CO_2气腹对胎鼠脑超微结构和Caspase-3表达的影响

目的探讨CO2气腹对胎鼠脑组织结构及脑组织Caspase-3表达的影响。方法选择不同CO2气腹压力,建立孕鼠的CO2气腹模型,于鼠孕17 d的24 h内取胎鼠脑组织分别进行HE染色、免疫组化、电镜制片,观察胎鼠脑组织结构变化和胎鼠脑组织Caspase-3表达。结果透射电镜观察显示随气腹压力的增加,胎鼠脑组织可见细胞轻微可逆性损害。Caspase-3在实验组与对照组间胎鼠脑组织表达无明显变化（P〉0.05）,同时组间Caspase-3的表达也无显著性差异（P〉0.05）。结论 CO2气腹压力升高对胎鼠大脑细胞产生可逆性轻度损伤。     

孕期微波辐射暴露对新生鼠前额叶皮质微细和超微结构的影响

目的：观察孕期900 MHz 微波辐射暴露对仔代大鼠脑前额叶皮质微细和超微结构的影响。方法：孕SD大鼠， 随机分为空白对照组、低强度辐射组和高强度辐射组，空白对照组常规饲养、不辐射；低强度辐射组整个孕期全身 辐射，6 h/d ；高强度辐射组整个孕期全身辐射，12 h/d。每组5 只孕鼠，称重孕第1 天和20 天孕鼠及出生后24 h 内 的新生鼠体质量，每窝分别随即取3 只。即每组15 只新生鼠，随机取5 只在乙醚麻醉下灌注后取前额叶皮质甲醛溶 液固定，H-E 染色观察，余10 只断颈处死后取前额叶皮质置于电镜保存液备电镜观察超微结构。结果：2 个孕期微 波辐射暴露组和空白对照组母鼠和新生鼠的体质量，同期在各组间差异无统计学意义；2 个孕期微波辐射暴露组的 新生鼠，前额叶皮质的微细结构和超微结构出现损伤。结论：孕期微波辐射暴露可致新生鼠前额叶皮质微细和超微 结构发生改变。     

小鼠肾脏发育中凋亡细胞的超微结构变化

1　材料和方法1 1　动物取昆明小鼠 ,雌雄比例 3∶1同窝饲养 ,以雌鼠阴道精栓出现为第 1日计算胎鼠胚龄。部分孕鼠分笼饲养 2 0日后 ,每天早八时观察分娩情况 ,新生仔鼠按生后计算日龄。选取 1 4、1 8日胎鼠各 4只 ,生后 1、7、1 4日龄仔鼠各 4只为观察对象。1 2　光镜和电镜标本制作　在冷操作条件下切开胎鼠和仔鼠腹部 ,取左肾于 2 5 %戊二醛内固定。胎鼠做全肾树脂包埋 ,仔鼠肾脏经肾门做矢状面切开 ,皮质和髓质分别进行树脂包埋。ＬＫＢ Ｖ型超薄切片机半薄连续切片 ,甲苯胺蓝染色 ,按Ｋｏｓｅｋｉ判断光镜下凋亡细胞后制超薄切片 ,…     

