内皮祖细胞对大鼠睾丸扭转复位后生精功能的影响

目的 探讨内皮祖细胞(EPC)移植对睾丸扭转复位后生精功能的影响.方法 获取大鼠骨髓源性EPC,采用携带增强型绿色荧光蛋白的重组腺病毒(Ad-eGFP)转染EPC.将大鼠分3组,每组各6只.假手术组:左侧睾丸未扭转;缺血再灌注损伤(IRI)组:睾丸扭转复位后经股静脉注射1 ml生理盐水;EPC组:睾丸扭转复位后注射1 ml EPC悬液(EPC数为1.0×106个).另外对3只睾丸扭转复位后大鼠进行Ad-eGFP转染后的EPC移植.术后5 d,观察移植EPC的归巢特征,并检测各组睾丸组织病理变化以及凋亡细胞/生精小管情况.结果 重复感染倍数(MOI)=50时,Ad-eGFP对EPC的转染效率>73.7%.Ad-eGFP EPC移植后5 d,可在左侧睾丸组织中发现绿色荧光细胞.假手术组生精细胞结构正常,凋亡细胞/生精小管为0.09±0.02.IRI组生精细胞稀少,凋亡细胞/生精小管为2.82 ±0.81.EPC组生精上皮较IRI组显著增厚,EPC组凋亡细胞/生精小管为0.32±0.09,低于IRI组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 EPC移植可改善睾丸扭转导致的生精功能障碍,对生精细胞产生保护作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of transplanted endothelial progenitor cells (EPCs) on the spermatogenic functions in testicular detorsion. Methods Bone-marrow-derived EPCs were obtained from rats and transfected by enhanced green fluorescent protein adenovirus (Ad-eGFP). The rats were divided into 3 groups (n=6 each). In the sham group, left testis was not twisted. In the ischemia reperfusion injury (IRI) group, 1 ml saline was injected into the femoral vein of each rat after testicular detorsion. In the EPCs group, 1 ml EPCs suspension (1.0×106 EPCs) was injected into each rat after testicular detorsion. The Ad-eGFP transfected EPCs were injected into the 3 additional rats of testicular torsion-detorsion. At Day 5 post-transplantation, the characteristics of transplanted EPCs homing were detected. And the pathological changes and apoptotic cells/seminiferous tubules in left testis were examined. ResultsWhen the value of multiplication of infection (MOI) was at 50, the transfection rate of EPCs by Ad-eGFP exceeded 73.7%. At Day 5 post-treatment, the cells exhibiting green fluorescence were detected in left testis. The germ cells in rats of the sham group were normal. And the ratio of apoptotic cells to seminiferous tubules was 0.09±0.02. The germ cells in rats of the IRI group were much fewer. And the ratio of apoptotic cells to seminiferous tubules was 2.82±0.81. As compared with the IRI group, seminiferous epithelium was thicker in the EPCs group. And the ratio of apoptotic cells to seminiferous tubules was 0.32±0.09 in the EPCs group. It was much smaller than that in the IRI group. There was significant difference (P<0.01). Conclusion The transplantation of EPCs is effective for treating the spermatogenic dysfunctions caused by testicular torsion so as to greatly enhance the spermatogenic functions.     

视黄酸对隐睾生精细胞增殖分化及减数分裂的 作用及其机制研究

目的 探讨视黄酸对隐睾生精细胞增殖分化及减数分裂的作用及其机制。方法 将30 只SD 孕 鼠随机分为3 组,每组10 只,取子代雄鼠进行研究。对照组常规饲养不给任何药物或试剂;模型组采用雄激 素拮抗剂氟他胺（Flu）复制隐睾大鼠模型;干预组在模型组基础上,在子代雄鼠生精细胞发育时期予以视黄 酸干预。采用TUNEL 法检测生精细胞的凋亡,免疫组织化学法观察睾丸组织中c-Kit、Stra8、Scp3 蛋白的 表达,qRT-PCR 检测睾丸组织中Stra8、c-Kit、Scp3 mRNA 的表达,Western blotting 检测睾丸组织中Stra8、 Scp3、c-Kit 和PLZF 蛋白的表达。结果 免疫组织化学结果显示,对照组和干预组中可见大量精子细胞排列 整齐;而模型组睾丸各级生精细胞数目减少、排列紊乱,且曲细精管管腔缩窄。TUNEL 检测结果显示,与对 照组和干预组比较,模型组可见大量生精细胞凋亡。对照组和干预组凋亡指数低于模型组（P <0.05）。对照 组和干预组Stra8、c-Kit、Scp3 mRNA 和蛋白相对表达量高于模型组（P <0.05）。对照组和干预组PLZF 蛋 白相对表达量高于模型组（P <0.05）。结论 视黄酸促进生精细胞发育的作用机制可能与调控隐睾生精细胞 增殖分化及减数分裂有关,可一定程度上恢复隐睾大鼠的生殖功能。     

