组织芯片在消化道肿瘤病理研究中的应用进展

随着人类分子遗传学的快速发展及基因芯片(gene chip)的广泛应用，许多基于基因遗传性改变的疾病机制和越来越多的与肿瘤发生发展相关的侯选标志基因正不断被发现。这些基因组学的早期发现，在转化为临床诊断和治疗的实际应用之前需要在大量的临床样本中进行DNA、RNA     

组织芯片在消化道肿瘤病理研究中的应用进展

随着人类分子遗传学的快速发展及基因芯片( genechip)的广泛应用,许多基于基因遗传性改变的疾病机制和越来越多的与肿瘤发生发展相关的侯选标志基因正不断被发现。这些基因组学的早期发现,在转化为临床诊断和治疗的实际应用之前需要在大量的临床样本中进行DNA、RNA及蛋白水平的检测和验证,以筛选与某种肿瘤或非肿瘤性疾病诊断、预后及治疗相关的基因[1 ,2 ] 。而目前传统的组织切片处理方法由于在一个蜡块内只能包埋一个组织标本,只能切出含有一份组织样本的切片,不利于快速高效的进行大样本的指标筛选工作。新近发展起来的组织芯片(tiss…     

组织芯片技术检测CMTM2在人睾丸肿瘤组织中的表达

目的 探讨CMTM2在人睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其临床病理学意义.方法 运用组织芯片技术、免疫组织化学方法检测CMTM2在人睾丸肿瘤组织和正常组织中的表达.结果 15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)CMTM2蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中17例(65.4%)CMTM2蛋白表达为阳性;7例畸胎瘤中4例(57.1%)CMTM2蛋白表达为阳性;12例胚胎癌中3例(25.0%)CMTM2蛋白表达为阳性;10例卵黄囊瘤中4例(40.0%)CMTM2蛋白表达为阳性.胚胎癌、卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性意义(P<0.05).而精原细胞瘤实验组以及畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05).结论 CMTM2蛋白在胚胎癌,卵黄囊瘤中的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,CMTM2可能为睾丸肿瘤候选的抑癌基因.     

组织芯片技术研究胆囊癌MMP-2和TIMP-2的表达及意义

目的 研究胆囊癌中MMP-2和TIMP-2的表达及其临床意义。方法 利用组织芯片技术,通过免疫组化的方法检测52例胆囊癌标本和11例正常胆囊组织标本中的MMP-2、TIMP-2的表达情况。结果 MMP-2在胆囊癌组织中的表达明显高于正常胆囊组织,TIMP-2在胆囊癌组织中的表达低于正常组织,MMP-2与TIMP-2的改变与肿瘤的病理分型、病理分级无关。结论 TIMP-2和MMP-2参与胆囊癌的发生发展过程。     

组织芯片技术检测人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的表达

目的:探讨人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其病理学意义。方法:运用组织芯片技术、免疫组化法检测人睾丸特异基因TDRG1在睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中的表达。结果:15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)TDRG1蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中7例(26.9%)TDRG1蛋白表达为阳性,7例畸胎瘤中4例(57.1%)TDRG1蛋白表达为阳性。而12例胚胎癌中10例(83.3%)TDRG1蛋白表达为阳性,10例卵黄囊瘤中8例(80.0%)TDRG1蛋白表达为阳性。精原细胞瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有极显著性差异(P<0.01)。畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性差异(P<0.05)。而胚胎癌组和卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05)。结论:TDRG1蛋白在精原细胞瘤和畸胎瘤的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,TDRG1可能为候选的抑癌基因。     

大组织切片结合组织芯片技术研究直肠癌淋巴结转移与微转移

目的研究直肠癌淋巴结转移与微转移规律,为合理施行直肠癌手术提供病理学证据。方法联合运用大组织切片与组织芯片技术,研究31例全直肠系膜切除(TME)手术标本。结果共检获992枚淋巴结,平均每例32枚。癌转移淋巴结148枚。56.1%位于直肠系膜后方。直肠侧壁肿瘤,同侧癌转移淋巴结明显多于对侧(P<0.001)。12例标本证实存在环周切缘癌浸润,与癌转移淋巴结数目相关(β=1.166,P=0.041)。9例标本的无癌淋巴结内查见肿瘤细胞微转移,但与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及肿瘤分化无关(P>0.05)。结论大组织切片结合组织芯片技术提高了淋巴结检获率。系膜外带及肿瘤同侧系膜内淋巴结转移较多。淋巴结微转移可见于各期直肠肿瘤。     