MEF-2C在妊娠糖尿病胎鼠心脏发育中的表达

目的了解肌细胞增强子-2C(MEF-2C)在妊娠糖尿病(GDM)胎鼠心脏发育过程中的表达,探讨其在GDM胎鼠心脏发育异常中的作用机制。方法将雌鼠随机分为对照组(n=24),GDM组(n=30):孕后腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ)40 mg/kg,柠檬酸组(n=30):孕后每只动物腹腔注射柠檬酸-柠檬酸钠液(2%链脲佐菌素溶剂)40 mg/kg,胰岛素组(n=30):采用2%STZ建立GDM模型鼠后于孕后72 h(血糖12～15 mmol/L)每天皮下注射给予中效胰岛素(诺和锐30R)20 U/kg,采尾静脉血监测血糖及称重,并分别于孕12、15、19 d 3个时间点剖腹获取胎鼠心脏组织:观察胎鼠心脏发育情况,HE染色观察心脏结构,免疫组化检测心脏组织MEF-2C蛋白,荧光定量PCR检测MEF-2C mRNA,Western blot检测MEF-2C蛋白。结果各组MEF-2C蛋白表达呈动态变化:孕12 d可见表达,孕15 d表达最高,孕19 d表达下降;与对照组相比,GDM组MEF-2C mRNA及MEF-2C蛋白的表达下降(P0.05)。结论妊娠糖尿病胎鼠心脏发育异常率显著增高,MEF-2C与GDM胎鼠心脏发育异常可能存在相关性。     

咖啡因对鼠牙胚发育的影响

背景：孕期饮用咖啡会导致孕妇钙吸收障碍,影响胎儿牙胚发育。 目的：观察咖啡因对鼠牙胚发育的影响。 方法：将Wistar孕鼠随机分为2组,在咖啡因组大鼠受孕7 d后的饮水中添加咖啡因,对照组孕鼠饮水中不加咖啡因。孕20 d时,两组各处死一半孕鼠取胎鼠,苏木精-伊红染色观察牙胚组织形态;另一半孕鼠连续用药至产仔后20 d,测定仔鼠血清中钙离子水平,并取仔鼠第一磨牙进行扫描电镜观察。 结果与结论：咖啡因组仔鼠血清中钙离子水平低于对照组(P < 0.05)。苏木精-伊红染色可见咖啡因组胎鼠与相同时期对照组胎鼠相比,牙胚组织体积减小,发育迟缓。电镜结果显示咖啡因组孕鼠所产仔鼠的第一磨牙酸蚀后表面空隙比对照组多。提示对孕鼠使用咖啡因可以影响其仔鼠牙胚的发育,导致牙胚发育迟缓,使釉质基质钙化不全,发育后的牙齿不耐酸蚀。     

孕大鼠和胎鼠心脏系统混沌特征分析

应用计算机化大鼠心电信号采集和处理系统,引导妊娠第21dSD大鼠和胚胎宫内心电,记录母胎鼠心动周期信号混沌图形参数和数值参数,探讨正常妊娠大鼠母胎心脏系统混沌特征,分析母胎鼠自主神经系统发育的差异性。结果显示,(1)正常胎鼠与孕鼠比较,频率和电压较低,差异均有显著性(P<0.01);(2)正常胎鼠和孕鼠心动周期信号功率谱具有类似于人的心动周期信号功率谱三峰特征;正常胎鼠和孕鼠比较,第二峰、第三峰明显较低;(3)正常胎鼠与孕鼠比较,相对分散度、李雅普诺夫指数和分维数均显著较低,差异均有显著性(P<0.01)。本研究表明,正常胎鼠心动周期信号变化的复杂性低于孕鼠,胎鼠心脏混沌程度低于孕鼠,胎鼠自主神经系统发育尚不成熟。     

中药蜈蚣对小鼠胚胎发育的影响

孕鼠１６１只随机分组，在孕期第７－１１天给实验组分别以５００ｍｇ／（ｋｇ．ｄ）（蜈蚣１组）及１０００ｍｇ／（ｋｇ．ｄ）（蜈蚣２组）的中药蜈蚣煎剂灌胃，至孕期１８天记录各组孕鼠和胎鼠的发育情况。结果表明：蜈蚣１，２两组致畸作用明显，死胎，吸收胎比例升高；蜈蚣２组胎鼠和孕鼠的体重均下降，堕胎作用显著，与对照组比较，差异均有非常显著意义（Ｐ＜０．０１）。     