p53、p63在SD大鼠隐睾中的表达

目的 探讨p53、p63在SD大鼠隐睾中的表达及其在隐睾所致生精障碍过程中的可能作用.方法 本实验将30只健康雄性SD大鼠随机分为隐睾组和假手术组,建立单侧隐睾模型.术后7天脱颈椎处死大鼠,留取各组大鼠双侧睾丸称湿重,常规组织学切片观察各组睾丸生精上皮形态,免疫组化分别检测p53、p63蛋白表达的变化.结果 术后第7天,与正常侧睾丸相比,隐睾侧睾丸重量明显减轻,生精小管内生精细胞排列紊乱,生精细胞与精子的数量减少,可见较多多核巨细胞;免疫组化显示p53在各组睾丸的生精小管的各级生精细胞的胞质中均有表达,尤其是在精母细胞胞质中,但在隐睾中表达最强;p63在假手术组表达较少且较弱,而在隐睾组中表达较多且较强.结论 隐睾能导致睾丸内p53、p63表达增高,从而促进生精细胞凋亡增加.     

氨基胍对隐睾所致生精细胞凋亡中p53表达的影响

目的:通过研究氨基胍对隐睾生精细胞中p53表达的影响,探讨生精细胞凋亡的分子机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、隐睾组、隐睾+氨基胍(Aminoguanidine,AG,iNOS抑制剂)组、隐睾+生理盐水组。后三组建立单侧隐睾模型,后两组术后分别于腹腔内注射AG和生理盐水,每天一次,定时定量。7天后处死所有大鼠,取双侧睾丸称湿重。手术侧睾丸H.E染色观察常规组织学及免疫组化检测p53的表达。结果:隐睾+AG组睾丸生精上皮较隐睾组及隐睾+生理盐水组排列有序,细胞层数厚,该组中p53表达弱于隐睾组。结论:AG可降低隐睾中p53的表达,抑制隐睾生精细胞的凋亡,提示NO可能通过增强隐睾生精细胞中p53的表达而促进生精细胞凋亡。     

输精管结扎对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

为探讨输精管结扎对睾丸曲细精管生精细胞凋亡程度的影响，应用流式细胞仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术，检测大鼠输精管结扎和假手术后２～１２周睾丸生精细胞的凋亡情况。结果：流式细胞仪检测发现结扎组的亚单倍体峰增高，亚单倍体细胞百分率升高；ＴＵＮＥＬ法则显示结扎后总的生精细胞凋亡数较假手术后明显增加（Ｐ＜０．００１）。结扎后不同时间组与同期假手术组比较，２周、６周、１０周组精原细胞和初级精母细胞凋亡数前者均高于后者（Ｐ均＜０．０５），１２周组精原细胞凋亡数前者高于后者（Ｐ＜０．０５）。结果表明输精管结扎会导致生精细胞凋亡增加。     

N-硝基-L-精氨酸甲酯对实验性大鼠隐睾Bcl-2表达的影响

①目的研究一氧化氮合酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡过程中B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）表达的影响。②方法 42天龄雄性SD大鼠建立单侧隐睾模型,随机分为隐睾组、隐睾＋L-NAME组、隐睾＋生理盐水（溶媒）组、假手术组,每组12只大鼠,隐睾＋L-NAME组和隐睾＋生理盐水组大鼠术后分别腹腔内注射L-NAME或生理盐水,每天1次,定时定量（50mg/Kg）,术后第7天分别采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测各组隐睾Bcl-2mRNA和蛋白表达的变化。③结果与假手术组睾丸相比,隐睾组、隐睾＋生理盐水组睾丸生精上皮和睾丸间质细胞内Bcl-2mRNA和蛋白表达降低,差异有显著性（P〈0.05）;而隐睾＋L-NAME组Bcl-2 mRNA和蛋白与假手术组睾丸无明显差别。④结论 L-NAME可通过调节Bcl-2的表达抑制热应激导致的生精细胞凋亡。     

