观察睾丸IGF-1 mRNA的表达.结果:何首乌饮可显著提高衰老大鼠精子数量、存活率和活动度,血清睾酮浓度,睾丸IGF-1 mRNA的表达;何首乌饮组大鼠各指标与何首乌丸组、模型组比较差异显著(P<0.05).结论:何首乌饮可改善衰老雄性大鼠的生殖功能,延缓性腺衰老.     

补肾活血中药对弱精子症大鼠抗氧化作用的研究

目的研究补肾活血中药对大鼠附睾精子的抗氧化作用。方法取40只大鼠随机分组。模型组给予200 mg/kg奥硝唑灌胃,正常对照组给予0.5%羧甲基纤维素钠灌胃,中药组给予补肾活血中药灌胃。3周后检测大鼠附睾精子的活动率、附睾匀浆MDA、SOD、GSH-PX、乳酸脱氢酶、α-葡糖苷酶、果糖浓度的变化。结果奥硝唑组大鼠附睾精子活动率下降,附睾匀浆MDA浓度升高,SOD、GSH-Px浓度明显低于对照组(P<0.05),LDH、α-葡糖苷酶浓度明显低于对照组(P<0.05)。中药高、低剂量组精子活动率和MDA浓度与正常组比较,均无明显差异。高、低剂量中药组SOD浓度与奥硝唑组比较,均有显著性差异(P<0.01)。高剂量中药组GSH-Px浓度与奥硝唑组比较,有显著性差异(P<0.05)。高剂量组中药组LDH、α-葡糖苷酶含量与奥硝唑组比较显著升高(P<0.05)。结论奥硝唑灌胃能够成功制作弱精子症大鼠模型,对附睾精子的氧化损伤是其中的机制之一。补肾活血中药通过增强体内抗氧化酶活性,增强附睾功能,从而发挥抗氧化作用,保护附睾精子免受奥硝唑所致的氧化损伤。      

益气养阴生精方对微波辐射雄性大鼠生殖的影响

目的 评价中药益气养阴生精方对微波辐射后雄性大鼠生殖系统相关参数的影响及睾丸组织病理形态学的变化情况.方法 二级健康成年雄性Wistar大鼠54只,随机分为对照组14只,辐射组20只和中药组20只,辐射组和中药组用高功率脉冲微波辐射雄性大鼠,1周后中药组给予益气养阴生精方灌胃给药,对照组不予辐射,常规饲养.14 d后大鼠股动脉取血,分离血清,采用化学发光法检测血清性激素,并剖开附睾和附睾管,采用WL-9000精子分析仪分析精子总数和活跃精子密度,取睾丸组织光镜观察组织学变化情况.结果 辐射组大鼠血清睾酮(T)浓度低于对照组,孕酮(P)浓度高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);中药组的T浓度高于辐射组,P浓度低于辐射组,差异有统计学意义(P＜0.05).大鼠精子总数和活跃精子密度辐射组较对照组降低,差异有统计学意义(P＜0.05);中药组的精子总数比辐射组和对照组显著提高,差异有统计学意义(P＜0.05).光镜观察大鼠睾丸组织辐射组可见生精上皮层轻度疏松,生精细胞变性、坏死和脱落,腔内精子减少,生精小管腔内间质蛋白水肿液积聚等;而经过中药灌胃治疗后大鼠睾丸生精小管腔中的精子明显密集,精子数量增高.结论 高功率辐射可引起睾丸早期损伤,睾酮辐射后的变化提示睾丸间质细胞对高功率辐射较敏感;益气养阴生精方能够改善辐射后大鼠血清性激素水平,治疗后睾酮和孕激素有显著改变,可提高辐射后精子质量,改变辐射后睾丸的病理变化,从而提高其生殖能力.     

茶多酚对镉致大鼠精子损伤的保护作用

目的 探讨镉对大鼠精子损伤及茶多酚(TP)的保护作用.方法 50只清洁级SD系成年雄性大鼠,随机分为阴性对照组、模型组和TP干预组(50,100,200 mg/kg).模型组和各干预组以CdCl2腹部皮下注射染毒5周,干预组分别给予50,100,200 mg/kg TP灌胃.干预结束后取大鼠血、睾丸、附睾等组织进行相关...     