基因芯片和组织芯片在前列腺癌基因诊断中的应用

前列腺癌是老年人疾病 ,占美国男性主要死亡原因第二位 ,近年来国人前列腺癌发病率有明显上升趋势[1] 。临床上亟待一种敏感的技术对前列腺癌早期诊断、治疗、演进趋势及预后进行评价 ,增加对前列腺癌本质的认识。新近发展的高通量基因表达分析平台———基因芯片及组织芯片技术 ,具有多样品并行处理能力 ,分析速度快 ,所需样品量少 ,污染少 ,现已用于前列腺癌的基因诊断、基因表达及寻找新基因等研究领域。我们对基因芯片和组织芯片技术在前列腺癌基因诊断研究方面的初步应用简要综述如下。一、基因芯片、组织芯片技术及其原理基因芯片 (ｇ…     

应用组织芯片技术检测KiSS-1基因在胆囊癌中的表达

目的 探讨转移抑制基因KISS-1在人胆囊癌转移过程中的作用及临床意义.方法 应用组织芯片和免疫组织化学(EnVision)技术检测KISS-1在59例胆囊癌(其中肝脏侵犯13例,淋巴结转移13例)、7例癌旁和6例正常胆囊组织中的表达.结果 胆囊癌组织中KISS-1的表达阳性率明显低于正常和癌旁组织(P<0.05).在胆囊癌中,KISS-1阳性表达与患者性别、年龄,肿瘤大小、组织学类型、分化程度及淋巴结转移均无关,而与胆囊癌的浸润深度、肝脏侵犯及临床分期(Nevin分期)有关(P<0.01).KISS-1在Ⅰ Ⅱ期和Ⅲ Ⅳ期以及V期胆囊癌组织中的表达阳性率分别为92.3%、57.1%和27.8%,呈明显下降趋势(P=0.002).结论 KISS-1的表达降低与人胆囊癌的发生及其侵袭、转移过程密切相关,可能参与了胆囊癌的发生、侵袭及转移过程的调控.     

利用组织芯片技术研究酪氨酸蛋白激酶在肝癌组织中的表达及意义

目的 观察酪氨酸蛋白激酶ERK、P38、C-jun、JAK2、STAT3、STAT5在肝癌组织中的表达及相互关系,探讨酪氨酸蛋白激酶表达与肝癌病人临床特征之间的关系.方法 收集原发性肝癌手术切除标本30例,制作组织芯片,以肝硬化组织作对照,采用免疫组化SP法研究酪氨酸蛋白激酶ERK、P38、C-jun、JAK2、STAT3、STAT5在肝癌组织与肝硬化组织中的表达.结果 ERK、P38、C-jun、JAK2、STAT3、STAT5在肝癌组织中的表达平均光密度值分别为(0.220±0.033,0.174±0.024,0.183±0.064,0.192±0.044.0.197±0.078,0.181±0.066),显著高于肝硬化组(0.065±0.028,0.058±0.028,0.042±0.016,0.070±0.030,0.052±0.024,0.052±0.023,P＜0.01).ERK与C-jun、JAK2、STAT3、STAT5在肝癌组织中表达呈显著正相关,(P＜0.01或P＜0.05),与P38呈显著负相关(r=0.404,P＜0.05).JAK2的过度表达与肝癌组织中细胞的分化程度有关,在低分化肝癌组织中表达显著率高于高中分化肝癌组织.结论 MAPK和JAK-STAT通路的过度活化在肝癌发生发展过程中起重要作用,细胞信号转导系统失去正常的协调平衡可能是导致肿瘤发生的重要原因.     