雄激素受体敲除小鼠睾丸生精功能变化及p63的表达

目的 研究雄激素受体（AR）敲除小鼠睾丸生精功能及p63在曲细精管中表达的改变.方法 采用雄性Flox-AR小鼠与雌性ACTB-Cre小鼠交配,并敲除胚胎中AR,筛选AR敲除（AR敲除组）和AR未敲除（对照组）雄性小鼠各10只,对比睾丸曲细精管生精功能及p63的表达.结果 两组小鼠曲细精管内径、管周膜厚度、管壁生殖细胞层数、生殖细胞成熟度评分及总Makler评分之间差异均有统计学意义（P＜0.05）,p63的阳性表达主要位于精原细胞及精母细胞,精子细胞及成熟精子中表达呈阴性,且AR敲除组表达阳性率及HSCRE评分均显著低于对照组（P＜0.01）.结论 AR表达与小鼠睾丸曲细精管p63表达关系密切,AR敲除小鼠睾丸曲细精管生精功能受损、p63表达下调,p63调控生殖细胞的早期分化.     

母鼠长期低剂量锰染毒对子代大鼠睾丸氧化应激状态及生精细胞凋亡的影响

目的 探讨氯化锰长期低剂量染毒对子代大鼠睾丸中氧化应激状态及生精细胞凋亡的影响。方法 健康雌性SD 大鼠32 只随机分为对照组,低、中、高剂量组,每组8 只。锰染毒组分别腹腔注射2、4 和8 mg/kg MnCl2·4H2O,对照组腹腔注射等容生理盐水,1 次/d,5 d/ 周,共8 周。与正常雄性SD 大鼠交配受孕后,雌 鼠在妊娠期和哺乳期继续染毒。每组随机取8 只12 周龄子代雄性大鼠断头处死后取材,HE 染色观察睾丸生精小 管结构;qRT-PCR、免疫组织化学、Western blot 分别检测叉头蛋白转录因子O 3a（FoxO3a）、与Bcl-2 相互作 用的细胞死亡调节子（Bim）、半胱天冬酶9（Caspase-9）mRNA 和蛋白的表达;TUNEL 技术检测生精细胞凋 亡。结果 ① HE 染色可见各锰染毒组睾丸生精小管呈现不同程度的形态学改变。随着锰染毒剂量的增加,生精 细胞层数逐渐减少,各级生精细胞排列紊乱、数量减少或缺如,管腔内成熟的精子数目减少;②中、高剂量组 精子密度、精子活动率降低,而精子畸形率上升（P <0.05）;③各锰染毒组大鼠睾丸组织内超氧化物歧化酶 （SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）活性随锰染毒剂量的增加而降低（P <0.05）; 而睾丸组织内丙二醛（MDA）含量和活性氧（ROS）水平随锰染毒剂量的增加逐渐升高（P <0.05）;④在 mRNA 和蛋白水平,FoxO3a 的表达随锰染毒剂量的增加逐渐上升（P <0.05）;低剂量组Bim mRNA 表达量 未见变化,但在中、高剂量组则降低,而细胞死亡调节因子表达量则随锰染毒剂量的增加逐渐增加（P <0.05）; ⑤ Caspase-9 mRNA 和蛋白表达量在各锰染毒组均升高,且随锰染毒剂量的增加逐渐增加（P <0.05）;⑥各 锰染毒组大鼠均可见生精细胞凋亡,其凋亡指数高于对照组,且随锰染毒剂量的增加而上升（P <0.05）。结论 长期低剂量锰染毒可抑制子代大鼠睾丸内抗氧化酶活性或（和）增加MDA 含量,提高睾丸组织ROS 水平,促 进FoxO3a 和Bim 表达,启动Caspase-9 信号通路,最终导致子代大鼠生精细胞的凋亡。     