精灵口服液对腺嘌呤致大鼠精核蛋白异常的影响

目的：探讨精灵口服液治疗男性不育症的作用机制和环节.方法：Wistar系大鼠40只,分正常组10只,用腺嘌呤灌胃法复制睾丸功能损害的大鼠肾阳虚模型30只,随机分模型组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组各10只.治疗Ⅰ、Ⅱ组分别灌胃精灵口服液3.6g/kg、1.8g/kg,观察大鼠睾丸和附睾精子的精核蛋白（RP）及精-组蛋白的构成比的变化.结果：精灵口服液可提高大鼠睾丸、附睾内精子精核蛋白和过渡型蛋白1（TP1）的含量,降低总组蛋白与精核蛋白（TH/RP＋TP1、TH/RP）的比值,改善大鼠睾丸、附睾内精子细胞的核蛋白构成.结论：精灵口服液能促进精核蛋白的生物合成,纠正蛋白-精核蛋白取代反应（HPRR）阻滞,给精子核以适当“包装”,使其在生理状态下具备生殖能力.     

续断种子方对少弱精子症模型大鼠生精作用及其超微结构改变的研究

目的探讨续断种子方(健脾益肾法)对大鼠睾丸生精作用及其对超微病理学的影响。方法制备奥硝唑所致的可逆性生精障碍大鼠模型,观察续断种子方对大鼠附睾超微病理学的影响。结果①与正常组相比,模型组精子密度与活动率均明显低于正常组(P<0.05);与模型组相比,左卡尼汀口服溶液组、续断种子方组精子密度与活动率明显高于模型组(P<0.05);续断种子方组精子密度与活动率都比左卡尼汀口服溶液组高(P<0.05)。②模型组附睾管壁变薄,管腔内精子明显减少,不能充满管腔,排列紊乱,附睾管腔间间隙增大;续断种子方组及左卡尼汀口服溶液组附睾管壁较厚,精子充满管腔,排列较为规则,呈团簇样,管腔间隙较紧密,均与正常组类似。结论续断种子方能拮抗并修复奥硝唑对大鼠睾丸附睾的超微结构损伤,维持了正常的生精功能。     

左归丸对不育症SD大鼠Ki67蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察左归丸对雷公藤多苷(tripterygium wilfordii,GTW)构建的少弱精子症模型大鼠睾丸组织中组织细胞增殖核抗原(Ki67)蛋白及mRNA表达的影响,初步探讨左归丸改善大鼠模型生殖功能的作用机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、左归丸组,每组12只,共干预8周。正常组全程给予去离子水灌胃;模型组前4周给予40 mg·(kg·d)~(-1)的GTW进行造模,实验5～8周给予去离子水灌胃干预。左归丸组前4周用40 mg·(kg·d)~(-1)的GTW造模,实验5～8周,给予6 g·(kg·d)~(-1)的左归丸混悬液灌胃。8周后将所有大鼠处死,无菌取睾丸组织,固定、包埋并切片。免疫组化法检测各组大鼠睾丸Ki67蛋白的表达,比较各组平均光密度值。采用RT-PCR方法检测各组大鼠睾丸组织Ki67mRNA的表达情况。结果:模型组大鼠睾丸组织各级生精细胞核中Ki67较正常组表达明显减弱(P0.05);左归丸组睾丸组织中各级生精细胞核中Ki67蛋白表达较模型组明显增多(P0.05)。模型组ki67 mRNA表达水平较正常组明显降低(P0.05);正常组与左归丸组ki67 mRNA表达水平相当;左归丸组ki67 mRNA表达水平明显高于模型组(P0.05)。结论:左归丸能够上调Ki67蛋白及mRNA的表达,促进生精细胞增殖,提高各级生精细胞的数量并改善其功能,最终提高精子质量。     

不同来源精子对卵胞浆内单精子注射助孕结局的影响

目的 探讨精液精子、附睾精子和睾丸精子对卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕结局的影响.方法 回顾性分析因男方因素寻求ICSI助孕的283个周期的临床资料,其中精液精子行ICSI组174个周期,附睾精子行ICSI组55个周期,睾丸精子行ICSI组54个周期,比较3组的受精率、卵裂率、临床妊娠率、早期流产率.结果 3组患者的受精率、临床妊娠率、早期流产率比较差异无统计学意义(P>0.05),而使用附睾精子的胚胎卵裂率低于精液精子(90.95% vs 94.02%,P<0.05).结论 若能够获得可移植的胚胎,精液精子、附睾精子和睾丸精子对ICSI助孕结局无明显影响;附睾精子行ICSI形成的胚胎,其发育潜力可能低于精液精子行ICSI形成的胚胎.     