采用组织芯片技术检测胃黏膜病变中缺氧诱导因子-1α的表达

目的　研究缺氧诱导因子 -1α (HIF 1α)在胃黏膜病变中的表达及其意义。方法　采用组织芯片技术制作 12 0例各类胃黏膜病变的组织芯片 ,免疫组织化学方法检测HIF 1α的表达。结果　 12 0例各类胃黏膜病变中HIF 1α阳性率为 2 8.3 %。慢性浅表性胃炎、伴肠化生慢性萎缩性胃炎、伴异型增生慢性萎缩性胃炎和肠型胃癌中HIF 1α的阳性率分别为 0 .0 % ,10 .0 % ,40 .0 %和 63 .3 %。肠型胃癌和伴异型增生慢性萎缩性胃炎中HIF 1α的阳性率均显著高于慢性浅表性胃炎和伴肠化生慢性萎缩性胃炎 (P <0 .0 5 )。结论　HIF 1α可以作为一种较好的胃癌前病变标志物。应用组织芯片大规模检测临床组织样本是可行的 ,具有高效、快速、方便、经济、准确的特点。     

用组织芯片技术检测Sema4C基因在小鼠不同组织的表达水平

目的：观察在小鼠不同组织中的表达水平。方法：用地高辛进行标记并制备Sema4C特异性RNA探针对小鼠组织芯片进行原位杂交。结果：Sema4C在成年小鼠的大脑皮层,小脑蒲肯野纤维层,视网膜视神经节细胞层和肾小管上皮细胞层中均有较高表达．而在肌肉,心脏．肺,脾脏．肝脏等组织中表达量比较低或未检测到表达。结论：Sema4C基因主要表达在神经系统和肾脏,这将有助于进一步认识Sema4C功能。     

组织芯片技术原位检测石蜡包埋肝细胞癌组织的研究

目的探讨组织芯片技术高通量原位免疫组织化学检测石蜡包埋肝细胞癌组织的价值。方法1991年1月-2002年6月西南肝胆医院实施根治性肝切除,病理证实为肝细胞癌234例石蜡组织块,健康成人肝组织18例(西南医院肝胆外科研究所肝移植供肝组织)作为对照,重新包埋石蜡组织,制备成为2个微阵列,分别为13×10(129点)和14×9(123点),微阵列点直径1.0mm,点间距为0.5mm。Envision法检测Vimentin和E cadherin的表达。结果组织芯片中组织样本的组织学结构完整,可满足病理学实验要求。结论组织芯片技术提供了一种快速、有效的组织学方法,可广泛应用大样本肝细胞癌的免疫组织化学检测。     

应用组织芯片研究HRG-1基因在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达

目的 观察HRG-1基因在前列腺增生和前列腺癌组织的表达,探讨HRG-1作为肿瘤标志物的可能性.方法 应用原位杂交法,检测含有前列腺癌组织（83例）和前列腺增生组织（95例）的组织芯片上HRG-1 mRNA的表达.结果 前列腺腺癌标本中有57例为HRG-1阳性表达,而且大部分为强阳性,阳性率为68.68% 前列腺增生组织中12例表达阳性,阳性率仅为12.63%.HRG-1 mRNA在前列腺癌组织和前列腺增生组织中的表达具有显著差异（P〈0.01）.而在癌组织与癌旁组织的比较中,55例癌旁及正常前列腺组织均为阴性表达,HRG-1 mRNA在癌组织的表达明显高于癌旁及正常组织（P〈0.01）.结论 HRG-1在前列腺癌组织表达水平的特异性升高,提示HRG-1基因有可能作为一种新的肿瘤标志物用于前列腺肿瘤的诊断.     

DNA芯片技术及其在泌尿医学研究的应用

DNA芯片是以基因序列为研究对象的“微矩阵（microarray)”，是近年来迅速发展起来的高新生物技术，被称为芯片上的实验室，本文综述了其原理，制作方法，在泌尿医学研究中的应用及存在问题。     