睾丸扭转复位后生精上皮细胞核转录因子表达的改变及其凋亡

目的探讨睾丸扭转2h复位后第3天睾丸生精上皮细胞核转录因子(NF-κB)表达的改变及其凋亡的关系。方法用24只雄性SD大鼠建立左侧睾丸扭转复位模型。分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,每组8只。Ⅰ组动物睾丸扭转复位后用柳氮磺胺吡啶灌胃;Ⅱ组动物睾丸扭转复位后用等量的生理盐水灌胃;Ⅲ组动物假手术后用等量的生理盐水灌胃。分别用Western蛋白印迹和免疫组织化学原位检测睾丸生精上皮细胞中NF-κB的表达情况;TUNEL法检测生精上皮细胞凋亡情况。结果Ⅱ组动物睾丸扭转复位后第3天扭转侧睾丸生精上皮细胞胞质NF-κB蛋白质(9·4±2·68)表达与Ⅰ、Ⅲ组扭转侧睾丸生精上皮细胞胞质NF-κB表达(分别为:12±2·2;11·1±3)相比下降水平差异无统计学意义,胞核NF-κB表达升高水平差异有统计学意义(3组分别为8·4±3·1;21·1±3·6;6·0±2·3)。免疫组织化学原位检测Ⅰ和Ⅲ组扭转侧睾丸生精上皮细胞中NF-κB的表达以胞质为主,Ⅱ组扭转侧睾丸生精上皮细胞中NF-κB的表达以细胞核为主,而且NF-κB阳性细胞比例较其他两组阳性率显著上升(三组分别为15·6%±2·6%,66·1%±3·8%,10·8%±2·7%)。Ⅰ组(7·7%±2·0%)和Ⅲ组(5·9%±1·7%)扭转侧睾丸生精上皮细胞凋亡指数差异不明显;Ⅱ组扭转侧睾丸生精上皮细胞凋亡水平(37·2%±3·3%)跟以上两组相比升高有显著性差异。结论睾丸扭转2h复位后第3d,睾丸生精上皮细胞NF-κB蛋白已被激活,从胞质转移至核内,启动生精上皮细胞凋亡过程。NF-κB蛋白质的激活是导致睾丸扭转复位后生精上皮细胞特别是精原细胞和各级精母细胞凋亡增加的重要环节。     

生殖股神经对单侧隐睾睾丸组织INSL3基因表达的影响

目的:研究生殖股神经(GFN)在单侧隐睾动物模型中,对睾丸组织中胰岛因子3(INSL3)基因表达的影响。探讨GFN在单侧隐睾对侧睾丸损害的可能机制。方法:通过注射17-β雌二醇获得隐睾大鼠动物模型,取单侧隐睾大鼠12只设为A组;另取12只单侧隐睾大鼠在出生后第30天切断隐睾侧GFN设为B组;双侧隐睾大鼠10只设为C组;10只正常大鼠设为对照D组。在第8周采集各组大鼠血清,放射免疫法测血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡激素浓度(FSH)。睾丸组织用Trazol法提取总RNA,通过RT-PCR和Northernblot检测INSL3基因mRNA表达水平。结果:隐睾大鼠血清T水平下降;A、B两组血清LH升高,B组较A组升高明显(P<0.05);A、B两组隐睾侧INSL3 mRNA表达量低于D组(P<0.05);B组正常侧睾丸表达量高于A组(P<0.05)。结论:INSL3基因表达量在单侧隐睾睾丸组织中降低,GFN可能是影响INSL3基因表达水平,从而造成对侧已降睾丸的生精功能的损害。     

禁水致脱水对大鼠睾丸网影响的形态定量研究

目的:确定脱水是否影响大鼠睾丸网的组织结构与精子的输送。方法:51～52天龄雄性SD大鼠随机分成两组:1组(对照组,n=19)常规给食(颗粒饲料)给水饲养;1组只给食不给水(脱水组,n=11)。4～5 d后取睾丸,制作通过睾丸网的切片(甲基丙烯酸树脂包埋),观察睾丸网的形态,测量睾丸网的宽度(厚度)。结果:与对照组相比,脱水组的睾丸网宽度无显著改变,但睾丸网腔内的精子和球形精子细胞增多,且有睾丸网挤压生精小管壁的形态特征。结论:在短期禁水所致脱水状态下,青春期大鼠睾丸网向附睾输送睾丸内产生的精子与未成熟生精细胞的功能更为活跃。     

