妊娠期混配农药暴露对亲子两代大鼠内分泌和免疫系统的影响

[目的]探讨妊娠期氯氰菊酯和甲基对硫磷混配染毒对亲子两代大鼠的内分泌干扰和免疫毒性效应.[方法]孕鼠112只随机均分为4组,于妊娠第1～15天,以剂量为0(对照组)、1/300 LD50(低)、1/95 LD50(中)、1/30LD50(高)等毒混配的氯氰菊酯和甲基对硫磷,每日灌胃染毒1次,共15天;对照组为色拉油.56只孕鼠自然分娩,仔鼠10周龄时随机抽取64只(每组16只,雌雄各半)处死;另56只孕鼠(每组14只)于妊娠19天处死;亲子两代分别称量脏器重量,用放射免疫法测定血清促卵泡成熟激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)和睾酮(T);三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)和促甲状腺激素(TSH)以及免疫球蛋白IgG和IgA. [结果]脏器系数中仅仔鼠的卵巢重量系数与混配农药之间存在剂量一效应关系(r=0.3144,P=0.0172);孕鼠中剂量组血清T3水平高于对照组(P＜0.05),仔鼠低剂量组血清睾酮高于对照组(P＜0.05);孕鼠IgA水平存在剂量一效应关系(rs=0.4649,P=0.0002);其余未发现异常.[结论]妊娠期氯氰菊酯和甲基对硫磷混配染毒对母鼠和子代有一定的内分泌干扰效应.     

NMDA受体NR2B亚单位结构和功能的研究进展

N-甲基-D-天门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptors,NMDARs)是中枢神经系统中最重要的谷氨酸受体之一,属于配体和电压双门控的离子通道,由已知的7种亚单位(NR1、NR2A-D、NR3A-B)构成四聚体复合物且与细胞内骨架蛋白交互作用定位于神经元突触后膜致密区(post synaptic density,PSD),在神经元突触形成与维持、突触传递可塑性及学习和记忆等调节过程中起重要作用.过量谷氨酸对NMDARs的过度激活导致神经元损伤直至死亡可产生兴奋性神经毒.现已知NMDA受体的NR1、NR2B亚单位的选择性表达、亚单位异聚体组成以及亚单位磷酸化状态等均可影响NMDARs的功能从而在兴奋性神经毒过程发挥重要作用.本文对近期有关NMDARs NR2B亚单位结构生理特性、分布和功能性调节特点以及与兴奋性神经毒之间关系的研究进展做一综述.     

哺乳期母鼠暴露大豆异黄酮对仔鼠卵巢类固醇受体表达的影响

目的研究大豆异黄酮对新生儿期雌性大鼠卵巢发育的影响。方法将孕鼠随机分至大豆异黄酮0、10、50、100、150和200mg/kg bw染毒剂量组中,在母鼠产后第5~10天通过给母鼠灌胃使新生儿期大鼠间接暴露大豆异黄酮,在产后第11天分离子代雌性大鼠的卵巢进行病理检查,并用免疫组织化学和RT-PCR方法测定卵巢中雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)、孕激素受体(PR)和增殖细胞核抗原(PCNA)及其mRNA的表达水平。结果与对照组比较,大豆异黄酮100、150和200mg/kg bw剂量组的卵巢/体重显著增加,卵泡发育加快;150mg/kg bw和200mg/kg bw剂量组卵巢ER及其mRNA和PCNA蛋白表达显著增加,而PR mRNA表达显著降低;但卵巢AR、PR蛋白及AR mRNA的表达各处理组与对照组差异无显著性。结论新生儿期暴露大豆异黄酮的雌性大鼠卵巢发育表现出明显的不良作用,这种作用至少涉及到雌激素敏感受体ER、PRmRNA的转录。     

异氟烷对老年大鼠认知功能及海马NMDA受体NR1亚基磷酸化的影响

目的 探讨老年大鼠吸入异氟烷后其认知功能变化及NMDA受体NR1亚基磷酸化的分析.方法 应用18月龄SD大鼠24只,雌雄各半,随机分成3组：0%异氟烷组（10%）、1.2%异氟烷组（11.2%）和1.8%异氟烷组（11.8%）,n=8.对各组大鼠行Morris水迷宫测试,结束用westtern-blot检测磷酸化NMDA受体NR1亚基.结果 11.2%组与10%组在第1天潜伏期比较有显著性差异（P〉0.05）,第2天以后各时间点潜伏期和空间探索实验的成绩与10%组同时间比较均无差异（〈0.05）;11.8%组与I0%组潜伏期和空间探索实验的成绩比较均有显著性差异（P〉0.05）.11.8%组与10%组NMDA受体磷酸化NR1分析比较有显著性差异（P〉0.05）.结论 1.8%异氟烷引起老年大鼠的认知功能下降,推测可能与海马NMDA 受体NR1亚基磷酸化降低有关.     

