OY-TES-1在肝细胞癌中的表达及抗体血清学分析

目的:了解OY-TES-1在肝细胞癌(HCC)中的表达及其抗体出现情况,探讨将OY-TES-1用于肿瘤免疫诊疗的可能性.方法:利用实时定量PCR和免疫组织化学技术,从mRNA和蛋白质两个水平研究OY-TES-1在HcC中的表达特点;采用酶联免疫吸附实验检测HCC患者及正常人血清中相应的抗体,并对其临床意义做初步的分析.结果:经实时定量PCR检测,HCC中OY-TES-1mRNA阳性率为73.21%(41/56),癌旁阳性率为64.86%(24/37),有17对HCC及配对癌旁组织均表达阳性,OY-TES-1mRNA在HCC及癌旁组织两者的表达阳性率无差异(P>0.05);在37对HCC及配对癌旁组织中,HCC中OY-TES-1mRNA水平明显高于对应的癌旁组织,其差异与病理分级有关CP<0.05).HCC中OY-TES-1蛋白阳性率为40%(4/10).血清学检测未发现76例正常人和17例肝硬化患者血清中有相应抗体,HCC患者血清抗体阳性率为20%(12/58),OY-TES-1血清抗体的出现与HCC患者的年龄、性别等临床资料无相关.结论:OY-TES-1在HCC中有较高的表达频率及表达水平,该蛋白具有较强的免疫原性,他有望作为用于HCC辅助诊断及免疫治疗的肿瘤抗原.     

MAGE-A1、MAGE-C2及SSX-1在原发性肝细胞癌中的表达及意义

目的 检测肿瘤-睾丸抗原(CT抗原)MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达情况.方法 采用RT-PCR方法检测MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA在55例HCC患者癌及癌旁组织中的表达,对产物进行测序,并对检测结果与临床指标进行分析.结果 55例HCC患者的癌组织中,MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA的表达率分别为60.0%、14.5%和40.0%;癌旁组织无表达.结论 CT抗原MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA在HCC中呈高表达,是HCC免疫治疗的理想靶位.     

肿瘤-睾丸抗原MAGE-1、MAGE-3、SSX-2及NY-ESO-1在胃癌中的表达

目的　检测肿瘤 睾丸 (cancer testis ,CT)抗原MAGE 1、MAGE 3、NY ESO l及SSX 2基因mRNA在胃癌组织中的表达 ,探索其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法　用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法对胃癌患者癌组织、相应癌旁组织和对照组织(慢性胃炎和正常胃组织 )中的MAGE 1、MAGE 3、NY ESO 1及SSX 2基因mRNA进行检测 ,结合临床指标进行分析 ,随机选取RT PCR阳性扩增产物进行序列测定。结果　在在检测的 5 0例胃癌组织中 ,MAGE 1、MAGE 3、NY ESO 1及SSX 2基因mRNA阳性率分别是 48% (2 4/5 0 )、42 % % (2 1/5 0 )、11% (6/5 0 )和 8% (4 /5 0 ) ;多个CT抗原基因mRNA在胃癌中同时表达 ,至少表达一种CT抗原者达76% (3 8/5 0 ) ,表达两种或两种以上者为 40 % (2 0 /5 0 ) ,表达三种或三种以上者为 10 % (5 /5 0 ) ,同时表达四种者为 6% (3 /5 0 )。而相应的癌旁组织和对照组织中均未检测到四种目的基因的表达。DNA测序结果表明RT PCR产物确为这四种基因的目的片段。MAGE 1、MAGE 3、NY ESO 1及SSX 2基因的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、浸润深度和淋巴结转移等无显著相关性 (P >0 .0 5 )。结论　CT抗原 (MAGE 1、MAGE 3、NY ESO 1及SSX 2 )基因在胃癌组织中呈高特异表达 ,这使得以这些基因编码的蛋     

肿瘤-睾丸抗原SPANX-C基因mRNA在肝细胞癌中的表达及HLA-A2限制性CTL表位的预测

目的:检测肿瘤-睾丸抗原SPANX-C基因在肝细胞癌(HCC)中的表达,预测SPANX-C/HLA-A2限制性CTL表位.为HCC的免疫治疗寻找新的靶位.方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对HCC患者癌组织、相应癌旁组织和对照组织(肝硬化和正常肝组织)中的SPANX-C基因mRNA进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行序列测定;用超基序法和量化基序法联合预测SPANX-C/HLA-A2限制性CTL表位.结果:在所检测的115例HCC组织中有70例(60.9%)表达SPANX-C基因mRNA,癌旁组织和20例对照肝组织均不表达.SPANX-C基因的表达与肿瘤分期、肿瘤分化程度、血清甲胎蛋白(AFP)水平等临床指标无相关性(P>0.05).用基序预测法筛选出5个HLA-A2限制性CTL表位(9肽),其中SPANX-C51-59(LVVRYRRNV)与HLA-A2分子具有较高结合力.结论:SPANX-C基因mRNA在HCC组织中呈高频率特异性表达,并存在HLA-A2限制性CTL表位,有望用于HCC的免疫治疗.     