VEGF、VEGFR2 在慢性砷中毒大鼠 生精小管中的表达及其意义

目的 研究血管内皮生长因子（VEGF）及其受体2（VEGFR2）在慢性砷中毒大鼠生精小管中 的表达,探讨其与男性不育的关系及致男性不育的机制。方法 健康清洁雄性SD 大鼠40 只,体重160 ～ 200 g,随机分为高（60.0 mg/L）、中（12.0 mg/L）、低（2.4 mg/L）剂量染毒组和对照组（蒸馏水）,采用经 口自由饮水方式染毒,连续染毒6 个月。染毒结束后,采用免疫组织化学法测定VEGF、VEGFR2 的表达,末 端标记法（TUNEL）测定大鼠睾丸生精上皮凋亡细胞灰度值,并观察精子形态,测定精子活力。结果 免疫 组织化学法结果显示,与对照组比较,各染毒组VEGF、VEGFR2 表达水平较低（P <0.05）。TUNEL 法结果 显示,各染毒组大鼠生精上皮凋亡细胞灰度值较对照组低（P <0.05）;随着砷染毒剂量的增加,大鼠睾丸生精 上皮凋亡细胞灰度值呈降低趋势。与对照组比较,各染毒组正常精子数量减少,畸形精子比例逐渐升高,精子 活力下降（P <0.05）。结论 慢性砷中毒可影响大鼠睾丸中VEGF、VEGFR2 的表达,引起生精上皮细胞凋亡, 导致男性不育。     

精索静脉曲张持续时间对精索内静脉结扎术效果的影响

目的:利用大鼠制作相关的动物模型来研究精索静脉曲张(VC)持续时间对精索内静脉结扎术(VT)效果的影响。方法:将制作成左侧VC模型的SD大鼠分别于6,12,18周,行VT。于VT 8周后摘取各组大鼠左侧睾丸,检测其Johnsen’s评分、生精小管的超微结构、睾丸组织的睾酮浓度(ITC)和生精细胞的凋亡指数(AI)。结果:VC持续6周和12周后治疗组各项指标与其对照组比较无显著性差异(P>0.05)。VC持续18周后治疗组Johns-en’s评分显著低于其对照组(P<0.05),AI显著高于对照组(P<0.05),ITC无显著性差异(P>0.05),生精小管的超微结构明显异常。结论:长期VC将导致同侧睾丸生精功能不可逆性损害。     

热休克蛋白60在高脂及高脂高糖大鼠睾丸中的表达及对生精细胞凋亡的影响

目的 探讨热休克蛋白60(Hsp60)在高脂及高脂高糖SD大鼠睾丸组织中的表达情况及对生精细胞凋亡的影响.方法 将雄性SD大鼠60只随机分成对照组15例、高脂组15例及高脂高糖组30例,对照组给予普通饲料喂养,高脂组给予高脂饲料喂养,24周后加入含0.2%丙硫氧嘧啶继续喂养;高脂高糖组给予高脂饲料喂养,24周后腹腔注射链脲佐菌素,所有大鼠均喂养36周.造模成功后取睾丸组织,用免疫组化法和免疫印迹试验分析检测大鼠睾丸组织中Hsp60表达情况,并检测组织中细胞凋亡情况.结果 对照组生精细胞数量多且按序逐层排列,管腔中央可见大量精子细胞,HSP60少量表达于次级精母细胞;高脂组及高脂高糖组生精细胞数量减少且排列紊乱,部分切片可观察到生精细胞脱落.免疫组化及免疫印迹试验结果均显示,高脂组及高脂高糖组Hsp60蛋白表达量高于对照组(P<0.05),而高脂组与高脂高糖组间比较差异无统计学意义(P>0.05).高脂组及高脂高糖组的生精细胞凋亡数量明显多于对照组,且高脂高糖组生精细胞凋亡数量多于高脂组(P<0.05).结论 高脂及高脂高糖大鼠睾丸生精细胞凋亡的发生可能与Hsp60密切相关.     

睾酮致成人精子发生抑制不伴有明显的生精细胞排列疏松

目的确定庚酸睾酮致人精子发生抑制是否伴有生精细胞排列疏松。方法10名正常已生育男性,5人接受庚酸睾酮肌注(200 mg/周)19-24周(睾酮组),5人未作处理(对照组)。取睾丸活检组织块,作甲基丙烯酸树脂包埋切片,观察睾丸的组织学变化。结果与对照组相比,睾酮组的生精小管萎缩,精子发生障碍,长形精子细胞滞留。在两个组的多数生精小管轮廓中,均见有生精细胞团突入生精小管腔,但在两个组均未见生精细胞之间出现明显的裂隙。结论外源性睾酮致成人精子发生抑制,不伴有明显的生精细胞排列疏松。     