铅对钾通道亚单位和NMDA受体亚单位的影响

[目的 ]研究低浓度铅对大鼠海马神经元钾通道亚单位和NMDA受体亚单位的影响及其作用机制。 [方法 ]应用全细胞膜片钳技术和原位杂交技术。 [结果 ]铅提高了动作电位的发放频率 ,抑制了K 通道电流 ,使IA 电流激活电压升高 ,失活时间常数延长 ;铅抑制了IH 电流的大小 ,使得IH 从超级化方向往去极化方向移动 ;增加了ID 的激活时程。铅暴露组 15d大鼠海马CA1,CA4 ,DG区 ,而 2 1d时海马CA4 ,DG区的NR1mRNA表达增强 ;铅暴露组 2 1d大鼠海马CA1,CA2 ,CA4 和DG区的NR2DmRNA表达增高 ;铅暴露组 15d大鼠海马CA1,CA4 ,DG区 ,而 2 1d时海马CA1,DG区的NR3AmRNA表达水平显著降低 ;没有观察到铅对NR2BmRNA表达的影响。还观察到铅可影响海马CA1、CA3 ,DG区的AMPA受体 ,以及CA1和DG区的Kainate受体。 [结论 ]低浓度铅暴露损伤了大鼠海马神经元和背根神经节钾通道亚单位和海马NMDA受体亚单位的mRNA的表达     

出生前暴露甲基对硫磷与氯氰菊酯混配农药对大鼠子代神经行为毒性的影响

[目的]探讨出生前甲基对硫磷与氯氰菊酯混配染毒,对大鼠子代神经行为发育的影响. [方法]48只Wistar孕鼠随机分为4组,于妊娠第1～15天用农药甲基对硫磷与氯氰菊酯进行连续灌胃染毒,对照组采用溶剂灌胃.甲基对硫磷剂量分别为:0,0.0230,0.0725,0.2300mg/kg体重;氯氰菊酯剂量分别为0,0.8000,2.5265,8.0000mg/kg体重.甲基对硫磷与氯氰菊酯采用等毒性混配,即分别为:0、1/300 LD50、1/95 LD501/30LD250,对349只仔鼠进行早期神经行为发育指标的测试;对64只仔鼠进行Morris水迷宫空间学习和记忆能力的测试. [结果]仔鼠断崖回避达标率在出生的第5、6天,高、中剂量组低于对照组(P＜0.05);视觉定位达标率在出生的第16天下午,高、低剂量组低于对照组(P＜0.05) Morris水迷宫实验测试指标,各剂量组与对照组差别无显著性(P＞0.05). [结论]大鼠孕期暴露于甲基对硫磷与氯氰菊酯混配农药,对仔鼠的神经行为发育可产生一定的影响.     

1-溴丙烷亚急性吸入染毒对大鼠大脑NR2B和GluR2影响

目的 探讨1-溴丙烷(1-BP)对大鼠大脑离子型谷氨酸受体NR2B亚基和GluR2亚基的影响.方法 无特定病原体级成年雄性Wistar大鼠36只,随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组4组,于动式吸入染毒柜内分别暴露于质量浓度为0、1 250、2 500和5 000 mg/m3的1-BP气体,8 h/d,每周染毒5d,连续4周.实验结束后处死大鼠,分离脑组织,应用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应法测定NR2B和GluR2的蛋白和基因表达水平.结果 中、高剂量组大鼠大脑NR2B和GluR2的蛋白表达水平均高于对照组和低剂量组(P＜0.05或P＜0.01).与对照组相比,高剂量组大鼠大脑NR2B mRNA表达水平增加(P＜0.05),各剂量组大鼠大脑GluR2 mRNA表达水平均增加(P ＜0.05或P＜0.01).结论 一定水平的1-BP亚急性吸入染毒能增加大鼠大脑NR2B和GluR2的蛋白表达.     