肝细胞癌癌组织Hic-5和COL1A1表达及其对术后生存的预测价值*

目的 探讨肝细胞癌(HCC)组织氧化氢诱导的克隆基因-5(Hic-5)和I型胶原α1链(COL1A1)表达及其对HCC患者术后生存时间的预测价值。方法 2013年9月～2016年7月我院行肝癌切除术的HCC患者97例,术后取癌组织和癌旁肝组织。采用RT-PCR法和免疫组化法分别检测组织Hic-5和COL1A1 mRNA和蛋白表达。随访3年。结果 HCC患者癌组织Hic-5蛋白表达阳性率为53.6%,显著高于癌旁组织(16.5%,P＜0.05),其mRNA阳性率为66.0%,也显著高于癌旁组织(25.8%,P＜0.05);HCC患者癌组织COL1A1蛋白表达阳性率为71.1%,显著高于癌旁组织(25.8%,P＜0.05),其mRNA阳性率为78.4%,也显著高于癌旁组织(30.9%,P＜0.05);TNM Ⅰ～Ⅱ期患者癌组织Hic-5 mRNA阳性率为56.4%,显著低于Ⅲ～Ⅳ期者(78.6%,P＜0.05),COL1A1 mRNA阳性率为70.9%,也显著低于Ⅲ～Ⅳ期者(88.1%,P＜0.05),存在门静脉癌栓患者癌组织Hic-5 mRNA阳性率为82.5%,显著高于无门静脉癌栓者(54.4%,P＜0.05),COL1A1 mRNA阳性率为90.0%,显著高于无门静脉癌栓者(70.2%,P＜0.05);随访的87例患者生存时间为8.2~36.0个月,中位生存时间为36.0(14.6,36.0)个月;癌组织Hic-5阳性表达患者3 a生存时间为26.3(16.1,36.0)月,显著短于Hic-5阴性者【36.0(30.6,36.0),P＜0.05】,3 a无事件生存时间为21.4(11.7,36.0)月,也显著短于Hic-5阴性者【36.0(24.2,36.0),P＜0.05】。结论 HCC患者癌组织Hic-5阳性表达预示术后生存时间缩短,其原因可能与肿瘤分期差或门静脉存在癌栓有关。     

小肝癌患者外周血中SSX基因mRNA的检测和临床意义

目的检测小肝细胞癌(HCC)患者外周血中SSX基因mRNA的表达,并初步探讨其临床意义.方法以简易"降落"PCR(stepdown RT-PCR)方法检测小HCC患者外周血中SSX基因mRNA表达,并将SSX基因的表达与预后等临床指标的关系进行分析.结果79.5%(31/39)的小肝癌患者肝癌组织中存在SSX基因mRNA的表达,而癌旁组织、肝硬化组织和正常肝组织均为阴性.外周血标本中,28.2%(11/39)的病例可检测到SSX基因的表达.癌组织不表达SSX基因者和对照组,外周血中也不能检测到其表达.小HCC患者外周血中SSX基因的表达与年龄、性别、肿瘤分化程度、血清AFP水平和HBV感染无显著相关性.随访16.7±5.1月,在11例外周血中表达SSX基因mRNA的患者中6例出现了复发和(或)转移,而20例阴性的患者仅有3例出现了复发和(或)转移,二者相比有显著差异(P=0.038),提示外周血中SSX基因表达与复发、转移密切相关.结论SSX基因可作为小HCC患者循环肝癌细胞的标志基因,并能反映预后.     

精氨酸酶1在肝细胞癌中的表达及其临床病理意义

目的 检测人类精氨酸酶1(ARG1)在肝细胞癌(HCC)中的表达,分析其与患者临床病理特征的关系.方法 利用高通量组织芯片技术和免疫组织化学方法评价167例HCC及癌旁肝组织中ARG1蛋白的表达情况,采用x2检验和Spearman秩相关分析ARG1蛋白表达与各临床病理特征间的关系.应用实时荧光定量PCR方法检测68例HCC及其癌旁肝组织中的ARG1 mRNA表达水平.结果 HCC中ARG1蛋白表达水平为3.540±3.702,明显低于癌旁肝组织(10.290±2.303;t=-22.421,P=0.000).ARG1表达与HCC分化程度、组织学分级、微血管侵犯、术前甲胎蛋白水平、术后复发有关(P值均＜0.05).68例HCC组织中ARG1 mRNA表达水平为0.0997(0.213),低于癌旁肝组织0.563(0.459);u=-6.544,P=0.000].结论 ARG1在HCC中低表达,其可能参与HCC发生发展.检测ARG1表达可能有助于HCC辅助诊断、评估分化程度及预后判断.     