桉叶油对大鼠胚胎发育的影响

目的 探讨桉叶油对SD大鼠胚胎发育的影响。 方法 取SD孕鼠25只,随机分成3个实验组（桉叶油高、中、低剂量）、溶剂对照组（花生油）和阳性对照组（环磷酰胺）,每组5只。实验组和溶剂对照组分别在大鼠妊娠第10天用300、200、100mg/kg 的桉叶油和花生油2ml/只灌胃,每天1次,连续5d。阳性对照组于孕第13天腹腔注射环磷酰胺1次（12.5mg/kg）。各组孕鼠于孕19d处死取胚胎,记录孕鼠的体重、子宫重、卵巢重和胎盘重;统计胚胎植入的总数、吸收胎数、活胎数和死胎数;观察胚胎外形,并测量胎鼠体重、身长和尾长。 结果 桉叶油灌胃SD孕鼠后,孕鼠的体重、子宫重、卵巢重及胎盘重与溶剂对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。胚胎植入总数、吸收胎数、活胎数及死胎数与溶剂对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。桉叶油各组活胎鼠平均体重、身长及尾长均较溶剂组高,但只有高剂量桉叶油组胎鼠平均体重（2.318±0.606）与溶剂组（1.462±0.397）比较有明显差异（P<0.05）,其余指标与溶剂组比较无明显差异（P＞0.05）。阳性对照组胎鼠平均体重、尾长明显低于溶剂组,且有差异（P<0.05）。阳性对照组胎鼠平均身长低于溶剂组,但统计学分析无差异（P＞0.05）。 结论 本实验条件下,桉叶油对SD孕鼠胚胎无毒性,环磷酰胺对大鼠胚胎有毒性。     

糖尿病妊娠胎鼠胰岛β细胞的形态学和体视学研究

本实验选用雌性Wistar大鼠，妊娠第一天腹腔注射四氧嘧啶（15mg/100g体重），分别于妊娠第17，18，19，20天剖腹取胎胰，一部分用改良Bouin液固定，石腊包埋切片，HE染色及免疫组织化学PAP法显示β细胞，并测定β细胞的数面密度和体密度，另一部分常规电镜制片及观察，结果显示，实验组β细胞的数面密度均显高于对照组，第17，18天实验组胎鼠β细胞分泌颗粒较对照组的增大，数量增多，而17天胎鼠胰岛为非常不规则的内分泌细胞团，对胰岛素抗血清呈阳性反应的细胞少，阳性反应弱，随着胎鼠的生长发育胰岛细胞逐渐聚集成条索状或团块状，阳性细胞增多，阳性反应渐增强，上述结果提示：妊娠高血糖可以促进胰岛β细胞数量增多，分泌颗粒成熟。     

骨形态发生蛋白2对14 d胎鼠端脑神经干细胞分化为胆碱能神经元的影响

背景：骨形态发生蛋白2可能是参与胆碱能神经元前体细胞分化的细胞外调控因子。 目的：观察骨形态发生蛋白2在孕14 d胎鼠端脑神经干细胞诱导成胆碱能神经元过程中的作用。 方法：取孕14 d胎鼠端脑,用含EDTA的胰酶和Ⅰ型胶原酶消化,无血清培养基培养细胞,种植于涂有多聚赖氨酸的培养板,细胞原代培养24 h后半量换液,加入10 μg/L骨形态发生蛋白2继续培养。 结果与结论：胶原酶消化得到的神经干细胞呈单层贴壁生长;Nestin免疫荧光鉴定细胞为阳性,获取的神经干细胞纯度大于99%;ChAT免疫荧光鉴定骨形态发生蛋白2可以将孕14 d胎鼠端脑神经干细胞诱导成胆碱能神经元,细胞纯度大于97%。     