长期低剂量锰染毒对子代大鼠睾丸生精细胞线粒体状态和细胞凋亡的影响

目的 探讨长期低剂量氯化锰染毒对子代大鼠睾丸生精细胞线粒体形态和凋亡的影响.方法 健康雌性SD大鼠32只分为对照组、低、中、高剂量组.腹腔注射2、4和8 mg/kg MnCl2·4H2O或生理盐水,1次/天,5天/周,共8周,并在妊娠期和哺乳期继续染毒.每组8只12周龄子代大鼠断头处死后,观察睾丸生精小管结构和生精细胞线粒体形态、视神经萎缩蛋白1(Opa1)、动力相关蛋白1(Drp1)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase9)表达和细胞凋亡情况.结果 随锰染毒剂量增加,生精细胞层数逐渐减少,细胞排列紊乱、数量减少;中、高剂量组可见线粒体分离、肿胀等表现;中、高剂量组Opa1显著降低(P＜0.05,P＜0.01),Drp1、Caspase9则随锰染毒剂量增加而递增(P＜0.05,P＜0.01);锰染毒组生精细胞凋亡指数随锰染毒剂量增加而上升(P＜0.05).结论 长期低剂量锰染毒可调节Opa1/Drp1基因表达而影响线粒体功能,导致子代大鼠生精细胞凋亡.     

p38 MAPK在小鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达

目的：探讨p38 MAPK在小鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达．方法：应用免疫组织化学SABC法检测1～7周龄小鼠睾丸p38MAPK的表达和定位．结果：在2周龄小鼠睾丸生精小管上皮中即可观察到p38MAPK免疫阳性反应，免疫反应阳性细胞为精原细胞；3，4和5周龄小鼠睾丸仅有个别生精小管上皮可见p38 MAPK免疫阳性反应；6，7周龄小鼠睾丸中p38 MAPK表达较丰富，免疫反应阳性细胞为精原细胞和初级精母细胞，免疫阳性反应物均主要位于细胞核内．在7周龄小鼠睾丸中还可见到部分间质细胞呈p38 MAPK阳性，免疫阳性反应物主要位于细胞质内．结论：p38 MAPK可能对生精细胞的增殖分化以及雄激素的分泌具有调控作用。     

大鼠一侧睾丸扭转后切除对另侧睾丸组织的保护作用

目的：探讨大鼠一侧睾丸扭转后行切除术对另侧睾丸组织的保护作用。方法：将63只青春期前SD大鼠随机分为假手术组、扭转复位组和扭转切除组,每组21只。假手术组将左侧阴囊打开分离暴露睾丸后,不予扭转,即将睾丸再固定于阴囊壁上,并缝合阴囊。扭转复位组和扭转切除组则依Turner法建立左侧睾丸扭转模型,均先扭转4h,其后前者行复位固定术,后者行切除术。三组分别于复位后4h、24h、1周各处死大鼠7只,取右侧睾丸行丙二醛（MDA）、白介素-6（IL-6）检测及病理评估,左侧睾丸仅行病理评估。结果：各组左侧睾丸病理评分值均达到最差分数,病理切片结果示存在绝大部分坏死或完全性坏死。与扭转切除组比较,扭转复位组对侧睾丸的MDA、IL-6值、病理评分等均有不同程度升高,且1周时生精细胞层数结合精细小管直径所示的预后情况亦较差;而各指标在扭转切除组与假手术组的相比中未示明显差异。结论：单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸早期即可出现继发性损伤。在明确扭转侧睾丸出现坏死后,不复位直接行切除术可以保护对侧睾丸。     

Morphology of rat testis preserved in three different fixatives

Histopathological examination of testes is important in assessing spermatogenesis and testicular function. Modified Davidson’s fluid (mDF) has been proposed as a superior substitute for Bouin’s fluid (BF) for fixation of adult animal testes. Besides, 4% paraformaldehyde (PFA) has been commonly used to fix testes with convenience. We compared the morphology of the rat testis fixed in 4% PFA, mDF, or BF using hematoxylin and eosin (HE)-stained sections. Fixation in 4% PFA resulted in obvious tissue shrinkage artifacts, especially between seminiferous epithelium cells. Shrinkage artifacts were also observed in the central area of the testes fixed in BF. Use of mDF did not cause shrinkage artifacts between seminiferous tubules, though a small amount can be observed in seminiferous tubules between germ cells. Clarity of nuclear detail in testes fixed in mDF and BF is better compared to 4% PFA. Our study demonstrated that fixation in mDF provided better morphologic details in the rat testis as compared with 4% PFA and BF.