左归丸对不育症SD大鼠Ki67蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察左归丸对雷公藤多苷(tripterygium wilfordii,GTW)构建的少弱精子症模型大鼠睾丸组织中组织细胞增殖核抗原(Ki67)蛋白及mRNA表达的影响,初步探讨左归丸改善大鼠模型生殖功能的作用机制。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、左归丸组,每组12只,共干预8周。正常组全程给予去离子水灌胃;模型组前4周给予40 mg·(kg·d)~(-1)的GTW进行造模,实验5～8周给予去离子水灌胃干预。左归丸组前4周用40 mg·(kg·d)~(-1)的GTW造模,实验5～8周,给予6 g·(kg·d)~(-1)的左归丸混悬液灌胃。8周后将所有大鼠处死,无菌取睾丸组织,固定、包埋并切片。免疫组化法检测各组大鼠睾丸Ki67蛋白的表达,比较各组平均光密度值。采用RT-PCR方法检测各组大鼠睾丸组织Ki67mRNA的表达情况。结果:模型组大鼠睾丸组织各级生精细胞核中Ki67较正常组表达明显减弱(P<0.05);左归丸组睾丸组织中各级生精细胞核中Ki67蛋白表达较模型组明显增多(P<0.05)。模型组ki67 mRNA表达水平较正常组明显降低(P<0.05);正常组与左归丸组ki67 mRNA表达水平相当;左归丸组ki67 mRNA表达水平明显高于模型组(P<0.05)。结论:左归丸能够上调Ki67蛋白及mRNA的表达,促进生精细胞增殖,提高各级生精细胞的数量并改善其功能,最终提高精子质量。     

基于Nrf2通路研究二仙解毒方对弱精子症大鼠精子微环境的影响*

目的基于Nrf2信号通路研究二仙解毒方对弱精子症模型大鼠精子微环境的改善作用及可能机制。方法 使用奥硝唑法构建成熟雄性大鼠弱精子症模型,随机分为模型组、二仙解毒方低剂量组、中剂量组、高剂量组、左卡尼汀组,每组各12只,连续灌胃4周后,检测各组大鼠精子浓度、精子活动力、相关氧化应激指标、大鼠睾丸及附睾中基于Nrf2蛋白表达及mRNA表达。结果 二仙解毒方可增强弱精子症模型大鼠精子活动力,剂量越高,氧化应激指标改变越显著,二仙解毒方高剂量组可将模型组大鼠的精液抗氧化能力恢复至正常大鼠水平;二仙解毒方可促进大鼠附睾、睾丸组织Nrf2基因转录与蛋白表达。结论 二仙解毒方确有提高精子活动力的作用,其可能的作用机制为通过诱导上调生殖细胞内Nrf2 mRNA和蛋白表达,以改善弱精子症大鼠精液氧化应激状态,从而提高精子活动力。     

实验性精索静脉曲张大鼠睾丸、肾脏的组织形态改变及附睾内精子质量影响

目的研究使用传统方法建立的实验性精索静脉曲张(Experimental varicocele EVC)大鼠的睾丸、肾脏的组织形态学改变其对附睾尾部精子质量的影响,以评价此动物模型是否适合用于精索静脉曲张的研究。方法 30只成年SD大鼠随机分为3组:1组(EVC组,n=10),2组(左肾静脉结扎对照组n=10),3组(假手术组,n=10)。3组大鼠在造模成功8周后处死动物,并取左肾和双侧睾丸和附睾,制作切片以行形态学研究,同时测量附睾尾部精子质量。结果 1组大鼠睾丸生精小管萎缩,部分生精小管内精子发生停滞,生精细胞脱落,同时睾丸Johnsen评分较对照组明显降低,左肾皮质纤维化改变在三组中并差异无统计学意义,1组附睾尾部的的精子活率明显低于2、3组,但精子密度差异无统计学意义。结论本研究结果表明传统部分结扎肾静脉的造模方法对睾丸形态学及附睾精子质量有明显影响,但并不影响肾脏的组织形态,由此更进一步证实此种造模方式适合用于精索静脉曲张的研究。     

当归川芎水蛭合剂对精索静脉曲张大鼠睾丸抗氧化系统及精子质量的影响

目的探讨当归川芎水蛭合剂对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能的影响。方法将30只雄性大鼠随机分为假手术组、对照组和治疗组。手术造模后5周分别给予对照组和治疗组大鼠10 ml／kg的生理盐水和当归川芎水蛭合剂灌胃。5周后取出左侧睾丸、附睾。检测睾丸中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;利用全自动精液分析系统分析大鼠左侧附睾尾部精子数量及活力。结果与对照组相比,治疗组左侧睾丸中MDA含量明显降低,SOD活性明显升高(P<0.05)。各组大鼠精子密度无明显差异。与对照组相比,治疗组精子活力中的精子平均直线运动速度、曲线运动速度、路径运动速度有明显的提高(P<0．05)。结论当归川芎水蛭合剂能减少实验性精索静脉曲张造成的睾丸脂质过氧化,增强抗氧化酶活性,对精索静脉曲张造成的左侧睾丸损伤具有保护作用,可以明显降低其对大鼠精子的质量的损害。     