^125碘—标记弓形虫感染孕鼠后胎鼠脑放射示踪研究

应用１２５碘－标记弓形虫经尾静脉感染受孕１４ｄ的昆明种小鼠，动态观察分布和受侵细胞变化情况，结果显示：孕鼠脑感染率为３０．６０％，胎鼠头感染率为７１．２０％，胎鼠头／躯干的放射性比值为１．３２～５．９５，随受染时间的延长而增高。放射自显影的光电镜观察提示，弓形虫感染后４～８ｈ虫体即在胎鼠脑胶质细胞内被发现。４８ｈ细胞核内可见，细胞退变崩解。７２ｈ脑神经细胞显著减少。实验结果为妊娠期感染弓形虫易导致胎儿神经管畸形提供实验病理学基础。     

桉叶油联合维甲酸对SD胎鼠脑组织Pax3和缝隙连接蛋白43表达的影响

目的探讨桉叶油联合维甲酸(RA)对SD胎鼠脑组织转录因子Pax3、缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法 SD孕鼠42只,随机分为6组,每组7只,正常对照组,RA组,溶剂对照组(花生油+RA),3个实验组(桉叶油高、中、低剂量+RA)。正常对照组自由摄食饮水,溶剂对照组于孕第7~14天每只花生油2ml灌胃,每天1次,孕第10天40mg/kg RA灌胃1次。桉叶油3个剂量组于孕第7~14天分别桉叶油300、200和100mg/kg灌胃,每天1次,孕第10天40mg/kg RA灌胃1次。RA组于孕第10天40mg/kg RA灌胃1次。各组于孕21天处死孕鼠取胚胎,Western blotting、免疫组织化学技术检测胎鼠脑组织的Pax3、Cx43蛋白的表达。Real-time PCR检测脑组织Pax3、Cx43 mRNA表达。阿利新蓝和茜素红进行骨骼染色,体视显微镜下观测椎骨发育,脊柱间隙。结果维甲酸灌胃各组胎鼠椎骨数量异常的胎鼠数与正常对照组比较差异无显著性,但在维甲酸灌胃各组中,胎鼠椎骨形态异常的异常率和胎鼠椎骨分裂的百分率最低值分别为55%(桉叶油高剂量+RA组)和45.8%(桉叶油低剂量+RA组),较正常对照组高(0)(P0.05)。在维甲酸灌胃各组中,桉叶油各组胎鼠椎骨形态异常的异常率和胎鼠椎骨分裂的百分率最高值分别为62.5%(桉叶油低剂量+RA组)和55.0%(桉叶油高剂量+RA组),较维甲酸组(73.7%,73.7%)和溶剂对照组低(68.2%,63.6%,P0.05)。与正常组胎鼠比较,维甲酸灌胃各组大脑组织的Pax3、Cx43蛋白及其mRNA的表达较正常组高(P0.05),在维甲酸灌胃各组中,桉叶油灌胃各组胎鼠脑组织Pax3、Cx43蛋白及其mRNA的表达较单纯RA灌胃组低,其差异有统计学意义(P0.05)。结论桉叶油对维甲酸引起胎鼠神经管缺陷有一定的拮抗作用。其机制可能与桉叶油拮抗维甲酸上调胎鼠神经组织的Pax3、Cx43蛋白过度表达有关     

胶原酶和胰酶对胎鼠端脑神经干细胞培养的影响*☆

背景：神经干细胞为神经发育和神经功能重建的研究带来了广阔前景,其体外培养已成为神经科学的一个研究基础。 目的：比较胶原酶和胰酶对体外培养神经干细胞的作用。 方法：取孕14 d的SD大鼠,无菌条件下取胎鼠端脑,剪碎后分别用含EDTA的胰酶和Ⅰ型胶原酶消化,无血清培养基培养细胞。 结果与结论：胶原酶消化得到的神经干细胞呈单层贴壁生长,而用胰酶消化得到的则形成聚集体;Nestin免疫荧光鉴定细胞为阳性;获取的神经干细胞纯度大于99%。提示用胶原酶可以简单而快速地获得原代单层化贴壁生长的神经干细胞。关键词：胰酶;胶原酶;神经干细胞;细胞培养;鉴定;胎鼠 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.14.019      