MK-801对锰中毒大鼠脑纹状体NMDA受体亚单位表达的影响

目的 研究MK-801对锰中毒大鼠脑纹状体NMDA受体亚单位mRNA和蛋白表达的影响.方法 Wistar大鼠40只,按体重随机分成5组,每组8只.第1组为对照组,皮下注射0.9%氯化钠;第2～4组为锰染毒组,分别皮下注射8、40、200 μmol/kg的氯化锰溶液;第5组为MK-801预处理组,隔日腹腔注射0.3 μmol/kg MK-801,2 h后皮下注射200μmol/kg的氯化锰溶液;注射容量均为5 ml/kg,染锰4周,每周5次.通过电镜观察神经细胞损伤情况,同时测定脑纹状体锰和谷氨酸(Glu)含量,NR1、NR2A、NR2B mRNA和蛋白表达.结果 染锰4周后,随着染锰剂量的增加,纹状体Mn和Glu含量均逐渐升高;NR1、NR2A、NR2B的mRNA和蛋白表达均有不同程度的下降,其中NR2A灰度值下降最明显.电镜观察发现染锰后神经细胞出现不同程度的空泡变性和染色质边集.MK-801预处理组与高剂量染锰组比较,NR2A的mRNA和蛋白表达均有所增加(P<0.05).结论 锰能够破坏纹状体Glu平衡,并且抑制NMDA受体亚单位的表达产生神经毒性,促使细胞凋亡.MK-801可以影响NR2A的mRNA和蛋白表达.     

碘过量及补硒对仔鼠甲状腺激素水平及受体表达的影响

目的研究过量碘摄入对小鼠仔鼠脑甲状腺激素受体基因表达的影响及硒的干预作用。方法将60只BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组(饮用自来水,NC)、碘过量组(饮水3000μg/LI,EI+)、单独补硒组(饮水200μg/LSe,Se+)和碘过量加硒组(饮水3000μg/LI+200μg/LSe,EI+Se+)。以纯系鼠饲料饲养。4个月后,雌雄交配。测定14和28日龄仔鼠血清总T4(T4)和总T3(T3)水平,用实时荧光定量PCR测定0、14和28日龄仔鼠大脑组织TRα1和TRβ1mRNA的表达水平。结果14日龄仔鼠血清T4水平碘过量组显著低于对照组和碘过量加硒组(P<0.05)。0和14日龄仔鼠脑组织TRα1和TRβ1mRNA水平碘过量组显著高于对照组、单独补硒组和碘过量补硒组(P<0.05)。碘过量和补硒对28日龄仔鼠血清T4水平和脑组织TRα1和TRβ1表达水平无明显影响。结论碘过量上调子代脑TRα1和TRβ1的表达,补硒具有缓解作用。     

微波辐照对大鼠海马NMDA受体NR1和NR2B亚基基因及蛋白表达的影响

目的从功能亚基NR1和调节亚基NR2B基因及蛋白表达方面探讨了NMDA受体在微波辐照所致的学习记忆功能障碍中的作用。方法采用平均功率密度为65 mW.cm-2的微波,全身1次辐照大鼠20 min,在辐照后不同时相点,用RT-PCR和Western-blot技术分别检测NMDA受体NR1和NR2B亚基在基因及蛋白表达水平上的变化。结果微波辐照后3 h、24 h、3 d,大鼠海马脑区NMDA受体重要功能亚基NR1基因表达分别比对照组下降了21.1%(P<0.05)、14.2%(P<0.05)、30.3%(P<0.01),NR1蛋白表达分别比对照组下降40.6%、55.7%、60.7%;调节亚基NR2B蛋白表达分别比对照组下降38.7%、26.5%、78.4%。结论微波辐照后,大鼠海马脑区NMDA受体重要功能亚基NR1基因和蛋白表达下调,调节亚基NR2B蛋白表达下调,由此可导致NMDA受体数量减少和自身调节功能下降,进而可能影响LTP的诱导能力和学习记忆功能。     

氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大鼠生殖发育的影响

[目的]探讨妊娠期氯氰菊酯和甲基对硫磷混配染毒,对母鼠的生殖毒性和对子代大鼠生殖和发育的影响。[方法]Wistar孕鼠112只随机均分为4组,于孕1～15天连续经口灌胃染毒不同剂量农药(两种农药以相当于0、1/300、1/95、1/30LD50的剂量等毒混配),对照组采用溶剂灌胃。56只孕鼠(每组14只)妊娠19天时处死,测定胚胎毒性;另56只孕鼠自然分娩,记录空孕率、每窝活产数、妊娠天数、平均产仔数和性别比;测量其371只仔鼠的体重增长和生长发育情况;10周龄时随机抽取雌鼠32只(每组8只)、雄鼠40只(每组10只)处死,称量生殖腺重量,计数睾丸每日生精量和附睾精子数。[结果]孕鼠胚胎毒性指标中仅高剂量组活胎比低于中剂量组和对照组(P<0.05);各剂量组分娩孕鼠的空孕率、妊娠天数、产仔数、平均活产数、仔鼠性别比与对照组相比无差异(P>0.05)。各剂量组仔鼠体重增长与对照组一致(P>0.05);高剂量组仔鼠出生第一天尾长比对照组长(P>0.05);雌性仔鼠的卵巢脏器系数与混配农药剂量之间存在剂量-效应关系(rs=0.3144,P=0.0172);各剂量组雄鼠睾丸每日精子生成量和附睾精子数与对照组相比无差异(P>0.05)。[结论]妊娠期甲基对硫磷和氯氰菊酯混配染毒,对母鼠有一定的胚胎毒性,并对仔鼠生长发育有轻微的影响。     

应用程序控制行为测试研究甲基汞和微波对仔鼠神经行为的影响

[目的]应用程序控制行为测试分别评价妊娠期暴露于氯化甲基汞、频率1800MHz低强度微波辐射对F1 代大鼠的神经行为毒性。[方法]Wistar大鼠以雌雄2∶1合笼交配 ,受孕母鼠随机分组。实验1:于孕鼠妊娠第6～9d给予氯化甲基汞 ,0、0.01、0.05、2.00mg/(kg·day)连续灌胃染毒。随机选择32只F1 代大鼠 (雌雄各半 )于10周龄时进行程序控制行为测试。实验2:于孕鼠妊娠第1～20d暴露于频率为1800MHz,功率密度为0.5、1.0mW/cm2 的微波辐射 ,对照组为虚拟暴露 ;随机选择48只F1 代大鼠 (雌雄各半 )于10周龄时进行程序控制行为测试。[结果]实验1:甲基汞3个剂量组大鼠的学习成绩在两种程序均比对照组降低 (P<0.05或P<0.01) ,存在剂量_反应关系 (高频度差别强化率rs= -0.7273 ,P<0.01;低频度差别强化率rs= -0.2238,P>0.05)。实验2:1800MHz、功率0.5mW/cm2 微波组雄性仔鼠在高频度差别强化率 (DRH8/4)的成绩比对照组降低 (P<0.05)。[结论]胚胎期暴露于低剂量甲基汞对大鼠可产生神经行为毒性 ,表现为学习记忆功能异常 ;出生前暴露于频率1800MHz微波对仔鼠神经行为发育的影响尚不能确定。     

出生前暴露于1800MHz电磁波对大鼠海马胶原纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨出生前暴露于1 800 MHz电磁波对大鼠海马胶原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响.方法 7周龄SD雌性大鼠32只,雄性16只,适应环境一周后交配(雌∶雄=2∶1),受孕后雌鼠随机分为2个暴露组和2个对照组.暴露组均采用1 800 MHz连续射频电磁波于孕0～20 d进行21 d全身暴露,每天12 h,功率...     