四氯化碳对成年大鼠睾丸的影响

目的研究四氯化碳(CCl4)对大鼠睾丸组织结构及生精细胞p53蛋白表达的影响。方法清洁级雄性Wistar大鼠36只随机分为对照组和实验组,实验组另设3个小组(1 d组、1周组和2周组),每组9只。实验组背部皮下注射体积分数60%CCl4-橄榄油溶液(0.03 mL.kg-1)。1 d组于实验第1天注射,1周组实验第1天和第4天注射,2周组实验第1天、第4天、第8天和第11天注射。对照组于实验的第1天、第4天、第8天和第11天背部皮下注射橄榄油(0.012 mL.kg-1)。实验第14天处死大鼠,取睾丸、附睾称重计算脏器系数;苏木精伊红染色(HE)和天狼猩红染色观察睾丸的组织结构和生精细胞的变化;免疫组织化学染色检测睾丸生精细胞p53蛋白的表达。结果HE和天狼猩红染色显示,对照组和1 d组大鼠睾丸基膜完整,间质偶见少量纤维,生精细胞在管内排列紧密有序,可见许多精子生成;1周组和2周组部分大鼠睾丸基膜增厚,间质纤维化明显,生精细胞排列紊乱,生精上皮层数减少,精子数目较对照组明显减少(P<0.05);睾丸和附睾脏器系数各组间比较无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学染色显示,对照组和1 d组偶见p53蛋白阳性细胞;1周组和2周组p53蛋白阳性细胞率较对照组和1 d组明显增多,精子数目明显减少(P<0.05),2周组p53蛋白阳性细胞率较1周组明显增多,精子数目明显减少,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论CCl4可使大鼠睾丸的组织结构发生改变,生精细胞p53蛋白表达明显增强。     

Cdyl、G9a、及HDAC1在肾阳虚大鼠睾丸组织中的表达

目的 观察Cdyl、G9a、HDAC1在肾阳虚大鼠睾丸组织中的表达,探讨Cdyl及相关因子引起雄性大鼠肾阳虚的机制.方法 20只健康雄性SD大鼠随机分为空白组与模型组,模型组采用环磷酰胺50 mg/kg·d腹腔注射,空白组给予等量生理盐水注射.大鼠造模后第6天,将大鼠取血处死,分离睾丸、附睾进行相关指标检测. 结果 与空白组比较,模型组大鼠精子浓度、活力及活率明显降低;模型组大鼠睾丸组织Cdyl、G9a表达明显降低(P<0.01),HDAC1表达明显升高(P<0.01). 结论 Cdyl、G9a表达降低,HDAC1表达升高与雄性大鼠肾阳虚相关.     

慢性铝暴露对小鼠精子质量及睾丸细胞焦亡的影响

目的 研究铝暴露对小鼠精子质量及睾丸细胞焦亡的影响。方法 将12只成熟雄性c57bl/6j小鼠分为两组：对照组(n=6)、铝模型组(n=6),对照组用蒸馏水灌胃，铝模型组采用10 mg/(kg·d) AlCl₃灌胃，8周后，获取小鼠睾丸组织、附睾组织及附睾精子。对附睾精子进行精子质量分析，对睾丸及附睾HE染色进行病理检测；运用PCR、免疫组化检测睾丸组织细胞焦亡关键基因的mRNA和蛋白表达。结果 与对照组相比，铝暴露的小鼠睾丸重量、附睾重量、精子活力、精子数量均显著下降(P<0.01),精子畸形率显著增加(P<0.01)。睾丸形态学观察结果显示，铝暴露小鼠睾丸生精小管中细胞排列紊乱，生精小管的面积和直径减小，管内精子减少。PCR及免疫组化结果显示，铝暴露小鼠睾丸组织中焦亡关键基因Nlrp3、Caspase-1、Gsdmd和IL-1b的mRNA及蛋白表达均上调(P<0.01)。结论 铝暴露可降低小鼠的精子质量，促进睾丸细胞焦亡，从而损伤雄性生殖系统。