快速老化系小鼠与昆明系小鼠AD相关指标的比较

目的： 观察6月龄的快速老化系SAM-P/8、SAM-R/1小鼠与昆明系小鼠的AD相关指标的变化。方法： 取健康（20±5）g 6月龄SAM-P/8小鼠、SAM-R/1小鼠和昆明系小鼠各14只，雌雄各半，随机分成：SAM-P/8小鼠（AD疾病模型小鼠）、SAM-R/1小鼠对照组和昆明系小鼠对照组，观察上述3组小鼠行为学、神经生化、超微结构、基因表达情况。结果： 6月龄SAM-P/8小鼠1-4d学习成绩、第5 d记忆成绩低于6月龄SMA-R小鼠和昆明系小鼠（P<0.05），真性胆碱酯酶活性则高于6月龄SMA-R/1小鼠和昆明系小鼠（P<0.05）；SAM-P/8小鼠海马神经元超微结构显示明显纤维化，而SAM-R/1小鼠和昆明系小鼠无明显纤维化；SAM-P/8小鼠脑神经细胞的凋亡相关基因表达有明显上调达2倍以上，而SAM-R/1小鼠和昆明系小鼠则未见这些基因有明显上调。SAM-R/1小鼠和昆明系小鼠比较，除基因表达略有差异之外，其它指标无明显差异。结论： 6月龄SAM-P/8小鼠在很多方面已经具备了AD自然发病模型典型特征。而用于正常对照的6月龄SAM-R/1与昆明系小鼠的行为学、TchE活性、超微结构则无显著差异；凋亡相关基因表达差异不明显，而部分基因表达则有一定差异。     

宫内缺氧对幼年大鼠大脑皮质神经元的影响

目的探讨宫内缺氧对幼年大鼠大脑皮质神经元的影响。方法将孕14d的SD孕大鼠10只随机分为对照组和缺氧组，各5只。缺氧组大鼠置于三气培养箱内缺氧，制造宫内缺氧模型，对照组不进行缺氧处理；两组孕鼠的幼鼠在生后40d取脑、固定、常规石蜡切片（片厚4μm），行NSE免疫组化染色。结果缺氧组幼鼠大脑皮质NSE阳性细胞数和阳性细胞光密度均较对照组明显减少（P〈0．05）。结论一定时间、一定浓度的宫内缺氧可致胎鼠生后大脑皮质神经元减少。     

胎鼠肺成纤维细胞的改良培养法

目的改良胎鼠肺成纤维细胞的培养方法。方法取19d胎龄129孕鼠,开胸取出胎肺,用胰酶稍微消化,再进行组织悬液贴壁培养。传代的肺成纤维细胞用免疫组化检测其vimentin和laminin的表达。结果24h后镜下可见组织块周边有长梭型细胞爬出,48h后生长迅速,3d接近融合。传代后杂细胞基本去除,5代后细胞的增殖能力逐渐下降。结论胰酶轻度消化后组织悬液贴壁法是一种可靠快速的肺成纤维细胞分离纯化培养方法。     

GATA-4在妊娠期糖尿病胎鼠心脏中的表达

 目的：了解妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus, GDM）胎鼠心脏发育过程中锌指转录因子GATA结合蛋白4（GATA binding protein 4, GATA-4）的变化规律,为深入探讨其在GDM胎鼠心脏发育异常中的作用机制奠定基础。方法：80只SPF级成年SD雌鼠随机分为对照组（n=40）和GDM组（n= 40）,通过阴道涂片确定受孕后,GDM 组予腹腔注射2%链脲佐菌素（streptozotocin, STZ;每只40 mg/kg）,对照组予腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。给药72 h后每天监测血糖,各组分别于孕12、15、19 d剖取胎鼠心脏组织,HE染色观察心脏组织病理变化,免疫组化检测GATA-4的表达,实时荧光定量RT-PCR检测GATA-4 mRNA的表达,Western blotting检测GATA-4蛋白的变化。结果：对照组及GDM组GATA-4蛋白的表达呈动态变化：孕12 d可见表达,孕15 d表达最高,孕19 d表达下降;与对照组相比,GDM组GATA-4 mRNA及蛋白的表达呈现下降趋势,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：妊娠期糖尿病胎鼠心脏发育异常率显著增高,GATA-4与GDM胎鼠心脏发育异常可能有相关性。     