乙型肝炎病毒相关肝癌发生过程中生长抑素受体与环氧合酶-2表达规律研究

目的 探讨乙型肝炎病毒相关原发性肝细胞癌(HCC)患者、肝癌及癌旁组织中生长抑素受体(SSTR)与环氧合酶-2(COX-2)表达规律,为生长抑素类似物(SSTA)与选择性COX-2抑制剂的使用提供依据.方法 逆转录-聚合酶链反应及免疫绀化法检测40例HCC患者肝癌、癌旁及硬化组织中SSTR 1～5亚型mRNA及蛋白表达;Western印迹法检测3种组织中COX-2蛋白表达.结果 肝癌、癌旁及硬化组织中SSTR 1～5 mRNA表达阳性率分别为62.5%～87.5%、90.0%～97.5%和60.0%～92.5%,SSTR 1～5蛋白表达量(吸光度值)分别为5.93～10.13、23.57～32.56和1.93～5.15;COX-2蛋白表达量分别为0.138±0.014、0.199士0.032和0.256±0.038.从硬化组织到癌旁组织,SSTR1～5与COX-2表达量呈直线负相关(P＜0.05);从癌旁组织到肝癌组织,SSTR 1～5与COX-2表达量呈直线正相关(P＜0.05).结论 癌前病变期及HCC早期可能是接受SSTA及COX-2抑制剂协同治疗的最佳时机.     

CD44v6及nm23-H1表达与肝细胞癌侵袭转移

目的原位检测肝细胞癌(HCC)中CD44v6 mRNA及nm23-H1 mRNA的表达,了解CD44v6 mRNA及nm23-H1 mRNA的表达与HCC侵袭转移的关系,了解HCC中CD44v6 mRNA表达与nm23-H1 mRNA表达的相关性.方法采用PCR法合成CD44v6 cDNA探针,体外转录法合成nm23-H1 cRNA探针,采用原位杂交法检测HCC 33例 CD44v6 mRNA和nm23-H1 mRNA的表达.结果侵袭转移倾向高危组的10例HCC标本中,CD44v6 mRNA和nm23-H1 mRNA的阳性率分别为80.0%(8/10)和40.0%(4/10);侵袭转移倾向低危组的23例HCC标本中,CD44v6 mRNA和nm23-H1 mRNA的阳性率分别为21.7%(5/23)和91.3%(21/23).CD44v6 mRNA的表达与HCC的侵袭转移倾向具有正相关性(P＜0.01),nm23-H1 mRNA的表达与HCC的侵袭转移倾向具有负相关性(P＜0.01),CD44v6 mRNA及nm23-H1 mRNA的表达具有负相关性(P＜0.01).结论检测CD44v6 mRNA及nm23-H1 mRNA的表达可能成为HCC转移预后判断的指标.     

蛋白翻译起始因子C_2在原发性肝细胞肝癌中表达的意义

目的研究C_2mRNA及其蛋白在原发性肝细胞肝癌(HCC)中的表达及意义。方法用原位杂交检测C_2mRNA住21例HCC及其癌旁组织中的表达,ABC免疫组化法检测C_2蛋白在60例HCC及其42例癌旁组织中的表达,Western blot法检测C_2蛋白在HCC及其癌旁组织中的表达。结果 21例HCC及其癌旁组织中,C_2mRNA阳性率分别占23.8％(5/21)和85.7％(18/21),60例HCC及42例癌旁组织中,C_2蛋白阳性分别占27.3％(17/60)和83.3％(35/42),27例肝硬变中,C_2蛋白阳性率为77.8％(21/27)。χ~2检验:C_2mRNA及其蛋白在HCC癌旁组织中表达明显高于癌组织(P<0.001);C_2蛋白在肝硬变中的表达明显高于HCC癌组织(P<0.01);C_2的表达与患者年龄、HBsAg及AFP有明显关系(P<0.05);而与癌组织的分化程度、肿瘤大小、淋巴转移无关;Western blot与免疫组化结果一致。结论 C_2基因表达下调可能与HCC的发生、发展及早期诊断有关。