孕鼠1800MHz电磁波暴露对子代海马细胞凋亡的影响

[目的]探讨孕期暴露1800MHz电磁波对子代大鼠海马细胞凋亡的影响。[方法]以7周龄无特定病原体（SPF）级SD大鼠24只（雌鼠16只、雄鼠8只）,雌雄2：1合笼。孕鼠随机分为0．5mW／cm^2暴露组、对照1组;1．0mW／cm^2暴露组、对照2组;暴露组采用1800MHz射频电磁波对大鼠于孕第0～20天进行连续21d全身暴露,每天12h,功率密度分别为0．5mW／cm^2和1．0mW／cm^2。各组于出生后第3周和第7周时,分别随机抽取8只仔鼠（雌雄各半）测定其海马细胞凋亡率。[结果]孕期暴露于密度为1800MHz0．5mW／cm^2的电磁波,3周龄仔鼠海马细胞凋亡率显著高于两对照组和1．0mW／cm^2暴露组（P〈0．05）,1．0mW／cm^2暴露组海马细胞凋亡率与两个对照组相比,差异无统计学意义（P〉0．05）;7周龄仔鼠海马细胞凋亡率,0．5mW／cm^2和1．0mW／cm^2组均高于两个对照组（P〈0．05）,两个对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。[结论]大鼠孕期暴露于1800MHz功率密度为0．5mW／cm^2和1．0mW／cm^2的电磁波可致发育期和成年期子代大鼠海马细胞凋亡率升高。     

Organic and Inorganic Mercury in Neonatal Rat Brain after Prenatal Exposure to Methylmercury and Mercury Vapor

Background

Many populations are exposed to multiple species of mercury (Hg), predominantly organic Hg as methylmercury (MeHg) from fish, and inorganic Hg as Hg vapor from dental amalgams. Most of our knowledge of the neurotoxicity of Hg is based on research devoted to studying only one form at a time, mostly MeHg.

Objectives

In this study we investigated the effects of prenatal exposure to MeHg and Hg vapor on Hg concentrations in the brain of neonatal rats.

Methods

Female Long-Evans hooded rats were exposed to MeHg (0, 3, 6, or 9 ppm as drinking solution), Hg vapor (0, 300, or 1,000 μg/m³ for 2 hr/day), or the combination of both, from 30 days before breeding through gestational day 18. On postnatal day 4, whole brains were taken from one male and one female from each of four litters in each treatment group to assess organic and inorganic Hg in the brain by cold vapor atomic absorption spectrometry.

Results

Statistical analysis using linear mixed effects models showed that MeHg dose was the primary determinant of both organic and inorganic brain Hg levels. For both outcomes, we also found significant interactions between MeHg and Hg vapor exposure. These interactions were driven by the fact that among animals not exposed to MeHg, animals exposed to Hg vapor had significantly greater organic and inorganic brain Hg levels than did unexposed animals.

Conclusion

This interaction, heretofore not reported, suggests that coexposure to MeHg and Hg vapor at levels relevant to human exposure might elevate neurotoxic risks.     

雌鼠围产期染铅对仔鼠脑组织POU域蛋白Brn-3a基因转录及蛋白表达的影响

目的探讨铅对中枢神经系统神经细胞内转录因子Brn-3a表达的影响。方法雌性SD大鼠在围产期经饮水染铅(对照组饮用蒸馏水,低、中、高剂量组染铅剂量分别为0.5、1.0、2.0g/L醋酸铅),取21日龄仔鼠脑组织进行观察,采用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)和组织原位杂交半定量检测Brn-3a的mRNA转录水平,采用免疫组织化学方法对Brn-3a蛋白进行检测以了解其表达水平。结果RT-PCR凝胶成像系统结果分析表明,各染铅剂量组脑组织海马区扩增产物的电泳条带密度与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。原位杂交检测Brn-3a的mRNA图像分析结果表明,高剂量组与对照组比较,在大脑皮层和海马部位可见平均灰度值升高(P<0.05),表明mRNA的表达量减弱,在海马部位还可见阳性面积比显著下降(P<0.01)。免疫组织化学图像分析表明,中、高剂量组脑组织皮层、海马及小脑的Brn-3a蛋白表达的阳性面积比[Aa(%)]、平均灰度与对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性的变化。染铅组Brn-3a表达低于对照组。结论大鼠脑组织基因转录水平和蛋白表达水平有所下降,提示铅干扰了Brn-3a蛋白的正常表达模式,Brn-3a作为转录调节因子可能参与了铅对学习记忆损害的神经毒性过程。     

职业接触低浓度混苯对健康的影响

目的观察低浓度混苯对作业人员健康的影响.方法.观察118名从事混苯作业人员,对照119名条件相当非接触混苯的行政人员健康状况.结果低浓度混苯接触组头晕、头痛、记忆力下降、月经紊乱以及鼻炎、咽炎、皮炎发病率明显高于对照组,发病者专业工龄无明显差异.结论职业接触低浓度混苯可损害神经系统、生殖系统、皮肤黏膜.