组织芯片检测技术在遗传性非息肉性结直肠癌家系筛选中的价值

目的研究组织芯片在遗传性非息肉性结直肠癌(HNPCC)家系筛选中的价值。方法将22例HNPCC家系中结直肠癌患者和15例散发性结直肠癌患者的肿瘤组织蜡块制作组织芯片,免疫组化方法检测hMLH1、hMSH2蛋白表达。结果常规免疫组化检测HNPCC组hMLH1或hMSH2阴性68.2%(15/22);散发性结直肠癌组hMLH1阳性14例、阴性1例(6.7%),hMSH2全部阳性。组织芯片检测HNPCC组hMLH1或hMSH2阴性77.2%(17/22);散发性结直肠癌组hMLH1阳性13例、阴性2例(13.3%);hMSH2全部阳性。应用常规免疫组化和组织芯片方法检测hMSH2其结果一致。对hMLH1常规免疫组化和组织芯片技术检测进行比较,P>0.05;差异均无统计学意义。结论组织芯片检测技术是一种高通量的筛选方法,适合于回顾性HNPCC家系筛选。     

应用高通量的DNA芯片技术筛选膀胱肿瘤肿瘤标记物

已知许多肿瘤标记物与膀胱肿瘤患者肿瘤分期及预后有关。然而,这些肿瘤标记物在检测浅表肿瘤及评价单个肿瘤的预后方面的能力是有限的。高通量的基因芯片技术是一种新的肿瘤研究及发现新的肿瘤标记物的方法。Sanchez-carbayo等论述了应用DNA芯片技术发现新的肿瘤标志物的研究现状。不同的膀胱肿瘤亚型具有不同的基因表达阵列,应用高通     

制作特殊皮肤标本石蜡组织芯片的方法

目的 寻找一种简易、芯点损失率低的方法制作包含特殊组织(如软骨、厚角质层)皮肤标本的组织芯片.方法 采用自制打孔器取34个直径为3mm的大鼠足垫组织块,制成6×6组织芯片;采用手工切割法取27个长条形大鼠耳、背皮肤组织块,制成一块9×3组织芯片;分别进行切片、常规HE染色、拍照,对比其芯点损失率.结果 传统打孔器法所得组织芯片损失率为11.8%;手工切割法背部皮肤无芯点损失,鼠耳芯点损失率18.5%.结论 手工切割法操作简单,得到的芯片质量完整性好,对于软骨等特殊组织及阳性面积较大的组织而言,比传统打孔器法更显优势.     

应用组织芯片进行乳腺癌分子分型的研究

目的探索一种能准确地预测乳腺癌预后的分子分型系统。方法筛选7 0例乳腺癌标本,3 5例为诊断乳腺癌后5年内死亡者,另3 5例为存活超过10年者。两组在诊断和治疗等方面均相匹配。采用基于组织芯片的免疫组化技术检测两组标本中17个分子标志物的表达,采用聚类分析对17个标志物进行分组,对分组结果进行生存分析及临床病理参数相关分析。结果 17个标志物分为4个亚组:ERα相关组,增殖相关组,PR相关组和HER-2相关组,中位生存时间分别为1 4 2,1 2 6,8 8,7 7个月,差异均有显著性(P=0.0 4 4)。Cox模型分析4个亚组的生存时间,相邻两组间死亡风险平均增加了1.623倍。4个亚组与癌肿长径具有低度正相关(Cramer列联系数为0.3 7 7)。结论由ERα相关组,PR相关组,增殖相关组和HER-2相关组构成新的乳腺癌分子分型,可以准确地预测乳腺癌患者死亡风险,可作为乳腺癌预测预后的一种新分型方法。     

组织芯片检测凋亡抑制蛋白Livin在前列腺癌中的表达及意义

目的:检测凋亡抑制蛋白Livin在前列腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用组织芯片技术构建71例前列腺癌和37例前列腺增生组织的64点阵石蜡组织芯片,用免疫组化SP法检测该芯片中凋亡抑制蛋白Livin的表达,分析其与前列腺癌临床病理特征的关系。结果:凋亡抑制蛋白Livin在前列腺癌组织中的阳性表达率为60.94%,在前列腺增生组织中阳性表达率为2.70%(P<0.01)。Livin表达与前列腺癌Gleason评分和临床分期有关,Livin在Gleason<7分的阳性表达率为41.67%,Livin在≥7分的表达率为85.71%,在前列腺癌Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期阳性表达率分别为53.66%和82.61%(P<0.05)。结论:凋亡抑制蛋白Livin表达与前列腺癌的发生进展关系密切。