母源性甲亢对胎鼠、仔鼠心的影响

目的:研究母源性甲亢对胎鼠、仔鼠心的影响.方法:建立妊娠合并甲亢模型;取孕16、18、20 d胎鼠心,出生5、10、15d仔鼠心,解剖检查;经石蜡包埋,Masson染色,测量心肌细胞直径和长度;免疫组织化学检测内皮素的差异表达.结果:母源性甲亢各组胎鼠、仔鼠心质量分数高于同期对照组,心肌细胞直径加大、细胞加长,心肌排列不整齐且胶原纤维增多,内皮素的表达高于同期对照组.结论:母源性甲亢会影响胎鼠、仔鼠心肌细胞.     

肝内胆汁淤积症胎鼠脑组织中NPY的表达定位及意义

目的观察妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)孕鼠肝脏、胎鼠脑组织结构变化;分析神经肽Y(NPY)在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎鼠脑组织中的表达及意义。方法选择孕15 d SD大鼠,用孕酮及乙炔雌二醇建立孕鼠ICP模型,观察孕鼠肝脏和胎鼠脑组织的病理变化;应用免疫组织化学染色方法及图像分析检测ICP孕鼠(20例,实验组)及正常孕鼠(20例,对照组)脑组织中NPY的表达及定量。结果 ICP孕鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆酸(TBA)明显升高;光镜下见部分肝细胞有颗粒样变性和空泡变性。电镜下见肝组织中毛细胆管扩张、微绒毛肿胀,毛细胆管周围肝细胞内见电子致密物沉积。胎鼠脑组织疏松,空泡样变性明显,部分细胞溶解,甚至消失。实验组胎鼠脑组织NPY表达免疫阳性神经元主要位于海马区,免疫阳性细胞被染成棕黄色,免疫阳性颗粒主要分布在胞质和细胞膜表面。对照组海马区仅少部分细胞膜着色或无免疫着色。胎脑组织NPY的免疫组化结果用图像分析仪测定,结果显示:实验组NPY平均光密度值(1.0486±0.0182)明显高于对照组的(0.6297±0.0278),两者比较有显著性差异(P<0.05)。结论 ICP母鼠肝脏及胎鼠脑组织有明显病变,胎鼠脑组织中的NPY表达升高,可能与胎脑组织受损有关。     

一氧化氮对胎兔动脉导管胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氢体系的影响

目的探讨H2S、NO对早产胎兔动脉导管的作用及其相互影响,进一步探索动脉导管开放与关闭的病理生理机制、意义及其影响因素,为临床上全面认识动脉导管的开放与关闭提供理论依据。方法将孕21d日本大耳白兔24只随机分成四组：空白对照组及三个处理组,处理组待孕龄23d和25d时分别腹腔注射以不同剂量的一氧化氮前体-硝普钠,待孕龄26d时解剖孕兔取胎兔,胎兔心脏取血1mL后立即解剖胎兔取动脉导管组织,进行实验。结果随着注射硝普钠浓度的增加,胎兔血浆中硫化氢含量、动脉导管组织CSEmRNA表达量均逐渐随注射剂量的增加而增加。各组间相比较,P<0.01,具有显著性差异。结论早产兔血浆中有H2S存在,早产兔动脉导管组织中存在CSEmRNA表达;给孕兔注射不同剂量硝普钠(在一定范围内)对早产兔动脉导管中H2S/CSE体系具有浓度依赖性促进作用。